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核苷酸合成代谢学习中奇幻联想法的应用
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作者 贾长虹 常丽新 +2 位作者 刘海燕 李玥 杨永强 《河北理工大学学报(社会科学版)》 2010年第4期113-114,120,共3页
介绍了如何将一种有效的记忆方法-奇幻联想法应用到核苷酸合成代谢的学习中,通过教学实践证明,该方法具有高效性和常效性。
关键词 奇幻联想法 核苷酸合成 嘧啶 嘌呤
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多肽/核苷酸合成用固相载体材料纤维素小球的制备及其表征
2
作者 季生象 保罗.尼利 贾凯凯 《化工管理》 2015年第35期148-149,共2页
本文通过对多肽/核苷酸合成用固相载体材料纤维素小球的制备及其表征进行研究分析,通过研究证明:在纤维素小球制备过程中,加入成孔剂淀粉可使纤维素小球,内部呈蜂窝状,空隙较多,为多孔结构。并且纤维素与DMAC/Li Cl配成溶液时浓度要适中... 本文通过对多肽/核苷酸合成用固相载体材料纤维素小球的制备及其表征进行研究分析,通过研究证明:在纤维素小球制备过程中,加入成孔剂淀粉可使纤维素小球,内部呈蜂窝状,空隙较多,为多孔结构。并且纤维素与DMAC/Li Cl配成溶液时浓度要适中,溶液浓度较低时,无法得到完整的纤维素小球。 展开更多
关键词 多肽/核苷酸合成 固相载体材料 纤维素小球 成孔剂 淀粉
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对虾白斑综合征病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因的系统进化分析 被引量:2
3
作者 李嵚 杨丰 +1 位作者 张景海 陈英杰 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期145-149,155,共6页
目的为了对对虾白斑综合征病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)中最为保守的胸腺嘧啶核苷酸合成酶 (WSV TS)基因 ,进行该病毒的系统发育学研究。方法通过GenBankTM 数据库和DNAMAN分析系统 ,对不同生物来源的胸腺嘧啶核苷酸合成酶进行... 目的为了对对虾白斑综合征病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)中最为保守的胸腺嘧啶核苷酸合成酶 (WSV TS)基因 ,进行该病毒的系统发育学研究。方法通过GenBankTM 数据库和DNAMAN分析系统 ,对不同生物来源的胸腺嘧啶核苷酸合成酶进行同源性比较并构建了该基因的系统发育进化树。结果 :WSV TS的氨基酸序列与来自高等生物 ,特别是同哺乳动物有着很高的同源性 ,而与多种病毒的同源性较低。结论WSV ts基因是WSSV基因组中最为保守的基因 ,其进化树的构建对于理解WSSV的进化地位有重要的帮助。 展开更多
关键词 胸腺嘧啶核苷酸合成 对虾白斑综合征病毒 同源性分析 系统进化分析
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枯草芽孢杆菌嘌呤核苷酸合成途径基因修饰及效应 被引量:1
4
作者 刘露 夏苗苗 班睿 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期53-58,79,共7页
在核黄素操纵子过表达的枯草芽孢杆菌中,采用无标记基因敲除方法,分别敲除GMP还原酶基因(guaC)、腺苷琥珀酸合成酶基因(purA)、嘌呤操纵子(pur operon)阻遏蛋白编码基因簇(purR-yabJ),并且用cryⅢA mRNA稳定子替换嘌呤操纵子的mRNA前导... 在核黄素操纵子过表达的枯草芽孢杆菌中,采用无标记基因敲除方法,分别敲除GMP还原酶基因(guaC)、腺苷琥珀酸合成酶基因(purA)、嘌呤操纵子(pur operon)阻遏蛋白编码基因簇(purR-yabJ),并且用cryⅢA mRNA稳定子替换嘌呤操纵子的mRNA前导区,构建了菌株LX35.采用实时定量PCR方法,测定其胞内嘌呤操纵子mRNA的相对水平.摇瓶发酵,测定其发酵液中的核黄素含量.结果显示,菌株LX35嘌呤操纵子的mRNA水平相对提高了53.33倍,核黄素产量提高了126.6%.使用cryⅢA mRNA稳定子,能够有效提高嘌呤操纵子的表达水平,有助于核黄素过量合成. 展开更多
关键词 pur操纵子 核黄素 实时定量PCR 嘌呤核苷酸合成途径 枯草芽孢杆菌
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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成相关酶有助于1,4-丁二醇转化为4-羟基丁酸 被引量:1
5
作者 张鑫 陈国强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1749-1754,共6页
4-羟基丁酸(4-HB)不仅具有医学应用价值,而且是合成生物材料P3HB4HB的重要前体。在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)参与情况下,大肠杆菌Escherichia coli S17-1(pZL-dhaT-aldD)可以把1,4-丁二醇(1,4-BD)转化为4HB。为提高4HB产率,通过过表达... 4-羟基丁酸(4-HB)不仅具有医学应用价值,而且是合成生物材料P3HB4HB的重要前体。在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)参与情况下,大肠杆菌Escherichia coli S17-1(pZL-dhaT-aldD)可以把1,4-丁二醇(1,4-BD)转化为4HB。为提高4HB产率,通过过表达烟酸磷酸核糖转移酶(PncB)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成酶(NadE)增加胞内NAD含量,从而加速1,4-BD转化反应的进行。结果表明,PncB-NadE的表达使1,4-BD转化率比对照组增加13.03%,由10 g/L的1,4-BD得到4.87 g/L的4HB,单位细胞的4HB产量由1.32 g/g提高40.91%至1.86 g/g。因此PncB和NadE可用于促进1,4-BD转化为4HB。 展开更多
关键词 4-羟基丁 1 4-丁二醇 烟酰胺腺嘌呤二核苷(NAD) 核糖转移酶 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成
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家蚕微孢子虫核糖-5-磷酸异构酶A基因的克隆及表达特征分析
6
作者 尚瑞沙 齐静茹 +3 位作者 陈红丽 张志林 张轶岭 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期61-66,共6页
核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植... 核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植物二氧化碳固定的卡尔文循环。为探索RpiA在家蚕微孢子虫侵染家蚕后能量代谢与物质合成过程中所发挥的作用,通过PCR扩增得到NbRpiA基因的编码区。该开放阅读框全长345 bp,编码114个氨基酸,预测蛋白质的分子质量约为13.145 kD,等电点为7.72,未发现明显已知功能结构域。实时荧光定量PCR检测发现,NbRpiA基因在家蚕微孢子虫感染家蚕后7 d内均有表达:从感染后2 h起,NbRpiA基因的表达水平呈缓慢上升的趋势,第2天达到最高,随后表达水平逐渐降低,从第4天开始表达水平大幅降低,至第7天降至最低。初步推测NbRpiA可能在家蚕微孢子虫孢子发芽及增殖阶段发挥作用。研究结果为了解NbRpiA在家蚕微孢子虫能量代谢与物质合成中的作用提供了初步线索。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 核糖-5-磷异构酶A 戊糖途径 核苷酸合成 实时荧光定量PCR
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CLOCK氧化还原修饰介导内源性H_(2)O_(2)对小鼠细胞呼吸的调节作用
7
作者 常薇薇 李勋凯 +2 位作者 张祝琴 陈厚早 刘德培 《基础医学与临床》 2023年第5期745-750,共6页
目的探究生物钟核心转录因子昼夜节律运动输出周期蛋白(CLOCK)介导内源性过氧化氢(H_(2)O_(2))对细胞呼吸的调节作用和机制。方法利用Seahorse细胞能量代谢分析仪检测Clock^(C195S)小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)和成体成纤维细胞(MAFs)细胞... 目的探究生物钟核心转录因子昼夜节律运动输出周期蛋白(CLOCK)介导内源性过氧化氢(H_(2)O_(2))对细胞呼吸的调节作用和机制。方法利用Seahorse细胞能量代谢分析仪检测Clock^(C195S)小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)和成体成纤维细胞(MAFs)细胞氧耗能力和糖酵解能力;通过q-PCR检测细胞呼吸关键代谢酶基因表达水平;MEFs进行抗氧化剂Trolox处理后,用Amplex■ Red试剂盒检测内源性H_(2)O_(2)的含量,并通过生物素碘乙酰胺(BIAM)探针标记检测CLOCK蛋白氧化还原修饰的改变,进一步检测处理后的细胞氧耗能力和细胞呼吸关键代谢酶基因表达水平。结果Clock^(C195S)细胞氧耗能力和糖酵解能力下降,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)合成关键酶烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(NMNAT2)表达降低(P<0.05),NAD含量下降;Trolox处理导致细胞内源性H_(2)O_(2)含量降低,Clock wt MEFs氧耗能力降低而Clock^(C195S) MEFs变化无统计学意义。结论CLOCK蛋白可以通过195位点半胱氨酸氧化还原修饰介导内源性H_(2)O_(2)对细胞呼吸的调节作用。 展开更多
关键词 细胞呼吸 烟酰胺腺嘌呤二核苷(NAD)合成 CLOCK氧化还原修饰
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多聚(ADP-核糖)聚合酶与细胞损伤 被引量:8
8
作者 朱铁年 赵瑞景 凌亦凌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期104-107,共4页
Poly(ADP-ribose) polymerase(PARP) is a protein-modifying and nucleotide-polymerizing enzyme. As a critical element in DNA repair, PARP can be activated by DNA strand breaks. Excessive activation of PARP, however, can ... Poly(ADP-ribose) polymerase(PARP) is a protein-modifying and nucleotide-polymerizing enzyme. As a critical element in DNA repair, PARP can be activated by DNA strand breaks. Excessive activation of PARP, however, can deplete NAD + and ATP, leads to cell death. Cleavage of PARP by activated caspase-3 play an important role in cell apoptosis. 展开更多
关键词 细胞凋亡 核苷酸合成酶类 细胞损伤 细胞坏死 炎症
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TS、Ki-67及P53在结直肠癌原发灶及转移淋巴结中的表达及与5-FU化疗敏感性的关系 被引量:6
9
作者 任建林 祝明洁 +1 位作者 陈峰 姚晓虹 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2020年第4期328-332,共5页
目的探讨结直肠癌原发灶及转移淋巴结中胸腺嘧啶核苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)、Ki-67和p53表达差异性,并探究其对预测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的价值。方法选取有淋巴结转移的结直肠腺癌患者33例,采用免疫组织... 目的探讨结直肠癌原发灶及转移淋巴结中胸腺嘧啶核苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)、Ki-67和p53表达差异性,并探究其对预测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的价值。方法选取有淋巴结转移的结直肠腺癌患者33例,采用免疫组织化学方法检测结直肠癌淋巴结转移灶及原发灶中TS、Ki-67和P53的表达情况。结果TS高表达、p53和Ki-67在转移淋巴结的表达率显著高于原发灶;较好预后的即对5-FU化疗敏感的病例共7例,其中在转移淋巴结及原发癌中TS均为低表达率,p53、Ki-67为阴性表达。结论转移淋巴结中的p53、TS、Ki-67的表达情况同原发灶相比有异质性变化,转移淋巴结TS表达情况可以预测结直肠癌患者对5-FU化疗敏感性,p53的表达情况或许可预测结直肠癌患者对5-FU的化疗敏感性,Ki-67表达与5-FU化疗敏感性的关系仍需要进一步研究。 展开更多
关键词 结直肠癌 淋巴结转移 化疗药敏性 5-氟尿嘧啶 胸腺嘧啶核苷酸合成 KI-67 P53
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沉默GCN5或SOX9基因对Thy-1肾炎大鼠肾组织中TGF-β1生成的影响 被引量:1
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作者 吴志皎 张志伟 +7 位作者 刘龙飞 夏露 谢梦晓 罗灿 邱文 张婧 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期360-366,共7页
目的:研究沉默大鼠肾组织中通用控制核苷酸合成5(general control nonderepressible 5,GCN5)基因、性别决定区Y框蛋白9(SRY related HMG box-9,SOX9)基因对Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾组织内转化生长因子-β1(transforming... 目的:研究沉默大鼠肾组织中通用控制核苷酸合成5(general control nonderepressible 5,GCN5)基因、性别决定区Y框蛋白9(SRY related HMG box-9,SOX9)基因对Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾组织内转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)生成的影响。方法:分别用慢病毒(lentivirus,LV)包装GCN5和SOX9发夹状小干扰RNA(shRNA),即制备LV-shGCN5和LV-shSOX9重组病毒。然后行大鼠肾动脉灌注术将LV-shGCN5和LV-shSOX9分别导入大鼠肾脏,再经尾静脉注射兔抗大鼠胸腺细胞抗血清(anti-thymocyte serum,ATS)复制Thy-1N模型。在注射ATS后3 h,取大鼠肾组织,用RTPCR和Western blot检查各组大鼠肾组织中GCN5和SOX9的mRNA及蛋白表达水平,以验证干扰效果及GCN5、SOX9对TGF-β1产生的影响。结果:利用肾动脉灌注术将LV-shGCN5或LV-shSOX9重组病毒导入大鼠肾组织后,不仅能有效沉默相应的靶基因,而且还能下调TGF-β1的表达。结论:沉默大鼠肾组织中GCN5或SOX9基因后能显著抑制Thy-1N大鼠肾内TGF-β1的生成。 展开更多
关键词 Thy-1肾炎(Thy-1N) 通用控制核苷酸合成5(GCN5) 性别决定区Y框蛋白9(SOX9) 转化生长因子-β1(TGF-β1) 基因沉默
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晚期非小细胞肺癌肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1和ERCC1基因表达的研究 被引量:2
11
作者 张国兵 陈建 +4 位作者 王临润 李菌 李敏伟 徐农 申屠建中 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期540-546,共7页
目的:探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1基因表达水平及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测49例晚期NSCLC肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1 mRNA表达水平,对照分析其与患者临床特征... 目的:探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1基因表达水平及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测49例晚期NSCLC肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1、ERCC1 mRNA表达水平,对照分析其与患者临床特征、吉西他滨/卡铂方案的化疗反应以及预后的关系。结果:肿瘤组织和外周血淋巴细胞中RRM1表达水平呈正相关(rs=0.332,P<0.05),而ERCC1无相关(rs=0.258,P>0.05);肿瘤组织或外周血淋巴细胞中RRM1和ERCC1表达几乎同步(rs=0.634、0.351,P<0.05),但基因表达与患者的性别、年龄、吸烟状态、体力状况PS评分,以及肿瘤临床分期和组织学类型均无显著相关性(P均>0.05)。肿瘤组织中RRM1、ERCC1或外周血RRM1低表达者化疗有效率、中位生存期及1年生存率均高于高表达者,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05),特别是肿瘤组织ERCC1低表达者有较高的2年生存率(P<0.05);而外周血ERCC1表达水平与化疗疗效以及预后均无相关性(P均>0.05)。结论:肿瘤组织中RRM1、ERCC1和外周血淋巴细胞中RRM1基因表达水平可能与晚期NSCLC患者吉西他滨/卡铂化疗的疗效以及预后密切相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺/病理学 肺肿瘤/病理学 聚合酶链反应 核苷还原酶类/生物合成 DNA结合蛋白质类/生物合成 脱氧胞苷/治疗应用 脱氧胞苷/类似物和衍生物 卡铂/治疗应用 基因表达
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西尼罗河病毒遗传学易感性的确定
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作者 朱音 《国外医学情报》 2003年第5期17-17,共1页
西尼罗河病毒的神秘之处就在于因它所产生的严重症状只在相对较小比例的人群(即被感染人群)中出现,也就是说,仅有20%的患者可出现发热症状。目前,法国一个研究小组提出可利用遗传学特性来确定西尼罗河病毒的易感性。
关键词 西尼罗河病毒 黄热病病毒 遗传易感性 29-59-寡嘌呤核苷酸合成
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HPV感染宫颈病变危险因素及cGAS/STING/TBK1信号通路基因表达水平 被引量:1
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作者 刘洁 罗春艳 +2 位作者 王小兵 郭艳琴 刘丽珍 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1076-1080,共5页
目的探讨环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素激活蛋白/TANK结合激酶1(cGAS/STING/TBK1)信号通路基因在HPV感染宫颈病变患者中的表达及其易感因素。方法回顾性分析2019年3月-2023年3月吉安市中心人民医院收治的151例人乳头瘤病毒(H... 目的探讨环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素激活蛋白/TANK结合激酶1(cGAS/STING/TBK1)信号通路基因在HPV感染宫颈病变患者中的表达及其易感因素。方法回顾性分析2019年3月-2023年3月吉安市中心人民医院收治的151例人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者的临床资料,并作为研究组,151例同期无HPV感染的宫颈病变患者的临床资料作为对照组。比较两组临床资料,采用单因素及多因素分析法分析宫颈病变患者HPV感染的易感因素;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测cGAS、STING、TBK1mRNA表达水平;比较研究组和对照组cGAS、STING、TBK1mRNA表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析cGAS、STING、TBK1单独及联合检测对宫颈病变患者HPV感染的诊断价值。结果多因素Logistic回归分析结果显示,年龄大、既往宫颈炎病史、性生活频率高、未使用避孕套、性生活前后无外阴清洗、初次性生活年龄≤20岁、有宫颈癌家族史、初中及以下文化、性伴侣个数≥2个均是宫颈病变患者HPV感染的易感因素(P<0.05);研究组cGAS、STING、TBK1 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);cGAS、STING、TBK1水平联合检测诊断宫颈病变患者HPV感染的曲线下面积(AUC)为0.902,高于各项单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度和特异度为82.80%和82.10%,诊断价值均较高。结论宫颈病变患者HPV感染后cGAS/STING/TBK1信号通路被激活;联合检测cGAS、STING、TBK1有助于诊断宫颈病变患者HPV感染;宫颈病变患者HPV感染与患者年龄、宫颈炎病史、性生活频率等多种因素有关。 展开更多
关键词 宫颈病变 人乳头瘤病毒 危险因素 环鸟嘌呤核苷腺嘌呤核苷酸合成 干扰素激活蛋白 TANK结合激酶1 诊断价值 受试者工作特征曲线
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高危型HPV感染宫颈病变患者外周血cGAS/ STING/TBK1信号通路基因表达
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作者 王媛媛 王亚莉 +3 位作者 黄颖 汪晶 王燕 宋成文 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期110-114,共5页
目的 探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者外周血环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素激活蛋白/TANK结合激酶1(cGAS/STING/TBK1)信号通路基因相对表达量。方法 选取2015年4月-2021年4月中部战区总医院妇产科收治的高危型... 目的 探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者外周血环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素激活蛋白/TANK结合激酶1(cGAS/STING/TBK1)信号通路基因相对表达量。方法 选取2015年4月-2021年4月中部战区总医院妇产科收治的高危型HPV感染宫颈病变患者89例为研究组,同期无HPV感染的宫颈病变患者89例为对照组,采用第2代杂交捕获实验检测高危型HPV DNA载量,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测外周血cGAS、STING和TBK1 mRNA表达水平。结果 研究组外周血单个核细胞中cGAS、STING和TBK1 mRNA水平高于对照组(P<0.05);不同高危型HPV DNA载量患者外周血cGAS/STING/TBK1信号通路基因表达的比较差异有统计学意义(P<0.05),其中高载量组cGAS、STING和TBK1 mRNA水平最高,低载量组最低(P<0.05);不同高危型HPV感染类型患者外周血cGAS/STING/TBK1信号通路基因表达的比较差异无统计学意义。结论 高危型HPV感染对宫颈病变患者外周血cGAS/STING/TBK1信号通路基因表达影响较大,高危型HPV DNA载量与其表达水平密切相关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 高危型 病毒载量 宫颈病变 环鸟嘌呤核苷腺嘌呤核苷酸合成 干扰素激活蛋白 TANK结合激酶1
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半夏曲发酵机制及主要优势真菌的发酵功能研究 被引量:2
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作者 舒波 余金洪 王涛 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3022-3031,共10页
目的探讨半夏曲的自然固态发酵机制。方法采用免培养、纯培养相结合的方法研究半夏曲发酵真菌和细菌区系构成及主要代谢功能,针对分离到的主要优势真菌的纯培养菌株,分别采用碘量法及分光光度法检测其产淀粉酶及蛋白酶情况,采用显微镜... 目的探讨半夏曲的自然固态发酵机制。方法采用免培养、纯培养相结合的方法研究半夏曲发酵真菌和细菌区系构成及主要代谢功能,针对分离到的主要优势真菌的纯培养菌株,分别采用碘量法及分光光度法检测其产淀粉酶及蛋白酶情况,采用显微镜观察菌株对草酸钙结晶的破坏情况。结果半夏曲发酵过程中检测到丝衣孢霉Byssochlamys、根霉Rhizopus、曲霉Aspergillus、米勒酵母Millerozyma、假单胞菌Pseudomonas、芽孢杆菌Bacillus等属微生物。半夏曲发酵过程中真菌数量大幅增殖,前期及末期的真菌多样性远远高于发酵旺盛期,发酵40~64 h期间的样品与其他样品的真菌区系构成存在极显著差异(P<0.01)。丝衣孢霉属是唯一参与了整个半夏曲发酵过程的优势真菌,对米勒酵母、根毛霉、曲霉的生长具有明显抑制作用。细菌的数量及多样性均低于真菌,且其数量在半夏曲发酵过程中没有明显增长。微生物群落功能预测(phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states,PICRUS)分析表明半夏曲发酵过程中的真菌与氨基酸代谢、糖代谢及核苷酸合成代谢密切相关。真菌菌株发酵实验证实,丝衣孢霉属真菌与α-淀粉酶的生成及草酸钙针晶破损有关。结论细菌不是半夏曲发酵过程中的主要功能微生物,丝衣孢霉是半夏曲发酵过程中的主要优势功能微生物,与半夏曲的淀粉酶活性和与刺激性降低密切相关。 展开更多
关键词 半夏曲 发酵机制 真菌 丝衣孢霉 发酵功能 固态发酵 碘量法 淀粉酶 蛋白酶 根霉 曲霉 米勒酵母 假单胞菌 芽孢杆菌 氨基代谢 糖代谢 核苷酸合成代谢
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cGAS/STING通过NLRP3炎性小体调控人肺微血管内皮细胞炎症的作用机制 被引量:2
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作者 姜硕 王梦楠 +3 位作者 赵慧颖 郭晓夏 王慧霞 安友仲 《中华重症医学电子杂志》 CSCD 2021年第3期233-240,共8页
目的探讨鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶(cGAS)/干扰素激活蛋白(STING)通过NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体调控人肺微血管内皮细胞(HPMVECs)炎症的作用机制。方法原代培养HPMVECs,进行脂多糖(LPS)量效实验及cGAS、STING和NLRP3抑制干... 目的探讨鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶(cGAS)/干扰素激活蛋白(STING)通过NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体调控人肺微血管内皮细胞(HPMVECs)炎症的作用机制。方法原代培养HPMVECs,进行脂多糖(LPS)量效实验及cGAS、STING和NLRP3抑制干预实验。(1)量效实验:以50、100、1000 ng/ml的LPS作用24 h后(分别为50 ng/mlLPS组、100 ng/mlLPS组、1000 ng/ml LPS组),用实时荧光反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)分别检测cGAS、STING和NLRP3表达。(2)cGAS抑制干预实验:使用cGAS(siRNA)转染,再加入100 ng/ml的LPS处理24 h;同时设立空白对照组、LPS刺激组、siRNA单独处理组,采用WesternBlot检测STING、NLRP3,及NLRP3下游因子白介素(IL)-1β和IL-18的表达。(3)STING抑制干预实验:使用STING(siRNA)转染,再加入100 ng/ml的LPS处理24 h;同时设立空白对照组,采用WesternBlot检测cGAS、NLRP3,及NLRP3下游因子IL-1β和IL-18的蛋白表达。(4)NLRP3抑制干预实验:使用NLRP3炎性小体抑制剂MCC950预处理30 min,再加入100 ng/ml的LPS处理24 h;同时设立空白对照组,采用WesternBlot检测cGAS、STING,及NLRP3下游因子IL-1β和IL-18的蛋白表达。结果(1)量效实验:与空白对照组比较,HPMVECs中cGAS、STING、NLRP3的mRNA水平和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)cGAS抑制干预实验:与空白对照组比较,LPS刺激HPMVECs,cGAS表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS刺激组比较,抑制cGAS时,siRNA+LPS处理组STING、NLRP3及其下游因子IL-1β、IL-18的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)STING抑制干预实验:与空白对照组比较,LPS刺激HPMVECs,STING表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS刺激组比较,抑制STING时,NLRP3及其下游因子IL-1β、IL-18的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),而cGAS的表达水平无显著降低(P>0.05)。(4)NLRP3抑制干预实验:与空白对照组比较,LPS刺激HPMVECs,siRNA+LPS处理组NLRP3表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS刺激组比较,抑制NLRP3显著降低了NLRP3下游因子白细胞IL-1β和IL-18的表达,差异有统计学意义(P<0.05),而cGAS和STING的表达水平无显著降低;差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)LPS刺激下,在HPMVECs中cGAS、STING、NLRP3、IL-1β和IL-18的表达水平均显著升高,参与调控炎症反应;(2)cGAS/STING/NLRP3信号通路顺序参与调控PMVECs炎症作用。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 人肺微血管内皮细胞炎性损伤 鸟嘌呤核苷腺嘌呤核苷酸合成 干扰素激活蛋白 NOD样受体蛋白3
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科学家找到抑制痘病毒复制新方法
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《中外科技信息》 北大核心 2003年第7期67-67,共1页
关键词 牛痘 痘病毒 病毒复制 抑制方法 人工合成低聚核苷 基因表达
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