X连锁核糖体S6激酶4在乳腺癌发生发展中的作用及其机制

目的探讨X连锁核糖体S6激酶4(RSK4)在乳腺癌发生发展的作用及其机制。方法 (1)检测乳腺癌组织及癌旁正常组织、乳腺癌细胞(T47D、ZR-75-1、SK-BR-3、MDA-MB-231、MDA-MB-436、MCF-7)及乳腺正常细胞MCF-10A中RSK4 mRNA及蛋白的表达水平。(2)将MDA-MB-231细胞分为实验组、阴性对照组和空白组,其中实验组、阴性对照组分别转染过表达RSK4的慢病毒载体、不含RSK4的慢病毒载体,空白组未进行转染。检测3组细胞RSK4 mRNA及蛋白、蛋白激酶(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达水平,以及细胞迁移和侵袭能力。(3)检测MDA-MB-231细胞及去甲基化的MDA-MB-231细胞的甲基化程度,比较两种细胞RSK4 mRNA的表达水平。(4)将12只裸鼠随机分为实验组及对照组各6只,分别在裸鼠乳房脂肪垫中注射实验组、阴性对照组MDA-MB-231细胞混悬液,比较两组接种后1～6周的瘤体体积及6周后的瘤体重量。结果 (1)乳腺癌组织RSK4 mRNA及蛋白的表达水平均低于癌旁正常组织(均P <0. 05)。MCF-10A细胞的RSK4 mRNA及蛋白表达水平均高于6种乳腺癌细胞(均P <0. 05)。在6种乳腺癌细胞中,MCF-7细胞的RSK4 mRNA及蛋白表达水平最高,MDA-MB-231细胞的RSK4 mRNA及蛋白表达水平最低(均P <0. 05)。(2)与阴性对照组和空白组比较,实验组细胞的RSK4 mRNA及蛋白、E-钙黏蛋白表达水平升高,细胞迁移数、细胞侵袭数以及p-AKT、p-ERK、波形蛋白表达水平降低(均P <0. 05)。(3)去甲基化的MDA-MB-231细胞中RSK4 mRNA表达水平高于MDA-MB-231细胞(P <0. 05)。(4)在第3、4、5、6周,实验组裸鼠的体重均高于对照组(均P <0. 05),在第2、3、4、5、6周,实验组裸鼠的瘤体体积均小于对照组(均P <0. 05)。结论 RSK4乳腺癌的发生发展过程中起抑制作用,其在乳腺癌中低表达可能由其启动子异常甲基化引起的。RSK4可能通过AKT/ERK信号通路调节乳腺癌细胞的上皮间质转化过程。

肾细胞癌患者临床病理特征与核糖体S6激酶4表达的相关性

目的探讨肾细胞癌患者核糖体S6激酶4(RSK4)的表达及其与肾细胞癌临床病理特征的相关性。方法应用免疫组化方法对50例肾细胞癌组织中RSK4的表达进行检测,并通过对患者随访,探讨其与肾细胞癌临床病理学参数及患者预后之间的关系。结果肾细胞癌患者中RSK4阳性表达27例,且RSK4阳性表达与Fuhrman分级、TNM分期、集合系统受累、淋巴结转移、病理类型等因素呈正相关;单因素分析显示RSK4(P=0.001)、Fuhrman分级(P=0.001)、TNM分期(P=0.001)、集合系统是否受累(P=0.001)、淋巴结是否转移与患者生存期长短有关;患者性别(P=0.428)、年龄(P=0.060)、肿瘤直径(P=0.621)、病理类型(P=0.335)与生存率无关;Cox回归模型显示,仅RSK4、Fuhrman分级、病理TNM分期、集合系统受累、淋巴结转移与肿瘤生存期相关。结论 RSK4可以成为肾细胞癌的潜在的独立预后因子之一。

核糖体S6蛋白激酶4基因在多种肿瘤中的表达及其生物信息学分析

目的探讨在不同肿瘤细胞中核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)的表达谱是否存在差异,以及预测可能存在的蛋白亚型及其生物学特性。方法提取神经胶质瘤细胞GL261、卵巢癌细胞ID8、乳腺癌细胞4T1和168FARN、结肠癌细胞mc38和CT26、胃癌细胞MFC和肺癌细胞LLC1的RNA,采用RT-PCR技术检测RSK4的表达及其剪接异构体,生物信息学分析RSK4的生物学特征及其功能。结果RT-PCR结果显示在GL261、4T1、mc38、CT26、MFC和LLC1中均表达RSK4,且不同的肿瘤细胞中表达了多个剪接异构体,开放阅读框分析RSK4可能至少编码11个蛋白亚型;二级结构分析显示,这些剪接异构体编码的蛋白亚型均由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,且保守结构域均相同;蛋白互作网络富集分析显示,RSK4主要通过mTOR信号通路和突触持续增强等信号通路在核质和胞浆中发挥激酶的活性。结论RSK4在不同的肿瘤细胞中存在不同的表达谱,可能产生多种氮端不同的蛋白异构体,能够通过多种信号通路参与不同的生物学途径。

核糖体S6激酶4在胰腺癌组织中的表达及其对预后评估的价值

目的:探讨核糖体S6激酶4(RSK4)在胰腺癌组织中的表达及其对预后评估的价值。方法:收集2012年4月至2013年4月湖北省谷城人民医院收治的72例胰腺癌患者的临床资料,采用免疫组化法检测胰腺癌组织和癌旁组织RSK4蛋白表达;以患者性别、年龄、糖尿病史、肿瘤发病部位、肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期等作为观察指标,分析RSK4蛋白与临床资料的关系;再以肿瘤中位生存期作为观察指标,筛选影响胰腺癌患者预后的危险因素。结果:胰腺癌组织RSK4蛋白阳性表达率为23.6%(17/72),癌旁组织RSK4蛋白阳性表达率为52.8%(38/72),胰腺癌组织RSK4蛋白阳性表达率显著低于癌旁组织(χ~2=12.973,P=0.000)。中、低分化胰腺癌组RSK4蛋白阳性率显著低于高分化胰腺癌组(P<0.05),有淋巴结转移组RSK4蛋白阳性率显著低于无淋巴结转移组(P<0.05),Ⅲ~Ⅳ期组RSK4蛋白阳性率显著低于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05)。单因素分析显示,RSK4蛋白阳性组中位生存时间显著低于阴性组,高分化组中位生存期显著低于中、低分化组,淋巴结转移组中位生存期显著低于无淋巴结转移组,Ⅲ~Ⅳ期组中位生存期显著低于Ⅰ~Ⅱ期组,各组间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析显示,RSK4蛋白、肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期是影响胰腺癌预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论:RSK4蛋白在胰腺癌组织表达显著低于癌旁组织,RSK4蛋白阳性率越低患者预后越差,RSK4蛋白可以作为胰腺癌诊断及预后评估的指标之一。

核糖体S6蛋白激酶4和热休克蛋白90在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)和热休克蛋白90(HSP90)在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理及预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测72例手术切除的乳腺癌组织和72例癌旁组织的RSK4和HSP90蛋白的表达情况,分析不同临床病理特征患者RSK4和HSP90蛋白的表达情况,比较不同RSK4和HSP90表达水平患者的生存期。结果 RSK4蛋白在乳腺癌癌旁组织中的阳性表达率高于癌组织(P<0.05),HSP90蛋白在乳腺癌癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),在乳腺癌组织中RSK4与HSP90蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。不同分化程度、TNM分期患者的乳腺癌组织RSK4蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05),不同肿瘤大小、有无淋巴结转移、不同组织学分化、不同TNM分期患者乳腺癌组织的HSP90蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。RSK4蛋白阳性表达患者的中位生存期为71个月,多于RSK4蛋白阴性表达患者的54个月(P<0.05),HSP90蛋白阳性表达患者的中位生存期为41个月,少于HSP90蛋白阴性表达患者的82个月(P<0.05)。结论乳腺癌组织中RSK4的表达降低,HSP90的表达升高,RSK4和HSP90在乳腺癌中可能通过某些通道存在相互影响的关系。

食管鳞状细胞癌组织中RSK4、p63的表达变化及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌(鳞癌)组织中核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)、p63的表达变化及意义。方法收集食管鳞癌活检标本72例份,应用免疫组织化学EnVision两步法检测癌组织中RSK4、p63蛋白表达,染色结果采用半定量分析。选取食管鳞状细胞癌细胞系TE-11、TE-10及正常食管细胞Het-1A,分别采用qRT-PCR法、Western blotting法检测RSK4、p63 mRNA及蛋白表达。采用Kaplan-Meier法及Cox风险回归模型对患者进行生存分析。结果食管鳞状细胞癌组织中RSK4蛋白阳性表达率为62.5%(45/72),p63蛋白阳性表达率为83.3%(60/72)。食管鳞状细胞癌细胞系(TE-11、TE-10)中RSK4、p63基因的mRNA和蛋白表达均高于正常食管细胞Het-1A(P均<0.05)。Kaplan-Meier法生存分析结果显示,RSK4阳性表达与食管癌患者预后不良相关(P<0.05),且分期、组织分化程度、淋巴结转移等均是影响患者生存期的因素(P均<0.05);p63表达与患者临床病理特征及预后均无关(P均>0.05)。Cox回归模型分析结果显示,RSK4阳性表达、pT分期、组织分化程度、淋巴结转移与食管癌患者生存有关(P均<0.05)。结论RSK4与p63在食管鳞状细胞癌组织中呈异常表达,RSK4可作为潜在食管癌分期的分子标志物及预后评估因子。

腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性研究

目的 测定肿瘤坏死因子受体相关因子4 (TRAF4)、肿瘤转移抑制基因nm23(nm23)、核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)在胃癌患者病灶组织中的蛋白表达,探究分析腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4、RSK4、nm23表达的相关性。方法 选取来自本三甲医院于2023年1月至2024年1月收治的胃癌患者的电子病历系统临床资料,共160例。比较胃癌组织与癌旁组织TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达。随访术后患者36个月,根据术后是否复发胃癌分为复发组和未复发组,比较两组患者一般资料,运用Cox回归模型进行多因素回归分析。结果 相较于癌旁组织,胃癌组织nm23、RSK4蛋白阳性表达率更低,TRAF4蛋白阳性表达率更高(P<0.05)。腹腔镜胃癌根治术后复发率为31.25%。两组组织分化、肿瘤直径、浸润程度、术后化疗、TNM分期、淋巴结转移、TRAF4、RSK4、nm23蛋白表达对比差异均有统计学意义(P<0.05)。TRAF4蛋白表达、淋巴结转移、RSK4蛋白表达、nm23蛋白表达、组织分化程度均是其影响因素(P<0.05)。结论 腹腔镜胃癌根治术后复发与病灶组织TRAF4蛋白高表达、RSK4蛋白低表达、nm23蛋白低表达有关,可成为早期评估腹腔镜胃癌根治术后复发的潜在标志物。

胃癌组织TRAF4和RSK4蛋白表达与腹腔镜根治术后复发的关系

目的探讨胃癌组织TRAF4、RSK4蛋白表达与腹腔镜胃癌根治术后复发的关系。方法将176例患者分为复发组和未复发组,对比癌组织与癌旁组织、复发组与未复发组胃癌组织中TRAF4和RSK4蛋白表达。分析复发的影响因素及二者预测复发的效能。结果胃癌组织中TRAF4蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),且复发组高于未复发组(P<0.05);胃癌组织RSK4蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05),且复发组低于未复发组(P<0.05);最大肿瘤直径>5 cm、低分化、TNMⅢ期、浸润深度T3~T4、淋巴结转移、术后未辅助化疗、TRAF4和RSK4蛋白阳性表达、规律饮食均是术后复发的影响因素(均P<0.05);胃癌组织TRAF4、RSK4蛋白联合预测复发的准确度为83.52%。结论胃癌组织TRAF4蛋白高表达、RSK4蛋白低表达,且均与复发有关。

RSK4、ACTN4和Ki-67在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)、α-辅肌动蛋白4(ACTN4)及核增殖抗原Ki-67在乳腺癌(BC)组织中的表达,分析三者表达水平与BC患者临床病理特征的关系。方法:收集2019年1月至2021年12月广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科100例手术切除并经病理确诊的BC组织及20例癌旁正常石蜡包埋组织标本。采用免疫组织化学法检测RSK4、ACTN4和Ki-67在BC及癌旁正常组织中的表达。采用Spearman等级相关分析法分析RSK4与ACTN4、Ki-67表达的相关关系。结果:与癌旁正常组织比较,癌组织中RSK4表达降低,ACTN4和Ki-67表达升高(均P<0.01)。RSK4与ACTN4、Ki-67表达均呈负相关关系,且三者表达水平与患者肿瘤大小、病理分级有关(均P<0.05)。结论:BC组织中RSK4表达下调,ACTN4和Ki-67表达上调,RSK4、ACTN4和Ki-67表达与BC进展有关,可作为BC临床诊疗的潜在标志物。

秦皮乙素经p70S6K/4E-BP1信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制研究

目的:探讨秦皮乙素经核糖体蛋白S6激酶/4E结合蛋白-1(p70S6K/4E-BP1)信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法:设HCT116细胞组、氟尿嘧啶组(20μg·ml^-1)、秦皮乙素低(40μg·ml^-1)、高(80μg·ml-1)剂量组,置于CO2培养箱(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2)。以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell Chamber测定迁移水平,RT-PCR法及WEST-BLOT法测定细胞p70S6K、4E-BP1mRNA与蛋白表达水平。结果:氟尿嘧啶组、秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4E-BP1 mRNA和蛋白水平显著低于HCT116细胞组,细胞凋亡率显著高于HCT116细胞组(P<0.05)。秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4EBP1 mRNA和蛋白水平显著高于氟尿嘧啶组,细胞凋亡率显著低于氟尿嘧啶组(P<0.05)。秦皮乙素低、高剂量组间各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:秦皮乙素能抑制结肠癌HCT116细胞增殖、迁移,诱导HCT116细胞凋亡,其机制与秦皮乙素抑制p70S6K、4E-BP1mRNA和蛋白表达有关。

核糖体S6蛋白激酶4变异体基因表达对乳腺癌细胞增殖的影响

目的探讨核糖体S6蛋白激酶4变异体(RSK4m)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响。方法将RSK4m的过表达载体稳定转染至乳腺癌M DA-M B-231细胞株中,分别设一个阴性对照组(mock组)及过表达RSK4m1组(OE1组)、过表达RSK4m2组(OE2组)、过表达RSK4m3组(OE3组),采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)和Western blotting检测RSK4m的mRNA和蛋白的表达,CCK-8试剂盒检测转染后M DA-M B-231细胞的生长增殖,免疫共沉淀试验(CO-IP)验证热休克蛋白与RSK4变异体的相互作用。结果成功转染RSK4m慢病毒表达载体至乳腺癌MDA-MB-231细胞,其mRNA和蛋白水平均过表达(P均<0.05)。OE1组、OE2组、OE3组在24、48、72、96 h的细胞抑制率(%)与mock组相比,48、72、96 h的差异具有统计学意义(P<0.05),CO-IP结果证实热休克蛋白与RSK4m存在相互作用关系。结论 RSK4m可抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖,并可能与RSK4w的抑制增殖作用存在着不同的调控机制。

核糖体S6蛋白激酶4在乳腺癌中的异常表达及临床意义

目的研究核糖体s6蛋白激酶4（RSK-4）在乳腺癌中的表达及意义，探讨RSK-4在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及免疫组织化学染色法，检测RSK-4mRNA和蛋白在56例乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和20例乳腺良性病变组织中的表达。结果RSK-4mRNA在乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别为48．2％、76．8％和75．0％，RSK-4mRNA在乳腺癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织（P〈0．05）。RSK-4mRNA在乳腺癌组织中的表达与肿瘤大小和临床分期有关，肿瘤越大、临床分期越晚，RSK-4mRNA的表达率越低（P〈0．05）。RSK-4蛋白在乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织中的阳性表达率分别为39．3％、71．4％和75．0％，RSK-4蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常乳腺组织和乳腺良性病变组织（P〈0．05）。RSK-4蛋白在乳腺癌组织中的表达与肿瘤大小、临床分期以及有无淋巴结转移有关，肿瘤越大、临床分期越晚以及伴淋巴结转移者RSK-4蛋白的表达率低（P〈0．05）。56例乳腺癌组织中，RSK-4mRNA和蛋白的表达一致率为73．2％，二者的表达显著相关（χ^2=10．254，P〈0．05）。结论RSK-4可能足乳腺癌的抑癌基因，其表达降低或缺失可能引起乳腺癌的发生和发展。

慢病毒介导的RSK4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的:观察转染核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)慢病毒表达载体对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力的影响。方法:构建特异性的RSK4慢病毒表达载体LV-RPS6KA6,稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中,使用荧光定量PCR和蛋白印迹检测RSK4mRNA和蛋白的表达情况。用Cell Counting Kit-8实验检测转染后细胞的生长增殖情况。结果:稳定转染LV-RPS6KA6至乳腺癌MDA-MB-231细胞后,RSK4mRNA和蛋白的表达均明显上调(均P=0.000)。过表达RSK4的MDA-MB-231细胞生长被明显抑制,转染24,48,72,96h后,其生长抑制率分别为(10.5±1.8)%、(17.7±2.5)%、(27.1±3.7)%和(13.8±2.1)%。结论:稳定转染RSK4慢病毒表达载体可明显上调RSK4mRNA和蛋白表达,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖。

慢病毒载体介导shRNA干扰对乳腺癌MCF-7细胞RSK4基因表达的影响

目的观察慢病毒干扰载体(RSK4-RNAi-LV)转染对低侵袭、低转移潜能的乳腺癌MCF-7细胞中核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)基因表达的影响。方法设计合成特异性的RSK4 shRNA干扰体RSK4-RNAi-LV,稳定转染至乳腺癌MCF-7细胞中,应用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测RSK4 mRNA及其蛋白的表达情况。结果稳定转染慢病毒干扰载体至乳腺癌细胞后,72h开始检测到GFP荧光表达,90h后GFP荧光表达明显增强,RSK4 mRNA及其蛋白的表达均被明显抑制,抑制率分别为98.2%和80.1%。结论稳定转染RSK4-RNAi-LV可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞中RSK4 mRNA及其蛋白的表达。

RSK4与TRAF4在不同乳腺细胞中的表达及分子作用通路研究

目的研究抑癌基因p90核糖体S6蛋白激酶4(p90 ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)相互作用蛋白与肿瘤坏死因子受体相关因子4(tumor necrosis factor receptor associated factor 4,TRAF4)在不同乳腺细胞株中的表达,探讨RSK4-TRAF4相互作用蛋白所在分子作用通路对乳腺癌侵袭转移的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测RSK4和TRAF4在HBL-100正常乳腺细胞株和MCF-7、Her-2阳性型、MDA-MB-231人乳腺癌细胞株中的表达情况。用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测RSK4和TRAF4以及MAPK通路下游蛋白ERK1/2在HBL-100、MCF-7、Her-2阳性型、MDA-MB-231 4种乳腺细胞株中的表达。结果 RSK4 mRNA、TRAF4 mRNA在4种细胞中均表达,RSK4 mRNA在HBL-100表达量最高,在MCF-7、Her-2阳性型、MDA-MB-231细胞中含量依次降低;TRAF4 mRNA在4种细胞中的表达量由低到高依次为HBL-100、MCF-7、Her-2阳性型、MDA-MB-231细胞,RSK4 mRNA、TRAF4 mRNA在4种细胞中两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RSK4与TRAF4在4种细胞中蛋白表达水平与mRNA表达水平相一致,具有高度相关性(rRSK4=0.92,P<0.01;rTRAF4=0.82,P<0.01);ERK1/2蛋白表达量由高到低依次为MDA-MB-231、Her-2阳性型、MCF-7、HBL-100。在mRNA转录水平,RSK4和TRAF4表现出负相关(r1=-0.81,P<0.01);在蛋白翻译水平,RSK4和TRAF4同样呈现出高度负相关(r2=-0.84,P<0.01)。结论 RSK4和TRAF4具有较高的负相关性,RSK4与TRAF4相互作用后可能通过MAPKs下游信号通路ERK起分子调控作用。

核糖体S6蛋白激酶4对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学特性的影响

目的 观察核糖体S6蛋白激酶4基因（RSK4）过表达对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响.方法 将细胞分为空白组、实验组和阴性对照组,采用病毒转染法,利用细胞集落实验、细胞计数试剂盒（CCK-8）法、细胞划痕实验、Transwell小室实验和细胞黏附实验探讨RSK4对MDA-MB-231细胞生物学特性的影响.结果 7d后3组细胞集落形成率分别为（21.280±0.114）％、（9.150±0.120）％、（19.080±0.108）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.CCK-8实验显示,实验组24、48、72和96h的吸光度（A值）分别为0.1790±0.0044、0.2090±0.0218、0.2230±0.0117、0.2680±0.0274.细胞划痕实验显示：实验组0、12、24、48 h细胞迁移距离分别是0、（0.9200±0.0735）、（1.4600±0.0510）、（2.0000±0.0316） mm.Transwell小室显示,实验组48 h细胞迁移实验中滤过膜细胞数为（273.000±2.2930）个；细胞侵袭实验中滤过膜细胞数为（89.000±1.208）个,以上均显示：实验组比空白对照组和阴性对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.而细胞黏附实验结果显示：实验组3h和6h的细胞黏附百分率分别为（0.0700±0.0037）％、（0.1920±0.0133）％,比空白对照组和阴性对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 RSK4过表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性.

核糖体S6蛋白激酶4在恶性肿瘤中研究进展

恶性肿瘤的形成是由于细胞分裂、增殖失去控制,其发生、发展是一个多步骤的持续过程,其中蛋白激酶在恶性肿瘤进展中的作用极其关键。核糖体S6蛋白激酶(ribosomal s6 kinase,RSK)是一组丝/苏氨酸激酶,RSK家族共分为4个亚型。与其他3个亚型相比,RSK4的分布具有选择性且相对低表达[1]。

YKL-40、RSK4、cyclinD1在结肠癌中的表达及意义

目的探讨人软骨糖蛋白(YKL)-40、核糖体S6蛋白激酶(RSK)4、细胞周期蛋白(cyclin)D1在结肠癌中的表达及意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测86例结肠癌患者血清中YKL-40、cyclinD1、RSK4 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法检测结肠癌组织及癌旁组织中YKL-40、cyclinD1、RSK4蛋白的表达情况。采用Pearson法分析结肠癌患者血清YKL-40、RSK4、cyclinD1表达水平的相关性,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析其对结肠癌的诊断价值。分析YKL-40、RSK4、cyclinD1表达与结肠癌患者临床病理特征的关系。所有患者随访3年,采用Kaplan-Meier法分析YKL-40、RSK4、cyclinD1表达与患者预后的关系。采用COX比例风险回归多因素分析影响结肠癌患者预后的独立危险因素。结果与对照组相比,结肠癌组织及血清中YKL-40、cyclinD1的表达水平及蛋白阳性表达率显著升高(P<0.05),而RSK4的表达水平及蛋白阳性表达率显著降低(P<0.05);结肠癌中RSK4与YKL-40的表达呈负相关(P<0.05),RSK4与cyclinD1的表达呈负相关(P<0.05),YKL-40与cyclinD1的表达呈正相关(P<0.05);联合检测结肠癌的敏感性为94.19%,特异性为98.21%,AUC面积为0.985(95%CI:0.949~0.998);YKL-40、cyclinD1、RSK4表达与浸润深度、淋巴结转移、血管浸润、TNM分期、分化程度密切相关(P<0.05);YKL-40、cyclinD1阴性表达组总生存期(OS)分别高于阳性表达组(P<0.05),RSK4阳性表达组OS高于阴性表达组(P<0.05);COX分析显示淋巴结转移、TNM分期与YKL-40、RSK4、cyclinD1的异常表达是影响结肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论YKL-40、RSK4、cyclinD1在结肠癌中存在异常表达,且三者之间可能存在相互调控关系。

基于mTOR/p70S6K/4EBP1通路探讨白花丹素对糖尿病肾病大鼠足细胞凋亡的影响

目的:探究白花丹素对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)/真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)通路的影响。方法:SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、雷帕霉素2 mg/kg组、白花丹素50、100 mg/kg组、白花丹素100 mg/kg+自噬抑制剂2 mg/kg组,每组12只。除正常对照组外,其余各组采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法建立DN大鼠模型,造模成功后,各组给予相应药物处理,1次/d,连续给药8 w。每日观察大鼠的一般状态,并比较给药前后大鼠的体质量变化;检测大鼠24 h尿微量白蛋白(U-mAlb)含量,并检测空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)含量;过碘酸雪夫染色观察肾组织病理学变化;免疫组织化学法检测足细胞标志蛋白足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、肾母细胞瘤基因1(WT-1)的表达;透射电镜观察肾小球足细胞超微结构变化;蛋白印迹法检测肾脏组织凋亡、自噬和mTOR/p70S6K/4EBP1通路相关蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠的一般状态较差,出现肾小球基底膜增厚、系膜基质增多等肾脏病理损伤以及肾小球足细胞足突倒伏、足突相互融合、部分足突消失,24 h U-mAlb、FBG、Scr、BUN含量、肾组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)蛋白和mTOR(p-mTOR)/mTOR、p70S6K(p-P70S6K)/P70S6K、4EBP1(p-4EBP1)/4EBP1蛋白比值明显升高(P<0.05),肾组织Nephrin、WT-1、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、自噬相关基因12(Atg12)蛋白和微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II/LC3-Ⅰ蛋白比值明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,白花丹素50、100 mg/kg组大鼠的一般状态、肾脏病理和肾小球足细胞损伤明显改善,24 h U-mAlb、FBG、Scr、BUN含量、肾组织Caspase-3、BAX蛋白、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/p70S6K、p-4EBP1/4EBP1蛋白比值明显降低(P<0.05),肾组织Nephrin、WT-1、BCL-2、Atg12蛋白、LC3-II/LC3-Ⅰ蛋白比值明显升高(P<0.05);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤能减弱白花丹素100 mg/kg对DN大鼠的改善作用(P<0.05)。结论:白花丹素可能通过抑制mTOR/P70S6K/4EBP1信号通路,激活自噬,抑制足细胞凋亡,进而减轻DN大鼠肾脏损伤。

结直肠癌组织RSK4、p53蛋白的表达及临床病理意义

目的:探讨结直肠癌组织中P90核糖体S6激酶4(RSK4)蛋白、p53蛋白的表达及其临床病理意义。方法:选取我院病理科2014年1月~2016年5月既往收集的结直肠癌手术后标本70例及同期结直肠癌癌旁组织30例,采用免疫组化染色检测两组标本中RSK4蛋白、p53蛋白的表达情况,并分析其与结肠癌患者临床病理特征的相关性。结果:结直肠癌组织中RSK4蛋白、p53蛋白的阳性表达率分别为20.00%、55.71%,而癌旁组织中RSK4蛋白、p53蛋白阳性表达率分别为53.33%、10.00%,两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ期+Ⅱ期、高分化和中分化结直肠癌组织RSK4蛋白的阳性表达率显著高于Ⅲ期、低分化结直肠癌(P<0.05);Ⅰ期+Ⅱ期、浸润深度(T1、T2)、未发生淋巴结转移的结直肠癌组织中p53蛋白阳性表达率显著的低于Ⅲ期、浸润深度(T3、T4)、发生淋巴结转移的结肠癌组织(P<0.05)。结论:结直肠癌组织中RSK4蛋白表达下调、p53蛋白表达上调,二者可能与结直肠癌的发生和发展有关,并可能作为结肠癌诊断和预后评估的参考指标。