核糖体蛋白激酶磷酸化程度与人乳头瘤病毒16感染情况的相关性分析

目的:检测人乳头瘤病毒16型(HPV16)感染的宫颈鳞癌组织中核糖体蛋白激酶S6K和S6的磷酸化水平,探讨HPV16感染在宫颈癌发生发展中的作用。方法:利用PCR方法将收集到的135例人子宫颈鳞癌样本分为HPV16感染阳性组和阴性组,用免疫组织化学方法检测磷酸化S6K(p-S6K)和磷酸化S6(p-S6)蛋白在病例样本中的表达水平。结果:HPV16感染的宫颈癌组织内,核糖体蛋白S6K和S6的磷酸化比率分别为46.5%和68.7%,分别高于未感染的宫颈癌组织(8.33%和30.6%),差异具有统计学意义(P均<0.05)。两种蛋白相关性分析,p-S6K与p-S6蛋白在HPV16型病毒感染的宫颈癌组织中表达呈正相关性(r=0.095,P=0.019)。结论:HPV16病毒的感染与核糖体蛋白激酶S6K和S6的磷酸化(活化)具有强相关性,后两者的活化能促进细胞的生长增殖,在肿瘤的发生发展中起重要作用。

核糖体S6蛋白激酶4基因在多种肿瘤中的表达及其生物信息学分析

目的探讨在不同肿瘤细胞中核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)的表达谱是否存在差异,以及预测可能存在的蛋白亚型及其生物学特性。方法提取神经胶质瘤细胞GL261、卵巢癌细胞ID8、乳腺癌细胞4T1和168FARN、结肠癌细胞mc38和CT26、胃癌细胞MFC和肺癌细胞LLC1的RNA,采用RT-PCR技术检测RSK4的表达及其剪接异构体,生物信息学分析RSK4的生物学特征及其功能。结果RT-PCR结果显示在GL261、4T1、mc38、CT26、MFC和LLC1中均表达RSK4,且不同的肿瘤细胞中表达了多个剪接异构体,开放阅读框分析RSK4可能至少编码11个蛋白亚型;二级结构分析显示,这些剪接异构体编码的蛋白亚型均由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,且保守结构域均相同;蛋白互作网络富集分析显示,RSK4主要通过mTOR信号通路和突触持续增强等信号通路在核质和胞浆中发挥激酶的活性。结论RSK4在不同的肿瘤细胞中存在不同的表达谱,可能产生多种氮端不同的蛋白异构体,能够通过多种信号通路参与不同的生物学途径。

核糖体S6蛋白激酶在大鼠肝纤维化组织中的表达

目的 :探讨有丝分裂原活化的蛋白激酶级联信号通路的关键效应分子——核糖体 S6蛋白激酶 (ribosom al S6 ki-nase,RSK)与肝纤维化发生的关系。 方法 :采用皮下注射二甲基亚硝胺 (dimethylnitrosamine,DMN)的方法制备大鼠肝纤维化模型 ,根据注射时间的不同 ,获取组织标本 ,行 H- E和 VG染色。明确纤维化分期后 ,进一步利用 Northern印迹及免疫组化方法 ,观察 RSK在肝纤维化进程中的表达变化情况。 结果 :RSK在正常大鼠肝脏中 ,仅在中央静脉周围的肝血窦有少量表达 ,而随着纤维化的进展 ,其表达量进行性增加 ;在纤维化肝脏 ,RSK主要分布于汇管区间质中 ,肝细胞未见染色。结论 :RSK在肝纤维化进程中持续上调 。

核糖体S6蛋白激酶p90^(rsk)与卵母细胞减数分裂

丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径对减数分裂有重要调节作用 ,p90 rsk是迄今研究最清楚的MAPK下游靶分子 ,介导MAPK途径在卵母细胞减数分裂中的多种功能 ,包括卵母细胞减数分裂的启动、MⅠ /MⅡ期转化和MⅡ期阻滞的维持等 .p90 rsk的磷酸化是MAPK激活的结果 ,而细胞退出减数分裂时 ,p90 rsk的去磷酸化也发生在MAPK失活以后 .介绍了在卵母细胞中 p90 rsk的研究进展 .

核糖体S6蛋白激酶4和热休克蛋白90在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)和热休克蛋白90(HSP90)在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理及预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测72例手术切除的乳腺癌组织和72例癌旁组织的RSK4和HSP90蛋白的表达情况,分析不同临床病理特征患者RSK4和HSP90蛋白的表达情况,比较不同RSK4和HSP90表达水平患者的生存期。结果 RSK4蛋白在乳腺癌癌旁组织中的阳性表达率高于癌组织(P<0.05),HSP90蛋白在乳腺癌癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),在乳腺癌组织中RSK4与HSP90蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。不同分化程度、TNM分期患者的乳腺癌组织RSK4蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05),不同肿瘤大小、有无淋巴结转移、不同组织学分化、不同TNM分期患者乳腺癌组织的HSP90蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。RSK4蛋白阳性表达患者的中位生存期为71个月,多于RSK4蛋白阴性表达患者的54个月(P<0.05),HSP90蛋白阳性表达患者的中位生存期为41个月,少于HSP90蛋白阴性表达患者的82个月(P<0.05)。结论乳腺癌组织中RSK4的表达降低,HSP90的表达升高,RSK4和HSP90在乳腺癌中可能通过某些通道存在相互影响的关系。

矫治力对兔牙周组织中雷帕霉素靶蛋白和核糖体S6蛋白激酶活性的影响

目的探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/S6蛋白激酶(p70S6K)信号通路在兔正畸牙移动过程中对牙周组织改建的作用。方法选用12只日本大耳白兔(体质量2.0kg左右),雌雄不限,建立正畸牙移动的动物模型,按照3,5,7,14d随机分组,每组3只,上颌右侧戴矫治器组为实验组,左侧未戴矫治器组为对照组,采用Western免疫印迹的方法,观察牙周组织中mTOR及p70S6K蛋白表达的变化。结果戴矫治器3d后牙周组织中mTOR和p70S6K表达增强,7d达高峰,14d后有所下降,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。结论在矫治力作用下,兔牙周组织中mTOR及p70S6K表达均明显增强,导致牙周组织发生一系列变化。

病理性瘢痕中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体40S小亚基S6蛋白激酶的表达

背景:近年研究表明哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(mammalian target of rapamycin/P70S6K,mTOR/P70S6K)信号通路在某些肿瘤形成过程中具有一定作用。病理性瘢痕特别是瘢痕疙瘩具有某些肿瘤的性质,因此该信号通路在病理性瘢痕形成中可能具有重要作用。目的:观察mTOR/P70S6K信号通路在病理性瘢痕中的的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测磷酸化mTOR/P70S6K(p-mTOR和p-P70S6K)在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、非病理性瘢痕及正常皮肤组织中的表达水平。实验所取瘢痕组织来自临床上诊断明确的瘢痕患者。结果:瘢痕疙瘩和增生性瘢痕组织中p-mTOR和p-P70S6K阳性表达率高于非病理性瘢痕及正常皮肤组(P<0.05)。p-mTOR和p-P70S6K表达呈正相关(r=0.482,P<0.05)。结果提示mTOR/P70S6K信号通路的激活参与了病理性瘢痕的形成过程,且mTOR和P70S6K之间具有协同作用。

p90核糖体S6蛋白激酶家族与恶性肿瘤

p90核糖体S6蛋白激酶(ribosomal S6 kinase,RSK)为Ras信号转导通路下游途径的重要调控因子,对Ras通路起调控作用。近年发现RSK家族与恶性肿瘤发生、发展密切相关。本文就RSK家族与恶性肿瘤的关系作简要综述。

核糖体S6K蛋白激酶

核糖体核糖体S6Ks蛋白激酶是cAMP—cGMP依赖性激酶和PKC激酶超家族成员之一，在控制细胞大小、生长和繁殖中发挥着重要作用，通过协同作用方式达到组织器官的正常发展。核糖体核糖体S6Ks蛋白激酶的活化是一个复杂的过程。国外学者相关性的研究认为S6K蛋白激酶具有致癌潜能。研究S6Ks如何控制蛋白翻译和细胞生长等具体功能机制，将为攻克肿瘤疾病提供更为有效的药物治疗依据。

地黄饮子对转基因果蝇AD模型mTOR信号通路中4E结合蛋白和p70核糖体S6蛋白激酶表达的影响

目的:研究地黄饮子对转tau基因果蝇m TOR信号通路中4E结合蛋白(4E-BP)和p70核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)表达的影响,探讨其防治AD的疗效和作用机制。方法:将果蝇分为3组,即空白组、地黄组、模型组,空白组为正常CS果蝇喂普通培养基,地黄组为转tau基因果蝇喂2%浓度地黄饮子培养基,模型组为转tau基因果蝇喂普通培养基,均喂养5d。采用荧光定量PCR技术检测果蝇4E-BP和p70S6K的m RNA表达,Western blot方法检测4E-BP和p70S6K蛋白的表达。结果:地黄饮子能够降低4E-BP和p70S6K的m RNA和蛋白的表达,且与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:地黄饮子通过调控m TOR信号通路中4E-BP和p70S6K的m RNA和蛋白的表达,调节了细胞周期,抑制了细胞的凋亡,提高转tau基因果蝇AD模型学习记忆能力。

核糖体S6蛋白激酶4在乳腺癌中的异常表达及临床意义

目的研究核糖体s6蛋白激酶4（RSK-4）在乳腺癌中的表达及意义，探讨RSK-4在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及免疫组织化学染色法，检测RSK-4mRNA和蛋白在56例乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和20例乳腺良性病变组织中的表达。结果RSK-4mRNA在乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别为48．2％、76．8％和75．0％，RSK-4mRNA在乳腺癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织（P〈0．05）。RSK-4mRNA在乳腺癌组织中的表达与肿瘤大小和临床分期有关，肿瘤越大、临床分期越晚，RSK-4mRNA的表达率越低（P〈0．05）。RSK-4蛋白在乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别为39．3％、71．4％和75．0％，RSK-4蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织（P〈0．05）。RSK-4蛋白在乳腺癌组织中的表达与肿瘤大小、临床分期以及有无淋巴结转移有关，肿瘤越大、临床分期越晚以及伴淋巴结转移者RSK-4蛋白的表达率低（P〈0．05）。56例乳腺癌组织中，RSK-4mRNA和蛋白的表达一致率为73．2％，二者的表达显著相关（χ^2=10．254，P〈0．05）。结论RSK-4可能足乳腺癌的抑癌基因，其表达降低或缺失可能引起乳腺癌的发生和发展。

雷帕霉素靶蛋白及其下游分子4E结合蛋白1和核糖体S6蛋白激酶表达在浸润性乳腺癌中的关系

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路中mTOR及其下游分子4E结合蛋白1（4EBP1）及核糖体S6蛋白激酶1（S6KI）在乳腺癌组织中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测116例浸润性乳腺癌及其癌旁组织中磷酸化的roTOR与4EBP1及S6K1的表达，分析i者表达的相关性，及其与患者年龄、肿瘤大小、腋淋巴结转移状况、组织学分级、临床分期以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、原癌基因表皮生长因子受体2（Her-2）等临床病理参数之间的关系。结果（1）p-roTOR、p-4EBPl和p-S6K1在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为68．1％、65．5％、59．5％，显著高于其在癌旁组织中的表达，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）p-mTOR与p-4EBP1及P—S6K1的表达明显相关（r=0．458，P〈0．05；r=0．383，P〈0．05）。（3）在腋淋巴结转移患者中p-mTOR、p-4EBP1、p-S6KI的阳性表达明显高于无淋巴结转移组，差异有统计学意义（P〈0．05），而三者的表达与其他各临床病理参数无明显相关。结论mTOR信号通路中mTOR及其下游分子4EBPI及S6K1的激活与乳腺癌的发生相关，并对促进腋窝淋巴结转移有一定作用。同时作为信号通路中的上游分子，roTOR对其下游的4EBP1及S6K1具有调控作用。

浸润性乳腺癌磷酸化核糖体S6蛋白激酶1的定位表达与临床病理特征和预后的关系

目的探讨磷酸化核糖体S6蛋白激酶1（p-S6K1）在浸润性乳腺癌中的定位表达与临床病理特征和预后的关系。方法对185例浸润性乳腺癌中不同亚细胞部位p-S6K1的表达及其与临床病理特征和预后的关系进行分析。结果细胞质p-S6K1在癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为48．1％和20．0％，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞质P-S6K1的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05），细胞核p-S6K1的表达与临床分期有关（P〈0．05）。细胞质p-S6K1阳性表达者其无疾病生存率小于细胞质p-S6K1阴性者，差异有统计学意义（P〈0．05）。临床分期、淋巴结转移和细胞质p-S6K1的表达是浸润性乳腺癌的独立预后因素（P〈0．05）。结论不同亚细胞部位p-S6K1的表达可用来标志浸润性乳腺癌不同的病理生物学特征。细胞质p-S6K1的表达是浸润性乳腺癌的一个独立的预后因素。

二甲双胍通过抑制核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6)调节体外人颗粒细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达

目的:探讨二甲双胍对核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(P70S6k)及胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白及其ser307位点磷酸化表达的影响。方法:利用0.1 mmol/L二甲双胍体外连续作用多囊卵巢综合症(PCOS)患者黄素化颗粒细胞24 h为实验组,设未加二甲双胍培养的颗粒细胞为对照组。通过RT-PCR和Real-time PCR检测P70S6k和IRS-1的表达,细胞免疫荧光化学和Western blotting的方法检测P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白的表达。结果:Real-time PCR结果显示实验组P70S6k和IRS-1m RNA水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光化学检测IRS-1和p-ser307-IRS-1蛋白在颗粒细胞胞质表达,P70S6k和p-thr389-P70S6k蛋白在细胞核表达。Western blotting法结果显示二甲双胍作用24 h前、后卵巢颗粒细胞P70S6k、p-thr389-P70S6k、IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达有统计学差异(P<0.05),灰度值分析显示添加二甲双胍组P70S6k、p-thr389-P70S6k蛋白表达显著升高,IRS-1及p-ser307-IRS-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:二甲双胍可抑制人颗粒细胞P70S6k的表达,并通过Akt/P70S6k/IRS途径调节IRS-1的表达,从而增加颗粒细胞胰岛素的敏感性。

核糖体S6蛋白激酶4对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学特性的影响

目的 观察核糖体S6蛋白激酶4基因（RSK4）过表达对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响.方法 将细胞分为空白组、实验组和阴性对照组,采用病毒转染法,利用细胞集落实验、细胞计数试剂盒（CCK-8）法、细胞划痕实验、Transwell小室实验和细胞黏附实验探讨RSK4对MDA-MB-231细胞生物学特性的影响.结果 7d后3组细胞集落形成率分别为（21.280±0.114）％、（9.150±0.120）％、（19.080±0.108）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.CCK-8实验显示,实验组24、48、72和96h的吸光度（A值）分别为0.1790±0.0044、0.2090±0.0218、0.2230±0.0117、0.2680±0.0274.细胞划痕实验显示：实验组0、12、24、48 h细胞迁移距离分别是0、（0.9200±0.0735）、（1.4600±0.0510）、（2.0000±0.0316） mm.Transwell小室显示,实验组48 h细胞迁移实验中滤过膜细胞数为（273.000±2.2930）个；细胞侵袭实验中滤过膜细胞数为（89.000±1.208）个,以上均显示：实验组比空白对照组和阴性对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.而细胞黏附实验结果显示：实验组3h和6h的细胞黏附百分率分别为（0.0700±0.0037）％、（0.1920±0.0133）％,比空白对照组和阴性对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 RSK4过表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性.

核糖体S6蛋白激酶4在恶性肿瘤中研究进展

恶性肿瘤的形成是由于细胞分裂、增殖失去控制,其发生、发展是一个多步骤的持续过程,其中蛋白激酶在恶性肿瘤进展中的作用极其关键。核糖体S6蛋白激酶(ribosomal s6 kinase,RSK)是一组丝/苏氨酸激酶,RSK家族共分为4个亚型。与其他3个亚型相比,RSK4的分布具有选择性且相对低表达[1]。

胃癌组织TRAF4和RSK4蛋白表达与腹腔镜根治术后复发的关系

目的探讨胃癌组织TRAF4、RSK4蛋白表达与腹腔镜胃癌根治术后复发的关系。方法将176例患者分为复发组和未复发组,对比癌组织与癌旁组织、复发组与未复发组胃癌组织中TRAF4和RSK4蛋白表达。分析复发的影响因素及二者预测复发的效能。结果胃癌组织中TRAF4蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),且复发组高于未复发组(P<0.05);胃癌组织RSK4蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05),且复发组低于未复发组(P<0.05);最大肿瘤直径>5 cm、低分化、TNMⅢ期、浸润深度T3~T4、淋巴结转移、术后未辅助化疗、TRAF4和RSK4蛋白阳性表达、规律饮食均是术后复发的影响因素(均P<0.05);胃癌组织TRAF4、RSK4蛋白联合预测复发的准确度为83.52%。结论胃癌组织TRAF4蛋白高表达、RSK4蛋白低表达,且均与复发有关。

腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性研究

目的 测定肿瘤坏死因子受体相关因子4 (TRAF4)、肿瘤转移抑制基因nm23(nm23)、核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)在胃癌患者病灶组织中的蛋白表达,探究分析腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性。方法 选取来自本三甲医院于2023年1月至2024年1月收治的胃癌患者的电子病历系统临床资料,共160例。比较胃癌组织与癌旁组织TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达。随访术后患者36个月,根据术后是否复发胃癌分为复发组和未复发组,比较两组患者一般资料,运用Cox回归模型进行多因素回归分析。结果 相较于癌旁组织,胃癌组织nm23、RSK4蛋白阳性表达率更低,TRAF4蛋白阳性表达率更高(P<0.05)。腹腔镜胃癌根治术后复发率为31.25%。两组组织分化、肿瘤直径、浸润程度、术后化疗、TNM分期、淋巴结转移、TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达对比差异均有统计学意义(P<0.05)。TRAF4蛋白表达、淋巴结转移、RSK4蛋白表达、nm23蛋白表达、组织分化程度均是其影响因素(P<0.05)。结论 腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4蛋白高表达、RSK4蛋白低表达、nm23蛋白低表达有关,可成为早期评估腹腔镜胃癌根治术后复发的潜在标志物。

吴茱萸碱对宫颈癌小鼠移植瘤的抑制机制

目的 探究吴茱萸碱(evodiamine,Evo)对宫颈癌小鼠移植瘤的抑制作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase, p70S6K)通路的影响。方法 取40只BALB/c裸鼠,随机选取10只设为健康组,剩余30只裸鼠成功建立宫颈癌移植瘤模型,随机分为荷瘤组、Evo组和Evo联合溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)组,各10只。Evo联合LPA组裸鼠灌胃Evo(18 mg·kg^(-1)),尾静脉注射LPA(0.8μmol·kg^(-1));Evo组裸鼠灌胃Evo(18 mg·kg^(-1)),尾静脉注射等体积生理盐水;健康组、荷瘤组裸鼠灌胃等体积二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO),尾静脉注射等体积生理盐水。每日1次,连续30 d。测定肿瘤体积;流式细胞仪检测外周血CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞占比;Tunel染色检测移植瘤细胞凋亡率;免疫印记法(Western blotting)检测移植瘤组织mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白的表达水平。结果 与荷瘤组比较,Evo组干预后第10、20、30天肿瘤体积均减小,CD4^(+)T淋巴细胞占比、CD4^(+)/CD8^(+)值升高,CD8^(+)T淋巴细胞占比、p-mTOR/mTOR值和p-p70S6K/p70S6K值降低(P<0.05);与Evo组比较,Evo联合LPA组干预后第10、20、30天肿瘤体积均增大,CD4^(+)T淋巴细胞占比、CD4^(+)/CD8^(+)值降低,CD8^(+)T淋巴细胞占比、p-mTOR/mTOR值和p-p70S6K/p70S6K值升高(P<0.05)。结论 Evo可抑制宫颈癌移植瘤生长、促进宫颈癌细胞凋亡、增强机体免疫功能,其作用机制可能与抑制mTOR/p70S6K信号通路有关。

慢病毒介导的RSK4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的:观察转染核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)慢病毒表达载体对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力的影响。方法:构建特异性的RSK4慢病毒表达载体LV-RPS6KA6,稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中,使用荧光定量PCR和蛋白印迹检测RSK4mRNA和蛋白的表达情况。用Cell Counting Kit-8实验检测转染后细胞的生长增殖情况。结果:稳定转染LV-RPS6KA6至乳腺癌MDA-MB-231细胞后,RSK4mRNA和蛋白的表达均明显上调(均P=0.000)。过表达RSK4的MDA-MB-231细胞生长被明显抑制,转染24,48,72,96h后,其生长抑制率分别为(10.5±1.8)%、(17.7±2.5)%、(27.1±3.7)%和(13.8±2.1)%。结论:稳定转染RSK4慢病毒表达载体可明显上调RSK4mRNA和蛋白表达,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖。