具核梭杆菌在结直肠癌筛查中的应用价值

目的探讨具核梭杆菌(Fn)在结直肠癌筛查中的临床价值。方法前瞻性纳入于2022年7月至2023年12月期间在首都医科大学附属北京友谊医院行结肠镜检查者。于结肠镜检查前3 d内留取粪便样本,采用定量聚合酶链反应(qPCR)法检测粪便中菌群Fn的相对丰度,同时行粪便隐血试验(FOBT)。采用受试者操作特征(ROC)曲线评估Fn对结直肠癌的诊断效能。结果共纳入271例受试者,其中诊断结直肠癌58例(21.40%)。结直肠癌组患者粪便中的Fn相对丰度显著高于非结直肠癌组[6.602(3.716,8.997)vs.1.665(0.593,4.752)],差异有统计学意义(P<0.05)。Fn诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)为0.750(95%CI:0.680~0.820,P<0.05),对应敏感度、特异度和阴性预测值分别为0.724、0.742和0.908。在FOBT结果阴性者中,Fn诊断结直肠癌的敏感度、特异度和阴性预测值分别为0.714、0.730和0.983。Fn联合FOBT诊断结直肠癌的AUC为0.894(95%CI:0.848~0.940,P<0.05),对应敏感度、特异度和阴性预测值分别为0.897、0.765和0.964,诊断效能显著优于单独检测Fn(P<0.05)。结论粪便Fn在结直肠癌筛查中具有较高的敏感性、特异性和阴性预测值,与FOBT联合应用可进一步提升结直肠癌检出率。因此,粪便Fn是结直肠癌筛查有价值的无创生物标志物,可有效避免FOBT阴性者中结直肠癌的漏诊。粪便Fn丰度升高者应尽快行结肠镜检查,若Fn与FOBT均阴性,则可基本排除结直肠癌。

具核梭杆菌对食管鳞状细胞癌铁死亡相关蛋白表达及预后的影响

目的:探讨具核梭杆菌(Fn)对食管鳞状细胞癌(ESCC)铁死亡相关蛋白缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达及预后的影响。方法:将ESCC细胞KYSE30及KYSE150各分为4组:对照组(不感染Fn),Fn感染12、24、48 h组。采用试剂盒检测细胞中活性氧(ROS)与丙二醛(MDA)含量,CCK8法检测顺铂(CDDP)对KYSE30和KYSE150细胞的半数抑制浓度(IC 50),Western blot法检测HIF-1α与GPX4蛋白表达水平。采用RNAscope技术检测222例ESCC及其癌旁正常食管组织中Fn感染情况,采用免疫组化法检测HIF-1α与GPX4蛋白的表达情况。采用Kaplan-Meier法绘制Fn感染阳性和阴性ESCC患者术后生存曲线。结果:Fn感染可诱导KYSE30及KYSE150细胞HIF-1α和GPX4蛋白高表达,提高细胞的氧化应激水平,并降低细胞对CDDP的应答效力,具有时间依赖性(P<0.05)。ESCC组织中Fn感染,HIF-1α及GPX4蛋白表达的阳性率均高于癌旁正常食管组织(P<0.05)。ESCC患者中男性、有吸烟史、有饮酒史、肿瘤低分化、肿瘤浸润深度侵及纤维膜、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期者Fn感染阳性率增加(P<0.05)。Fn感染阳性的ESCC患者术后生存状况较Fn感染阴性者差(P<0.001)。结论:Fn感染可抑制ESCC铁死亡,可能与ESCC患者预后不良有关。

具核梭杆菌与miR-497对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及其调控关系

目的观察具核梭杆菌与微小RNA(miR)-497对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响并分析其调控关系。方法将结直肠癌细胞系HCT116转染miR-497过表达质粒miR-497 mimic,随机分为感染指数(MOI)100组、MOI 200组、MOI 500组、MOI 1000组,分别与MOI为100、200、500、1000的具核梭杆菌进行共培养,实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-497,选择miR-497表达最低的细菌处理浓度作为具核梭杆菌后续的作用浓度。取HCT116细胞随机分为对照组、miR-497过表达组、miR-497降表达组、过表达阴性对照组、降表达阴性对照组,对照组不做处理正常培养,miR-497过表达组、miR-497降表达组、过表达阴性对照组、降表达阴性对照组通过Lipofectamine 2000分别转染miR-497 mimics、miR-497 inhibitor、mimic NC及inhibitor NC,CCK-8法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,划痕愈合实验观察细胞迁移能力。另取HCT116细胞随机分为对照组、miR-497过表达组、过表达阴性对照组及过表达+具核梭杆菌组,对照组不做处理正常培养,miR-497过表达组转染miR-497 mimic,过表达阴性对照组转染mimic NC,过表达+具核梭杆菌组在转染miR-497 mimic后与选定浓度的具核梭杆菌进行共培养,CCK-8法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,划痕愈合实验观察细胞迁移能力。结果miR-497表达MOI 100组>MOI 200组>MOI 500组>MOI 1000组(P均<0.05),选择MOI 1000作为具核梭杆菌后续作用浓度。细胞增殖率、侵袭细胞数、细胞迁移率miR-497降表达组>对照组、过表达阴性对照组、降表达阴性对照组>miR-497过表达组(P均<0.05);细胞增殖率、侵袭细胞数、细胞迁移率miR-497过表达组<过表达+具核梭杆菌组<对照组、过表达阴性对照组(P均<0.05)。结论具核梭杆菌可以通过负向调控miR-497促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移。

具核梭杆菌与食管癌的研究进展

食管癌是最恶性的消化道疾病之一,目前其发病的病因尚不明确。在食管癌患者的癌症组织中检测到高水平的牙周病细菌,其中具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)丰度显著偏高。具核梭杆菌是一种存在于口腔中的人体微生物群的组成部分,它会导致牙周疾病,也与人类癌症的发展有关。之前有相当研究集中在具核梭杆菌与结直肠癌的关系,本文对具核梭杆菌与食管癌的关联性及影响机制进行综述。

具核梭杆菌在口腔黏膜癌变中的作用与机制

口腔黏膜癌变是一种严重的健康问题,其发生、发展涉及多种因素。近年来,具核梭杆菌作为口腔微生物群落的一部分,被视为在多种癌症中发挥重要作用的感染性因素之一。本综述旨在全面探讨具核梭杆菌在口腔黏膜癌变中的作用和机制。通过分析临床和分子生物学研究,发现具核梭杆菌与口腔潜在恶性疾患和口腔鳞状细胞癌的发生及发展密切相关。具体来说,该菌种可以调控肿瘤免疫微环境,促进细胞增殖和侵袭,以及激活免疫检查点。此外,具核梭杆菌还可能作为口腔癌的生物标志物和治疗目标。然而,该领域的研究仍面临样本数量不足、患者特异性强以及多学科交叉合作的挑战。未来研究需要进一步揭示其作用机制,并探索其在口腔癌预防和治疗中的潜在应用。

具核梭杆菌通过增强STAT6 O-GlcNAc糖基化修饰诱导巨噬细胞M2型极化最终促进结直肠癌转移

目的探讨具核梭杆菌(F.nucleatum)在巨噬细胞极化和结直肠癌转移中的作用及潜在的分子机制。方法通过将F.nucleatum与RAW264.7细胞(MOI=100∶1)共培养,2-NBDG检测葡萄糖摄取,qPCR检测M1、M2型巨噬细胞的标志物,Western blot检测糖基化修饰水平以及巨噬细胞极化标志物,小麦胚芽凝集素(sWGA)下拉实验和免疫共沉淀(Co-IP)实验检测STAT6 O-GlcNAc糖基化修饰;其次,将F.nucleatum与RAW264.7细胞(MOI=100∶1)共培养,取其上清液制作条件培养基并处理RKO细胞后用划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果F.nucleatum促进巨噬细胞M2极化,且增强结直肠癌RKO细胞的迁移能力;F.nucleatum促进巨噬细胞对葡萄糖的摄取和巨噬细胞M2型相关标志物的表达,且促进STAT6 O-GlcNAc糖基化修饰。结论F.nucleatum通过增强巨噬细胞葡萄糖摄取从而促进细胞内STAT6的O-GlcNAc糖基化修饰,进而诱导巨噬细胞向M2型极化最终促进结直肠癌的转移。

结直肠锯齿状病变相关信号通路及其与具核梭杆菌相关性研究进展

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病率和死亡率逐年上升,影响着大众的健康。锯齿状途径是CRC发生的重要途径之一,在CRC的进展过程中扮演重要角色。其中锯齿状病变因2010年前缺乏统一病理诊断标准、内镜下易忽视、易与无恶变可能的息肉混淆等,检出率较低。但其易进展为具有BRAF突变、CpG岛甲基化表型、微卫星不稳定性的右半结肠癌,且检出时多处于晚期,患者预后不佳,成为近期研究热点。近年来微生物诱发CRC的研究成为热点之一,据报道具核梭杆菌是促进CRC的重要微生物之一,已有研究表明具核梭杆菌通过炎症通路促进锯齿状病变的进展。研究具核梭杆菌在炎症信号通路中对锯齿状病变的影响,可为疾病指导预后和治疗决策。

氢化镁颗粒对牙周致病菌具核梭杆菌的体外抗菌作用

目的评价微米氢化镁(MgH_(2))颗粒对牙周炎致病菌具核梭杆菌的体外抗菌作用,研究可能的抗菌机制。方法通过扫描电镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)对实验材料MgH_(2)颗粒的尺寸大小、表面形貌和晶相结构进行表征。使用电子顺磁共振技术(EPR)研究其释放行为,同时使用菌落计数实验(CFU)、溴化四甲基偶氮唑盐法(MTT)研究了MgH_(2)颗粒对具核梭杆菌的抗菌效应。结果MgH_(2)颗粒呈现为尺寸不均一的微米级球状颗粒,平均尺寸为10.52μm。XRD谱图具有属于MgH_(2)的(110)、(101)、(200)及(211)特征面的衍射信号。在菌落计数实验(CFU)实验中,当材料浓度达到1.5 mg/mL和2 mg/mL时有显著的抑菌效果,抗菌率分别为45.69%和79.24%。在MTT实验中,具核梭杆菌的活性随着MgH_(2)颗粒浓度的增加而逐渐降低,当MgH_(2)颗粒浓度达到2 mg/mL时,其活性接近于零。结论MgH_(2)颗粒对具核梭杆菌有着良好的抑菌效果,在临床应用方面具有良好的前景。

不同载体表面及糖暴露后具核梭杆菌黏附及生物膜特性

目的 探讨具核梭杆菌(F.nucleatum)在口腔常用材料(钛、树脂义齿、聚苯乙烯)表面的聚集、黏附和生物膜形成特性,以及糖(蔗糖、乳糖、木糖醇)暴露对其的影响,旨在揭示F.nucleatum在不同口腔条件下的致病力。方法 将F.nucleatum在不同载体表面、不同糖暴露下厌氧培养2 h、4 h、6 h、8 h(黏附时期)、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h(生物膜时期),采用结晶紫染色法检测F.nucleatum在不同条件下各时间点生物量,并计算黏附率;采用场发射扫描电子显微镜表征黏附时期的F.nucleatum形态。将F.nucleatum于不同材料(钛、树脂义齿、聚苯乙烯)表面、含有不同糖(蔗糖、乳糖、木糖醇)的培养基中厌氧培养48 h形成生物膜,将生物膜中细菌重悬后静置检测上清液吸光度值计算得到自聚集率。结果 0.1 m、0.5 m、1.5 m、3 m、4.0 m钛片、聚苯乙烯、树脂义齿表面F.nucleatum自聚集率分别为36.14%、53.76%、46.18%、45.08%、44.83%、50.22%;蔗糖、乳糖、木糖醇暴露后自聚集率分别为60.58%、43.36%、36.50%。F.nucleatum在0.1 m、0.5m、1.5 m、3 m钛片、树脂义齿表面于6 h达到最大黏附率,黏附率分别为98.00%、180.00%、177.00%、40.00%;4 m钛片、聚苯乙烯8 h黏附率分别为108.00%、548.00%。蔗糖、乳糖、木糖醇最大黏附率分别为370.00%、196.00%、144.00%、97.00%。所有条件下,F.nucleatum均在48 h达到最大生物膜生物量,生物膜成熟,72 h、96 h生物膜生物量减少,生物膜走向衰亡。结论 F.nucleatum在不同载体上、不同糖暴露下具有较好的聚集、黏附、形成生物膜能力。

具核梭杆菌在消化道肿瘤发生发展中作用的研究进展

近年来,随着医学技术不断发展,具核梭杆菌与消化道肿瘤免疫相关作用备受医学界的关注。具核梭杆菌在消化道中存在,与肿瘤的发生与发展密切相关,同时也参与调动免疫系统功能。临床相关研究表明,具核梭杆菌可通过多种机制对肿瘤免疫反应造成影响,从而对肿瘤的发生发展造成影响。消化道肿瘤是指在人体消化道发生恶性肿瘤,其中包括口腔癌、食道癌、胃癌、肠癌等多种类型。本文通过概述具核梭杆菌的定义,详细分析具核梭杆菌与消化道各种肿瘤免疫相关作用,旨在为开发肿瘤治疗方法提供理论基础。

具核梭杆菌感染与结直肠癌的关系

目的探讨具核梭杆菌(Fn)感染与结直肠癌(CRC)的相关性。方法对手术切除、经病理证实的101例CRC组织和配对正常组织进行实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测组织中Fn丰度。随机抽选其中22例CRC和配对正常组织进行荧光原位杂交,验证FQ-PCR的结果,分析Fn的富集度与临床病理指标的相关性。结果两检测方法均证实Fn在CRC组织中富集,CRC组织中Fn丰度显著高于配对正常组织者占87.1%(88/101),CRC组织Fn丰度归一化值为0.242±0.034,显著高于配对正常组织的0.050±0.017(P=0.000)。Fn的高丰度与患者的性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、浸润程度、Dukes分期等临床病理指标均无显著相关性(P>0.05),而与淋巴转移密切相关(P<0.05)。结论 Fn在CRC组织中富集,并有可能促进淋巴结转移。

具核梭杆菌黏附和侵入上皮细胞的初步研究

目的:本研究以P.gingivalisATCC33277为阳性对照,用KB细胞体外模拟牙龈上皮细胞,初步研究F.nucleatum对上皮细胞的黏附和侵入能力。方法:将实验菌株P.gingivalisATCC33277、F.nucleatumATCC10953以及F.nucleatumWCD05-1分别配制成2×107CFU/mL的菌悬液,加入培养有KB细胞的24孔细胞培养板中。在37℃,50 mL二氧化碳的细胞培养箱中孵育2 h,以P.gingivalisATCC33277为阳性对照,观察F.nucleatum对KB细胞的黏附和侵入。结果:两种F.nucleatum均能黏附和侵入KB细胞。与P.gingivalisATCC33277相比较,F.nucleatumATCC10953的黏附和侵入能力稍弱,而F.nucleatumWCD05-1的黏附和侵入能力更强。结论:F.nucleatum能黏附和侵入上皮细胞,至少在短时间内能保持一定的黏附和侵入量,在细胞内保持一定的活力。F.nucleatum的不同菌株之间黏附和侵入能力存在差异,临床株的毒力明显强于标准株。

血链球菌细菌素对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌拮抗作用的实验研究

目的:提取血链球菌标准菌株(ATCC10556)细菌素,研究其对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的拮抗作用。方法:通过超声破碎,高速离心,盐析等方法提取血链球菌细菌素;采用二倍稀释法,测定血链球菌细菌素对浮游状态下牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的最小抑制浓度(MIC);在体外建立牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌唾液生物膜模型,利用激光共聚焦扫描电镜观察该生物膜中细菌活性的变化。结果:血链球菌细菌素对浮游状态下的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的MIC为0.5 g/L;使用血链球菌细菌素作用牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生物膜,活菌百分比显著下降,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:血链球菌细菌素对浮游状态下和生物膜中的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生长均有显著的抑制作用。

具核梭杆菌调控牙龈卟啉单胞菌感染对口腔鳞状细胞癌KB细胞周期和细胞因子分泌的研究

目的:通过研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis)和具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum,F.nucleatum)感染对KB细胞的细胞周期和炎症因子分泌的调控,初步探讨牙周细菌感染对口腔鳞状细胞癌进展和炎症反应的影响。方法:建立P.gingivalis和F.nucleatum单独或联合感染KB细胞模型,透射电镜观察细菌感染细胞情况,流式细胞术检测细胞周期变化,酶联免疫法检测IL-6和IL-8蛋白分泌水平。结果:P.gingivalis联合F.nucleatum感染KB细胞8h抑制细胞周期进程,感染24h后加速细胞周期进程;P.gingivalis联合F.nucleatum感染促进KB细胞分泌IL-6和IL-8,并且有时间和F.nucleatum浓度依赖性。结论:牙周致病菌之间的联合作用更能促进口腔鳞状细胞癌的发展及免疫炎症反应。

吸烟个体血清在具核梭杆菌侵入KB细胞及分泌MMP-1中的作用

目的:探讨慢性牙周炎患者中吸烟个体血清在具核梭杆菌(Fn)侵入KB细胞及在侵入过程中对KB细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的作用。方法:提取慢性牙周炎吸烟个体10例(Y组)、慢性牙周炎非吸烟个体10例(N组)、牙周健康非吸烟个体5例(H组)的血清。分别将各组血清200、400、800μl添加至Fn感染KB细胞模型,作用24 h后计数细菌菌落。用人酶联免疫吸附测定试剂盒检测各组上清液中MMP-1的浓度。用单因素方差分析进行数据分析。结果:3组800μl血清引起Fn侵入KB细胞的侵入率(%)分别为12.59±1.27、8.03±0.075和7.99±0.14(P<0.05),KB细胞分泌MMP-1的浓度(μg/L)分别为400.04±21.02、252.57±18.89、262.47±35.29(P<0.05)。200μl和400μl血清组与N组、H组比较,Fn侵入率及KB细胞MMP-1分泌量无统计学差异(P>0.05)。结论:较高剂量吸烟个体血清有利于Fn侵入KB细胞并促进KB细胞分泌MMP-1。

克罗恩病患者粪便具核梭杆菌与钙卫蛋白相关性研究

背景:具核梭杆菌(Fn)是一种常见的肠道细菌,其可能作为条件致病菌参与了炎症性肠病(IBD)的发生。目前尚缺乏IBD患者肠道Fn的定量数据。目的:建立绝对定量real-time PCR方法,检测克罗恩病(CD)患者的粪便Fn,分析其与CD炎症指标的相关性。方法:收集苏州市立医院57例CD患者和41例健康体检者的粪便样本,提取基因组DNA。构建Fn菌株ATCC 25586特异的nusG(transcription antitermination protein)基因至pUC57质粒,作为标准品,以SYBR Green real-time PCR法检测梯度稀释的标准品质粒,建立绝对定量标准曲线。评价该检测方法的敏感性、特异性和稳定性,并以之检测CD患者和健康对照者的粪便Fn丰度,分析Fn丰度与粪便钙卫蛋白(FC)、C反应蛋白(CRP)和红细胞沉降率(ESR)的相关性。结果:本研究建立的粪便Fn绝对定量real-time PCR方法敏感性高、特异性强、稳定性好。CD患者粪便Fn检出率和丰度均显著高于健康对照者(P=0.034;P=0.039),且Fn丰度与FC水平呈显著正相关(r=0.459,P=0.011)。结论:本研究建立的绝对定量real-time PCR方法可用于人粪便样本Fn丰度检测。苏州地区CD患者粪便Fn检出率和丰度显著升高,Fn丰度与炎症活动度指标FC相关。

复方中药制剂对具核梭杆菌抗菌作用的体外研究

目的:观察由没食子酸、厚朴酚和白芨多糖三者配伍制成的复方中药制剂对具核梭杆菌的抗菌作用。方法:采用液体二倍稀释法,测定复方中药制剂对游离状态下具核梭杆菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度;在体外形成生物膜后,分别用复方中药制剂和氧化锌液作用30min,利用激光共聚焦扫描显微镜观察生物膜的细菌活性。结果:复方中药制剂、氧化锌液对游离状态下具核梭杆菌均有一定的抗菌作用,但两者的最小抑菌、杀菌浓度无显著性差异(P>0.05);通过对具核梭杆菌生物膜的观察,发现在使用中药制剂后,具核梭杆菌生物膜活菌百分比显著下降,与氧化锌、空白对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论:复方中药制剂对具核梭杆菌具有较强的抗菌作用,尤其对生物膜状态下的具核梭杆菌,抗菌作用更明显。

具核梭杆菌生物学特性及检测手段的研究进展

具核梭杆菌是牙周炎主要致病菌之一,在口腔乃至全身感染性疾病中检出率极高,与临床厌氧菌感染的关系十分密切。具核梭杆菌具有明显的毒力或致病性,可通过多种机制干扰宿主防御能力,引发牙周组织破坏。本文描述了具核梭杆菌的一些重要特性,包括其生物学特征、分类和毒性特征以及主要的生物学检测手段,着重描述了聚合酶链反应技术在具核梭形杆菌检测中的应用。

具核梭杆菌的研究进展

具核梭杆菌是一种G-专性无芽胞厌氧杆菌,在口腔乃至全身感染性疾病中检出率极高,与临床厌氧菌感染的关系十分密切.具核梭杆菌的致病性与它的黏附特性、代谢产物丁酸及宿主细胞因子水平有关.最近又有研究报道,该菌能够诱导外周血单个核细胞和多形核细胞的凋亡,从而逃避免疫细胞的杀伤作用,引起机体的感染性疾病.

正畸治疗中具核梭杆菌及其毒力因子FadA粘附素的检测

目的:检测正畸治疗患者口腔中的具核梭杆菌(Fn)及毒力因子FadA粘附素。方法 :随机收集120例患者的临床标本分别组成正畸治疗组(A组55例)、正常对照组(B组30例)、牙周炎组(C组35例),记录其各自GI,进行细菌DNA提取及16SrDNA PCR反应,并与牙龈指数GI进行相关性分析。结果:120例患者的临床标本中扩增出Fn 81株,检出率67.50%,A、B、C组检出率分别为69.09%、46.67%和82.86%(χ2=9.756,P<0.01);以FadA引物直接扩增其FadA基因片段,扩增出67例,阳性率55.83%,A、B、C组检出率分别为58.18%、33.33%和71.43%(χ2=63.53,P<0.005);经Spearman等级相关分析得出:正畸治疗组中Fn及FadA的检出率与GI之间存在明显的正相关关系(P<0.05)。结论:Fn与正畸治疗中牙龈炎性反应的发生发展密切相关;毒力因子FadA粘附素的检出率较高,在Fn致病机制中可能起重要作用。