^3H-RNA示踪法研究大鼠口服核糖核酸后的组织分布

利用3H-RNA示踪法研究了大鼠口服核糖核酸(RNA)制剂(80 mg/kg)后0.5、1.0、4.0和10.0 hRNA代谢产物在其脑、甲状腺、胸腺、心、肺、肝,脾、胃、小肠、结肠、肾、睾丸、子宫、肌肉和皮肤组织中的分布,旨在对核酸类生物制品的深度开发提供依据。结果显示,大鼠口服RNA后,其代谢产物在各器官中均有分布,除在胃和肠中含量很高外,在神经、内分泌和免疫相关组织中含量也较高。在给药后10.0 h时RNA代谢产物在组织中仍有一定含量,这表明RNA已被组织利用。

浓盐法提取啤酒酵母中核糖核酸的工艺参数研究

以啤酒酵母为原料,通过浓盐法进行了核糖核酸(RNA)提取的研究,对影响RNA提取率的因素,如提取温度、提取时间、加盐量及酵母质量浓度进行了考察,获得了最大提取率的条件：提取温度95℃,提取时间为60min,氯化钠的加入量为10%,酵母质量分数为10%。正交实验表明,加盐量为反应过程的显著影响因素。在上述条件下,90g湿酵母(相当于20g干酵母)能够提取1g RNA,A260/ A280是1．983。对RNA粗品进行精制,得到固体白色粉末。

肝纤维化时肝组织核糖核酸和羟脯氨酸含量的动态观察

为测定肝纤维化时肝组织ＲＮＡ和ＨＹＰ含量的动态改变，７２只家兔随机分为正常组、病理组。于感染血吸虫尾蚴后第７０、１００、１３０、１６０、１９０、２２０天，每组随机选６只作肝组织ＲＮＡ和ＨＹＰ含量测定。结果正常组各阶段间ＲＮＡ和ＨＹＰ含量均无显著性差异（Ｐ＞０．０５），病理组肝ＲＮＡ含量随着病程延长而减少，肝ＨＹＰ和肝胶原纤维分布面积佰分比随着病程延长而增加，肝ＲＮＡ含量与肝ＨＹＰ含量、肝胶原纤维分布面积百分比均呈反比。

白地霉提取核糖核酸的研究

采用正交设计试验等方法,研究了从白地霉(Geotrichum Candidum)中提取核糖核酸的适宜条件为提取温度为60℃,抽提时间为60 min,NH3.H2O浓度为1.5%,SDS浓度为3%,NaCl浓度为4%,核糖核酸粗品得率为84.2%,纯度为89.7%。

降低lncRNA-RMRP表达抑制人肺癌细胞系A549的增殖和侵袭

目的探讨抑制线粒体RNA加工核糖核酸内切酶RNA组分(RMRP)表达对人肺癌细胞系A549增殖和侵袭的影响;检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者全血和组织中RMRP表达,比较在不同临床指标表达差异性,以期为NSCLC机制研究提供参考资料。方法收集2016年3月至2021年3年在焦作市人民医院行手术治疗的NSCLC患者122例,同期,在体检中心选取健康者50名作为对照组。RT-qPCR检测全血和组织中RMRP mRNA水平。培养A549细胞分为si-RMRP组、siRNA-NC组和空白组(blank组)。RT-qPCR、CCK-8法和Transwell小室法分别检测细胞中RMRP表达、增殖活性和侵袭细胞数。结果NSCLC患者全血中RMRP相对表达量显著高于对照组(P<0.001);NSCLC组织中RMRP相对表达量高于癌旁组织(P<0.001);低分化、淋巴结转移和TNM分期Ⅲ的NSCLC患者全血和组织中RMRP相对表达量较高分化、未发生淋巴结转化和TNM分期Ⅰ~Ⅱ明显升高(P<0.05);Si-RMRP组细胞中RMRP相对表达量低于空白组(blank组)和siRNA-NC组(P<0.001);相比与blank组和siRNA-NC组,24、48、72和96 h时si-RMRP组细胞吸光度(A)值均降低(P<0.05);Si-RMRP组细胞侵袭数低于blank组和siRNA-NC组(P<0.001)。结论NSCLC患者全血和组织中RMRP相对表达量升高,下调A549细胞中RMRP基因表达可抑制细胞增殖,减少细胞侵袭。

妊娠期糖尿病患者血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平表达对妊娠结局预测价值研究

目的 探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清长链非编码核糖核酸分化拮抗非蛋白编码RNA (long noncoding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,LncRNA DANCR)、微小RNA-33a-5p (miR-33a-5p)水平表达对妊娠结局的预测价值。方法 选取2021年8月~2023年2月于衡水市第四人民医院产检和分娩的154例GDM患者为GDM组,并根据妊娠结局分为良好结局组(n=115)和不良结局组(n=39);同期收集24周葡萄糖耐量试验正常的149例健康孕产妇作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p预测GDM患者不良妊娠结局的价值;采用Pearson相关性分析GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR,miR-33a-5p与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;Logistic回归分析GDM患者不良妊娠结局的影响因素。结果 GDM组血清LncRNA DANCR水平(0.69±0.15)显著低于对照组(1.01±0.22),miR-33a-5p (1.59±0.40)及不良妊娠结局总发生率(25.34%)显著高于对照组(1.02±0.23,5.36%),差异具有统计学意义(t/χ^(2)=14.835,15.140,23.011,均P<0.05)。不良妊娠结局组血清LncRNADANCR水平(0.50±0.14)显著低于良好结局组(0.75±0.18),miR-33a-5p (2.00±0.58),FBG (8.97±0.66mmol/L),FINS (18.63±1.31pmol/ml)和HOMAIR (7.42±0.98)显著高于良好结局组(1.45±0.26,8.01±0.59mmol/L,14.32±1.29pmol/ml,5.10±0.86),差异具有统计学意义(t=7.895~17.961,均P<0.05)。LncRNA DANCR,miR-33a-5p单独及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.820,0.819和0.897。GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR与FBG,FINS,HOMA-IR呈负相关(r=-0.498,-0.513,-0.509,均P<0.05),miR-33a-5p与FBG,FINS,HOMA-IR呈正相关(r=0.517,0.494,0.507,均P<0.05)。LncRNA DANCR是影响GDM患者不良妊娠结局的保护因素(OR=0.804,95%CI:0.693~0.933,P=0.004),miR-33a-5p是影响GDM患者不良妊娠结局的危险因素(OR=2.747,95%CI:1.444~5.225,P=0.002)。结论 GDM不良妊娠结局患者LncRNADANCR降低,miR-33a-5p升高,二者均是不良妊娠结局的影响因素。

注射用核糖核酸Ⅱ对消化道肿瘤的临床疗效观察

目的观察注射用核糖核酸II(以下简称:核II)对晚期消化道肿瘤患者的疗效和安全性。方法 80例晚期消化道肿瘤患者单盲随机分为核II组和对照组,对照组采用单纯化疗方案,核II组于化疗同时静脉滴注核II 200 mg/d,连续45 d(一个疗程)后检测患者T细胞亚群的变化、外周白细胞变化、毒副不良反应发生率、并通过Karnofsky评分评价患者的生活质量。结果①核II组化疗后CD3、CD4、CD56的阳性率明显高于对照组(P<0.05)。②核II组化疗后的白细胞下降程度、不良反应II度发生比例均明显低于对照组(P<0.05)。③核II组化疗后Karnofsky评分升高比例57.5%明显高于对照组42.5%。结论①核II可刺激T细胞成熟和分化,显著提高机体免疫功能。②核II可减少化疗过程中患者白细胞的下降、毒副反应的发生。③化疗联合核II可以有效改善患者生活质量。

微小核糖核酸芯片技术在难治性癫癎患者脑组织中表达谱

目的：采用微小核糖核酸（miRNA）芯片技术筛选出在难治性癫癎患者脑组织中表达有显著差异者，探讨其在难治性癫癎发病中的作用及意义。方法：应用miRNA芯片技术获得6例难治性癫癎患者及4例对照组脑组织中表达有差异的miRNA，筛选出倍数变化（F／C）〉1．5且经t检验P〈0．05并对表达有差异的miRNA进行聚类分析。结果：筛选出表达有显著差异的miRNA基因13条，其中上调基因11条，分别是miR-10a、miR-374c、miR-376a、miR-425、miR-9、miR-224、hsa—miR-26a、let-7c、let-7a、miR-23c及miR-378c，下调基因2条，分别是miR-576—5p及miR-199b-5p。结论：建立了难治性癫癎患者脑组织和非癫癎患者脑组织表达中有差异的miRNA谱，并获得表达显著上调基因11条，显著下调2条，为进一步研究难治性癫癎提供了相关依据。

核糖核酸在提高晚期肺癌患者免疫力、改善生存质量中的临床效果

目的分析核糖核酸在提高晚期肺癌患者免疫力、改善生存质量中的效果。方法收集2013年2月至2017年6月进入我院的晚期肺癌患者63例作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(n=30)和治疗组(n=33)。对照组给予最佳支持治疗,治疗组在对照组基础上给予核糖核酸治疗,比较两组治疗前、后免疫功能情况和生存质量。结果治疗前,两组CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组的CD3^+比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组的CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者Barthel指数评分均升高,且治疗组高于对照组(P<0.05)。结论采用核糖核酸用于晚期肺癌患者,可有效改善患者免疫力,提高其生存质量。

LncRNA ZEB2-AS1调控miR-574-3p/ZEB1轴对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p和锌指E盒结合蛋白(ZEB)1的水平。取对数生长期的SW626细胞,分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-ZEB2-AS1组、si-NC组、si-ZEB2-AS1组、si-ZEB2-AS1+inhibitor-NC组、si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western印迹检测细胞ZEB1和迁移、侵袭相关蛋白的表达;双荧光素酶报告基因检测验证ZEB1与miR-574-3p的靶向关系。结果与正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC相比,人卵巢癌SKOV3、SW626、A2780细胞中ZEB2-AS1、ZEB1水平明显升高,miR-574-3p水平明显降低(P<0.05),且SW626细胞中ZEB2-AS1表达水平最高。转染后,与对照组相比,pcDNA3.1-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(VIM)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);si-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显降低,E-cadherin表达明显增加(P<0.05)。与si-ZEB2-AS1组相比,si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05)。双荧光素酶结果显示,高表达miR-574-3p可明显抑制ZEB1 WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论在卵巢癌中,LncRNA ZEB2-AS1过表达可能通过下调miR-574-3p,上调ZEB1的表达,进而诱导上皮-间质转化(EMT),促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭。

LncRNANNT-AS1通过调控miR-582-5p/NCKAP1轴激活Hippo-YAP/TAZ信号通路促进膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞干性影响

目的检测膀胱癌中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase antisense RNA 1,NNT-AS1)表达情况,研究其对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响及可能分子机制。方法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测膀胱癌组织标本及细胞中LncRNA NNT-AS1表达情况;将膀胱癌细胞转染分为sh-NC组,sh-NNT-AS1组,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组和sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组。采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度值(A值);Transwell实验检测细胞迁移、侵袭穿膜数;细胞成球实验检测干细胞干性。检索starBase和TargetScan数据库,并通过双荧光素酶报告基因实验预测验证LncRNA NNT-AS1和miR-582-5p,miR-582-5p与NCKAP1的靶向结合关系。Western blot检测膀胱癌干细胞标志蛋白(CD44,ALDH1A1,Oct4,Nanog)及Hippo-YAP/TAZ信号通路相关蛋白表达灰度值。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LncRNA NNT-AS1表达水平(0.34±0.07 vs 1.15±0.21)明显升高,差异有统计学意义(t=16.364,P<0.001)。与人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞(1.00±0.01)相比,膀胱癌细胞T24,5637,UM-UC-3和TCC-SUP中LncRNA NNT-AS1表达(6.03±0.17,4.66±0.36,5.47±0.26,3.02±0.20)明显升高,差异有统计学意义(t=17.472~51.160,均P<0.001)。与sh-NC组相比,在24,48和72 h时sh-NNT-AS1组细胞增值能力(A值)均显著降低(0.80±0.01 vs 1.07±0.06,1.18±0..07 vs 1.83±0.03,1.89±0.07 vs 2.53±0.06),差异有统计学意义(t=7.688,14.783,12.024,均P<0.05);sh-NNT-AS1组细胞迁移穿膜数(55.00±2.65个vs 354.30±7.84个)、细胞侵袭穿膜数(45.67±2.33个vs 303.00±9.07个)及膀胱癌干细胞成球数(20.85±2.17个vs 41.35±3.67个)显著降低,差异具有统计学意义(t=-62.641,-47.596,8.328,均P<0.001)。与sh-NC组相比,sh-NNT-AS1组细胞中CD44(0.04±0.01 vs 1.12±0.02),ALDH1A1(0.23±0.01 vs 1.16±0.05),Oct4(0.17±0.02 vs 1.10±0.04),Nanog(0.49±0.03 vs 1.24±0.03)的蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=83.656,31.591,36.019,30.619,均P<0.001)。与si-NC组相比,sh-NNT-AS1组CD44+CD133+细胞比例(9.30%±0.79%vs 88.50%±2.77%)明显降低,差异有统计学意义(t=-47.624,P<0.001)。双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-582-5p为LncRNANNT-AS1靶基因,NCKAP1为miR-582-5p靶基因;LncRNA NNT-AS1靶向调控miR-582-5p/NCKAP1轴。与sh-NNT-AS1组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞增值能力(A值)均明显升高(0.98±0.03 vs 0.73±0.06,1.74±0.04 vs 1.22±0.05,2.33±0.16 vs 1.69±0.14),差异有统计学意义(t=5.977~11.628,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞增值能力(A值)显著降低(0.69±0.04,1.01±0.07,1.39±0.08),差异有统计学意义(t=7.877~16.323,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞迁移穿膜数(322.31±28.45个vs 81.42±13.22个)、细胞侵袭穿膜数(316.07±30.21个vs 92.13±12.65个)及膀胱癌干细胞成球数(38.55±2.20个vs 18.98±1.16个)显著增加,差异具有统计学意义(t=15.115,13.158,14.592,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞CD44(1.05±0.08 vs 0.10±0.01),ALDH1A1(1.20±0.16 vs 0.22±0.02),Oct4(1.32±0.14 vs 0.19±0.03),Nanog(0.97±0.12 vs 0.15±0.04),YAP(1.29±0.11 vs 0.42±0.07)和TAZ(1.41±0.16 vs 0.35±0.05)蛋白表达灰度值均显著增加,差异具有统计学意义(t=10.650~21.243,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞迁移穿膜数(65.33±12.60个)、细胞侵袭穿膜数(71.08±15.19个)、膀胱癌干细胞成球数(11.36±1.05个)均显著降低,差异具有统计学意义(t=16.125,14.395,21.365,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞CD44(0.25±0.05),ALDH1A1(0.61±0.11),Oct4(0.22±0.08),Nanog(0.44±0.07),YAP(0.25±0.09)和TAZ(0.30±0.04)蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=6.412~17.889,均P<0.001)。结论膀胱癌中LncRNA NNT-AS1表达上调,其对膀胱癌细胞增殖、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响,可能是通过调控miR-582-5p/NCKAP1分子轴,激活Hippo-YAP/TAZ信号通路完成。

单磷酸阿糖腺苷对RNA病毒抑制的研究进展

阿糖腺苷化学名为9-（β？D-呋哺阿拉伯糖腺嘌呤）,是一种天然抗病毒化合物。最早通过化学全合成制备[1-2],后来逐步利用生物合成法合成。临床使用的是其单磷酸盐。本文综合了近年来国内有关单磷酸阿糖腺苷（Ara-Amp）用于部分RNA病毒治疗方面的研究,以期为Ara-Amp临床使用提供依据。

补肾方剂对胎鼠DNA、RNA影响的实验研究

目的:通过胚胎期给药,研究补肾方剂对胎儿宫内发育迟缓(IUGR)模型胎鼠肝细胞脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)含量的影响,探讨中医肾理论与现代分子遗传学的关系。方法:将孕鼠随机分为正常对照组、IUGR模型组、左归丸组、右归丸组、五子衍宗丸组、四君子汤组、四物汤组、八珍汤组。除正常对照组外,其余各组于受孕8天用酒精灌胃造模。各治疗组分别在造模同时予左归丸、右归丸、五子衍宗丸、四君子汤、四物汤、八珍汤灌胃,并检测各组胎鼠肝细胞DNA和RNA含量。结果:8组间DNA含量无明显差异。IUGR模型组RNA含量较正常对照组显著降低(P<0.05);胚胎发育期予五子衍宗丸和右归丸可显著提高宫内发育迟缓胎鼠肝细胞RNA含量(P<0.05)。结论:DNA、RNA可能是中医先天肾精的物质基础之一,推测补肾方剂对RNA的影响与肾的阴阳有关。

改进的免疫粒子群优化算法预测RNA二级结构

针对RNA二级结构预测问题,在SetPSO算法的基础上提出了一种改进的免疫粒子群优化算法,根据RNA折叠的特点,启用免疫记忆算子增加粒子群多样性,有效防止了原方法易陷入局部最优的缺陷。仿真结果表明改进算法能在更短的时间内达到更高的预测精度。

血浆长链非编码RNA核糖核酸酶PRNA成分H1表达与急性淋巴细胞白血病患儿免疫表型的相关性分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血浆长链非编码RNA(LncRNA)核糖核酸酶P RNA成分H1(RPPH1)表达水平,分析其与ALL患儿免疫表型的相关性。方法收集该院2017年12月—2019年12月89例ALL患儿为研究对象(观察组),同时期90例健康体检儿童作为对照(对照组)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血浆中LncRNA RPPH1水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;流式细胞术(FCM)检测骨髓中免疫表型。分析血浆中LncRNA RPPH1、免疫表型与TNF-α的关系及LncRNA RPPH1水平与免疫表型关系。结果与健康对照组相比[(1.00±0.25),(0.96±0.23)ng/ml],观察组血浆中LncRNA RPPH1(2.15±0.69)、TNF-α[(1.83±0.45)ng/ml]水平升高(P<0.05)。ALL患儿危险度结果:低危型27例、中危型18例及高危型44例。与低危型相比,中危型血浆中TNF-α、高危型血浆中LncRNA RPPH1、TNF-α水平,骨髓中CD34、HLA-DR、CD5及CD19阳性率升高(P<0.05),CD79a阳性率降低(P<0.05)。与中危型相比,高危型患儿血浆中LncRNA RPPH1、TNF-α水平,HLA-DR阳性率升高(P<0.05)。ALL患儿血浆中LncRNA RPPH1、骨髓中CD34、HLA-DR、CD19及CD79a与血浆中TNF-α,LncRNA RPPH1与HLA-DR、CD19关系密切(P<0.05)。结论ALL患儿血浆中LncRNA RPPH1高表达,与免疫表型HLA-DR、CD19关系密切,且与临床危险度、炎症细胞因子关系密切,临床上应该受到重视。

核酸疫苗研发态势与发展建议

应对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情防控的迫切需求,核酸疫苗以其快速高效的优点得到了疫苗研发领域的高度重视,特别是信使核糖核酸(mRNA)疫苗的研发进程显著加快,首次获批上市并在人体中使用。本文从核酸疫苗及相关技术概念、研发轨迹与发展趋势等方面总结梳理核酸疫苗的研发态势,辨识核酸疫苗特征,分析COVID-19疫情对mRNA疫苗研究的促进作用,梳理核酸疫苗拓展应用的主要领域,针对可能存在的技术性、安全性问题开展深入讨论。研究建议,从改良目的基因表达、完善递送系统、提高免疫应答、增强mRNA稳定性及易存性等方面着手,着力开展核酸疫苗的关键技术开发;严格监管核酸疫苗的安全性和有效性;引导利益相关方对具有安全性风险、可能对肿瘤与传染病防控带来颠覆性影响的mRNA疫苗技术开展改进研究,注重技术研发的前瞻布局并促进应用转化。

霉菌实时荧光核酸恒温扩增检测技术研究

以霉菌几丁质合酶Ⅲ保守序列作为靶序列设计引物,合成分子信标探针;以黑曲霉菌ATCC(16404)DNA为模板,通过PCR、分子克隆、转录构建靶标RNA,进而建立实时荧光核酸恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT),并对体系内相应成分进行优化;最后利用优化的SAT体系检测食品污染中常见的病原微生物,评价SAT方法的特异性;针对不同浓度的黑曲霉菌孢子悬液,提取RNA进行SAT检测,评价SAT方法的灵敏性。结果表明,SAT检测体系中引物浓度为10μmol·L^-1及探针浓度为10μmol·L^-1时,反应曲线最佳;扩增过程中累计荧光量达到设定的荧光阈值所需循环数与培养的黑曲霉菌孢子量的对数存在线性相关关系(y=-7.061x+59.567,R^2=0.961 1),该方法的灵敏度为10^3个·mL^-1孢子,用该方法检测食品中常见污染菌,发现仅黑曲霉菌出现荧光信号。初步建立了黑曲霉菌的SAT检测体系,可与食品常见污染细菌相鉴别,特异性达100%,进一步提高灵敏度后,可成为食品中黑曲霉菌检测的新方法。

RNA相关的低剂量辐射响应标志物

电离辐射会对人体造成损伤,根据受照剂量、时间等因素的不同可诱发多种生物效应。目前对于低剂量辐射产生的健康效应仍有争议,筛选对低剂量敏感的辐射响应生物标志物,对于完善低剂量辐射生物效应机制、拓宽低剂量辐射在临床中的应用均具有重要理论意义。综述探讨各核糖核酸(RNA)在低剂量辐射反应中的变化及其对辐射敏感性的调节作用,同时评估各RNA作为低剂量辐射响应标志物的潜力。

lncRNA MIR31HG对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制研究

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR31HG对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法选取2018年8月—2019年4月在湖南省中医药大学第一附属医院行甲状腺癌根治术的48例患者的新鲜癌组织及癌旁组织标本,男女各24例。利用TCGA数据库验证lncRNA MIR31HG在甲状腺癌组织与癌旁组织中的表达,患者术后病理报告确诊为PTC,提取样本RNA行qRT-PCR验证lncRNA MIR31HG在PTC组织与癌旁组织中表达情况及与患者临床病理特征的相关性;利用lncRNA MIR31HG的小干扰RNA转染PTC细胞系TPC-1并验证抑制率,保证抑制率>60%,MTT检测TPC-1细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力,Western blotting检测Akt信号通路关键蛋白分子Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、PTEN的表达。结果宫颈鳞状细胞癌、乳头状肾细胞癌、头颈部鳞癌、胰腺癌及甲状腺癌组织lncRNA MIR31HG相对表达量较癌旁组织高(P<0.05),膀胱癌、前列腺癌组织较癌旁组织低(P<0.05)。PTC组织lncRNA MIR31HG相对表达量较癌旁组织高(P<0.05)。TPC-1、K1及BCPAP的lncRNA MIR31HG相对表达量较Nthy-ori 3-1高(P<0.05),且TPC-1相对表达量最高。实验组lncRNA MIR31HG相对表达量均较siRNA-NC组下降(P<0.05),其中siRNA-1组与siRNA-3组沉默效率均>60%。各组OD值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA-1组与siRNA-3组划痕愈合率较siRNA-NC组低(P<0.05)。siRNA-1组、siRNA-3组侵袭至Transwell小室下室的细胞数较siRNA-NC组低(P<0.05)。siRNA-1组、siRNA-3组PTEN mRNA和蛋白较siRNA-NC组升高(P<0.05),且siRNA-3组最高;siRNA-1组、siRNA-3组p-Akt蛋白较siRNA-NC组低,且siRNA-3组最低(P<0.05)。结论lncRNA MIR31HG在PTC组织中高表达并与PTC患者肿瘤分期有关;下调lncRNA MIR31HG的表达可以抑制TPC-1细胞增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与lncRNA MIR31HG抑制PTEN表达从而激活Akt通路有关。

RNase MRP RNA and human genetic diseases

RNase MRP RNA is the RNA subunit of the RNase mitochondrial RNA processing （MRP） enzyme complex that is involved in multiple cellular RNA processing events. Mutations on RNase MRP RNA gene （RMRP） cause a recessively inherited developmental disorder, cartilage-hair hypoplasia （CHH）. The relationship of the genotype （RMRP mutation）, RNA processing deficiency of the RNase MRP complex, and the phenotype of CHH and other skeletal dysplasias is yet to be explored.