基于16S-rDNA序列的核桃细菌性疫病病原菌遗传多态性分析

核桃细菌性疫病(Xanthomonas arboricola pv.juglandis)是世界范围内核桃产区最主要的细菌病害,对其病原菌16S-rDNA的序列进行分析,为阐明其遗传多样性提供参考。本研究从湖北省保康县和丹江口市多个核桃园采集病样,对不同核桃病组织样进行分离纯化,得到77个病原菌类似菌株,对部分菌株进行了接种和分子鉴定。用通用引物27F和1492R对其中有代表性的22株进行16S-rDNA的PCR扩增和测序。用软件MEGA7.0对所有测序结果进行遗传发育树分析,菌株之间平均遗传距离为0.244。用3种限制性内切酶MspI、AfeI和HinfI对16S-rDNA的PCR产物进行酶切,酶切结果用软件NTSYSpc2.1进行聚类分析。所有菌株之间相似系数大于52%,在76%的相似水平,可以将22个菌株划分为6个类群。用软件ApE对所有序列进行同样的3个酶切,RFLP分析结果与试验酶切结果相似。不同方法构建的聚类和发育树分析结果表明,湖北省不同地理来源和病组织的菌株存在一定的遗传多态性。

核桃细菌性疫病的生防菌筛选与鉴定

以枇杷、茄子和水杉等45种植物的健康叶片或茎中分离得到的80株植物内生菌为试材,采用平板对峙法,研究了这些菌株对病原菌树生黄单胞菌核桃致病变种Xanthomonas arboricola pv.juglandis的影响,以期为核桃细菌性疫病的生物防治提供理论参考依据。结果表明:得到5株有明显拮抗作用的菌株,分别是PPE17-18、QCE17-2、QZYE-41、QZJ-42和SSE17-24。其中菌株QZYE-41抑菌能力最强,PPE17-18和SSE17-24的抑菌能力较弱,5株菌株均为革兰氏阳性菌。通过16S rDNA和gyrB基因测序分析,结合菌落形态和生理生化测试,初步确定QZYE-41和SSE17-24为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),PPE17-18和QZJ-42为鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii),QCE17-2为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)。该研究为核桃细菌性疫病的生物防治菌的开发应用提供了潜在生物新材料。

几种植物浸提物对5株细菌的体外抑制作用研究（英文）

[目的]为了寻找对核桃细菌性疫病及其他细菌有潜在防治作用的天然植物产物。[方法]用滤纸片扩散法,对15种植物的3种溶剂浸提物的抑菌作用进行了室内平板筛选。[结果]除了广玉兰和香蒲之外,其他13种植物叶片浸提物对供试的5个菌株都表现出一定程度的抑菌作用。其中七叶树叶水浸提物对枯草芽孢杆菌XHE8的抑制作用最强,抑菌圈直径达(31.3±3.9)mm,与对照直径之比达5.0以上。接骨草对5个菌株中的4个都表现出明显的抑制作用,麦冬和吉祥草对其中的3个菌株表现出明显抑制作用,它们与对照直径之比都大于1.5。七叶树叶浸提物对细菌有十分显著的抑制作用,有进一步研究和开发的潜力。[结论]研究结果为进一步筛选有效成分及抑菌机理研究奠定了基础。