核糖体蛋白L41与黄曲霉抗性的关系

已知与编码核糖体蛋白L41(RPL41)的CD399094相似的基因序列在黄曲霉敏感品种发育中种皮中上调表达。从花生黄曲霉抗性品种J11中克隆了相似基因。通过分析比较来自开放数据库中黄曲霉抗性和敏感品种花生发育中种子表达的RPL41序列,并对黄曲霉抗性和敏感品种果实不同发育时期和部位及叶片用荧光定量PCR做进一步的分析,研究在不同花生品种中核糖体蛋白L41与黄曲霉抗性的关系。结果表明,发育中种子表达的RPL41在抗性品种中多于敏感品种,而且多出的EST序列与在敏感品种中表达的不同,可能是特异地在抗性品种中表达。RPL41在抗性品种中发育中果实的果荚和子叶以及叶片上调表达,可能与该特定类型的RPL41 est的专一表达以及与黄曲霉的抗性有关。

核糖体蛋白L41(RPL41)基因对羊驼毛色调控的研究

羊驼原产于南美洲的安第斯山脉，是一种毛用动物，具有很高的经济价值，这是因为羊驼毛具有以下特点：1）羊驼毛手感细腻、光滑，刺激少于其他动物，具有极好的隔热和保温性能，耐磨损，脂肪、油或毛脂含量很低，不散发味道，蓬松不滞留水分，也不会抵制太阳光的辐射，不缩水；2）羊驼毛呈现不同程度的弯曲；

核糖体蛋白L41对人视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的研究核糖体蛋白L41(ribosomal protein L41,RPL41)对人视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将人视网膜母细胞瘤Y79细胞接种于含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中传代培养。根据药物处理浓度分为对照组(RPL41浓度为0μmol·L^(-1))、40μmol·L^(-1)RPL41处理组、80μmol·L^(-1)RPL41处理组、120μmol·L^(-1)RPL41处理组。Cell Titer-Glo荧光细胞活性检测系统检测各组细胞活性;流式细胞仪检测100μmol·L^(-1)RPL41处理后细胞凋亡率,Hoechst染色观察细胞凋亡形态;Western blot检测各组细胞中活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)的含量。结果与对照组相比,40μmol·L^(-1)RPL41处理组细胞活性为(97.9±1.5)%,无明显变化,差异无统计学意义(P=0.055);80μmol·L^(-1)RPL41处理组细胞活性为(87.6±1.8)%,120μmol·L^(-1)RPL41处理组为(63.9±2.0)%,与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RPL41对Y79细胞增殖有明显的抑制作用。100μmol·L^(-1)RPL41能够促进Y79细胞凋亡,凋亡率为(17.33±2.47)%。100μmol·L^(-1)RPL41处理组凋亡细胞与正常细胞相比,细胞颜色较亮,细胞体积较小。40μmol·L^(-1)RPL41处理组ATF4蛋白含量为0.76±0.04,80μmol·L^(-1)RPL41处理组为0.29±0.04,120μmol·L^(-1)RPL41处理组为0.29±0.05,与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。RPL41能够降低Y79细胞中ATF4的蛋白含量。结论RPL41能抑制人视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与ATF4有关。

鹌鹑和黑斑蛙核糖体蛋白L15 cDNA片段的克隆和序列分析

通过RT PCR方法,分别从两栖类的黑斑蛙(Rananigromaculata)和鸟类的鹌鹑(Coturnixcoturnixjaponica)中首次克隆了核糖体大亚基蛋白L15(RPL15,ribosomalproteinL15)的cDNA片段,并分析了其序列特征.黑斑蛙和鹌鹑的rpl15cDNA片段分别为467个核苷酸和408个核苷酸,推测分别编码155个氨基酸和136个氨基酸的蛋白片段,与其它已知的脊椎动物rpl15序列有高度的同源性.应用这两条cDNA序列和其它已知的脊椎动物rpl15序列构建的系统发育树显示聚类结果与传统分类一致.

鲇鱼和斜带石斑鱼核糖体蛋白L15完整cDNA的克隆和序列分析

通过RT PCR和3′ RACE方法,分别从鲇鱼(Silurusasotus)和斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)中克隆了核糖体大亚基蛋白L15(ribosomalproteinL15,RPL15)的完整cDNA,并详细分析了其序列特征.这两种鱼的RPL15蛋白cDNA均包含一个615个核苷酸的完整阅读框,推测分别编码一个204个氨基酸的蛋白.不论是核苷酸序列还是推测的氨基酸序列,这2个序列分别与同属的南方大口鲇和同科的大眼鳜rpl15序列同源性最高,与其他已知的脊椎动物rpl15序列也有较高的同源性.基于这2个序列的编码区和其他鱼类的rpl15编码序列进行分子系统学分析,与传统的形态分类结果是一致的.

喉癌组织中ATF4、RPL41表达变化及意义

目的探讨喉癌组织中转录激活因子4(ATF4)、核糖体蛋白L41(RPL41)表达变化及意义。方法选取120例喉癌患者,收集术中切除的喉癌组织及其癌旁组织(距肿瘤组织边缘>3 cm),用免疫组化法检测组织中ATF4、RPL41蛋白表达,分析ATF4、RPL41蛋白表达与患者临床病理特征的关系;Spearman法分析ATF4蛋白与RPL41蛋白表达的相关性;对患者进行随访,用Kaplan-Meier法分析ATF4、RPL41蛋白表达与患者预后的关系。结果与癌旁组织比较,喉癌组织中ATF4蛋白阳性表达率高,RPL41蛋白阳性表达率低(P均<0.05)。喉癌组织中ATF4蛋白与RPL41蛋白表达呈负相关(r_(s)=-0.809,P<0.05)。ATF4蛋白阳性表达率与喉癌淋巴结转移、TNM分期有关,RPL41蛋白阳性表达率与喉癌组织分化程度、TNM分期有关(P均<0.05)。ATF4蛋白表达阳性的喉癌患者5年生存率低于阴性患者,RPL41蛋白表达阳性的喉癌患者5年生存率高于阴性患者,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论喉癌组织中ATF4呈高表达,而RPL41呈低表达;ATF4表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移和预后有关,RPL41表达与肿瘤TNM分期、组织分化程度及预后有关。

东方巴贝斯虫核糖体蛋白L26全长cDNA克隆及蛋白特性分析

目的克隆东方巴贝斯虫核糖体蛋白L26(RPL26)全长cDNA序列,对编码的蛋白特性进行分析,并探讨它们在研究系统发育中的应用。方法采用经EST测序获得的东方巴贝斯虫RPL26的5′特异性引物及文库载体3′通用引物对东方巴贝斯虫cDNA文库进行扩增,测序获得东方巴贝斯虫RPL26全长cDNA序列。用BLASTX程序搜索相似性序列及保守结构域,所获序列在GenBank中登记,并用Neighbor-Joining(N-J)法构建基于L26氨基酸序列的系统发育树。结果东方巴贝斯虫RPL26全长cDNA序列(GenBank登录号为FJ492804)长度为716 bp,开放阅读框为414 bp,编码137个氨基酸;同源性分析结果表明东方巴贝斯虫RPL26序列较保守,与牛巴贝斯虫(Babesia bovis)、小泰勒虫(Theileria par-va)等亲缘关系较近,在系统发育树中的遗传距离也较近。结论首次获得东方巴贝斯虫RPL26基因,其可能作为分子指标应用于研究生物系统发育。

lncRNA FAM27L对喉癌TU212细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FAM27L对喉癌TU212细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法qPCR检测FAM27L在喉癌组织、相应癌旁组织、喉癌细胞系及人支气管上皮细胞系中的表达。选取FAM27L表达最低的细胞系,构建FAM27L过表达细胞系(FAM27L组)和阴性对照细胞系(阴性对照组)。MTT法和Transwell实验分别检测过表达FAM27L对细胞增殖能力和侵袭能力的影响。采用生物信息学网站LncBase Predicted V.2预测可互补结合FAM27L的miRNA,采用网站miRWalk2.0预测可互补结合miRNA的基因。qPCR检测miRNA和靶基因mRNA的表达。Western blot法检测靶基因蛋白和MAPK信号通路蛋白的表达。结果在喉癌组织中FAM27L的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。FAM27L在5种喉癌细胞系中的表达明显低于人支气管上皮细胞(P均<0.05),且以TU212细胞中表达最低(P<0.01)。过表达FAM27L后,与阴性对照组比较,FAM27L组TU212细胞的增殖能力和侵袭能力明显降低(P均<0.05)。LncBase Predicted V.2和miRWalk2.0网站预测显示,FAM27L可与miR-744-3p互补结合,miR-744-3p与核糖体蛋白L41(ribosomal protein L41,RPL41)存在靶向结合位点。与阴性对照组比较,FAM27L组miR-744-3p表达显著降低(P<0.01),RPL41及MAPK信号通路蛋白的表达显著降低(P均<0.05)。结论FAM27L在喉癌组织和细胞系中低表达,高表达FAM27L可通过下调miR-744-3p的表达促进RPL41基因的表达,干扰MAPK信号通路转导,从而抑制喉癌TU212细胞恶性生物学行为的进展。

栀子高质量总RNA的提取

利用改进的高盐高pH值法和EASYspin植物RNA快速提取试剂盒,从富含次生代谢产物的栀子叶片和果实中提取总RNA。用紫外分光光度法和1%非变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量,0.7%非变性琼脂糖凝胶电泳检测反转录产物质量,利用RT-PCR反应检测反转录产物用于基因扩增的有效性。结果表明,高盐高pH值法提取的栀子果实总RNA,试剂盒法提取的栀子叶片总RNA产量均较高,28S和18S条带清晰,28S条带亮度是18S条带的2倍,且A260/A280在1.9~2.0;以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广（250~5000bp）;上述反转录获得的cDNA均能够成功用于60S核糖体蛋白L18A基因片段的扩增。综上所述,利用高盐高pH值法提取栀子果实总RNA、利用EASYspin植物RNA快速提取试剂盒提取栀子叶片总RNA,效果最好。本研究成功建立了从栀子果实和叶片中提取高质量总RNA的方法。