不同分子量核桃肽在小鼠体内分布的初步探究

目的制备相对分子质量(M_(r))不同的核桃肽,并初步探究核桃肽经Cy7标记后在小鼠体内分布情况。方法利用不同酶降解核桃粕制备核桃肽,GPC色谱法测定核桃肽M_(r),利用Cy7标记的核桃肽进行小鼠活体成像,观察其在小鼠体内的分布情况。结果不同酶酶解得到的样品M_(r)占比不同,样品Ⅰ小分子量成分占比高,收率高,通过Cy7标记不同样品在小鼠体内呈现不同的荧光强度,Cy7-样品Ⅰ在脑部显现荧光信号,Cy7-样品Ⅱ和Cy7-样品Ⅲ仅在接受注射的尾部显现强荧光信号。结论不同酶制备的核桃肽在小鼠体内呈现不同的分布,样品Ⅰ中可能含有增强脑部荧光的肽段。

不同分子质量糖基化核桃肽的制备及功能特性分析

以核桃粕制备的核桃蛋白为原料,通过酶解、超滤制备3种不同分子质量的核桃肽,分别与5种糖类(葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糊精、葡聚糖)进行糖基化改性,以乳化性质和抗脂质氧化能力为指标,研究核桃肽糖基化改性最优工艺条件。利用凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱及圆二色谱表征核桃肽的糖基化共价接枝反应产物,研究其理化特性,同时基于激光共聚焦显微镜明确糖基化改性产物的乳状液稳性。结果表明:分子质量大于30 kDa核桃肽与麦芽糊精的糖基化反应最佳工艺条件为核桃肽-麦芽糊精比例1∶2、反应时间8 h、反应温度80℃、肽质量浓度15 mg/mL,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳实验结果证实了分子质量大于30 kDa核桃肽与麦芽糊精通过糖基化反应生成共价复合物,傅里叶变换红外光谱分析表明糖分子以共价键的形式接入到核桃肽分子中;圆二色谱表明肽结构发生改变,α-螺旋从4.85%增加至6.43%、反平行从30.16%增加至35.91%、平行从3.28%增加至4.33%、β-转角从23.21%降至20.77%、无规卷曲从33.59%降至31.22%。糖基化反应改性除Fe^(2+)螯合能力没有改善,其溶解性、乳化性、乳化稳定性、吸水性、吸油性、表面疏水性、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除力和抗脂质氧化能力均提高(乳化性为(83.24±1.64)m^(2)/g、乳化稳定性为(218.49±3.55)min、吸水性为(3.92±0.36)g/g、吸油性为(3.17±0.24)g/g、表面疏水性为251.05±6.91、DPPH自由基清除率为(86.74±2.14)%、抗脂质氧化能力为(62.17±3.51)%);激光共聚焦结果显示核桃肽糖基化改性后对核桃油的包裹能力增强,对提高乳液稳定性具有一定的潜在利用价值。核桃肽的糖基化改性为核桃粕副产物加工利用提供新思路,同时为糖基化改性在食品开发中的应用提供一定的参考。

大鼠肠囊外翻法分析核桃肽吸收特性及抗氧化肽筛选鉴定

本研究通过大鼠肠囊外翻法探讨了<3 kDa核桃蛋白肽模拟胃肠消化产物的吸收特性,以抗氧化能力(DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、Fe2+螯合率)和活性肽吸收率为指标筛选核桃肽在肠道吸收的最优条件,并应用模拟分子对接技术和Nano-HPLC-MS/MS技术对吸收肽组分进行筛选和鉴定,得到能够以完整形式被吸收并发挥抗氧化活性的新型核桃源肽。结果表明:当核桃肽消化产物吸收浓度为6 mg/mL,吸收时间为2 h时,其抗氧化活性最高且在小肠吸收率最高:进一步通过Nano-HPLC-MS/MS鉴定结果表明0.5~1 kDa活性肽数量最多,其中位于C端/N端氨基酸主要集中在Pro、Thr、Leu,鉴定出33条活性肽能够以完整形式被吸收,穿过肠道屏障;最后通过分子对接技术与DPP-Ⅳ相结合,获得三条结合能最低的活性肽NLRFPL、NPDDEFRPQ、KGHLFPN,其结合能分别为-8.8、-8.6、-8.6 kal/mol,其中KGHLFPN抗氧化能力最强。综上,<3 kDa核桃肽模拟胃肠道消化能够释放抗氧化活性更高且能够被小肠吸收的活性肽为KGHLFPN,本文为探索外源肽小肠吸收特性及筛选鉴定抗氧化肽提供新思路。

核桃肽的制备、分离纯化及生物活性研究进展

核桃粕是一种优质的植物蛋白资源,利用其制备的核桃肽有抗氧化、降血压等保健功能。但目前核桃粕常被作为废弃物或低价值饲料、肥料,该现状阻碍了核桃产业的发展。因此,利用核桃粕开发生物活性肽等产品,对于实现综合利用、提高副产品附加值具有重要意义。本文综述了核桃肽的制备、分离纯化及其生物活性,探讨了核桃肽在食品、医药行业的不同用途,旨在为核桃粕的高效利用和核桃产业发展提供参考信息。

预处理对核桃肽抗氧化活性的影响

比较了不同的预处理方式对低温和高温脱脂核桃粕酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率的影响。结果表明,对低温脱脂核桃粕进行加热、超声波、微波和碱提等预处理可以提高其酶解得到核桃肽的抗氧化活性和得率。其中,碱提得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.85±0.01、32.55%,微波预处理得到核桃肽的抗氧化活性和得率分别为0.86±0.03、34.63%,高于直接酶解得到的核桃肽的抗氧化活性和得率(0.72±0.08、18.46%),且差异具有显著性(p<0.05)。而高温脱脂核桃粕进行碱提等预处理与直接酶解得到核桃肽的抗氧化活性无明显差异。

铁离子螯合亲和层析分离抗氧化活性核桃肽

采用铁离子螯合亲和层析方法分离出具有不同抗氧化活性的核桃肽,并探讨核桃肽的抗氧化活性与铁结合能力的关系。结果表明,核桃肽在酸性条件(pH 5.5)下与铁的结合能力最强,随着pH逐渐升高,结合能力下降。磷酸氢二钠对吸附到铁亲和层析柱上核桃肽的洗脱效果最好,通过阶段洗脱,得到铁结合能力逐渐增强的核桃肽组分(F1、F2和F3)。对其总还原能力和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力进行测定,发现其抗氧化能力为F3>F2>F1(P<0.05)。结果表明,核桃肽的铁结合能力越强,其抗氧化活性越高。

葛根核桃肽复合饮料调配工艺的研究

以葛根和核桃饼粕为原料,经乳酸菌发酵后与核桃多肽粉按一定比例混合,制备葛根核桃肽复合饮料。以感官评分为评价指标,采用正交优化试验确定葛根核桃肽复合饮料的最佳调配工艺参数为白砂糖8 g/100 m L,柠檬酸0.10 g/100 m L,复合香精0.08 g/100 m L。采用响应面法优化复合饮料的稳定性,以稳定性评分为考察指标,得到的稳定剂最佳配方为黄原胶0.11 g/100 m L、羧甲基纤维素钠0.10 g/100 m L、藻酸丙二醇酯0.17 g/100 m L、蔗糖酯0.14 g/100 m L。在此条件下调配的复合饮料稳定性好,且酸甜适宜,香味宜人。

核桃肽对小鼠的抗疲劳作用

目的:探讨核桃肽对雄性小鼠的抗疲劳作用。方法:采用SPF级雄性ICR小鼠240只按体重随机分为5组,分别为空白对照组、乳清蛋白组[220mg/(kg·BW)]和3个核桃肽干预组[110、220、440mg/(kg·BW)]。每日经饮水给予受试样品30d,进行负重游泳实验测定各组小鼠负重游泳力竭时间,采用全自动生化仪测定各组小鼠血清尿素氮含量和乳酸脱氢酶活力,采用紫外分光光度计法检测各组小鼠血乳酸水平,采用试剂盒检测各组小鼠肝、肌糖原含量。结果:核桃肽可提高乳酸脱氢酶活性,降低血乳酸和血清尿素氮含量,提高肌糖原储备量,显著延长负重游泳时间。结论:核桃肽具备一定的缓解疲劳的作用。

核桃肽对幼年小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨核桃肽(WP)对幼年小鼠学习记忆能力的改善作用及其机制。方法选用北京大学医学部实验动物科学部提供的48只初断乳C57BL/6J雄性小鼠,随机分成4组,空白对照组和低(110 mg/kg·bw)、中(220 mg/kg·bw)、高(440 mg/kg·bw)3个剂量WP组,每组12只,干预30 d后进行开阔场实验、Morris水迷宫实验、跳台实验和穿梭箱实验,观察小鼠的自主活动能力及情绪反应、空间记忆能力和主动及被动回避能力。结果Morris水迷宫结果显示,WP高剂量组小鼠的逃避潜伏期较空白对照组明显缩短,WP中、高剂量组在目标象限停留时间和穿台次数较空白对照组明显增加,差异均有统计学意义。跳台实验24 h测试中,与空白对照组相比,WP低、高剂量组错误次数减少,三个干预组停留潜伏期均增长,5 d后测试中,WP中剂量组对电击的记忆消退较慢,差异均有统计学意义。穿梭箱实验中,与空白对照组相比,WP低、中、高干预组小鼠的主动回避次数增多,受到电击次数减少。WP剂量组血清T-SOD及GSH-Px活性高于空白对照组,MDA水平低于空白对照组,差异均有统计学意义。结论 WP可以增强幼年小鼠学习和空间记忆能力、主动及被动回避能力,也可能具有延缓小鼠学习记忆的衰退的作用,其机制可能与WP的抗氧化性有关。

葛根核桃肽复合饮料喷雾干燥工艺研究

为了改善葛根核桃肽复合饮料的喷雾干燥效果,优化喷雾干燥工艺,该研究考察了进口温度、进料流量、物料质量分数以及助干剂的种类和添加量的变化对葛根核桃肽复合饮料喷雾干燥效果的影响,并采用正交设计法优化喷雾干燥条件。结果显示,喷雾干燥最佳工艺条件为进口温度170℃,进料流量1.96 m L/min,物料质量分数15%,麦芽糊精添加量为总固形物含量的80%,β-环糊精添加量为总固形物含量的15%,在此条件下,所得产品的感官评分为95分,水分含量为3.98%。

核桃肽制备及生物活性的研究进展

核桃是重要的木本油料作物,核桃榨油后的核桃粕中含有丰富的优质植物蛋白,其利用率不高,资源浪费严重。提取核桃粕中蛋白制备生物活性肽具有潜在的食品开发价值,同时核桃肽在抗氧化、保护心血管、改善记忆等方面生物活性较强,是功能性产品的良好原料。有效利用核桃粕蛋白,研发高活性蛋白肽对实现核桃粕的综合利用,提高产品附加值具有重要的意义。为促进对核桃肽制备技术及功能活性作用机制进行深入研究,本文梳理、总结前人对核桃肽的制备、分离纯化、鉴定及生物活性的研究,旨在为核桃粕蛋白资源的高值化利用及核桃肽的深入研究提供理论参考。

核桃肽NP-1对大鼠酒精性情绪及认知损伤的改善效应

为评价核桃肽NP-1对SD大鼠酒精性情绪及认知损伤的改善效应,将40只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、酒精模型组、NP-1低、中、高剂量组,每组8只。采用10%酒精作为唯一水源,连续18周构建大鼠情绪及认知损伤模型组,同时空白对照组每天给予蒸馏水,低、中、高剂量组饮水中分别添加0.32、0.96、2.88 mg/m L的NP-1。每天测定大鼠饮水量变化,定期观察NP-1对大鼠体重的影响,高架十字迷宫检测大鼠情绪焦虑水平,强迫游泳实验检测情绪抑郁水平,Morris水迷宫检测空间学习记忆能力,血细胞自动分析仪进行血常规免疫相关指标分析。结果表明,与空白对照组相比,模型组大鼠高架十字迷宫中开放臂时间比例(OT%)、强迫游泳时累计不动时间、水迷宫潜伏期、平台穿越次数和目标象限探索时间、白细胞和淋巴细胞水平均显著改变(p<0.05)。与模型组相比,不同剂量NP-1组高架十字迷宫OT%、水迷宫实验平台潜伏期均显著降低(p<0.05),高剂量组平台位置穿越次数和目标象限探索时间显著增加(p<0.05),白细胞和淋巴细胞水平显著降低(p<0.05),其中高剂量组改善效果最明显,提示NP-1能有效改善酒精导致的情绪及认知损伤。

核桃肽生物活性的研究进展

综述了核桃肽的提取工艺及其抗氧化、抗疲劳、降血糖、免疫调节等生物活性。

核桃肽制备工艺的优化及其改善记忆功能研究

目的:以核桃粕为原料,探讨核桃肽制备工艺优化及其改善记忆力功能活性。方法:通过单因素实验和正交试验对核桃肽的制备工艺进行优化;同时采用水迷宫试验、跳台试验以及避暗试验评价核桃肽对记忆功能的影响。以雌性小鼠作为受试动物,分为低、中、高三个剂量组及空白对照组,灌胃剂量分别为1.33、2.66、3.99 g/kg BW,空白对照组灌胃蒸馏水处理,连续灌胃30 d,末次灌胃24 h后开始试验。结果:最佳酶解制备工艺为前处理柠檬酸浓度2%、碱性蛋白酶添加量4%、料液比1:15、酶解时间4 h,此条件下核桃肽收率为33.5%且具有良好的澄清度;水迷宫试验中剂量组达到终点的动物数显著高于空白对照组(P<0.05),避暗试验高剂量组潜伏时间极显著延长,错误次数及错误反应率极显著减少(P<0.01),核桃肽具有改善记忆的功能活性。结论:本研究在保证核桃肽产品质量的同时提升了产品澄清度,同时功能研究结果显示核桃肽可从主动回避和被动回避两方面改善受试小鼠记忆力。

核桃肽生产工艺的探讨

阐述核桃肽的生产工艺、主要设备、技术与质量指标,该技术完善了核桃肽生产工艺,促进我国核桃产业的发展。

葛根核桃肽复合饮料发酵工艺的研究

以葛根、核桃饼粕为主要原料,经乳酸菌发酵后与核桃多肽粉按一定比例混合,制备葛根核桃肽复合饮料。以黄酮提取率和感官评分为评价指标,利用正交设计法对乳酸发酵型葛根核桃肽复合饮料的发酵工艺进行了初步研究。结果表明,最佳发酵工艺为葛根与核桃饼粕的原料配比3∶1,乳酸菌(保加利亚乳杆菌∶乳酸乳球菌=1∶1)接种量4%,蔗糖添加量1%,固液比1∶15,发酵温度39℃,发酵时间2 d。调配后的复合饮料稳定性好,且酸甜适口,香味宜人,其中黄酮质量浓度为0.2 g/L,多肽质量浓度为12 g/L。

改善记忆中草药与核桃肽的相互作用

选取5种具有改善记忆作用的传统中草药(人参、远志、茯苓、龙眼及银杏叶),分别水提得到相应的活性成分,考虑提取效果和重复性,选择3种活性成分与核桃多肽进行相互作用,研究所得复合物的理化特性与抗氧化活性.首先,通过含量和抗氧化测定,发现所提取的中草药活性成分均具有抗氧化、清除自由基功效;然后,以蛋白回收率和抗氧化活性为指标优化核桃酶解工艺,分析最佳酶解液的总氨基酸组成,并借助抗氧化性评价和荧光光谱法研究中草药活性成分与核桃多肽的交互作用,探讨不同相互作用条件(如配比、温度、pH值等)对交互作用的影响.结果表明,中草药中提取的活性成分会使核桃多肽发生荧光猝灭,说明两类物质发生了交互作用,且在抗氧化功效上有协同作用.通过对交互作用影响因素的探讨,发现合适的中草药活性成分与核桃多肽配比有助于增进协同效果,温度、pH值对活性成分和多肽交互作用的影响较为显著.研究结果可为相关产品生产时中草药活性成分与多肽类物质的复配提供一定的参考.

微囊化核桃肽制备及其稳定性研究

本研究以冷榨核桃粕酶解制备的核桃肽为原料,以β-环糊精为壁材对其进行微囊化处理。从芯材壁材比、包埋温度,包埋时间三个因素对微囊化核桃肽的制备工艺进行优化,并对微囊化核桃肽稳定性进行研究。结果显示,微囊化核桃肽的最佳制备工艺为芯材与壁材的比例1∶10,包埋温度为60℃,包埋时间为60min,此时包埋率为80.05%。90d稳定性实验结果显示微囊化核桃肽水分增加明显缓于核桃肽,提示微囊化核桃肽性质更加稳定,更易于存储。

核桃肽提高SAMP8小鼠生存质量和寿命的研究

目的:评估核桃肽对衰老和老龄小鼠生存质量和寿命的改善作用。方法:取60只SAMP8小鼠随机分为4组,包括模型对照组和低、中、高剂量3个核桃肽干预组,另设SAMR1小鼠作为正常对照组。通过摄食量、饮水量、体重的变化,以及体脂含量、代谢率、脏器指数,评估其生存质量的改善;通过衰老评分表征其衰老特征和程度;通过寿命分析,表征核桃肽对SAM小鼠寿命的影响。结果:模型对照组小鼠体重、肌肉率均低于正常对照组和各剂量干预组,低剂量干预组腓肠肌质量、呼吸商和代谢率均显著高于模型对照组(P<0.05)。低剂量组生存率和寿命大于模型对照组。结论:低剂量核桃肽缓解SAMP8小鼠衰老、提高生存质量、延长其寿命的效果较明显。本研究对核桃肽延缓衰老的深入研究提供了科学依据。

核桃肽免疫调节作用的研究

通过体外检测细胞炎症因子的影响以及体内斑马鱼免疫调节模型,研究核桃肽的免疫调节功效。结果显示,核桃肽可以调节-IL-10和IL-17A细胞炎症因子,对斑马鱼巨噬细胞的抑制和吞噬墨汁巨噬细胞的数量具有明显的改善和促进作用,改善作用可达83.33%,促进倍数达到3.4倍。综上,核桃肽具有较好的免疫调节作用,可开发为用于增强免疫力的药物和食品。