HPLC-DAD法对不同生长年限瓦布贝母10种核苷和碱基含量的测定（英文）

核苷和碱基具有多种生理生化活性,定量测定瓦布贝母的含量对其质量控制也很重要。本文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器联用技术(HPLC-DAD)同时测定瓦布贝母鳞茎中6种核苷(鸟苷、胞嘧啶核苷、胸苷、腺苷、尿苷、肌苷)和4种碱基(胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺嘌呤)成分含量的测定方法。采用Zorbax 300?300 Extend C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),检测波长为260 nm,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,以1.0 mL/min的流速在30 min以内能够实现所选用的核苷和碱基实现完全分离。采用优化色谱条件后,所有10种待测成分具有良好的线性关系(R^2≥0.9993),精密度(RSD≤3.715%),重复性(RSD≤3.748%),稳定性(RSD≤5.545%)和加样回收率(97.688%–102.923%)。利用所建立的色谱方法成功地应用于不同生长年限瓦布贝母核苷和碱基的测定,并且首次分析了不同生长年限(1–7年)瓦布贝母的10种核苷和碱基的含量变化。本研究将有助于对瓦布贝母的栽培时间选择、质量控制、药理研究和临床应用。

在线二维液相色谱法测定发酵虫草菌粉(Cs-4)中6种活性物质

目的:建立发酵虫草菌粉(Cs-4)中尿嘧啶、尿苷、腺苷、腺嘌呤、鸟苷、麦角甾醇6种活性物质的二维液相色谱测定方法。方法:采用二维液相色谱测定法,第一维色谱系统采用亲水相互作用色谱柱,第二维系统采用C18色谱柱。样品经乙腈溶液提取,过滤后进样,5种核苷和碱基在第一维液相系统分离测定,麦角甾醇在第二维液相系统测定。结果:方法中各物质线性范围:尿嘧啶,0.3~30μg·mL-1;尿苷,0.4~40μg·mL-1;腺苷,0.8~80μg·mL-1;腺嘌呤,1.0~100μg·mL-1;鸟苷,2.5~250μg·mL-1;麦角甾醇1.5~150μg·mL-1。方法中各物质加样回收率范围与精密度:尿嘧啶,96.7%~103.4%,1.8%~3.1%;尿苷,98.9%~101.4%,1.7%~2.6%;腺苷,95.9%~104.7%,1.5%~3.5%;腺嘌呤,97.0%~104.0%,1.4%~4.0%;鸟苷,98.2%~101.4%,1.9%~3.1%;麦角甾醇,96.0%~102.0%,2.5%~3.7%。结论:本研究方法显著提高了分析效率,准确度高,可满足药物评价、质量监督等工作的需求;对发展发酵虫草菌粉(Cs-4)等中药复杂成分分离方法,指导药物临床使用具有重要意义。

HPLC同时测定西藏栽培天麻中天麻素和8种核苷及碱基类成分

本实验建立了同时测定天麻药材中天麻素及8种核苷和碱基类成分的高效液相色谱法：Agilent Zorbax Bonus—RP（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，甲醇-（0．04％冰乙酸）水溶液为流动相，梯度洗脱，柱温36℃，流速1．0mL·min^-1，检测波长254nm，进样量20μL。该方法分离度良好，天麻素、胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷和腺苷等的质量浓度在2．04～262．00，0．20～24．67，0．18—23．75，0．20～25．83，0．20—26．67，0．16—20．00，0．22—27．71，0．20—24．29，0．24—30．58mg·L^-1内，相关系数r在0．9989～0．9999，具有良好的线性。天麻素和8种核苷及碱基平均加标回收率在96．4％-99．6％，RSD均小于2．7％（n=6）。测定了7个西藏栽培天麻药材中上述9种成分的含量。结果表明，7个天麻样品中天麻素的含量均高于2．0mg·g^-1，均含有较高的腺苷、鸟苷、尿苷和胞嘧啶，而胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较低。该方法简便、准确，重复性好，适用于天麻药材中天麻素和腺苷等8种核苷及碱基类成分的含量测定。

藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的含量分析

目的建立藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中同时测定胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷、胸苷和腺苷10种核苷类成分含量的HPLC-DAD方法,并对产自青海的6批次麻花秦艽花和6批次线叶龙胆花的这10种核苷成分进行含量测定和比较分析。方法 Bonus RP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.04%乙酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm,进样量20μL。结果 10种核苷类成分线性关系、精密度、稳定性、重复性均符合含量测定方法学的要求,加样回收率为95.1%~98.5%。不同产地线叶龙胆花中10种核苷类成分总含量849.38~1 014.37μg·g^(-1),麻花秦艽花为256.27~822.52μg·g^(-1)。腺苷、鸟苷、尿苷和胞苷在麻花秦艽花和线叶龙胆花中的含量均较高,是其主要核苷成分,而尿嘧啶、鸟嘌呤和胸苷在2种样品中含量均较低。结论该法简便实用、重复性好,适用于藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的测定。青海不同产地2种藏药中10种核苷类成分的分析数据可为其质量控制和品质评价提供参考。

基于多指标成分比较不同微生物菌剂对枸杞子品质的影响

目的:通过比较配施不同微生物菌剂后枸杞子中多类型化学成分含量差异,揭示微生物菌剂对枸杞子品质的影响。方法:以宁杞7号为实验材料,通过配施培元和新特锐(TP组)、哈茨木霉和枯草芽孢杆菌(BW组)、根无忧(MT组)和菌益多(JYD组)4种微生物菌剂,以不施微生物菌剂为空白组(CK组),采用紫外分光光度法、高效液相色谱法(HPLC)、超高效液相色谱质谱联用法(UHPLC-MS/MS)测定枸杞子中总酚、总黄酮、糖类、氨基酸、核苷和碱基、甜菜碱等成分含量,运用多重比较、主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等方法分析微生物菌剂对枸杞子品质的影响。结果:微生物菌剂对枸杞子中不同的化学成分影响不同,总酚含量以TP组最高,与CK组差异具有统计学意义(P<0.05);总黄酮含量以BW组最高,TP组次之;多糖和糖醛酸含量均以JYD组最高;与CK组比较,TP组和BW组甜菜碱含量均明显升高(P<0.05);测定的23种氨基酸中,大部分氨基酸在JYD组最低,MT组最高;核苷碱基则在MT组和BW组含量较高。基于测定的45种化学成分可以明显区分不同处理组枸杞子。PLS-DA显示,各处理组主要的差异成分为多糖、葡萄糖、果糖、甜菜碱、糖醛酸、天冬酰胺、蔗糖、苏氨酸、总黄酮、丙氨酸和总酚等。基于主要差异成分的PCA综合评分结果显示,各处理组枸杞子化学成分综合得分为BW组>TP组>MT组>CK组>JYD组。结论:配施微生物菌剂BW、TP和MT可以促进枸杞子品质提升,配施JYD在一定程度上促进了多糖和糖醛酸的积累,但对枸杞子品质的整体影响尚不明确。本研究可为枸杞子产业绿色健康发展奠定基础。