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水稻赤霉素代谢基因OsGA2ox4的两种检测方法比较
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作者 顾巧美 郑国利 王攀 《中国种业》 2024年第4期108-112,共5页
针对水稻赤霉素代谢基因OsGA2ox4,利用PARMS试剂盒及基于PCR引物3'末端核苷酸双脱氧修饰两种检测方法,对236份水稻材料进行基因型检测,两种检测方法结果符合率为93.18%,均可以通过SNP分型对水稻赤霉素代谢基因OsGA2ox4进行基因型鉴... 针对水稻赤霉素代谢基因OsGA2ox4,利用PARMS试剂盒及基于PCR引物3'末端核苷酸双脱氧修饰两种检测方法,对236份水稻材料进行基因型检测,两种检测方法结果符合率为93.18%,均可以通过SNP分型对水稻赤霉素代谢基因OsGA2ox4进行基因型鉴定。对两种方法的优缺点具体说明,并且提供这两种方法的选择或使用条件,可以为SNP检测技术的进一步研究及两种方法在水稻其他基因SNP分型中的应用提供参考。 展开更多
关键词 水稻 赤霉素 PARMS 核苷双脱氧修饰 核苷多态性
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酵母tRNA^(Ala)中修饰核苷酸T_(54),Ψ_(55)的生物功能
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作者 蒋华琦 金由辛 王德宝 《中国科学(C辑)》 CSCD 1997年第6期497-502,共6页
酵母tRNA^(Ala)的3′半分子与一个11聚的DNA片段(5′GGAATCGAACC3′)杂交后用RNase H酶解,该酶能在ψ_(55)的3′侧定点剪切,这样就制备得片段C_(36)-ψ_(55)该片段经1~2个高碘酸氧化和β-消去得片段C_(36)-T_(54)和C_(36)-G_(53).机器... 酵母tRNA^(Ala)的3′半分子与一个11聚的DNA片段(5′GGAATCGAACC3′)杂交后用RNase H酶解,该酶能在ψ_(55)的3′侧定点剪切,这样就制备得片段C_(36)-ψ_(55)该片段经1~2个高碘酸氧化和β-消去得片段C_(36)-T_(54)和C_(36)-G_(53).机器合成了3个酵母tRNA^(Ala)的片段,分别j是片段C_(56)-A_(76),U_(55)-A_(76)(以U替代ψ_(55))和U_(54)-A_(76)(以UU替代T_(54)ψ_(55)).合成和制备的片段以适当的组合用T_4RNA连接酶连接,产物是酵母tRNA^(Ala)的3′半分子或其类似物.3种3′半分子或其类似物分别与天然5′半分子连接得重组天然酵母tRNA^(Ala)(tRNAr)和2个酵母tRNA^(Ala)的类似物:(1)tRNAa(以U替代ψ_(55)),(2)tRNAb(以UU替代T_(54)ψ_(55)).体外测定了它们的丙氨酸接受活力和参入活力,发现酵母tRNA^(Ala)的类似物tRNAa和tRNAb与天然重组酵母tRNA^(Ala)相比,它们的氨基酸接受活力分别降低了25%和55%,参入活力分别降低了35%和30%.说明酵母tRNA^(Ala)中的修饰核苷酸T_(54)和ψ_(55)对该tRNA的功能有重要的影响. 展开更多
关键词 酵母 酵母tRNA^Ala 生物功能 修饰核苷
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hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究 被引量:3
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作者 孙淑娜 桂永浩 +2 位作者 宋后燕 蒋璆 王跃祥 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期325-329,共5页
目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为... 目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。方法采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调,并进行hand2表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射,即对照MO(Con MO)注射组、hand2MO注射组、hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率。在显微镜下观察hand2MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。结果hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2-GFP mRNA注射组在8hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与Con MO注射组相比,hand2MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。结论向斑马鱼受精卵显微注射hand2MO的方法可有效的使hand2表达下调。hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。 展开更多
关键词 hand2 斑马鱼 胚胎发育 吗啡啉修饰的反义核苷
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合成Hg-DADPA柱分离含硒或硫化合物的研究
4
作者 韩维娜 张震 +2 位作者 师帅 柴奇 刘学娜 《安徽农业科学》 CAS 2015年第24期12-16,共5页
[目的]通过化学方法合成一种新颖的Hg-DADPA柱,用于分离和富集植物及微生物体中硫硒修饰的化合物。[方法]使用二氨基二异丙基琼脂糖(DADPA)与对氯汞苯甲酸进行反应,得到Hg-DADPA色谱柱,用不同浓度的盐酸洗脱不同位置取代的硫或硒化合物... [目的]通过化学方法合成一种新颖的Hg-DADPA柱,用于分离和富集植物及微生物体中硫硒修饰的化合物。[方法]使用二氨基二异丙基琼脂糖(DADPA)与对氯汞苯甲酸进行反应,得到Hg-DADPA色谱柱,用不同浓度的盐酸洗脱不同位置取代的硫或硒化合物;然后,通过Hg-DADPA色谱富集大肠杆菌(E.coli)的tRNA中含硫、含硒化合物,并且鉴定。同时,测试Hg-DADPA色谱柱分离后样品回收率。[结果]合成的Hg-DADPA柱通过0.002、0.005、0.5 mol/L HCl洗脱,可以分离尿苷三磷酸(UTP)、2-硫代尿嘧啶(2-SU)、2-硒代尿嘧啶(2-Se U)和4-硒代尿苷三磷酸(4-Se UTP)混合物,回收率均在90%以上。Hg-DADPA柱从大肠杆菌K12中选择性地富集到3个含硫修饰的核苷酸,经ESI和HR-MS鉴定为鸟嘌呤-2-硫代尿嘧啶核苷酸、腺嘌呤-3-硫代尿嘧啶核苷酸和鸟嘌呤-5-甲酰-2-尿嘧啶核苷酸。[结论]合成的Hg-DADPA柱对含硒、含硫化合物有很好的分离效果,且可反复使用,从而为植物、微生物中含硒或硫有机化合物的富集、分离提供一个简便的分离材料。 展开更多
关键词 Hg-DADPA柱 对氯汞苯甲 含硫或硒修饰核苷 TRNA 分离
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末端脱氧核苷酸转移酶在生物传感及核酸合成领域的应用
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作者 唐梦童 王兆官 +1 位作者 李娇娇 齐浩 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期51-64,共14页
末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是聚合酶X家族中的一员,与典型的DNA聚合酶不同,TdT以恒温的无模板依赖的方式催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)聚合到寡核苷酸的3’羟基端来合成DNA。并且TdT对底物的耐... 末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是聚合酶X家族中的一员,与典型的DNA聚合酶不同,TdT以恒温的无模板依赖的方式催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)聚合到寡核苷酸的3’羟基端来合成DNA。并且TdT对底物的耐受性高具有聚合修饰型dNTP的能力,如荧光修饰的dNTP、生物素修饰的dNTP,甚至人工碱基均可作为其良好底物。TdT的这些生化特性使其被广泛的应用在生物传感和核酸合成领域中,促进了许多基于核酸的工具和方法的发展,并为酶促从头合成DNA技术的发展奠定基础。介绍了TdT的性质,重点总结了它在其介导的生物检测技术、核酸的修饰技术以及酶促合成DNA技术三个方面的核心作用、目前面临的挑战以及未来研究的方向,以期促进TdT在生物传感器和核酸合成中的进一步应用。 展开更多
关键词 末端脱氧核苷转移酶 生物传感器 修饰核苷 合成
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非复制型mRNA疫苗的设计策略
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作者 贺彩英 竺家扬 +1 位作者 刘雨莎 文金生 《生命的化学》 CAS 2024年第5期769-779,共11页
随着信使RNA(messenger ribonucleic acid,mRNA)的核苷酸化学修饰和递送技术的不断发展和完善,mRNA疫苗技术在传染病预防和癌症治疗中显示出了超乎预期的效果。2023年,Katalin Karikó及Drew Weissman因为在核苷酸碱基修饰助力mRNA... 随着信使RNA(messenger ribonucleic acid,mRNA)的核苷酸化学修饰和递送技术的不断发展和完善,mRNA疫苗技术在传染病预防和癌症治疗中显示出了超乎预期的效果。2023年,Katalin Karikó及Drew Weissman因为在核苷酸碱基修饰助力mRNA疫苗成功研发方面的突出贡献荣获了诺贝尔生理学或医学奖。本文对近年来非复制型mRNA疫苗研究在降低mRNA诱导免疫反应、提高mRNA稳定性、提升抗原表达效率、递送系统开发等方面的最新进展予以综述,以期为研究人员提出全新的概述,并且助力mRNA疫苗在更多传染性疾病乃至肿瘤防治中得到广泛应用。 展开更多
关键词 MRNA 非复制 疫苗 核苷酸修饰 递送系统
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mRNA修饰研究概况及展望 被引量:2
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作者 孙文举 周克任 +2 位作者 杨建华 周惠 屈良鹄 《生命科学》 CSCD 2016年第5期531-538,共8页
信使RNA的核苷酸修饰主要包括2'-O-甲基化、假尿嘧啶化、m6A、m5C、m7G、m1A、5hm C等。已有的研究表明,这些修饰在m RNA稳定性、加工、遗传信息传递以及细胞的应激反应中起到重要作用。由于技术的限制,过去我们对于m RNA修饰知之... 信使RNA的核苷酸修饰主要包括2'-O-甲基化、假尿嘧啶化、m6A、m5C、m7G、m1A、5hm C等。已有的研究表明,这些修饰在m RNA稳定性、加工、遗传信息传递以及细胞的应激反应中起到重要作用。由于技术的限制,过去我们对于m RNA修饰知之甚少。近年来,一系列新技术的产生为全面地考察m RNA核苷酸修饰状况,深入地研究它们的生物学功能提供了极大的便利,并且取得了一些重要的进展。就此方面的研究概况作简要概述。 展开更多
关键词 信使RNA 核苷酸修饰 假尿嘧啶化 m6A m1A m5C 表观转录组学
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酵母丙氨酸tRNA类似物的合成及其生物活力的测定 被引量:3
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作者 刘建华 王德宝 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 1991年第1期43-49,共7页
在体外系统中,T 7-RNA聚合酶转录编码酵母丙氨酸tRNA及其半分子的DNA,获得不含修饰核苷酸的酵母丙氨酸tRNA及其5’半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸).在T4-RNA连接酶的催化下,不含修饰核苷酸的5'半分子(1-35位核苷... 在体外系统中,T 7-RNA聚合酶转录编码酵母丙氨酸tRNA及其半分子的DNA,获得不含修饰核苷酸的酵母丙氨酸tRNA及其5’半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸).在T4-RNA连接酶的催化下,不含修饰核苷酸的5'半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸)分别与天然的3'半分子(36-75位核苷酸)和5'半分子(1-36位核苷酸)连接成tRNA类似物.用以上方法得到了酵母丙氨酸tRNA的3个类似物:(1)tRNA的5'半分子不含修饰核苷酸;(2)tRNA的3'半分子不含修饰核苷酸;(3)整个tRNA分子不含有修饰核苷酸.在鼠肝氨酰tRNA合成酶系统中测定tRNA接受丙氨酸的活力,在兔网质无细胞蛋白质合成系统中测定tRNA将丙氨酸参入蛋白质的活力.结果是:5'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低52%,而参入丙氨酸的活力基本不变;3'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低79%,参入活力降低57%;整个分子不含修饰核苷酸者接受丙氨酸的活力降低85%,参入活力降低47%.这些结果说明修饰核苷酸,尤其是3'半分子的修饰核苷酸与tRNA的接受活力和参入活力间有密切的关系. 展开更多
关键词 酵母丙氨 TRNA 修饰核苷
全文增补中
Selective alkylation and bioactivity of phosphorothioated nucleolin aptamer AS1411 被引量:1
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作者 张光普 邓家荔 +4 位作者 杨先桃 朱月洁 关注 张礼和 杨振军 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2017年第1期23-30,共8页
An operationally simple and efficient method for the synthesis of a wide range of alkylated nucleotides under mild conditions was developed. This improved method furnishes alkylated nucleotides fi'om both single nucl... An operationally simple and efficient method for the synthesis of a wide range of alkylated nucleotides under mild conditions was developed. This improved method furnishes alkylated nucleotides fi'om both single nucleotides and oligonucleotides, and were prepared in high yields of 81% to 91%. Alkyl modified aptamer AS1411s were synthesized using this method and the biological activity screening results demonstrated that alkylation at the 1^st P-S site on yielded stronger target protein binding capacity, greater growth suppression effects against K562 and HL-60 cell lines, and improved serum stability, as compared with AS1411. This modified aptamer may be useful in tumor detection and treatment. 展开更多
关键词 Phosphorothioated nucleotide ALKYLATION APTAMER AS 1411 NUCLEOLIN
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Electrochemistry of carboxylated nanodiamond films
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作者 LI YanShuang LUO HongXia +3 位作者 DAI LiMing GUO Wei LI ShaNa GUO ZhiXin 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2012年第11期2445-2449,共5页
The electrochemical behavior of nanodiamond (ND) film functionalized with carboxylic acid groups was studied systemati- cally on a glassy carbon (GC) electrode. One stable redox couple corresponding to the carboxy... The electrochemical behavior of nanodiamond (ND) film functionalized with carboxylic acid groups was studied systemati- cally on a glassy carbon (GC) electrode. One stable redox couple corresponding to the carboxylic acid group was observed. At the scan rate of 0.1 V/s, the cathodic and anodic peak potentials were -0.093 V and 0.088 V (vs. Ag/AgCI), respectively. The carboxylic acid groups on the ND surface were reduced to CH2OH via a four electron redox process. The ND film modified electrode showed favorable electrocatalytic behavior toward the oxidation as well as the reduction of biomolecules, such as tryptophan and nicotinamide adenine dinucleotide. 展开更多
关键词 carboxylated nanodiamond FILM cyclic voltammetry CATALYSIS biomolecules
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