核结合因子相关的急性髓系白血病的临床分析

目的探讨影响核结合因子(CBF)相关的急性髓系白血病(AML)患者临床特征、细胞遗传学特点及影响其生存、预后的主要因素。方法对130例CBF AML[其中AML伴t(8;21)87例、AML伴inv(16)/t(16;16)43例]患者进行随访,分析其免疫表型、染色体核型及治疗、生存情况、影响总体生存时间及无复发生存时间的因素。结果 130例CBF AML患者总完全缓解率96.1%,其中1疗程总完全缓解率77.2%。中位生存期(OS)51.64(0.26～132.5)个月,中位无复发生存期(RFS)未达1.18～96.62个月。3年OS率50%,5年OS率41%;3年RFS率59%,5年RFS率54%。年龄、染色体核型与OS有关,其中年龄≥45岁患者、染色体核型伴9q-的患者预后差、生存期短。在巩固治疗过程中采用≥2疗程的中剂量阿糖胞苷(Ara-C)巩固治疗方案的患者预后好,生存期长。OS、RFS对比分析显示:AML伴inv(16)/t(16;16)的OS较AML伴t(8,21)明显延长(P=0.046),但AML伴t(8,21)的RFS较AML伴inv(16)/t(16;16)明显延长(P=0.038)。结论年龄、染色体核型及巩固治疗的方案是影响CBFAML患者生存、预后的主要因素,在巩固治疗中采用≥2疗程的中剂量Ara-C可以延长CBF AML患者的OS、RFS。AML伴inv(16)/t(16;16)患者较AML伴t(8,21)患者总体生存期长、预后好。

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α_1基因及成骨细胞生成的影响(英文)

目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的条件培养体系中,17β-雌二醇(E2)对其核结合因子α1(Cbfα1)基因表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法取自1只3月龄雌性SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代后,用1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。应用半定量RT-PCR技术,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中核结合因子α1mRNA表达的影响,以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达,且呈剂量依赖性。E2浓度为0,1×10-10,1×10-8和1×10-6mmol/L时,Cbfα1mRNA的表达量分别为23.4%±1.8%,21.8%±2.0%,15.8%±1.5%(t=6.3,P<0.01)和5.8%±0.8%(t=17.8,P<0.01)。Northernblot结果显示Cbfα1mRNA的表达量分别为4.22±0.11,2.51±0.12(t=21,P<0.01),1.88±0.10(t=31,P<0.01)和1.17±0.09(t=41,P<0.01)。ALP活性随E2浓度增加而降低,在上述E2浓度时,ALP活性分别为(42.6±2.5)U/g,(17.9±2.0)U/g(t=15,P<0.01),(10.8±1.5)U/g(t=21,P<0.01)和(3.6±0.7)U/g(t=29,P<0.01)。细胞Ⅰ型胶原的含量随E2浓度增加而降低。结论E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达。

核结合因子a1的调控机制

Cbfa1是骨发育过程中调节骨髓基质干细胞向成骨细胞分化和成熟的重要转录因子。Cbfa1的表达水平异常与骨骼系统疾病有关。体内体外实验证实多种通路(如Wnt/LRP5/-catenin,BMP/Smads,1,25-(OH)2-vitaminD3/VDR/VDRE途径)和调节蛋白(Msx2,Dlx5,Twists)在Cbfa1基因表达、活性和随后的骨形成过程中起关键作用。这些发现对调控成骨细胞分化和治疗骨质疏松以及其他伴有骨量改变的疾病治疗提供了新的思路,这些疾病有可能用控制Cbfa1表达来进行治疗。

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的 :研究骨髓基质细胞 (MSCs)在向成骨细胞(OB)分化的条件培养体系中 ,17β 雌二醇 (E2 )对其核结合因子α1(corebindingfactorα1,Cbfα1)基因表达的影响 ,探讨E2对OB生成的作用及绝经后高转换骨代谢的可能机制 .方法 :取自 3mo龄雌性SD大鼠MSCs在生长培养基中传代后 ,用1,2 5 (OH) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导MSCs向OB分化 .应用半定量RT PCR技术 ,观察不同浓度E2 对MSCs分化过程中Cbfα1mRNA表达的影响 ;以α 磷酸奈酚为底物 ,测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)的活性 ;VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量 .结果 :E2 能明显抑制MSCs分化过程中Cbfα1mR NA的表达 ,从 (2 3.4± 1.8) %降至 (15 .8± 1.5 ) %和 (5 .8± 0 .8) % (P <0 .0 5 ) ;细胞ALP活性随E2 浓度增加而降低 ,从(70 6± 37)nkat·g-1(protein)降至 (6 3± 5 )nkat·g-1(P <0 .0 5 ) .E2 降低细胞Ⅰ型胶原的合成 ,用VanGieson染色细胞 ,随着E2 浓度的增加 ,胞质染色由鲜红、淡红到黄色 .结论 :E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbfα1mRNA的表达 ,减少OB的生成 .

核结合因子1表达的调控

核结合因子 1(Cbfa1)是成骨细胞分化的一个特异性转录因子 ,在骨骼发育过程中起着重要的作用。体内体外实验表明Cbfa1的表达受多种因素影响 ,同时它又对成骨细胞数个基因的表达起着调节作用 。

应力对纯钛表面成骨细胞核结合因子α1形成和表达的影响

目的观察应力对纯钛表面成骨细胞核结合因子α1(Cbfα1)形成及表达的影响,揭示应力对支抗种植体周骨反应的调控机制。方法用大小为2.205N的间断离心力刺激接种于纯钛表面的成骨细胞,刺激频率为每培养4h加力15min,分别于4、8、12h后收集细胞,采用免疫荧光法检测Cbfα1的形成,提取总RNA并应用逆转录聚合酶链反应检测Cbfα1mRNA的表达。结果纯钛表面加力组和不加力组MG-63成骨细胞的细胞核内均有Cbfα1荧光染色,且加力组Cbfα1蛋白荧光强度较不加力组多,差异有统计学意义(P<0.05);纯钛表面加力组和不加力组MG-63成骨细胞Cbfα1mRNA表达均为阳性,且加力组Cbfα1mRNA表达较不加力组多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成骨细胞受力后Cbfα1基因形成和表达增强,提示间歇性的牵引应力可以促进纯钛表面成骨细胞的活性。

核结合因子促进骨髓间质细胞MBA-1凋亡

目的:研究核结合因子(core b ind ing factor alpha 1,Cbfa1)的2种亚型Cbfa1/P56和Cbfa1/P57对骨髓间质细胞MBA-1凋亡的影响,并探讨其促进MBA-1凋亡的作用机制。方法:用带有Cbfa1/P56或Cbfa1/P57全长cDNA的质粒瞬时转染到骨髓间质细胞MBA-1,72 h后用流式细胞仪观察细胞凋亡率的变化,并抽提蛋白进行Cbfa1及相关凋亡蛋白Bax,Bc l-2,cytochrom e-C,caspase-3,caspase-9和TNF-α的免疫印迹检测。结果:流式细胞仪检查发现,转染Cbfa1/P56或Cbfa1/P57质粒后,MBA-1细胞的凋亡率明显增加。W estern b lot显示,Cbfa1/P56或Cbfa1/P57能增加Bax蛋白表达和Bax/Bc l-2比值,并增加cytochrom e-C,caspase-3,caspase-9,TNF-α蛋白的表达。结论:Cbfa1/P56和Cbfa1/P57能诱导骨髓间质细胞MBA-1凋亡。Cbfa1促进MBA-1凋亡的机制包括线粒体途径和膜受体途径2种,凋亡相关蛋白Bax,Bc l-2,cytochrom e-C,caspase-9和caspase-3组成的信号级联反应构成了Cbfa1促进MBA-1凋亡的信号转导通路,TNF-α也参加了该凋亡的信号转导。

重组结缔组织生长因子对体外培养成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的:研究发现,结缔组织生长因子可促进软骨细胞和成骨细胞的增殖及其表型的发生,在骨骼发育以及骨量维持方面发挥重要作用,但其对成骨细胞的作用机制目前尚不清楚。观察重组结缔组织生长因子对体外培养人成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响。方法:实验于2006-01/2007-01在日照市人民医院完成。①实验材料:外科手术取正常成人髂骨松质骨,患者对试验知情同意。②实验方法:体外培养正常人成骨细胞,用不同浓度0,50,100,200,1000μg/L的重组结缔组织生长因子(0μg/L作为空白对照组)干预48h后,抽提细胞总RNA和总蛋白。③实验评估:采用半定量反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析方法观察不同浓度重组结缔组织生长因子对体外培养人成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响。结果:半定量反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹结果显示,50,100,200,1000μg/L重组结缔组织生长因子干预后均可显著上调成骨细胞核结合因子α1的表达,并呈明显剂量依赖关系,与空白对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论:重组结缔组织生长因子可剂量依赖性上调成骨细胞核结合因子α1基因的表达,核结合因子α1可能参与了结缔组织生长因子对成骨细胞增殖和分化的调节。

各种桩核系统以及影响桩核结合的因素

近年来,随着聚合物材料和陶瓷在工业和生物材料领域越来越广的应用和人们对美观越来越高的要求,各种预成桩核应运而生。预成桩的种类较多,有金属桩、纤维桩和陶瓷桩;影响桩核间结合力的因素包括预成桩头部设计及表面处理,核材料的种类,口腔环境因素等。本文就预成桩的种类以及影响桩核结合的各种因素作一综述。

核结合因子a1在成骨细胞分化和骨形成中的作用

核结合因子a1(corebindingfactora1,Cbfa1)是近年来发现的一个成骨细胞特异性转录因子,在转录水平与多种成骨细胞相关基因的启动子相结合调控其表达,Cbfa1在间充质干细胞向成骨细胞分化及成骨细胞产生细胞外基质矿化成骨过程起重要作用。抑制或增强Cbfa1的表达均将引起相应表型的变化。

核结合因子-κB及bcl-2/bax在PQ中毒鼠肺组织中的表达

目的探讨NF-κβ、bcl-2/bax基因在百草枯中毒鼠所致急性肺损伤中的表达.方法 80只SD雄性大鼠分为对照组(C组30只)、百草枯中毒组(PQ组50只).PQ组一次性灌胃PQ 25 mg/kg染毒,C组予等体积生理盐水灌胃.观察各组大鼠在中毒后6 h、12 h、1 d、3 d、5 d肺组织病理改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织bcl-2和bax m RNA的表达.采用ELISA方法检测肺泡灌洗液中PMN的NF-κβp65表达.结果 C组肺组织结构完整,无炎症细胞渗出.PQ组肺组织炎性细胞浸润明显增多,且随时间推移肺损伤加重.PQ组bcl-2m RNA的表达于6 h后最强,至3 d仅有少量表;bax m RNA的表达于1 d达高峰,第5天仍有少量表达;bcl-2/bax比例为促凋亡的bax基因占优势,且随着时间的推移这种优势越来越明显;与相应点C组相比差异有统计学意义(P<0.05);PQ组染毒1d时NF-κβp65即有明显表达,3d时表达最强,5d后明显减弱,与C组比较差异有统计学意义(P<0.01).PQ组NF-κβp65与bcl-2表达呈正相关(r=0.71,P<0.01);NF-κβp65与bax表达呈负相关(r=-0.77,P<0.01).结论 NF-κβ、bcl-2/bax介导的肺细胞炎症反应可能是PQ中毒所致急性肺损伤的机制之一.

行政监察与业务稽核结合点探讨

监察和稽核同属金融监督形式,过去二者曾出现各唱各的调、各吹各的号的现象,缺乏紧密的配合、协作,力量分散、没有形成监督检查的整体功能。为了凝聚和发挥二者合力,探求执行县级中央银行职能的新路子,我们组成了联合监察稽核组,率先对波阳县农业银行人员最多,业务量最大的基层单位——珠湖分理处1989——1992年一季度三年多来的各项效能,开展了一次监察稽核会同活动试点。在试点工作中,我们研究实施了一套具体运作方法,取得了一定的效果。

左归丸通过p38MAPK信号通路刺激MC3T3细胞核结合因子表达(英文)

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的作用机制。方法:用含或不含p38 MAPK特异性阻滞剂(SB203580)的孵育液预处理细胞60min,加入左归丸含药血清孵育48h后,采用MTT法检测细胞活力;采用蛋白质印迹分析方法测定p38活性和Runx2蛋白表达水平;采用实时定量PCR方法测定Runx2和Col I mRNA表达水平。结果:左归丸含药血清能够显著增加细胞活力和磷酸化p38蛋白表达水平,诱导Runx2和Col I表达(P<0.01)。SB203580抑制了左归丸含药血清诱导的细胞活力和p38蛋白磷酸化水平,同时下调了左归丸含药血清诱导的Runx2和Col I表达(P<0.01)。结论:左归丸含药血清可能部分通过活化p38 MAPK信号通路,上调Runx2表达,刺激Col表达,促进骨形成。

诱导成纤维细胞表达核结合因子的研究

目的 探讨诱导条件下成纤维细胞表达成骨细胞特异性转录子 -核结合因子 (Cbfa1)的可能性及成纤维细胞表达成骨表型的发生机理。 方法 分离、纯化人皮肤成纤维细胞 ,使其生长在分别含一定浓度肿坏死因子 (TNF) α、骨诱导蛋白 (BMP) 2、TNF α加BMP 2的条件培养液中 ,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术 ,分别检测Cbfa1、骨钙素、H ras、BMPⅠ型受体 (BMPR ⅠA)和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达及Ras、BMPR ⅠA蛋白形成状况。 结果 TNF α可诱导成纤维细胞由表达Ⅰ、Ⅲ型胶原表型向表达Ⅰ型胶原转化 ;促进成纤维细胞Ras的形成 ,在TNF α作用 1、3h和 1周后 ,可使成纤维细胞H rasmRNA的相对表达量分别升高 39 5 %、7 4%和 43 2 % ;TNF α作用 1h后的成纤维细胞可产生BMPR ⅠA。联合应用TNF α与BMP 2可诱导成纤维细胞表达Cbfa1、骨钙素mRNA。 结论 TNF α与BMP 2联合应用 ,可刺激成纤维细胞表型转化 。

核结合因子a1基因修饰的皮肤成纤维细胞修复骨缺损的实验研究

目的探讨核结合因子 al(Cbfal)基因修饰的兔皮肤成纤维细胞与煅烧骨构建的移植材料对长骨大段骨缺损的修复作用。方法分离、纯化、培养兔皮肤成纤维细胞(RSF),应用pSG5-cbfal 及 pSG5质粒分别转染 RSF,获得 pSG5-Cbfal/RSF 及 pSG5/RSF,培养生长48 h 后,分别接种于长2 cm、直径4 mm 的圆柱状牛煅烧骨(TBC)上,制成 pSG5-Cbfal/RSF/TBC 及 pSG5/RSF/TBC复合物材料。制备兔桡骨中部长2 cm 的骨缺损模型,随机分组后,植入 pSG5-Cbfal/RSF/TBC 材料作为实验组(Ⅰ组),以 pSGS/RSF/TBC 材料植入组(Ⅱ组)、单纯 TBC 材料植入组(Ⅲ组)和无植入材料的自然修复组(Ⅳ组)作为对照,每组6只(12个桡骨)动物。分别于术后第4周及第12周摄 X 线片检查并最终获取骨折处标本,对植骨处进行三点抗折弯测试、脱钙骨组织切片的 HE 染色和 Masson染色及新生骨小梁图像计量分析。结果Ⅰ组标本骨质生长活跃,有大量新生骨小梁,生物力学性能良好,骨缺损处已完成早期愈合及修复;Ⅱ组、Ⅲ组及Ⅳ组无明显新生骨形成,未显示骨修复现象。结论 Cbfa1 基因修饰的兔皮肤成纤维细胞经与煅烧骨复合植入兔体内后,能完成对大段骨缺损的修复。

鹿茸再生干细胞体外培养及核结合因子a1的检测

为了建立鹿茸再生干细胞的体外分离培养方法,进一步了解鹿茸再生、骨化等生理过程,本试验采用酶消化和组织块培养相结合的手段,成功进行了鹿茸再生干细胞的体外培养及传代扩增,对其生长曲线进行了初步分析,并对核结合因子a1(cbfa1)基因的表达情况进行了免疫细胞化学的分析,结果表明用酶消化和组织块培养法能够很好地获得鹿茸再生干细胞;鹿茸再生干细胞表达Cbfa1基因。

3种预成桩与4种核成型材料的结合力比较

目的比较3种不同材质的预成桩钉与4种核成型材料的结合力。方法预成不锈钢桩、玻璃纤维树脂桩和渗透陶瓷桩分别与ParaCore、Clearfill、Durafill和F2000复合体核材料结合,测试不同桩-核材料间的结合力并对其进行比较。结果3种预成桩中,具有机械固位设计的不锈钢桩组与树脂核的结合力最高;4种成核材料与桩的结合力分别是ParaCore组和Clearfill组高于Durafill组和F2000复合体组,F2000复合体与桩的结合力最低。结论临床选用桩时可考虑利用机械锁结固位,并通过表面粗糙化处理来增加桩-核的结合;采用结合力强、流动性好的树脂材料成核,可获得更好的桩-核结合效果。

核基质结合区对转基因表达的影响及其作用机制

核基质结合区(matrix attachment region,MAR)是一段在体外能与核基质结合的富含AT的DNA序列。研究发现MAR能使染色质形成环状结构;将其连到目的基因二侧构建载体并转至生物体中,发现它能增强基因转录表达水平及稳定性,在一定程度上降低转基因个体或细胞系之间转基因的表达水平的差异,这很可能是减低了基因沉默所致。现对MAR的序列特征、MAR对转基因表达的影响及对转基因效应的影响机制进行综述。

核结合因子-急性髓细胞白血病的治疗现状

核心结合因子-急性髓细胞白血病（CBF-AML）包括伴有t（8；21）（q22；q22）AML与伴有inv（16）（p13q22）／t（16；16）（p13；q22）AML2种类型。CBF-AML患者对大剂量化疗敏感，预后良好。但是，近年来研究发现CBF-AML的预后具有异质性，对其进行危险度分层治疗为目前国际趋势。大剂量阿糖胞苷治疗仍为CBF-AML的首选治疗方案，异基因造血于细胞移植（allo-HSCT）为治疗高危、复发患者的重要手段，靶向药物的出现亦为CBF-AML的治疗提供了新希望。为了指导临床CBF-AML的治疗，笔者拟就CBF-AML的临床治疗研究进展进行介绍。

核基质结合区提高报告基因在稳定转化的杜氏盐藻中的表达

前期的研究从杜氏盐藻(Dunaliella salina)中分离出一核基质结合区(matrix attachment region,MAR)片段---DSM1.实验证实,它在体外能与核基质结合且具有MAR的典型特征.为研究其在转基因盐藻中的作用,构建了RbcS启动子驱动、氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因为报告基因及表达盒两侧含DSM1MAR的表达载体.电击法转化盐藻,随机挑选20株稳定转化的盐藻藻株,分析CAT酶活性.结果表明,在稳定转化的盐藻细胞中,MAR能使报告基因CAT的表达水平比对照藻株提高1.5倍,不同藻株之间个体表达的差异性也有所降低.