二种核糖体型的多环马格里夫藻(Margalefidinium polykrikoides)的形态和超微结构比较及分子系统学分析

多环马格里夫藻是一种世界性广泛分布的有毒有害藻华原因种。过去30多年里多环马格里夫藻藻华在许多国家频繁暴发且呈快速扩散趋势。过去的研究根据不同地理来源种群在核糖体大亚基基因序列的显著差别,将其分成4种不同核糖体型(ribotype),即东亚型、菲律宾型、美国/马来西亚型和地中海型。但是,不同核糖体型的种群在形态和超微结构上是否也存在可辨识差异尚未见深入研究。为此,本文对从中国青岛胶州湾、美国东海岸和马来西亚近海分离的三株多环马格里夫藻(中国株MPJZBC3、美国株CP1和马来西亚株MPCoKK23)的细胞表面形态和超微结构进行了比较研究,并进一步基于核糖体大亚基序列进行了分子系统学分析。结果首先证明了分离自胶州湾的多环马格里夫藻属于东亚核糖体型,而美国株和马来西亚株均属美国/马来西亚型(中国株与美国株及马来西亚株在1523个碱基的核糖体大亚基序列上相似性为93.6%)。但是,在所有常用的具有分类学意义的细胞形态学和超微结构特征上[细胞大小、单细胞或群体及群体细胞数、上下锥形状、横沟位移度(绕细胞圈数)、纵沟形态、顶沟形态、细胞核位置与形状、染色体形状与数目、叶绿体的形状、结构、数目及分布、淀粉核形态等],中国株与美国株和马来西亚株(也即东亚核糖体型和美国/马来西亚核糖体型)都没有明显可区分的差别。因此,我们认为应该在生活史、休眠孢囊形态和生理学特征(如毒素种类及毒性强弱)以及性别相容性(sexual compatibility)等方面开展进一步比较研究,以获得对不同核糖体型种群的识别性状。在现阶段有害藻华的野外监测中,尤其是对于不同核糖体型种群可能造成的生物入侵的监测和追溯,多环马格里夫藻的鉴定尚必须以核糖体基因序列作为可靠的判决依据。

中国鼠疫菌核糖体型地理分布

目的 了解鼠疫菌核糖体型在中国的地理分布情况。方法 用限制性内切酶对鼠疫菌染色体进行消化 ,电泳后 ,用 16s 2 3s 5srRNA基因探针进行Southern杂交。结果 把分离自中国不同地区的鼠疫菌共分成了三个核糖体型 ,每种类型的杂交图谱大概一致 ,区别仅在于 1～ 2个酶切片段的有无。核糖体A型及B型较常见 ,分布于中国较大范围的地理区域内 ,C型最少 ,只见于某一特殊地区 ;核糖体型与中国鼠疫自然疫源地之间有一定的对应关系 ,一种疫源地对应一种核糖体型常见。结论 核糖体型在中国鼠疫自然疫源地内比较稳定 ,不同核糖体型在中国的分布具有明显的地域性 ;A、B、C三种核糖体型具有不同的来源 。

PCR-核糖体分型技术基因分型艰难梭菌

目的调查区域性的艰难梭菌基因型分布和毒素A、B的携带情况。方法 68株艰难梭菌临床菌株收集自悉尼大学韦斯特米德医院,利用PCR-核糖体分型技术进行基因分型,利用PCR方法检测毒素A、B编码基因tcdA、tcdB。结果 68株菌可分为31种核糖体型(RT),最常见的为RT014(19.1%)和RT002(11.8%);94.1%(64株)的菌株tcdA、tcdB均为阳性。结论悉尼地区主要流行的艰难梭菌基因型为RT014和RT002,绝大部分临床菌株均携带毒素A、B。

进出口食品及饲料中沙门氏菌Ribotype分型研究

[目的]采用16S核糖体分型技术,对本实验室近年间从食品及饲料中分离的沙门氏菌进行16SrDNA分型分析。[方法]经Riboprinter全自动细菌指纹图谱分析仪进行限制性内切酶多态性分析,以大肠杆菌rrnB操纵子为探针杂交得到的核糖体谱型为基础,导入Bionumerics软件作聚类处理,构建进化树,获得的图谱与Vitek仪器给出的沙门氏菌生化谱并结合地域分布进行比较。[结果]样品中分离获得的29个菌株分别进行了血清型、核糖体型分析,血清型分类数量少于核糖体型,部分属于A-F血清型,比较核糖体型与血清型间的相关性可知,两者缺乏直接的关联。[结论]地域分布与核糖体谱型相关性较强,同一地区的分离株基本处于亲缘关系树的同一树状分支上,而生化谱型与地域分布和核糖体谱型相关性均较差,没有明显的倾向性。在构建的进化树上,按照不同相似度为界限值,对沙门氏菌的分类范围和数量影响较大,相似度界限值越大,分类数量越多。如果以93%为界限值,可将获得的沙门氏菌株分为10个簇,表现出较大的分类学异质性。

Spatio-temporal Expression Study of Phosphorylated 70-kDa Ribosomal S6 Kinase (p70S6k) in Mesial Temporal Lobe Epilepsy

Objective To determine the spatio-temporal expression of p70S6k activation in hippocampus in mesial temporal lobe epilepsy. Methods Temporal lobe epilepsy model was established by stereotaxically unilateral and intrahip-pocampal injection of kainite acid (KA) in adult male C57BL/6 mice. Latent and chronic epileptogenesis were represented by mice 5 days after KA injection (n=5) and mice 5 weeks after KA injection (n=8), respectively. Control mice (n=5) were injected with saline. Immunohistochemical assays were performed on brain sections of the mice. Results Hippocampus both ipsilateral and contralateral to the KA injection displayed significantly up-regulated pS6 immunoreactivity in dispersed granule cells in 5-day and 5-week model mice. Conclusion The activation of p70S6k is mainly located in the dentate gyrus in KA-induced mouse model of temporal lobe epilepsy, indicating that the activation may be related with the disperse degree and hypertrophy of granule cells.