RPL34基因敲减抑制黑素瘤细胞侵袭与生长研究

目的:研究核糖体蛋白60SL34(RPL34)对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法:比较20例皮肤黑素瘤和正常皮肤组织内RPL34蛋白表达,采用慢病毒感染法构建人黑素瘤细胞A375 RPL34稳定干扰的细胞株。实时荧光定量PCR(RT-PCR)及免疫印迹法检测细胞中RPL34基因的干扰效率。用细胞增殖和克隆形成试验检测RPL34干扰对A375细胞增殖和克隆形成能力的影响。细胞迁移、侵袭和划痕试验观察RPL34干扰对A375细胞迁移运动和侵袭能力影响。结果:免疫组化显示,患者黑素瘤组织中RPL34的表达高于正常组织。在A375细胞中干扰RPL34后,细胞增殖(F=25.362,P<0.05)和克隆形成的能力(t=23.171,P=0.00065)明显减弱,细胞迁移运动能力(t=6.99,P=0.00185),侵袭能力(t=7.576,P=0.00156)亦显著减弱。A375细胞中干扰RPL34后,TWIST1基因、波形蛋白(vimentin)、组织抑制因子(TIMP)2、基质金属蛋白酶(MMP)7、MMP9和MMP13的表达均低于对照细胞(P<0.05)。结论:在黑素瘤中降低RPL34表达抑制了细胞增殖及克隆形成的能力,影响细胞上皮间质化的进程,从而抑制黑素瘤细胞的迁移、侵袭。