用大肠杆菌游离细胞酶法合成核苷药物

研究了采用大肠杆菌游离细胞核苷磷酸化酶合成核苷药物过程中反应平衡常数和底物转化率的计算方法及其变化规律，阐明了游离细胞内核苷磷酸化酶的活力与细胞的培养、菌体的预处理方式密切相关。实验结果表明，大肠杆菌湿菌体经４°Ｃ干燥处理２～３ｄ后，胞内核苷磷酸化酶不易失活，并能有效地降低胞内抑制物对酶反应的抑制作用。与湿菌体相比，干燥菌体用于酶反应时底物的转化率可提高３３．５％。

脑靶向寡核苷酸药物策略用于衰老相关脑部疾病治疗

寡核苷酸药物近10年发展迅速,已有多款应用于临床治疗。因其设计便捷、序列灵活、特异性高,有望解决许多靶点难成药的困境,并且其临床转化周期和成本较低,目前已成为新兴生物技术药物研发的前沿领域。脑部疾病包括多种目前无法治愈的疾病,如神经退行性疾病、胶质瘤、运动神经元疾病等,其中很多与年龄相关,被认为是衰老相关脑部疾病。因其病因复杂,许多靶点难成以药,同时由于脑部特殊屏障系统“血脑屏障”的存在,导致大部分药物无法实现脑部病灶的有效积累,众多小分子药物遭遇临床转化失败。寡核苷酸类药物的特异性和序列灵活性提供了新的成药可能性,但同样面临脑部递送的挑战。尽管目前已有多款寡核苷酸类药物应用于医疗市场,但脑靶向寡核苷酸药物仍然极为罕见,随着纳米递送和脑靶向基团研究的逐渐成熟,未来5~10年寡核苷酸药物用于脑部疾病治疗将成为可能。本文针对本领域重点话题如寡核苷酸药物临床批准的应用案例、脑靶向寡核苷酸药物的递送瓶颈和当前策略,以及衰老相关脑部疾病的寡核苷酸药物潜在靶点进行了梳理,同时对临床转化中的难点和面临的挑战展开了综述和讨论。

寡核苷酸药物生物分析方法的研究进展

寡核苷酸药物是具有不同功能化学修饰的DNA或RNA,主要在基因水平上发挥治疗的作用。到目前为止,已经批准16种寡核苷酸药物用于临床治疗,这也导致了人们对寡核苷酸药物生物分析的兴趣日益增加。尤其需要强大的生物分析工具来研究这些药物的质量控制及体内的药代动力学研究。该篇综述总结了液相色谱、毛细管凝胶电泳、杂交酶联免疫吸附技术在检测寡核苷酸药物的优缺点,为该类药物的研究及质量控制提供一定的思路。

带量采购政策对我院核苷类抗乙型肝炎病毒药物使用情况的影响

目的分析孝感市中心医院执行带量采购政策对核苷类抗乙型肝炎病毒药物使用情况的影响,为医院药事管理和药物政策制定提供参考。方法提取医院执行带量采购政策前后4种核苷类抗乙型肝炎病毒药物的使用数据,采用药物经济学方法对药品供应目录、药品价格、销售数量、销售金额、用药频度(DDDs)、限定日费用(DDC)和排序比(B/A)等进行回顾性分析。结果执行带量采购政策后,4种核苷类抗乙型肝炎病毒药物的总消耗量增加了73.34%,销售总金额下降了96.49%,总DDDs增加了46.15%,未中选的阿德福韦酯、恩替卡韦和替诺福韦DDC下降比例达10.45%~42.12%。结论执行带量采购政策可以有效减少医疗机构药品费用支出,提高医保基金使用效率,显著减轻患者的用药负担,进一步促进临床合理用药。

八珍汤合化积丸加减联合核苷类药物治疗“正虚血瘀型”乙肝肝硬化继发脾功能亢进的效果

目的:探讨八珍汤合化积丸加减联合核苷类药物治疗“正虚血瘀型”乙肝肝硬化继发脾功能亢进的效果。方法:选取2020年6—12月在武威市凉州医院就诊的西医诊断为“乙型肝炎后肝硬化继发脾功能亢进”、中医辨证为“正虚血瘀型”的96例患者作为研究对象,根据随机数表法分为对照组和观察组,各48例。对照组给予替诺福韦酯,观察组给予替诺福韦酯联合八珍汤合化积丸,比较两组白细胞(WBC)、血小板(PLT),凝血酶原活动度(PTA)、脾脏厚度、门静脉内径变化、肝脏硬度值及临床疗效。结果:治疗前、治疗3个月,两组WBC、PLT、PTA水平及脾脏厚度、门静脉内径比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月,两组WBC、PLT、PTA水平较治疗前升高,脾脏厚度、门静脉内径较治疗前降低,且观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前肝脏FibroScan弹性值比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗6个月肝脏FibroScan值小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为87.5%,高于对照组的62.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:八珍汤和化积丸加减联合核苷类药物治疗“正虚血瘀型”乙肝肝硬化继发脾功能亢进,不仅能改善患者的临床症状,还能提高WBC、PLT,改善PTA,在降低肝脏硬度值及脾脏厚度和门静脉内径方面效果显著。

血清HBsAg、HBV RNA水平对慢性乙型肝炎患者核苷(酸)类药物治疗停药预测的价值

目的探讨血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)定量、乙型肝炎病毒核糖核酸(HBV RNA)水平对慢性乙型肝炎(CHB)患者核苷(酸)类似物(NAs)药物治疗停药预测的价值。方法回顾性分析南昌市第九医院肝病科接受NAs治疗且符合停药标准有计划停药的80例CHB患者的临床资料,选择停药时乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)<20 U·mL^(-1),HBsAg定量<200 U·mL^(-1)和HBsAg定量200~1000 U·mL^(-1)的患者各40例进行随访,同时观察HBsAg定量<200 U·mL^(-1)、HBV RNA<100 U·mL^(-1)的患者3年复发情况。结果停药3年后,在HBV DNA<20 U·mL^(-1)的前提下,HBsAg定量<200 U·mL^(-1)、HBV RNA<100 U·mL^(-1)的CHB患者复发率为14,3%(5/35),其余患者的复发率为46,7%(21/45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清HBsAg定量和HBV RNA水平可以预测安全停药,在HBV DNA<20 U·mL^(-1)的前提下,HBsAg定量<200 U·mL^(-1)、HBVRNA<100 U·mL^(-1)的患者可以安全停药。

“4+7”带量采购政策对某院核苷类抗乙型肝炎病毒药物使用影响分析

目的分析带量采购政策对核苷类抗乙型肝炎病毒(HBV)药物使用情况的影响,为进一步完善临床药学服务和医院药事管理提供参考依据。方法采用药物经济学方法,汇总“4+7”带量采购政策实施前一年(2018年12月至2019年12月)及实施后第一年(2020年1—12月)、第二年(2021年1—12月)核苷类抗HBV药物使用数量、金额、用药频度(DDDs)、日治疗费用(DDC)等数据,进行统计学分析。结果实施带量采购政策后,核苷类抗HBV药物第一年使用量DDDs增加75.05%,销售金额降低32.08%,第二年使用量同比增加6.56%,销售金额同比增加31.30%。“4+7”集采中选恩替卡韦片(ETV,商品名“木泽”)、富马酸替诺福韦二吡呋酯片(TDF,商品名“倍信”)的第一年和第二年使用量DDDs、销售金额占比分别为76.53%、4.64%和73.92%、3.86%。两药在集采后连续两年DDDs均大幅提高,DDC下降。抗HBV国谈新药富马酸丙酚替诺福韦(TAF)使用量和销售金额稳步增加。结论带量采购政策在医院落地实施2年,中选品种使用量逐年升高,销售额逐年下降,切实减轻了部分患者的用药负担,体现出“4+7”带量采购政策的稳步落地,医患对该政策的接受度逐渐增加。

安络化纤丸联合核苷类药物治疗乙型肝炎肝纤维化系统评价的再评价

目的:对安络化纤丸联合核苷类药物治疗乙型肝炎肝纤维化系统评价或Meta分析进行再评价。方法:检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、PubMed、Embase和Cochrane Library等数据库,检索时间为建库起至2022年7月,搜索安络化纤丸联合核苷类药物治疗乙型肝炎肝纤维化的系统评价或Meta分析。依照纳入和排除标准,由2名研究人员独立筛选文献并提取文献资料,应用AMSTAR2量表、PRISMA声明和GRADE分级系统对纳入文献的报告质量、方法学质量和证据级别进行再评价。结果:最终纳入8篇系统评价或Meta分析文献,均为中文文献,发表时间为2015~2022年。8篇文献的AMSTAR2评价结果均为极低质量;PRISMA评分15.5~19.5分,提示所纳入文献的报告有一定缺陷。评价的8篇文献中共纳入安络化纤丸联合核苷类药物治疗慢性乙型肝炎肝纤维化患者的65项结局指标,其中:HA 8项、LN 8项、PC-Ⅲ8项、Ⅳ-C 8项、ALT 7项、TBil 5项、门静脉内径5项、脾脏厚度5项、AST 4项、HBV DNA转阴率4项、凝血酶原活动度1项、白蛋白2项。包括中等质量证据2项,低质量证据12项,极低质量证据51项。结论:现有的证据表明安络化纤丸联合核苷酸类药物治疗乙型肝炎肝纤维化在改善患者HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C等结局指标方面要优于对照组,但所纳入文献的方法学质量、文献质量和证据质量均偏低,需要提高系统评价或Meta分析的质量,从而为中医药治疗疾病提供高质量的循证医学证据。

核苷类药物纳米递送系统研究进展

核苷类药物在肿瘤和病毒等疾病的临床治疗中占据重要地位,但这类药物生物利用度低,缺乏靶向性,入胞效率较低,极大地制约了临床应用。设计并利用纳米载体,通过提升载药效率与药物利用度、维持药效与系统稳定性、调整载体与药物分子的结合能力、修饰特异性分子实现主动靶向等方式,能够改善核苷类药物的生理学性质。本文从核苷类药物纳米递送系统设计策略出发,综述了针对核苷类药物的纳米递送系统载体设计及包载效果。

探讨柔肝化纤颗粒联合核苷类抗病毒药物对乙型肝炎后肝硬化失代偿期患者肝功能及门静脉系统血流动力学的影响

目的探究与分析柔肝化纤颗粒联合核苷类抗病毒药物对乙型肝炎后肝硬化失代偿期患者肝功能及门静脉系统血流动力学的影响。方法选取自2018年2月~2022年2月门诊乙型肝炎后肝硬化失代偿期患者88例,采取随机数字表法分为对照组与观察组,每组各44例,对照组给予常规护肝与核苷类抗病毒治疗,观察组在其基础上增加柔肝化纤颗粒治疗,对比两组患者临床疗效、抗病毒相关指标变化,治疗前后肝功能及肝纤维化指标、门静脉系统血流动力学指标,同时观察对肝脾影像学指标变化情况。结果观察组与对照组相比临床有效率较高,HBV DNA转阴率、HBsAg转阴率、HBeAg转阴率、HBeAg/HBeAb血清转换率均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组与对照组相比,ALT、AST、TBil、LN、HA、PCⅢ、CIV水平均较低,ALB水平较高(P<0.05);Dpv和Dsv较低,门静脉内径和脾静脉内径缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论柔肝化纤颗粒联合核苷类抗病毒药物治疗乙型肝炎后肝硬化失代偿期患者的临床疗效显著,抗病毒效果突出,同时可促进改善患者的肝功能指标以及门静脉系统血流动力学指标,影像学指标也得以恢复。

乙型肝炎后肝硬化治疗中核苷类药物的应用效果

分析针对收治的乙型肝炎肝硬化患者,开展不同核苷类抗病毒药物的临床有效性。方法 选取我院收治的乙型肝炎肝硬化患者92例,以随机数字均分46例单组,常规组和实验组。常规组采用阿德福韦酯治疗,实验组行恩替卡韦治疗。结果 在实验组所涉及的观察项目中,经对临床治疗总有效率依据标准评估,结果显示为86.96%,与常规组依据标准评估的结果56.52%展开比较,居更高水平(P<0.05);实验组谷草转氨基酶检测值、谷丙转氨酶、总胆红素低于常规组,组间对比(p<0.05)。实验组血清白蛋白、胆碱酯酶高于常规组,组间对比具有统计学意义(P<0.05);实验组自发性腹膜炎率低于常规组,实验组HBeAg检测值、HBV-DNA转阴率检测值、HBV-DNA下降幅度检测值均能高于常规组,组间对比(p<0.05)。结论 乙型肝炎肝硬化实施恩替卡韦治疗,有利于肝功能指标的改善,药用安全,阻抑HBV病毒进行复制,有利于HBeAg转阴。

慢性乙型肝炎患者停用核苷(酸)类药物后并发慢加急性肝衰竭列线图预测模型的构建

目的构建预测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者停用核苷(酸)类药物(nucleoside and nucleotide analogs,NAs)后并发慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)风险的列线图模型,并验证模型的预测能力。方法选取2018年3月—2022年10月我院收治的停用NAs后复发的CHB住院患者作为研究对象,收集患者临床资料,采用单因素和多因素Logistic回归分析其发生ACLF的危险因素,并建立列线图模型。结果停药持续时间长、HBe Ag阳性、总胆红素≥85.5μmol/L、凝血酶原活动度<50%、血小板计数<100×10^(9)/L和白蛋白<35 g/L是CHB患者停用NAs后并发ACLF的独立危险因素(P均<0.05)。模型验证结果显示,一致性指数为0.851(95%CI:0.819~0.883),校准曲线趋近于理想曲线,ROC曲线的AUC为0.847(95%CI:0.759~0.842),在2%~79%预测范围内,模型净获益。结论CHB患者停用NAs后并发ACLF的危险因素较多,基于危险因素建立的列线图模型对CHB患者停用NAs后并发ACLF风险具有良好的预测效能。

核苷类药物联合中成药治疗乙型肝炎肝硬化研究进展

目前西医临床对乙型肝炎（乙肝）肝硬化多采用保肝、抗病毒、抗纤维化等措施治疗，核苷类药物为其常用药物，其在抗病毒治疗中的安全性和有效性已获得认同，但乙肝病毒（ HBV ）基因突变耐药、疗程较长、费用高等问题限制了其临床应用。中药以其费用低、不良反应小的特点逐渐用于乙肝肝硬化的治疗。现就核苷类药物与中药联合应用治疗乙肝肝硬化的现状作一综述。

核苷类抗疱疹病毒药物的研究进展

疱疹病毒可引起多种疾病,如角膜炎、唇疱疹、带状疱疹、生殖器疱疹、脑炎等,目前临床上用于治疗疱疹性疾病的药物主要是以阿昔洛韦为代表的核苷类药物,本文对已上市及正在研究中的核苷类抗疱疹药物及其作用机制作简要介绍。

抗肿瘤反义寡核苷酸药物研究现状和趋势

以基因为靶的反义药物是抗肿瘤新药研究和开发的重要方向之一 ,已有近 10种不同抗肿瘤反义寡核苷酸药物正在进行Ⅱ或Ⅲ期临床试验。基于肿瘤相关基因的多样性和复杂性 ,抗肿瘤反义药物的发展趋势是研究和开发靶向特定基因治疗特定类型肿瘤的“窄谱”抗肿瘤反义药物 ,以及由靶向多个肿瘤相关基因的反义寡核苷酸组成的“复方”式“广谱”抗肿瘤反义药物。

核苷类药物在乙型肝炎后肝硬化治疗中的应用与疗效

目的观察分析核苷类药物应用在乙型肝炎后肝硬化治疗中的临床疗效。方法从乙型肝炎后肝硬化患者中抽取90例,随机分为A、B、C3组,分别使用不同的核苷类药物进行治疗,A组为拉米夫定,B组为阿德福韦酯,C组为恩替卡韦,对比观察其实验室指标变化。结果所有患者在治疗1年后其HBV病毒DNA载量明显低于治疗前,且C组患者的降低程度及HBeAg转阴率明显高于另外两组患者,不良反应明显低于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对乙型肝炎后肝硬化患者使用核苷类药物进行治疗,能够有效降低患者体内病毒载量,其中恩替卡韦的临床治疗效果尤为突出,且不良反应较少,更为安全可靠,具有进一步推广应用的价值。

恩替卡韦对核苷类药物经治慢性乙型病毒性肝炎患者的抗病毒疗效观察

目的观察联合应用恩替卡韦和阿德福韦对拉米夫定耐药后联合阿德福韦治疗效果欠佳慢性乙型病毒性肝炎患者(慢乙肝)的抗病毒疗效。方法 124例拉米夫定耐药后联合阿德福韦治疗效果欠佳者按治疗意愿分为研究组(70例)和对照组(54例),对照组按原方案继续治疗,研究组换为恩替卡韦和阿德福韦联合治疗。追溯患者在拉米夫定初始治疗时和出现耐药时HBV DNA载量和耐药位点,观察比较治疗12个月内2组HBV DNA、HBeAg的阴转率和抗-HBe的阳转率。结果2组患者在拉米夫定初始治疗时和出现耐药时HBV DNA载量和耐药位点分布比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗6、9、12个月时,研究组的HBV DNA阴转率分别为74%、100%和100%,均高于对照组同时点的HBV DNA阴转率(P均<0.05)。研究组治疗9、12个月时的HBe Ag阴转率分别为43%和49%,均高于对照组同时点的HBe Ag阴转率(P均<0.05)。2组在不同时点的抗-HBe阳转率比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论对拉米夫定耐药后联合阿德福韦治疗效果欠佳的慢乙肝患者改用恩替卡韦和阿德福韦联合治疗可以获得更佳的抗病毒效果。

LC/MS技术在寡核苷酸类药物生物样品定量分析和代谢物鉴定中的应用

寡核苷酸是药物发展的新领域，这类药物是人工合成的DNA或RNA片段，一般由15～50个核苷酸组成，其药动学研究的经典方法是酶联免疫法，但由于该方法的建立耗时、耗资，因此成为新药研发的瓶颈。液相色谱一质谱（LC／MS）联用技术在寡核苷酸类药物生物分析中面临的主要问题有：待测物离子化效率低、基质效应严重、色谱分离条件与质谱不易兼容，样品处理回收率低，但该方法建立快速且选择性强，并能够同时进行代谢产物研究，因此，这项技术尽管存在一些缺点但依然备受关注。本文综述了过去15年中LC／MS技术在寡核苷酸类药物生物样品定量分析和代谢物鉴定中的发展和应用。

慢性乙型肝炎核苷类药物治疗依从性影响因素Logistic回归分析

目的:探讨影响慢性乙型肝炎核苷类药物治疗依从性的相关因素及预防措施。方法:回顾性分析190例核苷类药物治疗的慢性乙型肝炎患者的临床资料,比较依从性好与依从性差两组患者相关指标上的差异,进行Logistic回归分析。结果:190例应用核苷类药物治疗的慢性乙型肝炎患者中依从性好130例(68.42%),依从性差60例(31.58%);单因素检验11个研究指标是影响核苷类药物治疗依从性的相关因素(P<0.05);多因素非条件Logistic回归分析影响慢性乙型肝炎核苷类药物治疗依从性的独立因素有:文化程度低(OR=4.032)、缺乏慢性乙型肝炎知识(OR=3.285)、存在核苷类药物不良反应(OR=2.984)、经济收入低(OR=2.562)。结论:慢性乙型肝炎患者进行核苷类药物治疗存在一定程度的依从性差,影响因素复杂,应实施相应措施提高其依从性。

核苷类抗病毒药物研究进展

核苷类药物在病毒类疾病的治疗中占据重要位置。此文综述了核苷类抗病毒药物的研究开发状况。