核糖体蛋白S27a在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

核糖体蛋白（ribosomal protein,RP）除组成核糖体、参与蛋白质生物合成之外,还具有参与复制、转录加工、修复、自体翻译、细胞凋亡调控以及正常细胞的恶性转化及发育调控等功能,与肿瘤的密切关系更是引人注目。有研究报道表明,一些RP参于肿瘤细胞增殖的调控,并与其恶性转化和进展有关。作为一种多功能的RP,RPS27a在多种活性增殖细胞和肿瘤组织中表达量显著增加,在细胞快速生长时过度表达。

核糖体S6激酶对肝星状细胞内胶原表达的调控

目的:探讨核糖体S6激酶(p90RSK)调节肝星状细胞(HSC)Ⅰ型胶原表达的作用.方法:将设计的p90RSK特异性siRNA克隆至真核表达载体pAV-U6+27中,构建p90RSK的RNA干扰真核表达载体pAV-RSKi.将构建的pAV-RSKi通过脂质体瞬时转染HSC-T6,分别采用实时定量聚合酶链式反应和Western Blot方法检测细胞的p90RSK和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达.将p90RSK的真核表达质粒(pMT2-RSK1)和pAV-RSKi分别与Ⅰ型胶原启动子荧光素酶报告基因质粒(pGL3-COL1A1)共转染原代HSC,48h后检测细胞的荧光素酶活性.结果:构建的pAV-RSKi能够有效抑制HSC-T6中p90RSK mRNA和蛋白表达,与对照组相比较分别减少了(70.20±4.04)%和(89.10±5.26)%(P<0.01).HSC-T6中Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白的表达,与对照组相比较分别减少(61.80±3.96)%和(98.50±7.01)%(P<0.01).各组转染pMT2-RSK1,pAV-RSKi和空载质粒的HSC中,Ⅰ型胶原启动子活性之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论:p90RSK参与了HSC中胶原的表达调控,可能成为肝纤维治疗的新靶点.

1,25-二羟维生素D3对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖与S期激酶相关蛋白及抑癌基因p27表达的影响

目的 观察1,25-二羟维生素D3对人子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖及S期激酶相关蛋白（Skp2）基因、抑癌基因p27表达的影响,探讨其抗癌机制.方法 应用免疫组织化学方法检测人子宫内膜癌HEC-1-A细胞表达维生素D受体（VDR） 选用人子宫内膜癌HEC-1-A细胞进行体外培养,用CCK-8法测定不同浓度1,25-二羟维生素D3作用细胞后不同时间后细胞生长抑制率,流式细胞仪进行细胞周期分析,采用荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）及蛋白质印迹法检测Skp2/p27基因表达的变化.结果 人子宫内膜癌HEC-1-A细胞表达VDR,且定位于细胞核内 1×（10-8～10-6）mol/L浓度的1,25-二羟维生素D3作用于HEC-1-A细胞1～5 d范围内各不同浓度处理组细胞生长增殖均受到明显抑制,并且随着作用浓度增加,细胞增殖能力逐渐下降 1,25-二羟维生素D3能增加G0/G1期细胞比例,降低S、G2/M期细胞比例,从而降低细胞增殖指数（P＜0.01） 在mRNA、蛋白质水平上,能降低Skp2表达,而p27mRNA减少,p27蛋白表达明显增加.结论 1,25-二羟维生素D3对人子宫内膜癌HEC-1-A细胞有抑制作用,可能是通过转录水平下调Skp2基因表达,同时由于Skp2的减少增加p27蛋白稳定性,减少其降解,从而产生抑癌作用.

喉鳞状细胞癌中Skp2和p27蛋白的表达

目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P<0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P<0.01)。p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P<0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P<0.01)。将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001)。结论Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用。

Skp2和p27kip1在乳腺癌组织中的表达及其相关性的研究

目的:检测乳腺癌组织中Skp2和p27kip1 mRNA的表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用及其相关性。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测40例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织和20例正常乳腺组织中Skp2 mRNA和p27kip1 mRNA的表达,并分析其在乳腺癌组织中的表达水平与临床病理因素的关系。结果:乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显增高(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中差异无统计学意义(P>0.05);而p27kip1 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显降低(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈正相关;p27kip1 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈负相关。2种基因表达均与患者年龄、绝经状况、肿瘤大小及病理学分期无关(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA与p27kip1 mRNA表达呈负相关。结论:乳腺癌组织Skp2和p27kip1参与了乳腺癌的发生、发展过程,两指标的联合检测可能有助于预测乳腺癌预后。

Skp2与p27^(kip1)在人子宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系

目的 S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)与p27kip1在人子宫颈鳞癌中的表达及其与人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染的关系。方法选取子宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of cervix,SCC)组织50例、子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasias,CINs)组织40例,并选取慢性子宫颈炎(chronic cervicitis,CC)组织15例为对照组。用免疫组织化学法检测p27kip1和Skp2的表达情况,并与临床病理特征进行比较;用原位杂交法检测HPV 16/18的表达,及其与Skp2和p27kip1表达的相关性。结果 50例SCC组织中Skp2蛋白表达阳性率为76.0%,高于CC(13.3%,P<0.01)及CINs(57.5%,P<0.05)组织;p27kip1蛋白在SCC组织中表达阳性率为24.0%,低于CC(92.6%,P<0.01)及CINs(52.5%,P<0.05)组。Skp2和p27kip1的表达在淋巴结转移方面差异有统计学意义(P<0.05),而在年龄、分化程度、临床分期方面差异均无统计学意义(均P>0.05)。子宫颈鳞癌组织中HPV 16/18 DNA表达阳性率为74.0%,高于CC组的13.3%,组间差异有统计学意义(P<0.01);但与CINs组表达阳性率(62.5%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。HPV 16/18感染与Skp2蛋白表达之间呈正相关(r=0.238,P<0.05),HPV 16/18感染与p27kip1蛋白表达之间呈负相关(r=-0.245,P<0.05)。结论 Skp2的高表达和p27kip1蛋白低表达与子宫颈鳞癌的发生、转移以及与HPV感染有密切关系。

PPAR-γ和p27^(kip1)、Skp2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)-γ、p27kip1和细胞S期激酶相关蛋白(Skp)2蛋白在肝癌发生发展过程中的作用。方法:肝细胞癌组织标本57例(肝癌组)和正常肝组织标本(对照组)20例。采用免疫组织化学方法检测2组PPAR-γ、p27kip1及Skp2蛋白的表达,分析它们之间及其与肝癌临床病理特征的关系。结果:肝癌组PPAR-γ及Skp2蛋白的阳性表达率高于对照组,p27kip1蛋白阳性表达率低于对照组(P<0.05),PPAR-γ蛋白与Skp2、P27kip1蛋白在不同TNM分期中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。PPAR-γ蛋白与Skp2、p27kip1蛋白表达无相关性(P>0.05);Skp2与p27kip1蛋白的表达呈负相关(r=-0.307,P=0.020)。Skp2蛋白低表达组的1、3、5年生存率高于高表达组(P<0.001)。结论:PPAR-γ和Skp2蛋白表达与肝细胞癌的恶性生物学行为密切相关,Skp2可作为判断肝细胞癌预后的指标。

mTOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨m TOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达水平及其相关临床诊断、治疗意义。方法收集2012年1月—2014年1月手术切除或进行活检的正常宫颈组织65例,宫颈癌组织、癌旁组织各85例,提取组织中的mRNA,应用RT-PCR的方法来检测3种组织中m TOR和P70S6K mRNA的表达水平,并进行分析。结果宫颈癌组织中m TOR、P70S6K mRNA的表达明显高于癌旁组织及正常组织(P<0.05),m TOR、P70S6K mRNA水平在宫颈癌组织、癌旁组织及正常组织中均呈正相关(P<0.05)。结论 m TOR信号通路在宫颈癌组织中处于活化状态,其在宫颈癌的发生发展以及向其他部位转移中具有重要作用,是一个诊断和治疗的分子靶点。

核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响

目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及机制.方法 采用随机数字表法将24只9周龄健康雄性db/db小鼠（体质量44.5～48.2 g）随机分至对照组（n1=12）和实验组（n=12）,实验组小鼠尾静脉注射核糖体蛋白S6激酶1短发夹RNA重组基因腺病毒,对照组尾静脉注射含U6启动子空载体腺病毒.注射病毒后第6天,对照组和实验组采用随机数字表进一步分为进食组（n=6）及空腹组（n=6）.在进食和空腹状态处死小鼠,提取肝脏,应用Western blot法观测胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达水平.提取肝脏总RNA,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测糖异生基因mRNA表达水平.经尾静脉取血,采用酶联免疫吸附法测定胰岛素水平,采用比色法检测游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇水平.组间比较采用单因素方差分析.结果 与对照组相比,进食及空腹状态时,实验组胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2蛋白表达均增加.在空腹状态下,实验组与对照组相比,糖异生基因过氧化酶体增殖物受体共激活因子1α（分别为0.072±0.024和0.028±0.012）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（分别为23.8±4.0和12.3±2.4）、葡萄糖6磷酸酶（分别为3.0±0.8和1.5±0.4）mRNA表达均下降（F值分别为7.58、5.76、9.15,均P＜0.01）.对照组和实验组胰岛素水平无显著差异（t=1.26,P＞0.05）.空腹及进食状态下,实验组胆固醇水平低于对照组（F=15.48,P＜0.01）.与空腹对照组相比,空腹实验组游离脂肪酸降低（t=2.56,P＜0.05）.结论 db/db小鼠肝脏核糖体蛋白S6激酶1基因沉默后,空腹糖异生和血清游离脂肪酸水平下降,胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达增加,提示营养过剩条件下核糖体蛋白S6激酶1可能在肝脏胰岛素抵抗中发挥重要作用.

RSK4在甲状腺乳头状癌组织中的表达及与临床病理因素的关系

目的探讨核糖体蛋白激酶A6(RSK4)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其与临床病理因素的关系。方法 收集200例PTC(A组)和对应的癌旁组织(B组),40例甲状腺良性结节(C组)及其结节旁组织(D组)新鲜标本,提取相应RNA,并逆转录成cDNA,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RSK4的表达量,并分析其与PTC患者临床病理因素的关系。结果 A组中RSK4表达量显著低于B组( Z =-9.658, P <0.01)和C组( Z =-5.648, P <0.01),但C组RSK4表达量与D组比较差异无显著性( P >0.05)。肿瘤直径>1 cm的PTC组织中RSK4表达量显著低于≤1 cm组( Z =-3.528, P <0.01),有包膜侵犯的PTC组织中RSK4表达量显著低于无包膜侵犯组( Z =-2.822, P <0.01)。结论 RSK4在PTC组织中低表达,且与肿瘤大小、包膜侵犯相关,可能成为PTC诊断和预后评估的潜在生物标志物。

蟾蜍令灵对裸鼠食管鳞癌原位移植瘤中P70S6K表达的影响

背景食管癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤之一,近年研究发现,核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)与其发生密切相关。笔者前期的研究表明,蟾蜍令灵(Bufalin)有明显的抗肿瘤作用。目的探讨Bufalin对裸鼠食管鳞癌原位移植瘤中P70S6K表达的影响。方法 Nu/Nu健康裸鼠36只,雌雄各半,采用随机数字表法分为4组,每组9只,即对照组(0.9%氯化钠溶液)、Bufalin低剂量(0.5 mg/kg,BL)组、Bufalin中剂量(1.0 mg/kg,BM)组、Bufalin高剂量(1.5 mg/kg,BH)组。观察经Bufalin治疗后裸鼠肿瘤生长情况;反转录PCR(RT-PCR)法检测裸鼠原位移植瘤中P70S6K mRNA的表达,Western blotting及免疫组化法检测裸鼠原位移植瘤中P70S6K和p-P70S6K相对表达量。结果 4组治疗前及治疗后第1天裸鼠体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4组治疗前肿瘤体积比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后第15天肿瘤体积比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后第15天,BM组、BH组肿瘤体积均低于BL组和对照组(P<0.05)。3组肿瘤抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4组P70S6K mRNA及P70S6K相对表达量比较,差异无统计学意义(F=0.634、0.119,P>0.05)。4组p-P70S6K相对表达量比较,差异有统计学意义(F=233.005,P<0.05)。结论 Bufalin对裸鼠食管鳞癌原位移植瘤具有抑制作用;Bufalin可以下调P70S6K的磷酸化水平,而P70S6K则不受影响,提示Bufalin可能通过抑制P70S6K活化而发挥作用。

1,25(OH)_2D_3对人肾小球系膜细胞增殖及mTOR/p70s6K表达的影响

目的：探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对mTOR/p70s6K信号通路的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞，取传代培养至3～7代细胞分为4组：正常对照组（加含5%胎牛血清DMEM培养基），VD组[加1,25（OH）2D310-8 mol/L]，R组（加雷帕霉素5 mg/L），R＋VD组[加雷帕霉素5 mg/L及1,25（OH）2D310-8 mol/L]，干预48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒CCK-8检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期时相分布，免疫荧光法检测细胞中mTOR、p70s6K的表达情况。结果正常对照组、VD组、R组、R＋VD组：（1）吸光度值（A450）依次降低，组间多重比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）；抑制率（IR）依次升高。（2）G1期细胞比例依次增加，S期、G2/M期依次减少，增殖指数（PI）依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。（3）系膜细胞中mTOR、p70s6K蛋白表达强度均依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论1,25（OH）2D3可显著抑制人系膜细胞增殖，且其可能通过抑制mTOR/p70s6K信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。

PI3K/Akt/mTOR/p70^(S6K)信号通路在肝纤维化发生发展中的作用

PI3K/Akt/m TOR/p70S6K是细胞生命活动的重要信号通路,在促进细胞生长、增殖、侵袭、抗凋亡及促进血管生成中具有重要作用。简述了PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路作用于肝星状细胞(HSC)而对肝纤维化发生发展产生的作用,分析表明阻断该信号通路中任一靶点均能抑制HSC活化、增殖,促进HSC凋亡,抑制HSC分泌细胞外基质和延缓肝纤维化进程,阻断该通路有望成为肝纤维化的治疗策略。

HBV感染免疫耐受期产妇与正常产妇脐带血浆细胞样树突状细胞中PI3K、mTOR、p70S6K、IFNα的表达情况分析

目的比较HBV感染免疫耐受期产妇脐带血与正常产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)中PI3K、mTOR、p70S6K、IFNα表达的差异。方法选取湖南中医药大学第一附属医院产科住院部2017年10月-2020年1月HBV感染免疫耐受期产妇20例(乙型肝炎组)及正常产妇10例(正常组)。分离培养脐带血pDC,在培养的第7天加入CpG-A,24 h后分别收集细胞及上清液,real-time PCR检测pDC PI3K、mTOR、p70S6K mRNA的表达,Western Blot技术检测pDC PI3K、mTOR、p70S6K蛋白表达,ELISA法检测pDC培养上清IFNα水平。计量资料采用两独立样本t检验。结果乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC PI3K、mTOR、p70S6K mRNA表达水平显著低于正常产妇组(t值分别为-81.04、-63.07、-34.55,P值均<0.001);乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC PI3K、mTOR、p70S6K蛋白表达水平亦显著低于正常产妇组(t值分别为-8.13、-7.75、-6.71,P值均<0.001);乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC培养上清IFNα表达水平显著低于正常产妇组(t=-15.88,P<0.05)。结论HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC的PI3K、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平及IFNα水平减少,pDC功能受到抑制。

p70S6K、EGFR、PI3Kp110β在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、表皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇-3激酶亚单位110β(PI3Kp110β)在胃癌组织中的表达水平及相关临床意义。方法选取2015年4月至2020年4月病理科系统中经病理确诊为胃癌的患者为胃癌组,选择同期检查确诊为浅表性胃炎患者为对照组,每组30例。采用免疫组织化学方法检测两组p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的表达水平,采用χ^(2)检验比较两组间p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的表达情况,并分析其在胃癌组中不同分化程度、肿瘤TNM分期、是否累及浆膜层患者的差异。结果p70S6K在胃癌组和对照组中的高表达分别为24例(80.0%)、10例(33.3%),EGFR在胃癌组和对照组中的高表达分别为20例(66.7%)、7例(23.3%),PI3Kp110β在胃癌组和对照组的高表达分别为22例(73.3%)、11例(36.7%),胃癌组的p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的高表达率均显著高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为13.303、11.380、8.148,P值均<0.01)。胃癌组中,低分化患者p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的高表达率分别为87.5%、90.0%、86.4%,明显高于中高分化患者,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为7.873、5.868、4.802,P值均<0.05);肿瘤TNM分期中,Ⅲ~Ⅳ期p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的高表达率分别为70.8%、75.0%、72.7%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为11.429、8.213、9.075,P值均<0.05),肿瘤累及浆膜层患者的p70S6K、EGFR、PI3Kp110β的高表达率分别为79.2%、85.0%、81.8%,明显高于未累及浆膜层患者,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为7.163、5.568、8.523,P值均<0.05)。结论p70S6K、EGFR、PI3Kp110β在胃癌组织中高表达可能是胃癌发生及发展的重要标志。

氧化型低密度脂蛋白通过Akt／mTOR／p70S6K通路诱导血管内皮细胞自噬

目的探讨氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein, oxLDL）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）自噬和Akt/mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法将培养的HUVECs分为oxLDL组和对照组，分别用100 μg/ml oxLDL和等体积磷酸盐缓冲液处理。在培养6 h和12 h后收集细胞。应用透射电子显微镜观察自噬小体，实时荧光定量聚合酶链反应检测微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3）和p62 mRNA表达，应用蛋白质印迹法检测LC3、p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表达。结果与对照组相比，oxLDL处理组细胞内的自噬小体数量明显增多（P〈0.05），LC3 mRNA及蛋白表达水平均显著增高（P均〈0.05），而p62 mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P均〈0.05）。此外，oxLDL处理组Akt、mTOR、p70S6K磷酸化蛋白表达水平均较对照组显著降低（P均〈0.01），但Akt、mTOR和p70S6K总蛋白表达水平与对照组无显著差异。结论oxLDL可通过抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路诱导HUVECs自噬。

p70S6K1及4E-BP1蛋白在结直肠癌中的作用

磷脂酰肌醇激酶3-蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在结直肠癌的发生、发展中发挥重要的作用。mTORC1下游靶点是核糖体 S6蛋白激酶1（p70S6K1）和真核翻译起始因子-4E结合蛋白1（4EBP1），两者在蛋白质合成中起主要的调节作用。结直肠癌中 p70S6K1及4EBP1的异常表达成为关注的焦点。

S期激酶相关蛋白2在喉癌组织中的表达及调控增殖和凋亡的机制

目的检测S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，并探讨应用RNA干扰技术抑制skp2基因表达对喉癌Hep2细胞生长、凋亡、p27表达以及细胞周期的影响。方法应用免疫组织化学方法检测Skp2蛋白在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，根据设计siRNA的原则，针对人Skp2的mRNA序列，设计并合成编码siRNA的两条寡核苷酸序列，构建重组质粒pGPU6Skp2，转染重组质粒至Hep-2细胞中，应用流式细胞术检测skp2蛋白的表达。采用四甲基偶氮唑蓝法（MrIT）检测细胞增殖变化。采用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期和p27蛋白表达的变化。结果52例喉癌组织标本中skp2蛋白均呈阳性表达，高分化喉癌组织标本Skp2蛋白表达低于中、低分化组（X2=7．33，P〈0．05）。经酶切和DNA测序鉴定证实重组质粒上连接序列确实为所设计序列。pGPU6-Skp2转染组skp2蛋白表达明显低于空质粒对照组（f=19．42，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞增殖抑制率为26．93％，明显高于空质粒对照组2．47％（t=15．23，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞凋亡率为11．71％，明显高于空质粒对照组1．93％（t=17．92，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组s期细胞所占比例明显高于空质粒对照组（t=7．73，P〈0．05）；pGPU6-Skp2转染组p27蛋白表达明显高于空质粒对照组（t=2．86，P〈0．05）。结论skp2蛋白在喉癌中的表达与癌组织的分化程度有关。抑制喉癌细胞系Hep-2细胞skp2的表达可以抑制细胞增殖，并促进细胞凋亡p27蛋白表达提高以及细胞s期阻滞可能是其作用机制之一。

Skp2在急性白血病中的表达及其与p27（kip1）和Ki67的关系

目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）在急性白血病中的表达及其与p27（kip1）蛋白和增生相关抗原Ki67的关系。方法采用免疫细胞化学法检测三者在初治急性非淋巴细胞白血病患者、急性淋巴细胞白血病患者及正常对照者骨髓单个核细胞中的表达。结果初治急性白血病患者中Skp2和Ki67的表达水平明显高于对照组（均P〈0．01），p27（kip1）的表达水平明显低于对照（P〈0．05），以上各指标在急性非淋巴细胞白血病和急性淋巴细胞白血病之间差异无统计学意义（P〉0．05），且Skp2与p27（kip1）、Ki67的表达分别呈负相关（rs=-0．489，P〈0．05）、正相关（rs=0．609，P〈0．01）。结论Skp2异常增高可能通过促进p27（kip1）的降解而参与了白血病的发生，并与细胞增生相关抗原Ki67正相关。

乳腺癌组织中Skp2和p27 Kip1表达与临床病理因素的关系

目的:探讨乳腺癌组织中Skp2与p27Kip1的表达及其意义。方法:采用免疫组化法两步检测法检测正常乳腺组织、导管上皮不典型增生组织(ADH)以及浸润性导管癌(IDC)组织中的Skp2与p27Kip1的表达,并分析两者表达与乳腺癌淋巴结转移及组织学分级的关系。结果:Skp2阳性表达率在正常乳腺组织、ADH组织、IDC组织依次升高,伴腋窝淋巴结转移的IDC组织中Skp2阳性表达率明显高于无淋巴结转移的IDC组织,而p27Kip1的表达则与Skp2的表达呈反向变化(均P<0.05);不同组织学分级IDC组织间Skp2阳性率、p27Kip1阳性率差异均有统计学意义(均P<0.05),且Skp2阳性表达与IDC组织学分级呈正相关(r=0.492,P<0.05),而p27Kip1的阳性表达与IDC组织学分级呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论:乳腺癌组织中Skp2表达上调而p27Kip1表达下调,两者的变化程度与乳腺癌的恶性生物学特征密切相关。