代谢工程在D-核糖生产中研究现状及应用前景

简要介绍了代谢工程的进展情况 ,并较为详细地从宿主的选择、加速限速反应、改变代谢流和生产过程的优化等方面论述了代谢工程在D -核糖基因工程菌构建方面的应用及其应用前景。

D-核糖生产菌的原生质体诱变育种及其发酵条件的研究

以短小芽孢杆菌为出发菌株 ,经过硫酸二乙酯和原生质体紫外诱变 ,定向选育出一株稳定的核糖生产菌 TJ3,该菌株具有莽草酸营养缺陷、耐高糖、以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。在发酵条件试验中 ,采用均匀设计理论 ,利用微机对试验数据进行统计处理 ,确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产核糖的优化配比。在最适培养条件下 ,摇瓶发酵平均产核糖 30 .12 mg/m

α-淀粉酶基因在D-核糖生产菌中的表达

Bacillus subtilis HJ0 1不能有效地利用淀粉为碳源生产 D-核糖 ,地衣芽孢杆菌 (Bacilluslichenif ormis)携带的含α-淀粉酶基因的质粒 p Amy4 1 3C通过原生质体转化导入 HJ0 1中 ,构建成菌株 B.subtilis HJ0 1(p Amy4 1 3C) .该菌株连续转接培养 98h,质粒 p Amy4 1 3C保持率为 1 0 0 % ;在 LBS培养基中 ,HJ0 1 (p Amy4 1 3C)的α-淀粉酶活性比原菌株 HJ0 1高 3～ 4倍 ;发酵液中葡萄糖含量比 HJ0 1高 1 0 0倍以上 ;以淀粉为碳源HJ0 1 (p Amy4 1 3C)的核糖产量比 HJ0 1提高了一倍 .结果表明 ,菌株 B.subtilis HJ0 1 (p Amy4 1 3C)