白细胞介素-1β激活核转录因子-κB介导A549细胞分泌白细胞介素-8的研究

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)对肺II型上皮A549细胞分泌白细胞介素-8(IL-8)的诱导作用,探讨相关的细胞内信号通道的激活和传导的机理。方法以1ng/ml终浓度的IL-1β干预经核转录因子-κB(NF-κB)的IKK2复合物抑制物(AS602868)预处理的A549细胞,Western blot检测IL-1β干预后细胞内磷酸化IκBα(p-IκBα)和IκBα蛋白的表达水平;激光扫描共焦显微镜(LSCM)检测NF-κB的p65和p50蛋白的核转移过程;ELISA检测NF-κB的p65和p50蛋白与DNA结合活性及IL-8蛋白的释放。结果IL-1β干预后细胞内p-IκBα蛋白明显升高,IκBα蛋白明显下降;LSCM扫描显示p65和p50蛋白从胞浆向胞核转移,同时p65和p50与DNA结合活性明显升高(P<0.01);IL-8的蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。细胞经AS602868的预处理,阻断了细胞内p-IκBα蛋白升高和IκBα蛋白降解;减少了p65和p50蛋白的核转移和与DNA结合活性(P<0.01);降低了IL-8蛋白的表达水平(P<0.01)。结论IL-1β通过激活NF-κB介导了A549细胞分泌IL-8,结果提示可能通过抑制NF-κB信号通道的方法,减轻呼吸机相关肺损伤(VALI)的生物性损伤。

白介素-1受体相关激酶-2反义寡核苷酸对白介素-1和肿瘤坏死因子激活核因子-κB的不同影响

目的 研究白介素 1受体相关激酶 2 (IRAK 2 )在白介素 1(IL 1)与肿瘤坏死因子 (TNF)激活核因子 κB(NF κB)过程中的作用。方法 IRAK 2反义寡核苷酸转染人胚肾细胞 (2 93细胞 ) ,阻断IRAK 2的表达 ,用IL 1及肿瘤坏死因子刺激细胞后 ,用夹心ELISA方法检测NF κB活性。结果 以IRAK 2反义寡核苷酸预处理可明显减弱IL 1诱导的NF κB活性 ,此效应强度存在时间和浓度依赖性 ,但I RAK 2反义寡核苷酸对肿瘤坏死因子诱导的NF κB活性无影响。结论 IRAK 2反义寡核苷酸对IL 1和TNF激活NF κB有不同影响。IRAK 2在IL 1诱导的NF

核转录因子-kB1基因多态性与早发冠心病的相关性研究

目的探讨核转录因子家族中NF-Kb1基因-94ins/delATTG 的多态性与我国早发冠心病（早发CHD）的相关性。方法对早发冠心病（病例组）92例和非冠心病（对照组）94例患者，采用苯酚-氯仿法提取DNA，聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）分析NF-kappaB1基因多态性。结果两组病例del/del型纯合子，ins/ins型纯合子，del/ins型杂合子基因型频率及ins、del等位基因频率差异无统计学意义。结论 NF-kappaB1基因多态性与我国早发冠心病的易感性可能无关。

糖皮质激素受体-α、核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的:探讨糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)-α、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR-α、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达及其分布。结果:GR-α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致,GR-α不但在表皮呈弥漫性表达,还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而,与正常对照皮肤相比,GR-α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF-κB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中,在正常对照组皮肤中均为胞质表达,而在慢性皮炎组中为胞质表达和(或)胞核均有表达。TNF-α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异,为弱阳性反应。结论:慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR-α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。

辛伐他汀下调大鼠脑出血后炎症因子核因子-κB和白介素-1β表达

目的：探讨大鼠脑出血后辛伐他汀对核因子-kB（nuclear{actorkappaB，NF-kB）和白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）表达的干预作用。方法：采用自体血注入法制作脑出血模型，Garcia法对各组大鼠进行神经功能行为学评分，干／湿重法测定脑组织含水量的变化，免疫组织化学检测脑组织NF-kB、IL-1β的表达，免疫印迹检测脑组织NF-kB、IL-1β的蛋白表达水平。结果：大鼠脑出血后NF-kB和IL-1β蛋白表达显著增多，辛伐他汀干预后NF-kB和IL-113蛋白表达明显下降，脑含水量显著下调，与脑神经功能障碍评分上调相一致。结论：辛伐他汀可能通过NF-kB通路，抑制IL-1β的表达，减轻脑出血后血肿周围脑组织的炎症损伤，对脑组织起保护作用。

核因子-κB与血管细胞间黏附分子-1在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达及其与斑块稳定性的关系

目的探讨核因子-κB(NF-κB)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达及其与斑块稳定性之间的关系。方法从48例尸检标本中获得48个冠状动脉前降支标本。通过苏木素-伊红染色病理特征将标本分为正常对照组、稳定斑块组和不稳定斑块组。采用免疫组织化学法检测NF-κB、VCAM-1在各组冠状动脉内膜中的表达。结果正常对照组NF-κB、VCAM-1不表达,在稳定斑块组和不稳定斑块组NF-κB、VCAM-1表达增加(P<0.05),且不稳定斑块组表达高于稳定斑块组(P<0.05)。NF-κB、VCAM-1在粥样硬化冠状动脉内膜区域的表达强度呈正相关(r=0.401,P<0.05)。结论NF-κB、VCAM-1参与冠状动脉粥样硬化斑块的发生、发展并与斑块稳定性密切相关。NF-κB作为引发炎症的关键转录因子可能上调VCAM-1的表达。

核因子-κB与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α表达的相关性研究

目的:观察核因子-κB(NF-κB)与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)表达水平的相关关系,以探讨鼻息肉发病的可能机制。方法:运用免疫组化SP法检测鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平,采用t检验和直线相关分析进行组间差异和相互关系的统计学分析。结果:鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平明显高于下鼻甲黏膜(P<0.001),鼻息肉组织中NF-κB与H IF-1α表达水平呈中度的正相关关系(r=0.628,P<0.001)。结论:NF-κB、H IF-1α在鼻息肉组织中呈阳性表达,其表达强度高于下鼻甲黏膜,与鼻息肉的发生发展相关;NF-κB可能通过上调H IF-1α的表达而作用于鼻息肉的形成过程。

已酮可可碱对内毒素所致SIRS大鼠核转录因子-KB的调控

目的:探讨已酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对内毒素所致全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)大鼠核转录因子-kB(NF-kB)的调控。方法用内毒素复制SIRS大鼠。实验分三组,即正常对照组、SIRS组和PTX组。用ELISA的方法检测各组NF-kB活性以及TNF-α和IL-1β的表达。结果与正常对照组比较,SIRS组大鼠NF-kB活性以及TNF-α和IL-1β的表达明显升高(P<0.01);与SIRS组比较,PTX组大鼠NF-kB活性以及TNF-α和IL-1β的表达明显降低(P<0.01)。在SIRS组大鼠中NF-kB活性与TNF-α和IL-1β的表达分别呈明显正相关(r=0.67,r=0.43,P<0.01)。结论PTX可明显抑制SIRS大鼠的炎症反应,其作用机制可能是抑制NF-kB的活化。

肾毒血清性肾炎大鼠肾组织中核因子-κB活化及单核细胞趋化蛋白-1表达

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)活化在肾毒血清性肾炎发病机制中的作用。方法:肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基底膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率检测肾组织中NF-κB活化;采用免疫组化及彩色病理图文分析系统观察肾小球及肾小管中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达,并分析其与蛋白尿和肾小球细胞数之间的关系。结果:模型组肾组织中NF-κB活化较正常对照组显著上调;肾小球及肾小管中MCP-1表达分别为(24.37±7.06)个/肾小球横切面(gcs)和(54.78±11.49)%,较正常对照组显著升高(P<0.01),肾组织中NF-κB活化和MCP-1表达与单核细胞浸润和蛋白尿密切相关。结论:NF-κB活化在肾小球肾炎发病机制中发挥重要作用。

胰岛素对大鼠急性肺损伤的肺血管内皮细胞核因子-κB和细胞间粘附分子-1表达的影响

目的探讨胰岛素对急性肺损伤(ALI)大鼠肺血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法24只健康雄性SD大鼠(190-210g),随机分为正常对照组、ALI模型组、胰岛素干预组。观察肺组织病理形态,采用原位杂交技术半定量法和免疫组织化学染色检测肺血管内皮细胞的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA和核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达。结果(1)肺病理组织学结果显示胰岛素干预组肺病变局限且程度减轻;(2)ALI模型组肺血管内皮细胞ICAM-1mRNA表达(0.456±0.018)和NF-κB核染色阳性细胞百分比(0.542±0.009)与正常对照组(0.274±0.014,0.308±0.017)比较显著升高(均P<0.05);(3)胰岛素干预组ICAM-1mRNA表达(0.357±0.024)和NF-κB核染色阳性细胞百分比(0.427±0.018)比模型组明显减低(均P<0.05),但与正常对照组比较仍较高(均P<0.05)。结论ICAM-1和NF-κB在ALI显著增加,胰岛素可以抑制NF-κB和ICAM-1mRNA的表达,可能是其对抗ALI的作用机制之一。

蒺藜皂苷对缺血心肌细胞内核转录因子-κB的作用

目的研究蒺藜皂苷对培养大鼠乳鼠心肌细胞H2O2损伤时心肌细胞内蛋白激酶C(PKCε)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及核转录因子-κB(NF-κB)水平的影响。方法利用培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,采用H2O2建立心肌细胞损伤模型,应用PKCε抑制剂Chelerythrine干预后,观察细胞形态学改变,应用流式细胞仪定性检测细胞凋亡率,Western blotting定量检测各组PKCε、ERK1/2及NF-κB水平。结果蒺藜皂苷明显保护受损心肌细胞,降低细胞凋亡率,并且能够升高PKCε、ERK1/2及NF-κB水平;应用Chelerythrine可部分阻断蒺藜皂苷的上述作用。结论蒺藜皂苷对H2O2损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其保护作用机制与PKCε、ERK1/2及NF-κB激活有关。

阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子-κB活化与肾小管间质损害的关系

目的 :探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中核因子 - κB(NF- κB)活化及其与蛋白尿、肾小管间质损害和趋化因子表达之间的关系。方法 :阿霉素肾病模型采用尾静脉注射阿霉素 (6 m g/kg)制备。应用免疫组化和图像分析系统观察肾皮质区小管间质损害程度、NF- κB活化及单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达。结果 :阿霉素肾病大鼠出现大量蛋白尿及明显的皮质区肾小管间质损害。肾皮质区 NF- κB活化及 MCP- 1表达显著增强 ,且与蛋白尿及肾小管间质损害程度显著相关。结论 :NF- κB活化介导了非免疫性慢性肾小球肾炎时皮质区肾小管间质损害及诱导趋化因子的产生。

IL-1 预刺激对反义IRAK-1 寡核苷酸抑制NF-κB活化的影响

实验分为白介素－１（ＩＬ－１）预处理组和非预处理组，脂质体介导反义ＩＬ－１ 受体相关激酶－１（ＩＲＡＫ－１）寡核苷酸（ＯＤＮ） 转染ＨｅｐＧ２ 细胞，用ｗ ｅｓｔｅｒｎ 杂交分析ＩＲＡＫ－１ 表达水平，以夹心酶联免疫吸附测定法检测ＮＦ－κＢ含量． 结果表明，ＩＬ－１ 非预处理组反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ不能抑制ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化，而预处理组ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化受到明显抑制． 反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ 对ＮＦ－κＢ活化的抑制作用具有时间（５～２４ ｈ）和剂量（１～８ μｇ）依赖性． 说明ＩＬ－１ 预刺激在反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ抑制ＩＬ－１ 诱导的ＮＦ－κＢ活化中起决定性作用．

微米复方黄连制剂对高脂饮食喂养家兔核因子-κB及炎症因子表达的影响

目的:研究微米复方黄连制剂对高脂饮食喂养家兔炎症因子表达的影响及其可能的机制。方法:ELISA法检测血清C反应蛋白(CRP)、白介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α);RT-PCR法检测胸主动脉核因子-κB(NF-κB)mRNA的表达,电泳流动漂移法(EMSA)测定NF-κB的活性。结果:高脂饮食喂养16周后可明显增加血清CRP,IL-1及TNF-α的水平,并明显增加胸主动脉NF-κB mRNA的表达,同时升高NF-κB与DNA的结合活性;微米复方黄连制剂可明显逆转高脂饮食对上述指标的影响。结论:微米复方黄连制剂可明显抑制高脂饮食喂养家兔的炎症因子的表达,其机制可能是抑制NF-κB的表达及其活性所致。

核转录因子-κB在肺疾病中的表达

核转录因子-kB（NF—kB）是-种蛋白转录因子，它使细胞间黏附分子、诱生型一氧化氮合酶、TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-8等炎症反应相关炎症前分子的转录最大化。由于这些分子与炎症级链反应相关且主要在转录水平得到调控，因此NF—kB是炎症级链反应重要的细胞间调控物。本综述将系统阐述NF—kB的分子生物学相关机制及其在包括急性肺损伤、哮喘及阻塞性肺病的发病过程中的作用。

核因子-κB在急性胰腺炎治疗中的意义

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是常见的急腹症之一。近年大量的研究证实，AP局部、全身炎症反应与肿瘤坏因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL—1β）等多种细胞因子有关，而核因子-kB（nuclear factor—kappa B，NF—kB）在其基因表达上起着关键作用。NF—kB是一种具有基因转录调节作用的核蛋白，调控多种细胞因子的表达。因此，研究如何抑制NF—kB的活化，减少促炎基因的表达，从而减轻组织损伤和炎症反应，在AP治疗上有着重要意义。

大鼠脑出血后血肿周围核因子-кB的表达和意义

目的研究大鼠实验性脑出血后血肿周围脑组织核因子-кB(NF-кB)的表达及其在继发性脑损伤中的作用。方法采用自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型,免疫组化染色法检测脑组织NF-кB、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达。结果脑出血后6 h血肿周围脑组织NF-кB开始表达,48 h达高峰,ICAM-1 12 h开始表达,72 h达高峰;各组与假手术组之间有显著差异(均P<0.01);脑出血后NF-кB与ICAM-1呈正相关关系(γ=0.868,P<0.05),NF-кB表达从开始到高峰均早于ICAM-1。结论脑出血后NF-кB表达增加,并通过ICAM-1参与了脑出血继发性脑组织损伤。