术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4以及长链非编码核糖核酸SBF2反义RNA1与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤的关系

目的探讨术前血清V-set和免疫球蛋白结构域4(VSIG4)以及长链非编码核糖核酸(LncRNA)SBF2反义RNA1(SBF2-AS1)与肾结石患者经皮肾镜取石术后急性肾损伤(AKI)的关系。方法选择2020年1月—2022年12月本院收治的109例肾结石患者为研究对象。术前检测患者血清VSIG4水平以及LncRNA SBF2-AS1表达,术后记录AKI发生情况。采用多因素Logistic回归模型分析肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析VSIG4、LncRNA SBF2-AS1预测肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的价值。结果本研究中,术后发生AKI者16例。AKI组血清VSIG4水平低于非AKI组,LncRNA SBF2-AS1表达高于非AKI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前高尿酸水平、术前高LncRNA SBF2-AS1表达、较长的手术时间、术中低血压是肾结石患者经皮肾镜取石术后发生AKI的危险因素(P<0.05),术前高VSIG4水平是保护因素(P<0.05)。术前血清VSIG4、LncRNA SBF2-AS1水平预测肾结石患者经皮肾镜术后发生AKI的曲线下面积分别为0.854、0.705,二者联合预测的曲线下面积为0.948,大于各指标单独预测(Z=1.995、2.958,P<0.05)。结论肾结石患者术前血清VSIG4水平降低、LncRNA SBF2-AS1表达增高与经皮肾镜取石术后AKI的发生有关,联合检测术前VSIG4、LncRNA SBF2-AS1可预测术后AKI的发生风险。

核糖核酸酶A专栏导读

长久以来,我们“顾名思义”,“理所当然”地认为核糖核酸酶A的功能就是降解核糖核酸(RNA)。事实上,随着研究的深入,发现该家族不少成员不仅能降解RNA,而且能精准地在特定位点切割RNA产生功能性非编码RNA,甚至具有“非酶”功能!例如,我们课题组研究的核糖核酸酶A超家族成员5(ribonuclease 5,也称angiogenin,中文译为“血管生成素”)不仅以酶的形式参与RNA代谢(主要是rRNA、tRNA和miRNA)。

长链非编码RNA MALAT1与微小核糖核酸-146a相互作用对子痫前期滋养细胞功能的影响

目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)与微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-146a相互作用在对子痫前期(preecampsia,PE)滋养细胞功能的影响及机制研究。方法:体外培养绒毛膜癌细胞JEG-3细胞,分4组对JEG-3细胞进行转染,分别为Control、sh-MALATl、miR-146a-5p inhibitor和sh-MALATI+miR-146a-5p inhibitor组,其中sh-MALATl组转染sh-MALATl,miR-146a-5p inhibitor组转染miR-146a-5p inhibitor,sh-MALATl+inhibitor组共同转染sh-MALATl与miR-146a-5p inhibitor,Control组加入等量空载体。通过QPCR检测mRNA水平;生物信息预测MALATl与miR-146a-5p的靶向关系;通过CCK8实验检测各组质粒转染JEG-3细胞后对其增殖能力的影响;利用Western Blot技术检验不同方式处理后,JEG-3细胞内蛋白的表达量变化。结果:sh-MALATl明显降低MALATl并提高miR-146a-5p在JEG-3细胞mRNA水平。sh-MALATl抑制JEG-3细胞增殖能力;miR-146a-5p inhibitor促进细胞增殖能力,减弱sh-MALATl产生的影响。同时,sh-MALATl减弱滋养细胞中TRAF6、VEGR、MMP2蛋白的表达,而miR-146a-5p inhibitor可增强其表达,并减弱sh-MALATl的抑制作用。结论:MALATl与miR-146a可相互作用对子痫前期滋养细胞生物学行为产生影响。

环状RNA的成环策略及环状RNA疫苗的研究现状

环状RNA相比于线性mRNA具有合成简单、稳定性高、持续稳定表达等优点,在感染性微生物疫苗、肿瘤疫苗和蛋白替代疗法等领域具有巨大的应用潜力,近年来已经成为核酸药物领域研究的热点。RNA的环化技术是体外合成环状RNA的关键,成环策略对环化效率、免疫原性和蛋白表达量等产生重要影响,制约了环状RNA的基础研究和临床应用。本文系统综述了化学法、酶法和核酶法等几种成环策略,重点分析各成环技术的反应条件、成环工艺、环化效率和免疫原性等。目前,理想的环状RNA成环策略还面临诸多挑战,但是研究证实环状RNA在新型冠状病毒肺炎疫苗、抗肿瘤疫苗等领域比线性mRNA具有更好的稳定性和更强的免疫效应,成为一种极具潜力的新型核酸药物分子,为优化和拓展环状RNA的研究和临床应用提供参考。

伤寒沙门菌核糖核酸酶G对胞内非编码RNA T3956水平的影响

目的:研究伤寒沙门菌核糖核酸酶G(RNase G)对非编码RNA(ncRNA)T3956胞内水平的影响。方法:利用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌RNase G基因(rng)缺陷变异株;利用重组质粒pBAD将rng导入rng缺陷变异株,构建rng缺陷回补株;通过实时定量PCR分别比较伤寒沙门菌野生株、rng缺陷变异株、回补株等在不同生长时期的ncRNA T3956水平。结果:成功制备伤寒沙门菌rng缺陷变异株、rng缺陷回补株和空质粒对照株;实时定量PCR结果表明,rng缺陷株中T3956的胞内水平较野生株有所升高,并且在对数中期和稳态期升高得更加明显,而回补株胞内T3956的水平又得到恢复。结论:伤寒沙门菌RNase G能够参与对胞内ncRNA T3956水平的调控,并且在细菌对数生长中期和稳态期作用更为明显。

核糖核酸酶A家族典型成员在肿瘤发生中的作用

人体中核糖核酸酶A(ribonuclease A,RNaseA)家族包含8个典型成员(RNase 1至RNase 8)。已有研究显示,除RNase 8外,该家族其它典型成员影响了胰腺癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌和皮肤癌等多种肿瘤的发生发展。在肿瘤发生过程中,特定RNase表达量及糖基化修饰会发生显著改变,是肿瘤诊断的潜在标志物;它们能以多种机制参与肿瘤发生、生长和转移等过程,有望成为肿瘤治疗的靶点;而部分成员则具有杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤发展的功能,存在临床开发成肿瘤治疗药物的可能。具体而言,RNase 1通过核糖核酸酶活性依赖的细胞毒性和细胞外RNA降解功能,发挥直接杀伤肿瘤细胞或降低局部炎症而抑制肿瘤生长的作用;RNase 1还能结合并激活促红细胞生成素,产生肝细胞癌受体相互作用蛋白A4 (erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma receptor-interacting protein A4, EphA4)信号通路,促进乳腺癌的发生。RNase 2和RNase 3是嗜酸性粒细胞颗粒蛋白质的重要成分,依赖于阳离子性及核糖核酸酶活性在抗肿瘤免疫防御中发挥重要作用。RNase 4和RNase 5则通过诱导血管生成、加快肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡等方式,促进肿瘤发生发展。其中RNase 5发挥作用的分子机制包括促进47 S前体rRNA转录和激活促肿瘤生长的信号通路,以及产生tRNA衍生的应激诱导的RNA(tRNA-derived stress-induced RNA,tiRNA)等。虽然RNase 6和RNase 7与肿瘤的发生存在相关性,但其具体作用及机制的研究仍较少。本文总结了RNase A家族典型成员与肿瘤的相关性和作用机制,并对其临床应用前景进行了展望,以期为肿瘤治疗药物的开发提供新思路。

mRNA技术在疫苗领域的探索与实践

mRNA疫苗是将编码抗原的mRNA递送到人体细胞内,在细胞内翻译后产生相应的抗原蛋白,从而诱导机体产生有效的免疫反应。与传统疫苗相比,mRNA疫苗安全性好、研发周期短、免疫效力高,可以同时刺激细胞免疫反应和体液免疫反应。随着核苷酸修饰技术和递送技术的发展,mRNA疫苗也迎来了广阔的应用前景。本文对mRNA技术及其在疫苗领域的应用进行综述,以期为正在或即将开展mRNA疫苗研发工作的学者提供理论和实践指导。

结核病mRNA疫苗的研制策略与展望

应对危害全球人类健康的重大传染性疾病——结核病流行的严峻挑战,迫切需要研制出有效的新型结核病疫苗。虽然目前开展了多种类型的新型结核病疫苗的研制,且一些疫苗已进入临床试验研究,但至今仍未能获得可以替代传统卡介苗(BCG)的更为有效的新型疫苗。随着mRNA疫苗研制技术的突破,其研发周期短、高效、安全和生产成本低等优点,使其成为一个非常有前景的疫苗研发新方向。笔者主要就mRNA疫苗的技术原理、优势、制备技术,以及结核病mRNA疫苗的研制策略和现状等方面的研究进展进行综述,以期为结核病mRNA疫苗的研制提供参考。

微小核糖核酸病素(Picornaviruses)与疾病

微小核糖核酸病毒包括一大类最微小的RNA病毒。引起人类疾病的的微小核糖核酸病毒主要有 4属 :肠道病毒 (enteroviruses)、鼻病毒 (rhinoviruses)、嗜肝病毒 (hepatovirus)和标准ECHO病毒 (parechoviruses)。肠道病毒寄居于人体消化道 ,能从咽喉或下部肠道分离到。鼻病毒主要从鼻腔和咽喉分离。微小核糖核酸病毒能引起人类的疾病病种很多 ,累及的器官脏器很多 ,包括麻痹症、无菌性脑膜炎、流行性胸痛、多发性肌炎、心肌炎、呼吸道感染。

mRNA疫苗制备技术在甲型流感病毒疫苗研究中的应用

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)、H1N1和H3N2亚型人流感病毒(Influenza virus,IV)均属于甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)。IAV含有多种亚型,毒株变异快,因此IAV疫苗株需要根据当年的优势毒株进行相应的调整,这给疫苗的研制和生产带来巨大挑战。信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)疫苗制备工艺简单、生产时间短且容易规模化生产,在疾病预防方面具有广阔的应用前景。笔者对mRNA疫苗的种类、优化策略和IAV mRNA疫苗的研究现状进行了综述,旨在为IAV mRNA疫苗的研发提供理论参考。

CAR－bacillus菌亚单位核糖核酸RNA限制性内切酶图谱的研究

利用生物体中编码亚单位核糖核酸ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｓｕｂｕｎｉｔｒｉｂｏｓｏｍａｌ ＲＮＡ，ＳＳＵｒＲＮＡ）的ＤＮＡ序列为引物，经ＰＣＲ法扩增到ＣＡＲ－ｂａｃｉｌｌｕｓ的大约１．５ｋｂ的ＳＳＵｒＲＮＡ序列，采用ＨｉｎｄⅡ、ＨｉｎｆⅠ、ＥｃｏＴ１４，ＨａｅⅢ和ｘｈｏⅠ等５种限制性内切酶进行酶切电泳分析，同时比较了来源于小鼠的ＣＢＭ株及来源于大鼠的ＣＢＲ株，未发现两者有差异。

猪苓多糖乙肝疫苗和核糖核酸联合治疗慢性乙型肝炎78例疗效分析

我们采用猪苓多糖(连云港东风制药厂生产)联合乙肝疫苗(上海生物制品研究所生产)和抗乙肝免疫核酸核酸(沈阳生物制药厂生产)治疗慢性乙型肝炎78例,取得了一定的效果。现报道如下。

抗乙肝免疫核糖核酸联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎疗效观察

将1993年8月～1997年3月门诊和住院确诊的慢性持续性肝炎(CPA)136例,随机分为A、B两组,A组为抗乙肝免疫核糖核酸联合乙肝疫苗及西医保肝治疗(治疗组);B组为聚肌胞联合中成药乙肝解毒胶囊和乙肝扶正胶囊及西医保肝治疗(对照组)。

麻疹疫苗免疫核糖核酸和胸腺素联合治疗慢性活动性乙型肝炎

麻疹疫苗免疫核糖核酸和胸腺素联合治疗慢性活动性乙型肝炎ＭｅａｓｌｅｓｖａｃｃｉｎｅｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＩＲＮＡａｎｄｔｈｙｍｏｓｉｎｆｏｒｃｈｒｏｎｉｃａｃｔｉｖｅｈｅｐａｔｉｔｉｓＢ苗洪庆１９９２年以来，采用麻疹疫苗、免疫核糖核酸、胸腺素联合治...

^3H-RNA示踪法研究大鼠口服核糖核酸后的组织分布

利用3H-RNA示踪法研究了大鼠口服核糖核酸(RNA)制剂(80 mg/kg)后0.5、1.0、4.0和10.0 hRNA代谢产物在其脑、甲状腺、胸腺、心、肺、肝,脾、胃、小肠、结肠、肾、睾丸、子宫、肌肉和皮肤组织中的分布,旨在对核酸类生物制品的深度开发提供依据。结果显示,大鼠口服RNA后,其代谢产物在各器官中均有分布,除在胃和肠中含量很高外,在神经、内分泌和免疫相关组织中含量也较高。在给药后10.0 h时RNA代谢产物在组织中仍有一定含量,这表明RNA已被组织利用。

抗乙肝免疫核糖核酸加乙肝疫苗治疗慢性乙肝疗效观察

本文采用配对观察乙肝免疫核糖核酸，加用乙肝疫苗联合治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。对乙肝病毒复制指标（ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ）、肝功能异常的慢性乙型肝炎１２０例进行分组配对观察。乙肝免疫核糖核酸组，ＨＢｅＡｇ转阴率为６５％，加用乙肝疫苗组转阴率为６７．５％两者无显著性差异（Ｐ＜０．０５），二者ＨＢＶＤＮＡ转阴率为６５．０％和６１．１％，无显著性差异（Ｐ＞０．０５），两者合用未发现有协同作用。但与对照组比较均有显著性差异（Ｐ＞０．０５）。对乙肝病毒携带者病毒复制指标阴转无明显疗效。ｉＲＭＡ为一有效抗病毒制剂，未发现任何明显副作用。

血管生成素:RNA代谢过程中重要的核糖核酸酶

血管生成素是核糖核酸酶A超家族成员之一,具有较弱的核糖核酸酶活性.最新研究发现,血管生成素参与细胞内多种RNA的代谢过程.在生长条件下,血管生成素可以发生核转位聚集于细胞核中,促进rRNA转录,并可参与其剪切加工,同时它也调控一系列mRNA基因的转录,最终促进细胞的生长和增殖;在应激条件下,血管生成素能降解tRNA形成tiRNA,抑制细胞内整体蛋白质的翻译水平,并促进应激小体的形成,激活细胞内应激保护机制,从而促进细胞存活.此外,血管生成素还可参与非编码小RNA等RNA代谢过程.本文概述了血管生成素在RNA代谢中的作用与分子机制等方面的进展,并探讨了其在疾病发生和发展中的作用,以期开拓血管生成素的研究新思路.

抗乙肝免疫核糖核酸加乙肝疫苗治疗慢性乙肝225例疗效观察

225例慢性乙肝病毒感染患者经用抗乙肝免疫核糖核酸加乙肝疫苗3个月结果,总有效率为91.55%。