高效液相色谱法测定铁皮石斛中的5种核苷类物质含量

目的建立高效液相色谱法检测铁皮石斛中5种核苷类物质的分析方法。方法采用月旭C 18 Ultimate AQ-C 18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为20 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:260 nm,柱温:30℃,进样体积:20μL。结果5种核苷类物质在各自线性范围内线性良好,加样回收率为97.24%~100.10%之间,RSD小于2.12%。结论该方法操作简便、稳定可靠,可用于铁皮石斛中核苷类物质的测定。

初始pH值对细脚拟青霉小试发酵过程菌体生长及胞内核苷类物质积累的影响

在30L发酵罐中,采用液体深层发酵的方法,考察培养液初始pH7、6.5、6、5.5、5、4.5时对细脚拟青霉菌体生长及胞内核苷类物质积累的影响。结果表明:初始pH6.5时,对菌体生长和胞内核苷的积累最为有利,最大生物量为28.7g/L,最高胞内核苷类物质产量为5.94mg/g;起始pH7、6、5.5、5、4.5时,最大生物量分别在发酵的第9、10、11、11、13天获得,依次为26.4、27.3、23.6、21.2、18.5g/L;最大胞内核苷类物质的产量分别在发酵的第11、11、11、13、13天获得,依次为5.27、5.51、4.89、4.29、4.05mg/g。细脚拟青霉以菌体或者胞内代谢物为发酵目标进行优化控制时,其发酵初始pH值应调节到相应的最佳值。

超声波提取HPLC-UV法测定人工蛹虫草中8种核苷类物质

蛹虫草中核苷及其代谢化合物的分析检测对于蛹虫草的生理和药理研究是非常重要的。该文采用超声波辅助提取HPLC-UV法，以反相DIAMONSILC18（250mm×460mm，5μm）为色谱柱，以水（含O．1％乙酸）和甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱，同时测定了人工蛹虫草中的尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素等8种化合物。结果表明，超声波提取的最优条件为提取溶剂为甲醇，提取温度25℃，提取时间15min，超声功率IOOW，料液比1：100，在最优的超声提取和色谱分离条件下，8种核苷类化合物在检测范围内的线性关系较好（r^2〉O．9995），检出限和定量限最低可达到16．9ng／mL和56．4ng／mL，日内和日间精密度（RSD）分别小于4．1％和4．6％，加样回收率为81．9％～93．7％。此法可用于冬虫夏草及其代用品中核苷类化合物的分析检测。

HPLC法测定中国白酒中的γ-氨基丁酸和核苷类物质

建立测定白酒中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)和核苷类物质(腺苷、尿苷)的高效液相色谱分析方法。确定检测γ-氨基丁酸的色谱条件为流动相A∶B(A-乙腈;B-50 mmol/L三水合乙酸钠)=35∶65(体积比),流速为1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长为436 nm;确定检测核苷类物质的色谱条件为:流动相10%甲醇,流速为0.8 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。对20种白酒分析结果显示,不同香型白酒中功能成分差异明显。GABA在浓香型白酒中较高,其中2号酒样中GABA含量达0.867 mg/L。核苷类物质在芝麻香型和酱香型白酒中要高于浓香型,其中9号达到438.960 mg/L。该方法用于白酒中GABA和核苷类物质的分析具有分离效果佳、精密度高、稳定性高的特点。

不同来源多种虫草核苷类物质检测分析比较

采用高效液相色谱法,以甲醇与超纯水作为流动相,在同一检测平台同步对冬虫夏草、蛹虫草和蝉花虫草子实体中的虫草素、腺苷、胞苷、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷7种核苷类物质的含量进行检测与比较分析。实验结果表明,11种样品均含有的核苷类物质是鸟苷和肌苷,核苷类物质中虫草素含量最高的是功能性蛹虫草米基,其含量为17 367.91 mg/kg,而功能性蛹虫草虫体中腺苷含量最高,其含量为2 178.05 mg/kg。

液相色谱-质谱联用技术在猴头菇核苷类物质分析的应用研究

应用液相色谱-质谱联用技术对猴头菇水提液中核苷类物质成分进行定量定性分析,试验结果表明,该技术线性关系、精密性、重复性、12 h内稳定性、加样回收率均表现良好。选用水作提取溶剂,能更大程度地提取猴头菇中的核苷类物质。

核苷酸类物质的应用研究进展

核苷酸类物质包括腺苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、胞苷酸等及其衍生物,是生物体内一种极其重要的低分子化合物,具有十分广泛的用途。已在医药、食品、保健、农业、化妆品中得到了广泛的应用,本文综述了核苷酸类物质应用方面的研究进展。

商陆中9种核苷类物质的快速检测方法

建立高效液相色谱法测定核苷类物质,探究含量并比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。采用Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇;流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速1.0 mL/min, VWD检测波长260 nm;柱温37℃。检测方法显示, 9种核苷类物质的检测线性范围为0.05~100 mg/L;检出限(S/N=3)为0.002~0.018 mg/kg;在加标浓度分别为1.0, 5.0, 10.0和20.0 mg/g条件下,加标回收率(N=6)为87.12%~104.22%,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的商陆中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种商陆核苷类物质的总含量以超临界萃取最高,超临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了商陆核苷类物质。结果表明,从商陆核苷类物质的含量及物质特性保留的角度考虑,选择商陆的提取工艺以超临界萃取为宜。

仿生法提取马铃薯核苷类物质的同时检测

研究建立了高效液相色谱法测定核苷类物质含量及比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。采用Agilent XDB C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇,流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min, DAD检测波长为260 nm,柱温为35℃。检测方法显示:9种核苷类物质的检测线性范围为0.02～500 mg/L;检出限(S/N=3)在0.004～0.049 mg/kg之间;加标回收率(N=6)在87.30%～105.29%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的马铃薯中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种马铃薯核苷类物质的总含量以仿生法萃取最高,仿生法萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了马铃薯核苷类物质;结果表明,从马铃薯核苷类物质的含量及物质特性保留的角度考虑,选择马铃薯的提取工艺以仿生法萃取为宜。

不同提取工艺下艾叶中核苷类物质的同时检测

建立高效液相色谱法测定核苷类物质含量并比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。采用Reprosil-Pur Basic C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇;流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,DAD检测波长260 nm;柱温40℃。检测方法显示,9种核苷类物质的检测线性范围为0.02~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003~0.02mg/kg;加标回收率(N=6)在86.45%~106.88%、检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的艾叶中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种艾叶核苷类物质总含量以亚临界萃取最高,亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留艾叶核苷类物质;结果表明,从艾叶核苷类物质含量及物质特性保留的角度考虑,选择艾叶的提取工艺以亚临界萃取为宜。

茵陈蒿的提取及其中核苷类物质分析和在卷烟中的应用

采用不同方法提取茵陈蒿,建立高效液相色谱法测定茵陈蒿核苷类物质,比较提取工艺对茵陈蒿核苷类物质含量的影响,并研究了茵陈蒿提取物在卷烟中的应用。采用Agilent 959990-902 Eclipse Plus C_(18)色谱柱(4.6mm×150 mm);流动相A相为甲醇,流动相B相为纯水;梯度洗脱,流速0.9 m L/min;DAD检测波长265 nm;柱温38℃。检测方法显示,9种核苷类物质的检测线性范围为0.02~400 mg/L;检出限(S/N=3)在0.005~0.025 mg/kg;加标回收率(N=6)在89.36%~106.41%,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的茵陈蒿中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种茵陈蒿核苷类物质总含量以亚临界萃取最高;卷烟加香应用结果表明,茵陈蒿亚临界萃取物能与烟香协调,增加香气厚实、饱满度和爆发力,改善余味。

提取方法对接骨草中9种核苷类物质的影响

研究建立了高效液相色谱法测定核苷类物质含量及比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。试验采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇,流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,DAD检测波长为262 nm,柱温为30℃。检测方法显示:9种核苷类物质的检测线性范围为0.02～250 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003～0.035 mg/kg之间;加标回收率(N=6)在85.38%～102.45%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的接骨草中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种接骨草核苷类物质的总含量以亚临界萃取最高,亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了接骨草核苷类物质;结果表明,从接骨草核苷类物质的含量及物质特性保留的角度考虑,选择接骨草的提取工艺以亚临界萃取为宜。

HPLC定量分析冬虫夏草的主要核苷类有效成分

目的:探讨冬虫夏草主要核苷类成分的定量分析方法。方法:采用微量提取及HPLC-UV分析法。结果:建立了冬虫夏草核苷类物质的微量提取方法,在优化的HPLC-UV色谱条件下,鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷和虫草素等5种冬虫夏草主要核苷类物质的标准品分离完全。精密度、稳定性和回收率实验表明,用HPLC-UV方法即可定量分析冬虫夏草的核苷类有效成分。用该方法检测到这5种核苷类物质含量在冬虫夏草子座部分与其虫体部分之间以及冬虫夏草居群间存在显著差异。结论:冬虫夏草主要核苷类成分的有效定量分析方法的建立对冬虫夏草的品质评价及质量控制具有重要的现实意义,也为进一步研究影响冬虫夏草品质的因素并建立品质评价体系奠定了基础。

基质固相分散-高效液相色谱法同时测定冬虫夏草和蛹虫草中的9种核苷及碱基

目的：建立基质固相分散一高效液相色谱法（MSPD-HPLC）同时测定野生冬虫夏草、深层发酵培养的蛹虫草菌丝体和固态培养的蛹虫草子实体中的腺嘌呤、腺苷、胸腺嘧啶、胸苷、尿嘧啶、尿苷、胞嘧啶、乌苷和虫草素。方法：采用MSPD—HPLC法同时测定上述9种核苷及碱基。结果：MSPD提取条件为：弗罗里硅土为分散剂，分散剂与样品质量比为4：1，15mL石油醚为淋洗剂，15mL甲醇为洗脱剂。标准曲线在线性范围内具有较好的线性关系（r〉0．9997），化合物的检出限和定量限分别为12．4—79．4ng·mL^-1和41．2～264．6ng·mL^-1。日内和目间精密度均低于7．28％。样品加标回收率在81．54％-95．77％之间。结论：本法简单快速，样品用量少，可广泛应用于中草药和生物药品中核苷和碱基的同时测定。

虫草制品中核苷类有效成分分析方法研究

采用HPLC法建立测定虫草中11种有效成分的分析方法。采用碳十八色谱柱,甲醇和磷酸盐水溶液进行梯度洗脱,11种有效成分分别为:胞嘧啶、尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、肌苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、鸟苷、2'-脱氧胸苷、腺苷、虫草素。考察了方法的线性范围、稳定性以及仪器的精密度。试验数据显示上述指标均在可接受的范围内。

化学电离质谱法在核苷类等化合物分析中的应用

CI is very useful when the molecular ion peak of an unknown sample is absent by EI. The quasi-molecular ion peak obtained by CI provides the information about the molecular weight. More than fifty samples in which some nucleosides were analysed successfully by CI-MS.

冬虫夏草发酵液和菌丝体中主要核苷类成分分析

为研究冬虫夏草发酵液和菌丝体中核苷类物质的种类和含量,将冬虫夏草进行液体发酵培养,再经超声提取、醇沉、真空浓缩等方法获得供试样品Ⅰ(发酵液醇提成分)和供试样品Ⅱ(菌丝体提取物醇提成分),应用高效液相色谱法对供试样品中主要核苷类物质进行测定,结合次黄嘌呤、腺嘌呤、腺苷、虫草素等标准品图谱和标准曲线方程对其进行定性定量分析。结果显示,试验条件下,发酵液中含有较多的虫草素和次黄嘌呤,产率分别为28.470、23.436mg/L;菌丝体中含有较多的腺苷,产率为5.067 9mg/g。

不同产地掌叶半夏中4种核苷类成分和葫芦巴碱测定

目的:明确不同产地掌叶半夏中有效成分含量差异。方法:采用高效液相色谱法检测了河北安国市、河北涉县、河南郸城县和陕西周至县4个地区掌叶半夏块茎中肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷和葫芦巴碱5种有效成分,并与河北安国市的半夏进行了比较。结果:河南郸城县掌叶半夏中核苷类物质总量和鸟苷的含量最高,分别为236.30μg/g和179.28μg/g;4地掌叶半夏中葫芦巴碱含量依次为河南郸城县(122.82μg/g)、河北安国市(104.99μg/g)、河北涉县(75.86μg/g)和陕西周至县(42.86μg/g)。其中河南郸城县的掌叶半夏和河北安国市的半夏中核苷类和胡芦巴碱含量没有显著差异。结论:以鸟苷和葫芦巴碱含量作为衡量掌叶半夏质量的指标,河南郸城县掌叶半夏的品质最高。掌叶半夏中有效成分含量因种植区的气候条件和土壤类型不同而呈现显著差异。

虫草有效成分的研究进展

虫草是一类重要的药用真菌,近年来,研究者对不同种类虫草的化学成分进行了广泛研究。对虫草的化学成分研究进行了总结,主要包括核苷类物质(虫草素、腺苷等)、虫草多糖、D-甘露醇、甾醇、超氧化物歧化酶及氨基酸等。