信使核糖核酸药物递送载体的研究进展

信使核糖核酸(mRNA)作为一类新兴的核酸类药物,在疫苗、免疫治疗、再生医学、基因编辑等方面具有巨大的应用潜力,尤其是2020年全球新型冠状病毒感染疫情极大加速mRNA技术的发展。然而,mRNA带负电,很难进入细胞,且在体内易被先天免疫系统的细胞吞噬或被核酸酶降解,其不稳定性和低递送效率阻碍了广泛应用。因此,需要安全、有效、稳定的递送载体,以保护mRNA不被降解,突破细胞膜障碍,实现细胞内表达。该文系统介绍了基于mRNA药物递送载体的最新研究进展,主要介绍了脂质载体、聚合物载体、多肽载体及病毒载体,并对未来mRNA药物递送载体研究进行展望,以期为mRNA药物递送新载体的研发提供参考。

大青叶对小鼠肝脏CYP2E1酶活性及信使核糖核酸表达的影响

目的：了解大青叶对细胞色素P450 2E1（CYP2E1）酶活性及其信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。方法：以小鼠为研究对象．实验组按每天7．8g·kg^-1·d^-1和0．78g·kg^-1·d^-1大青叶提取液灌胃，对照组给予生理盐水。于3，6，9d后处死，提取肝微粒体．通过测定苯胺羟化酶反映CYP2E1酶活性；运用反转录PCR（RT-PCR）技术检测CYP2E1转录水平。结果：实验组小鼠肝微粒体CYP2E1酶活性增加．于第3天达高峰，诱导率在4．96％～84．27％之间；各组CYP2E1与β-Actin RT-PCR扩增条带像素灰度的比值差异无显著性。结论：大青叶提取液能使小鼠微粒体CYP2E1酶活性增加，但对其转录水平无影响。

良、恶性胸水表达癌胚抗原信使核糖核酸——癌胚抗原系统差别的研究

目的 分析癌胚抗原信使核糖核酸 (CEAmRNA)癌胚抗原 (CEA)系统在良、恶性胸水中表达的差别 ,探讨应用CEAmRNA和CEA指标诊断恶性胸水的价值。方法 采集胸水为检测标本 ,其中恶性胸水 92例、良性胸水5 4例。应用反转录 套式 聚合酶链反应 (RT NP PCR)检测CEAmRNA ,应用磁性抗体分离酶联免疫测定 (MAIA)检测CEA。结果 不同胸水表达CEAmRNA和CEA的阳性结果分别为 :良性 5 .6 % (3/ 5 4 )和 7.4 % (4/ 5 4 )、恶性 80 .4 %(74 / 92 )和 5 4 .3% (5 0 / 92 ) ,两者差别具有统计学意义 (P <0 .0 0 1)。指标诊断恶性胸水的特异性和敏感性分别为 :CEAmRNA 94 .4 %和 80 .4 % ,CEA分别为 92 .6 %和 5 4 .3% ,CEAmRNA的敏感性明显高于CEA(P <0 .0 1)。结论 CEAmRNA CEA系统在良、恶性胸水中的表达的差别具有统计学意义 ,可以用作诊断与鉴别诊断恶性胸水的指标。其中 ,CEAmRNA在恶性胸水中的表达率和敏感性比CEA更高 ,有望成为一个新的。

癌胚抗原信使核糖核酸在不同类型肺癌组织中的表达

目的 比较不同类型肺癌组织表达癌胚抗原信使核糖核酸 (CEAmRNA)的差别 ,评估检测组织标本CEAmRNA指标在诊断与鉴别诊断肺癌方面的应用价值。方法 选取肺癌组织为研究对象 ,非癌性疾病的肺病变组织为对照 ,应用反转录套式聚合酶链反应 (RT NP PCR)技术检测CEAmRNA。结果 肺癌组总体表达CEAmRNA的阳性结果为 6 6 / 76 (86 .8% ) ,其中 ,不同类型肺癌组织表达CEAmRNA的阳性结果分别为 :腺癌 2 2 / 2 5 (88.0 % )、鳞癌 19/ 2 2 (90 .5 % )、腺鳞癌 8/ 8(10 0 % )、小细胞癌 10 / 12 (83.3% )、大细胞未分化癌 7/ 9(77.8% )。对照组织有 2例阳性发现 (8.0 % )。结论 各类肺癌组织表达CEAmR NA的结果明显高于非肺癌组织 (P <0 .0 0 1) ,检测肺组织标本CEAmRNA指标对诊断肺癌具有较高的应用价值 (特异性为92 .0 %、敏感性为 86 .8% )。

检测组织标本癌胚抗原信使核糖核酸指标诊断肺癌

目的 探讨检测癌胚抗原信使核糖核酸 (CEA mRNA)在肺癌诊断与鉴别诊断中的应用价值。方法 应用反转录套式聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 3 2例肺癌组织和 1 1例肺良性疾病肺组织标本中的CEA mRNA表达水平。结果 3 2例肺癌组织中CEA mRNA阳性者 2 7例 (84.4% ) ,而对照组 1 1例均为阴性。检测CEA mRNA诊断肺癌的特异性为 1 0 0 % ,敏感性为 84.4%。结论 采用RT PCR技术检测肺癌组织中CEA mRNA有助于肺癌的诊断与鉴别诊断 。

应用荧光标记信使核糖核酸差异显示技术分离子宫肌瘤相关基因片段

目的:应用荧光标记的信使核糖核酸(messengerribonucleicacid,mRNA)差异显示技术分离子宫肌瘤及正常子宫肌组织相关的差异基因片段。方法:用4种锚定引物和3种随机引物,共12种组合,结合GenomyxLRTMDNA差异显示系统及GenomyxSCTM荧光图像扫描系统,以及配套的FluoroDDandHI-EROGLYPHmRNAProfile试剂盒,采用荧光标记的mRNA差异显示技术进行子宫肌瘤及正常子宫肌组织相关差异基因片段的分离。结果:从子宫肌瘤及正常子宫肌组织间分离出相关的差异基因片段27条,差异片段中主要表现为条带密度的强弱差别。结论:子宫肌瘤的产生可能与某些基因表达的差异有关,而差异基因的序列及功能有待进一步研究。

心力衰竭患者外周血淋巴细胞与心肌组织中钙调神经磷酸酶信使核糖核酸水平相关性研究的初步报告

目的:研究心力衰竭患者外周血淋巴细胞与心肌组织中钙调神经磷酸酶(CaN)信使核糖核酸(mRNA)的相关性。方法:选择2007-01至2007-08因二尖瓣狭窄伴关闭不全接受二尖瓣替换术的心力衰竭患者38例(心功能Ⅱ级11例、Ⅲ级15例、Ⅳ级12例),正常对照12例,彩色多普勒超声心动图测量心功能参数。取静脉血和少量左心室前乳头肌,分离静脉血淋巴细胞后,提取淋巴细胞及乳头肌组织的总RNA,用半定量逆转录多聚酶链反应技术分别测定CaN A亚基α、β异构体(CnAα和CnAβ)mRNA在两者中的水平。结果:38例慢性心力衰竭患者外周血淋巴细胞和心肌组织中的CnAαmRNA水平呈正相关r=0.820,P<0.01;CnAβmRNA水平呈正相关r=0.875,P<0.01。心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者外周血淋巴细胞和心肌组织的CnAα和CnAβmRNA水平较正常对照者升高,差异有统计学意义(P<0.05～0.01),且随心力衰竭级别增加,CnAβmRNA增加更显著,差异有统计学意义(P<0.01)。外周血淋巴细胞CnAβmRNA水平和心功能级别呈正相关r=0.877,P<0.01;心肌组织CnAβmRNA水平和心功能级别呈正相关r=0.805,P<0.01。结论:外周血淋巴细胞CaNA mRNA水平可以反映心肌组织中的CaNA mRNA水平。

甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌

目的:探讨联合检测血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)异质体(AFP-L3)和甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)诊断肝细胞癌及评估肝癌预后的价值。方法:对2005年4月—2005年7月收治的82例肝细胞癌(HCC)、11例慢性乙型肝炎肝硬化合并门脉高压和19例肝脏良性肿瘤患者,应用酶联吸附法及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)联合检测AFP-L3和AFPmRNA水平,对比其阳性率。结果:AFP-L3和AFPmRNA联合检测阳性率可达87.6%,较单独检测AFP、AFP-L3、AFP-mRNA的阳性率(分别为69.5%、81.7%、36.6%)高,差异有统计学意义;术前、术后联合检测AFP-L3和AFPmRNA均阳性患者的术后3年生存率较低。结论:术前联合检测APF-L3和AFPmRNA可提高HCC,尤其是AFP阴性HCC的诊断率,而术后联合检测对评估HCC的预后有一定的指导意义。

甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌

目的:探讨联合检测2种血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)异质体(AFP-L3)和甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)诊断肝细胞癌价值及评估肝癌预后的意义。方法:对2005年4-7月收治的82例肝细胞癌(HCC)、11例慢性乙型肝炎肝硬化合并门脉高压和19例肝脏良性肿瘤患者应用酶联吸附法及荧光定量PCR联合检测AFP-L3和AFPmRNA水平,对比其阳性率;并对术后1个月的肝癌患者检测AFP-L3和AFPmRNA水平,统计作出生存曲线。结果:术前不同肿瘤指标的检测结果:AFP-L3联合AFPmRNA检测阳性率为64.3%,明显高于AFP、AFP-mRNA单独检测的阳性率(50.9%、40.2%),差异均有统计学意义(P<0.05);术前、术后AFP-L3联合AFPmRNA检测均阳性的患者术后3年生存率较低。结论:术前联合检测APF-L3和AFPmRNA两项指标可提高HCC、尤其是AFP阴性HCC的诊断率,而术后联合检测又对评估HCC的预后有一定的指导意义。

肾移植受者巨细胞病毒即刻早期信使核糖核酸检测及其临床意义

目的:探讨肾移植术后巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的早期、快速、准确的诊断方法。方法:应用核酸基础序列扩增法(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)检测55例肾移植术后受者外周血CMV的即刻早期信使核糖核酸(immediate early messenger ribonucleic acid,IEmRNA),同时检测CMV的PP65抗原,并比较其结果。结果:55例中29例抗原指数阳性,发生CMV病10例,未发生CMV病19例,发生CMV病组与未发生CMV病组比较,其抗原指数值差异有统计学意义(P<0.01)。IEmRNA阳性20例,IEmRNA阳性者的CMV抗原指数值显著高于IEmRNA阴性者,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后首次检测到IEmRNA的时间显著早于首次检出PP65抗原的时间(P<0.05),经抗病毒治疗后两者转阴时间无差异。结论:应用NASBA检测IEmRNA能早期诊断CMV活动性感染,对肾移植术后抗CMV治疗具有指导意义。

应用信使核糖核酸差异显示研究中医肝阳上亢、肝阳化风证的基因表达

为探讨肝阳上亢、肝阳化风两证的分子机理，应用信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）差异显示技术，研究了两证患者与正常受试者的基因表达情况。结果显示：使用１５种不同的引物组合，聚丙烯酰胺凝胶电泳，放射自显影后，有２８条区带呈现不同的表达。其中，肝阳上亢患者与正常受试者之间有１４条区带表现不同的表达，肝阳化风患者与正常受试者之间有１１条区带表达具有差异，而肝阳上亢患者与肝阳化风患者有６条区带表现不同的基因表达。在肝阳上亢患者、肝阳化风患者与正常受试者之间，大部分不同表达的基因其表达为降低。这些结果初步表明，肝阳上亢患者、肝阳化风患者与正常受试者之间存在基因表达的改变；肝阳上亢患者与肝阳化风患者之间也存在基因表达的差别。

大肠癌患者外周血细胞角蛋白-20信使核糖核酸与白细胞介素-10联合检测的临床意义

目的 联合检测大肠癌患者外周血细胞角蛋白 - 2 0信使核糖核酸 (CK - 2 0mRNA)与血浆中白细胞介素 - 1 0 (IL - 1 0 ) ,并评价其临床意义。方法 应用RT -PCR检测大肠癌患者外周血CK - 2 0mRNA ;应用ELISA检测其血浆IL - 1 0浓度。结果 对照组2 5例健康查体者 ,其外周血中未见CK - 2 0mRNA的表达 ;观察组 46例大肠癌患者 ,2 5例外周血中CK - 2 0mRNA表达阳性。大肠癌患者外周血CK - 2 0mRNA的表达与Dukes分期关系为 :A期 2 0 .0 % (1 / 5)、B期 2 7.3 % (3/ 1 1 )、C期 61 .1 % (1 1 / 1 8)、D期 83 .3(1 0 /1 2 ) ;其中C、D期与A、B期比较差异有高度显著性 (P <0 .0 1 )。大肠癌患者血浆IL - 1 0浓度明显高于健康查体者 ,且与Dukes分期显著相关。外周血CK - 2 0mRNA阳性表达的大肠癌患者血浆IL - 1 0水平高于阴性者。结论 联合检测大肠癌患者外周血CK -2 0mRNA与IL - 1 0 ,掌握检测大肠癌转移的相关指标 ,可以及时全面地了解大肠癌患者病情进展情况。

检测癌胚抗原信使核糖核酸指标诊断恶性胸水

目的：分析恶性胸水和良性胸水标本检测癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA)结果的差异，探讨检测胸水标本CEAmRNA指标鉴别诊断恶性胸水的应用价值。方法：采集胸水为检测标本，其中恶性胸水44份、良性胸水34份。应用反转录-套式-聚合酶链反应（RT-NP-PCR）技术检测CEAmRNA。结果：CEAmRNA的阳性检测率分别为：恶性胸水79.5%（35/44）、良性胸水5.9%(2/34)，两者结果的差别有显著性（X^2test,P<0.001)。CEAmRNA指标的特异性为94.1%，敏感性为79.5%。结论：在诊断和鉴别诊断恶性胸水方面，CEAmRNA是一个特异性和敏感性较好的实用指标，具有应用价值。

癌胚抗原信使核糖核酸诊断大肠癌血液转移的价值

为了解检测外周血液癌胚抗原信使核糖核酸(CEA mRNA)在诊断大肠癌血液转移方面的应用价值,应用逆转录-套式-聚合酶链反应技术(RT-NP-PCR)检测血液标本CEA mRNA。结果显示,大肠癌组CEA mRNA的阳性率(68.6%)显著高于对照组(2.2%)(P<0.01)。检测CEA mRNA诊断大肠癌血液转移的特异性为97.8%,灵敏度为68.6%,准确度为83.4%。检测血液中CEA mRNA有助于诊断大肠癌血液转移。

甲胎蛋白信使核糖核酸与原发性肝癌(文献综述)

如何预测或预防肝癌的复发转移是当前的研究热点。目前应用 RT- PCR技术来检测肝癌患者特异性的甲胎蛋白信使核糖核酸 (AFP m RNA) ,该技术对肝细胞癌微小转移、复发的早期发现。

良恶性腹水表达癌胚抗原信使核糖核酸的差别

目的:分析良、恶性腹水表达癌胚抗原信使核糖核酸(CEA mRNA)的差别,探讨应用CEA mRNA诊断与鉴别诊断恶性腹水的价值。方法:应用反转录-套式-聚合酶链反应技术检测58例良性腹水和103例恶性腹水CEA mRNA的表达。结果:恶性腹水组CEA mRNA的表达率明显高于良性腹水组(P<0.01);CEA mRNA诊断恶性腹水的特异性为93.1%、敏感性为84.5%、诊断效率(准确率)为87.6%。结论:恶性腹水CEA mRNA的表达阳性率明显高于良性腹水,CEA mRNA具有良好的诊断与鉴别诊断恶性腹水的作用。

癌胚抗原信使核糖核酸与肿瘤关系研究进展

癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)是指导合成CEA的模版,在肿瘤时呈现高度活跃表达状态,但CEAmRNA的表达与CEA的分泌并不一致,表现为细胞内CEAmRNA的表达量明显高于体液内CEA的分泌量。这种肿瘤细胞特有的表达CEAmRNA情况,是CEAmRNA作为肿瘤标志物的基础。近年来,CEAmRNA作为监测肿瘤发生、早期发现肿瘤、早期发现肿瘤微转移、评判治疗肿瘤疗效等的一个新指标。

甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)的检测方法及其临床意义

目的 探讨AFPmRNA对诊断原发性肝癌的意义 ,并评估原发性肝癌的临床分期 ,预测转移倾向、预后和复发以及治疗。方法 建立并改进巢式逆转录多聚酶链反应 (nestedRT -PCR)检测外周静脉血肝癌细胞。结果 nestedRT -PCR在 1ml血中含有≥ 5个肝癌细胞时即可检测到AFPmRNA。 2 2例原发性肝癌中 18例血液标本检测到AFPmRNA ,而对照组中均未检测到AFPmRNA。AFPmRNA的检出率与肝癌分期 (TNM )、血清AFP浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显联系 (P <0 .0 1)。结论 nestedRT -PCR是一个稳定而又敏感的检测方法 ,AFPmRNA可作为定性诊断原发性肝癌的血液学指标 ,也可作为肝癌细胞转移的标志 ,并可判断肝癌临床分期、转移倾向。

鱼油对大鼠腹腔感染早期肝脏肿瘤坏死因子信使核糖核酸表达的影响

鱼油具有抗炎效应，能抑制肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的产生与分泌。本实验通过给大鼠口服鱼油，并用反义差别ＰＣＲ方法来检测腹腔感染早期肝组织ＴＮＦｍＲＮＡ表达水平的变化。结果提示，鱼油饮食后腹腔感染大鼠各时相点内血浆ＴＮＦ水平及肝脏ＴＮＦｍＲＮＡ表达量均显著...