脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1、微小RNA-149-5p的表达与临床病理特征和预后的相关性

目的 探讨脑胶质瘤组织中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(long non-coding RNA nuclear paraspeckle assembly transcript1,Lnc RNANEAT1)、微小RNA-149-5p(micro RNA-149-5p,mi R-149-5p)的表达与临床病理特征和预后的相关性。方法 选取2014年1月至2017年6月上海中医药大学附属曙光医院收治的103例脑胶质瘤患者为研究对象。分析脑胶质瘤组织与瘤旁组织中的LncRNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平、LncRNA NEAT1与miR-149-5p表达水平的相关性以及Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。以脑胶质瘤组织中LncRNANEAT1表达量的平均值为分界线将患者分为LncRNA NEAT1高表达组(≥1.69,49例)和Lnc RNA NEAT1低表达组(<1.69,54例);以脑胶质瘤组织中miR-149-5p表达量的平均值为分界线将患者分为miR-149-5p高表达组(≥1.04,53例)和mi R-149-5p低表达组(<1.04,50例)。分析Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p表达水平与脑胶质瘤患者术后5年总生存率的关系。分析脑胶质瘤患者术后5年预后不良的影响因素。结果 脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1的表达量为1.69±0.33,显著高于瘤旁组织中的1.19±0.15(t=14.175,P<0.001);脑胶质瘤组织中miR-149-5p的表达量为1.04±0.28,显著低于瘤旁组织中的1.82±0.44(t=15.337,P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,脑胶质瘤组织中Lnc RNA NEAT1与mi R-149-5p的表达水平呈显著负相关(r=-0.728,P<0.001)。Lnc RNA NEAT1、mi R-149-5p的表达水平均与分化程度、WHO分级显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Lnc RNANEAT1高表达组患者术后5年的总生存率显著低于LncRNA NEAT1低表达组(χ^(2)=16.601,P<0.001);miR-149-5p高表达组患者术后5年的总生存率显著高于miR-149-5p低表达组(χ2=19.768,P<0.001)。单因素分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、LncRNANEAT1≥1.69、miR-149-5p≥1.04与脑胶质瘤患者预后不良显著相关(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,低分化、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、Lnc RNA NEAT1≥1.69为脑胶质瘤患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-149-5p≥1.04为脑胶质瘤患者预后不良的独立保护因素(P<0.05)。结论 脑胶质瘤组织中的Lnc RNA NEAT1高表达,miR-149-5p低表达,二者表达水平与分化程度、WHO分级密切相关,且均为脑胶质瘤患者术后5年预后不良的独立影响因素。

肿瘤细胞核旁斑的生物学结构及功能研究进展

核旁斑是细胞核内一类重要的亚核体。核旁斑可通过拘留RNA或蛋白以及与miRNA相互作用等方式调控基因的表达,从而在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用,研究核旁斑在肿瘤细胞中的生物学结构及作用对肿瘤的诊疗具有重要意义。目前关于核旁斑在肿瘤细胞中的结构、功能及临床意义尚未完全明确。本文综述了肿瘤细胞核旁斑的组成、结构、装配及其在肿瘤发生、发展过程的作用机制和临床意义,旨在为肿瘤的诊断、治疗及预后提供新的研究方向与线索。

长链非编码RNA核旁斑组装转录本1在妇科恶性肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)在多种人类疾病的发生发展过程中发挥重要调控作用。其中,lncRNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)定位于人染色体11q13.1,是一类参与核旁斑结构形成和维持的lncRNA,参与调节多种细胞生物过程和生理过程。lncRNA NEAT1在恶性肿瘤中的表达异常升高,通过各种途径发挥重要的调控作用,尤其是参与妇科恶性肿瘤的增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药和放射抵抗等生物学行为,可能是新的诊断、靶向治疗以及预测风险和临床预后的生物标志物。现探讨lncRNA NEAT1在妇科恶性肿瘤的表达和作用机制,为进一步了解妇科恶性肿瘤提供新思路。

长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)在免疫相关性疾病中的研究进展

严格调控免疫反应是有效清除病原体和防止过度炎症的基础。核旁斑组装转录本1(NEAT1)是近年来被广泛关注的参与调控免疫反应的长链非编码RNA。已证实,NEAT1在免疫相关性疾病中异常表达(多数是上调),如脓毒症、炎症性肠病、自身免疫性疾病及病毒感染。然而,其在疾病发病进程的作用却错综复杂。在机制上,主要作为微小RNA(miRNA)海绵来抑制miRNA与目标mRNA之间的相互作用,也可以影响核旁斑介导的基因表达调控。我们总结了NEAT1在免疫相关性疾病中的表达变化及作用,重点分析其调控免疫细胞分化和功能的机制,为人们理解NEAT1在免疫相关性疾病中的作用提供理论依据。

长链非编码核旁斑装配转录物1对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的探讨长链非编码核旁斑装配转录物1(Lnc NEAT1)靶向微小RNA(miR)-506-3p对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法收集河南省人民医院手术切除的结肠癌组织标本和癌旁正常组织标本各82例,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠癌组织和癌旁组织中Lnc NEAT1的mRNA表达水平;构建miRNA-Control、miR-506-3p和短发卡RNA(shRNA)-Control、shRNA-Lnc NEAT1慢病毒结肠癌细胞株,采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析Lnc NEAT1和miR-506-3p的靶向关系;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell分别检测shRNA-Control和shRNA-Lnc NEAT1细胞的增殖、迁移能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测shRNA-Control和shRNA-Lnc NEAT1细胞中LAMC1的蛋白表达水平。两组均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果Lnc NEAT1在结肠癌组织(1.93±0.18)中的mRNA相对表达水平显著高于癌旁组织(0.52±0.06,t=33.337,P<0.05)。过表达Lnc NEAT1-WT后,miR-506-3p细胞的相对荧光素酶活性(0.39±0.04)较miRNA-Control组显著下降(1.50±0.12,t=26.405,P<0.05)。shRNA-Lnc NEAT1细胞48 h(0.69±0.03比1.15±0.03,t=20.129,P<0.05)和72 h(0.82±0.07比1.48±0.06,t=12.651,P<0.05)的增殖活力明显低于shRNA-Control。shRNA-Lnc NEAT1细胞的迁移细胞数明显低于shRNA-Control(47.67±5.81比155.33±12.51,t=13.649,P<0.05)。shRNA-Lnc NEAT1细胞中LAMC1的蛋白表达水平较shRNA-Control显著下降(0.48±0.04比1.39±0.11,t=30.883,P<0.05)。结论Lnc NEAT1可能通过负向抑制miR-506-3p的表达,增强LAMC1的表达,从而促进结肠癌细胞的增殖和迁移。

lncRNA NEAT1在鼻咽癌中的表达情况及其对鼻咽癌放疗敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核旁斑富集转录本1(NEAT1)在鼻咽癌中的表达情况及其对鼻咽癌放疗敏感性的影响。方法(1)使用UALCAN数据库分析NEAT1在头颈部鳞状细胞癌中的表达情况及其与患者临床分期、预后的关系。(2)利用实时荧光定量PCR检测鼻咽癌组织及正常鼻咽黏膜上皮、人永生化鼻咽上皮细胞NP-69及多株鼻咽癌细胞(CNE-1、CNE-2、CNE-2R、C666-1、C666-1R)中NEAT1的表达情况。(3)使用RNA干扰技术构建NEAT1沉默的CNE-2R细胞[NEAT1-短发夹RNA(shRNA)组],并设立对照组(未转染的CNE-2R细胞)、NEAT1-NC组(转染对照序列的CNE-2R细胞)。给予不同放射剂量X线照射后,检测3组CNE-2R细胞的存活率、凋亡率、克隆形成率及放射生物学参数。结果(1)NEAT1在头颈部鳞状细胞癌组织中呈高表达,且表达水平随着头颈部鳞状细胞癌分期的增加呈升高趋势(P<0.05),但不同NEAT1表达水平患者的总生存率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)相较于正常鼻咽黏膜上皮组织,鼻咽癌组织中NEAT1表达上调(P<0.05)。相较于NP-69细胞,NEAT1在鼻咽癌细胞中的表达上调(P<0.05),其中CNE-2R细胞中的表达量最高(P<0.05);放射抗拒性细胞CNE-2R、C666-1R中NEAT1的表达量分别高于放疗敏感性细胞CNE-2、C666-1(P<0.05)。(3)在接受不同剂量X射线照射后,与对照组及NEAT1-NC组比较,NEAT1-shRNA组CNE-2R细胞存活率、克隆形成率及放射生物学参数降低,凋亡率升高(P<0.05),但对照组与NEAT1-NC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论lncRNA NEAT1在鼻咽癌组织和细胞中呈高表达,与肿瘤分期密切相关,沉默NEAT1的表达可增加鼻咽癌的放疗敏感性。

lncRNA NEAT1调节miR-424-5p/ELK4轴对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤、Lp-PLA2和CRP水平的影响

目的:探讨长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(lncRNA NEAT1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤中的分子机制和功能。方法:收集健康人和动脉粥样硬化(AS)病人血液标本并通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清中lncRNA NEAT1、微小RNA-424-5p(miR-424-5p)和ETS域蛋白4(ELK4)mRNA表达水平。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),qRT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中lncRNA NEAT1、miR-424-5p和ELK4表达情况;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测HUVEC细胞增殖活力和凋亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定HUVEC中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β含量、脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)和C反应蛋白(CRP)水平;采用双荧光素酶报告基因测定lncRNA NEAT1、miR-424-5p和ELK4之间的靶向相互作用。进行动物实验以评估lncRNA NEAT1在体内AS进展中的作用。结果:lncRNA NEAT1在AS病人血清和ox-LDL诱导的HUVEC中显著上调(P<0.05)。lncRNA NEAT1的沉默可削弱ox-LDL引发的细胞毒性,降低Lp-PLA2和CRP水平,并减少ApoE^(-/-)小鼠的脂质异常分泌(P<0.05)。miR-424-5p是lncRNA NEAT1在调节ox-LDL诱导的HUVEC损伤中的功能介质,ELK4是miR-424-5p的直接靶标(P<0.05)。miR-424-5p的抑制或ELK4的过表达逆转了lncRNA NEAT1沉默对ox-LDL诱导的HUVEC细胞损伤的影响(P<0.05)。结论:沉默lncRNA NEAT1可通过调控miR-424-5p/ELK4轴保护HUVEC免受ox-LDL触发的细胞毒性,降低Lp-PLA2和CRP水平。

LncRNA NEAT1调控miR-505-3p/VEGFA对碱烧伤大鼠角膜新生血管的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)核旁斑组装转录本1(NEAT1)调控微小RNA-505-3p(miR-505-3p)/血管内皮生长因子A(VEGFA)轴对碱烧伤大鼠角膜新生血管生成的影响及其作用机制。方法 144只SD大鼠随机分为对照组、模型组、sh-NC组、sh-NEAT1组、sh-NEAT1+antagomir-NC组和sh-NEAT1+miR-505-3p antagomir组,每组24只。除对照组外,其余组大鼠均建立碱烧伤模型。观察大鼠角膜新生血管情况,并计算角膜新生血管面积;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠角膜中LncRNA NEAT1、miR-505-3p、VEGFA mRNA表达;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠角膜病理形态学改变;免疫组织化学染色、Western blot检测大鼠角膜中VEGFA、CD31蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-505-3p与LncRNA NEAT1、VEGFA的靶向关系。结果 与对照组比较,模型组大鼠角膜新生血管面积增加,LncRNA NEAT1、VEGFA mRNA相对表达水平以及VEGFA、CD31蛋白表达水平均升高,miR-505-3p相对表达水平降低(均为P<0.05),角膜组织存在炎症细胞浸润、上皮细胞缺损等病理学损伤;与sh-NC组比较,sh-NEAT1组大鼠角膜新生血管面积减少,LncRNA NEAT1、VEGFA mRNA相对表达水平以及VEGFA、CD31蛋白表达水平均降低,miR-505-3p相对表达水平升高(均为P<0.05),角膜组织病理学损伤有所改善;与sh-NEAT1+antagomir-NC组比较,sh-NEAT1+miR-505-3p antagomir组大鼠角膜新生血管面积增加,VEGFA mRNA相对表达水平以及VEGFA、CD31蛋白表达水平均升高,miR-505-3p相对表达水平降低(均为P<0.05),角膜组织病理学损伤加重。经验证,大鼠角膜上皮细胞中miR-505-3p与LncRNA NEAT1、VEGFA均存在靶向关系。结论 干扰LncRNA NEAT1可能通过靶向上调miR-505-3p并下调VEGFA表达抑制碱烧伤大鼠角膜新生血管生成。

肾综合征出血热患者血浆外泌体固有免疫相关长链非编码RNA含量测定及临床意义

目的观察肾综合征出血热(HFRS)患者血浆外泌体(exosome)固有免疫相关长链非编码RNA(lncRNA)的含量变化情况及其与疾病发生发展的关系。方法提取并鉴定HFRS患者及健康对照者血浆外泌体,对其中的lncRNA进行高通量测序,找出具有足够丰度的固有免疫相关lncRNA,进行实时定量PCR鉴定,分析其与HFRS发生发展的关系。结果提取血浆外泌体;发现固有免疫相关lncRNA抗病毒应答负性调节因子(NRAV)、干扰素应答负性调节因子(NRIR)及核旁斑装配转录物1(NEAT1)在HFRS患者血浆外泌体中有一定丰度,其中NEAT1含量显著低于健康对照,但与疾病的进展无明显关系。结论HFRS患者血浆外泌体中含有多种固有免疫相关lncRNA,其中NEAT1含量降低与HFRS的发生显著相关。

阿尔茨海默病患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1的表达变化及临床意义

目的 分析阿尔茨海默病(AD)患者血清长链非编码RNA(LncRNA)转移相关的肺腺癌转录本1(MALAT1)、LncRNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)的表达变化,探讨其是否参与AD炎症反应和认知功能损伤。方法 选取2018年1月—2021年1月青海大学附属医院收治的AD患者93例为AD组,选取同期该院54例体检健康者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1的表达,酶联免疫吸附试验检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,简易精神状态量表(MMSE)评估认知功能。Pearson或Spearman相关性分析AD患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1表达与病程、MMSE评分、炎症因子的相关性。ROC曲线分析血清炎症指标、LncRNA MALAT1、LncRNA NEAT1表达对AD的诊断价值。结果 AD组血清LncRNA MALAT1相对表达量和MMSE评分低于对照组,LncRNA NEAT1相对表达量高于对照组(P <0.05)。AD组hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于对照组(P <0.05)。Pearson或Spearman相关性分析显示,AD患者血清LncRNA MALAT1表达与MMSE评分呈正相关(r_(s)=0.587,P <0.05),与hs-CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均呈负相关(r_(s)=-0.522、-0.601、-0.574和-0.577,均P <0.05),LncRNA NEAT1表达与MMSE评分呈负相关(r_(s)=-0.593,P <0.05),与hs-CRP、IL-1β水平、IL-6、TNF-α均呈正相关(r=0.487、0.588、0.611和0.573,均P <0.05)。ROC曲线显示,血清LncRNA MALAT1诊断AD的AUC为0.915(95%CI:0.858,0.955),最佳临界值为0.98,其对应的敏感性为94.62%(95%CI:87.92,98.22),特异性为81.48%(95%CI:68.61,90.70);血清LncRNA NEAT1诊断AD的AUC为0.858(95%CI:0.791,0.910),最佳临界值为2.37,其对应的敏感性为90.32%(95%CI:82.45,95.52),特异性为72.22%(95%CI:58.44,83.57)。结论 AD患者血清LncRNA MALAT1低表达、LncRNA NEAT1高表达可能参与AD炎症反应和认知功能损伤,可作为AD的诊断标志物。

NEAT1在小鼠早期妊娠子宫组织中的表达和调节

探讨核旁斑组装转录本1(NEAT1)在小鼠早期妊娠子宫组织中的表达和调节,为揭示NEAT1在小鼠胚胎着床过程中的作用机制提供科学依据。分别构建小鼠早期妊娠、假孕、人工诱导蜕膜化和类固醇激素处理模型,采用RNA原位杂交以及实时荧光定量PCR技术检测NEAT1在上述模型子宫组织的定位与表达。结果显示,NEAT1在小鼠早期妊娠子宫组织中呈现动态变化规律,在妊娠1~5 d的子宫内膜组织和肌层组织中均有表达,且主要表达于子宫内膜腔上皮细胞和腺上皮细胞;在妊娠6~8 d的子宫组织中NEAT1主要表达于蜕膜化细胞,而在孕体组织中未见阳性表达。在小鼠假孕子宫组织中,NEAT1的定位表达与早期妊娠基本一致,在子宫内膜组织和肌层组织中均有表达。在人工诱导蜕膜化模型中,NEAT1主要定位于蜕膜区,且其表达水平与对照组相比极显著上升(P<0.01)。在类固醇激素处理模型中,孕酮(P_(4))和雌二醇(E_(2))均可显著上调NEAT1的表达水平(P<0.05),且对子宫内膜基质细胞中NEAT1表达上调的作用更加显著。本研究结果表明,NEAT1参与调节小鼠早期妊娠和蜕膜化进程,其表达水平受到类固醇激素的显著上调。

lncRNA NEAT1作为竞争性内源RNA在恶性肿瘤耐药和放射抵抗中的研究进展

核旁斑组装转录本1(NEAT1)作为一种长链非编码RNA(lncRNA),在多种恶性肿瘤中均过表达,能够通过多种调节机制促进恶性肿瘤的发生、发展,包括耐药性和放射抵抗。其中,lncRNA NEAT1主要作为竞争性内源RNA(ceRNA)海绵吸附微RNA,减弱其对下游靶点/信号通路的抑制作用,间接调节下游基因的表达水平,进而介导恶性肿瘤的耐药和放射抵抗过程。明确lncRNA NEAT1介导的ceRNA调控网络在恶性肿瘤耐药和放射抵抗过程中的具体作用机制,可为临床治疗恶性肿瘤耐药和放射抵抗提供新思路和新靶点。

lncRNA NEAT1通过miR-377-3p/Wnt通路影响ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、侵袭迁移

目的·研究长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)核旁斑组装转录本1 (nuclear paraspeckle assembly transcript 1,NEAT1)通过微RNA-377-3p (microRNA-377-3p,miR-377-3p)调控Wnt通路对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cell,HVSMC)增殖、侵袭迁移的影响。方法·以100μg/mL的ox-LDL处理体外培养的HVSMC。将HVSMC随机分为对照组、模型组、lncRNA NEAT1siRNA组、miR-377-3p抑制组、转染+抑制组(转染NEAT1 siRNA和miR-377-3p抑制剂)、转染阴性对照组(NEAT1 siRNA阴性对照)。除对照组外,其余各组以100μg/mL的ox-LDL诱导建立动脉粥样硬化细胞模型,分组转染处理后,通过细胞计数试剂盒8 (cell counting kit-8,CCK-8)测定各组细胞活力;通过流式细胞实验测定各组细胞凋亡率;通过Transwell实验评测各组细胞迁移侵袭情况;通过免疫印迹实验评测各组细胞增值细胞标志蛋白[增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)]及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白[E-cadherin、vimentin]的表达;通过qRT-PCR实验测定各组细胞NEAT1、miR-377-3p及无翅型MMTV整合位点家族成员5A (wingless-related MMTV integration site 5A, WNT5A) mRNA表达。结果·与对照组相比,模型组NEAT1 mRNA表达升高,miR-377-3p mRNA表达降低,细胞凋亡率降低,细胞活力、迁移侵袭细胞数升高,PCNA、vimentin蛋白表达蛋白升高,E-cadherin表达降低,WNT5A mRNA表达升高(均P=0.000)。干扰NEAT1后,细胞凋亡率升高,细胞活力、迁移侵袭细胞数降低,PCNA、vimentin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,WNT5A mRNA表达降低(均P=0.000);抑制miR-377-3p后上述各项指标均呈现相反的表达趋势(均P<0.05)。此外,抑制miR-377-3p可逆转NEAT1干扰对细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的调控作用(均P=0.000)。结论·下调NEAT1表达,可能通过与miR-377-3p竞争性结合,升高miR-377-3p表达,降低Wnt通路蛋白表达,进而抑制ox-LDL诱导的HVSMC异常增殖及侵袭迁移,并诱导其凋亡。

NEAT1通过IGF2BP2调控GPX4的表达对中耳胆脂瘤细胞的影响

目的探讨核旁斑组装转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,NEAT1)通过胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 2,IGF2BP2)调控谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达对人中耳胆脂瘤细胞的影响。方法选取2021年5月至2022年12月期间郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科收集的30例中耳胆脂瘤患者的术中标本和瘤旁正常组织标本,分别命名为对照组和中耳胆脂瘤组。培养胆脂瘤细胞分别转染NEAT1过表达质粒、小干扰RNA、乱序siRNA及PBS,分别命名为NEAT1组、si-NEAT1组、阴性对照(siRNA-negative control,si-NC)组和普通对照(normal control,NC)组。通过实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测NEAT1、IGF2BP2、GPX4的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证NEAT1与IGF2BP2的靶向关系。使用细胞计数剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验验证NEAT1对胆脂瘤细胞活性的影响。结果中耳胆脂瘤组的NEAT1相对表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,NEAT1组的NEAT1相对表达量升高,si-NEAT1组的NEAT1相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,IGF2BP2 mimics+NEAT1-WT组胆脂瘤细胞的相对荧光素酶活性低于miRNA-NC+G-CSF-WT组,差异有统计学意义(P<0.05);IGF2BP2 mimics+NEAT1-MUT组与miRNA-NC+NEAT1-MUT组相对荧光素酶活性比较无统计学差异(P>0.05)。与NC组比较,NEAT1组IGF2BP2、GPX4 mRNA相对表达量下降,si-NEAT1组的IGF2BP2、GPX4 mRNA相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,NEAT1组细胞活性增加,si-NEAT1组的细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NEAT1通过抑制IGF2BP2/GPX4途径增强中耳胆脂瘤细胞活性,可将NEAT1作为中耳胆脂瘤治疗靶点进行研究。

血清中LncRNA NEAT1和SP1与帕金森病患者H-Y分级的相关性及诊断意义

目的探讨帕金森病(PD)患者血清中长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(LncRNA NEAT1)和特异性蛋白1(SP1)的表达水平与疾病严重程度的关系。方法选取2020年11月—2022年1月东莞市滨海湾中心医院收治的80例PD患者(PD组),根据修订版Hoehn-Yahr(H-Y)分级分为轻度PD亚组26例、中度PD亚组31例、重度PD亚组23例,选取同期57名体检健康者作为对照组。比较各组血清LncRNA NEAT1、SP1 mRNA表达差异及与H-Y分级的相关性,采用ROC曲线分析两者表达对PD的诊断价值。结果PD组血清LncRNA NEAT1、SP1 mRNA表达高于对照组(t=6.887、6.303,P<0.001)。轻度、中度、重度PD亚组血清LncRNA NEAT1、SP1 mRNA表达依次升高(F=66.803、H=59.259,P<0.001)。PD患者血清LncRNA NEAT1、SP1 mRNA表达与H-Y分级呈正相关关系(rs=0.790、0.840,P<0.001),两者单独与联合诊断PD的曲线下面积分别为0.787、0.784、0.858,灵敏度分别为58.75%、51.25%、70.00%,特异度分别为91.23%、96.49%、89.47%。结论PD患者血清LncRNA NEAT1、SP1 mRNA表达升高与病情进展密切相关,LncRNA NEAT1、SP1的表达水平对PD具有一定的诊断价值,且联合诊断价值更高。

长链非编码RNA NEAT1通过调节miR-221-3p对哮喘炎症和细胞屏障损伤的影响

目的研究长链非编码RNA NEAT1在哮喘中的作用及其相关机制。方法将人气道平滑肌细胞(ASMCs)分为对照组(常规培养,不做处理),模型组[用血小板活化因子(PAF)处理ASMCs 12 h],转染组1(转染空载质粒24 h后,给予PAF处理12 h),转染组2(转染NEAT1过表达质粒24 h后,给予PAF处理12 h)。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测NEAT1和微小RNA-221-3p(miR-221-3p)的表达。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;比较各组ASMCs之间的单层通透性;用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验验证NEAT1和miR-221-3p之间的相关性。结果对照组、模型组、转染组1和转染组2的ASMCs中NEAT1 mRNA的表达水平分别为1.00±0.00,1.54±0.07,1.50±0.13和2.12±0.13;miR-221-3p的表达水平分别为1.00±0.00,0.55±0.02,0.62±0.04和0.34±0.03;IL-1β分别为(1.57±0.09),(6.48±0.37),(6.16±0.55)和(15.21±0.98)pg·mL^(-1);IL-6分别为(153.51±8.37),(753.41±49.86),(712.79±83.83)和(1179.52±85.86)pg·mL^(-1);TNF-α分别为(9.94±0.56),(28.33±1.13),(26.52±0.90)和(54.86±3.74)pg·mL^(-1);ASMCs的单层通过率分别为(4.44±0.21)%,(8.43±0.39)%,(8.27±0.47)%和(16.54±0.78)%。对照组与模型组,转染组1和转染组2相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因检测实验结果表明NEAT1可以靶向调控miR-221-3p(P<0.05)。结论NEAT1通过靶向miR-221-3p加重了哮喘气道炎症和细胞屏障损伤。