乙型肝炎病毒核衣壳蛋白装配抑制剂--甲磺酸莫非赛定

乙型肝炎病毒(HBV)是引起乙型肝炎的病原体,属嗜肝DNA病毒科,具有较强的传染性、突发性等特点,在临床上表现多样化,易发展为慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化并可转变为原发性肝癌,是一类严重影响我国民众健康的重大疾病,现有的治疗药物在使用中有明显的局限性。甲磺酸莫非赛定(GLS4JHS)是由我国广东东阳光药业自主研发的一款二氢嘧啶类药物,按作用机制属于靶向HBV核衣壳蛋白装配抑制剂,可呈剂量依赖性减少病毒衣壳的正确组装,加速异常衣壳形成,从而强烈抑制HBV的复制和成熟病毒颗粒的产生。目前,已进入Ⅱ/Ⅲ期临床试验,现已公布的试验数据表明,甲磺酸莫非赛定对HBV DNA抑制作用十分明显,且安全性较好。本文就甲磺酸莫非赛定的基本信息、作用机制、药物代谢动力学及临床研究等作一概述。

HIV-1核衣壳蛋白NCp7的功能及其抑制剂研究进展

NCp7在HIV-1生活周期中多个步骤发挥重要的核酸分子伴侣作用。抑制NCp7的功能可阻断HIV-1复制。NCp7含有两个高度保守的锌指结构,对NCp7的功能起决定性作用。锌指结构突变将导致HIV-1丧失感染能力。NCp7抑制剂可望成为下一代不容易产生耐药突变的抗HIV-1药物。本文就NCp7抑制剂目前的研究进展作简略综述。

HBV衣壳蛋白装配抑制剂的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)是一种常见的嗜肝性病原体,全球约有4亿人感染,带来严重的社会问题和经济负担。虽然目前已有预防和治疗HBV的药物,但由于耐药性等问题不能彻底清除病毒感染,新药开发依然迫在眉睫。介绍了HBV的病毒结构、复制和感染过程,对现有治疗药物的优缺点进行了总结。对以衣壳蛋白装配为靶点的新药研究进展进行综述,旨在为今后开发抗HBV的新药提供参考。

不同程度肺炎患儿分泌型白细胞蛋白酶抑制剂与核因子-κB水平变化及临床意义

目的探讨不同程度肺炎患儿分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)与核因子-κB(NF-κB)水平变化及其临床意义。方法选择66例支气管肺炎患儿,分为普通肺炎组和重症肺炎组,分别在入院24h内(治疗前)和治疗5d后(治疗后)检测SLPI水平和NF-κB表达水平,同时选择20例健康儿童作为健康对照组。结果治疗前,重症肺炎组和普通肺炎组患儿SLPI水平明显低于健康对照组,NF-κB水平明显高于健康对照组(P<0.05)。治疗后,重症肺炎组和普通肺炎组SLPI水平较治疗前显著升高,NF-κB水平显著降低(P<0.05),但重症肺炎组的SLPI水平仍低于健康对照组,NF-κB水平仍高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),普通肺炎组的SLPI水平和NF-κB水平与健康对照组差异无统计学意义(P<0.05)。结论对肺炎患儿早期检测SLPI及NF-κB水平,有助于重症肺炎的早期诊断、治疗和预后。

胎膜早破孕妇胎膜组织中基质金属蛋白酶9与金属蛋白酶组织抑制剂2和核因子κB的表达与意义

目的 探讨胎膜早破患者胎盘胎膜组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP-2）和核因子κB（NF-κB）表达变化及意义.方法 采用免疫组织化学法,实时定量聚合酶链反应法和免疫印迹法分别检测胎膜早破剖宫产病例45例（胎膜早破组）、正常妊娠择期剖宫产52例（未临产组）、足月自然临产组56例（临产组）孕妇分娩后胎膜组织中MMP-9、TIMP-2和NF-κB的表达水平.结果 实时定量PCR在未临产组,临产组和胎膜早破组中,MMP-9的相对表达量分别是（3.0±1.2）、（10.4±3.1）、（22.1±3.5）,TIMP-2的相对表达量分别是（7.1±2.7）、（4.6±2.0）、（3.6±1.8）,NF-κBP65在3组的相对表达量分别是（1.1±0.4）、（2.5±0.4）、（3.3±0.4）,3组数据比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;免疫印迹显示,未临产、临产和胎膜早破组的MMP-9在胎膜的IOD值分别为（29.5±1.2）、（68.7±3.1）、（167.2±4.8）,TIMP-1的IOD值分别是（61.1±4.1）,（32.2±2.7）,（7.3±3.0）,NF-κB P65的IOD值分别是（22.3±3.2）、（52.5±3.6）、（182.7±5.0）,3组数据比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 MMP-9在胎膜早破中起到关键性作用,MMP-9/TIMP-2的平衡失调可能间接导致胎膜早破,可能通过NF-κB信号通路发挥调控作用.

SGLT-2抑制剂通过Nrf2/HO-1信号通路对2型糖尿病合并高血压大鼠动脉重构的干预作用

目的探究钠-葡萄糖协同转运蛋白(SGLT)-2抑制剂通过核因子-E2相关因子(Nrf)2/血红素氧合酶(HO)-1信号通路对2型糖尿病合并高血压大鼠基底动脉重构的干预作用。方法用自发性高血压大鼠(SHR)高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病合并高血压大鼠模型,造模成功后分为对照组、模型组和试验组各15只,实验组采用1 mg/(kg·d)达格列净灌胃,模型组和对照组给予等量生理盐水灌胃。8 w后血糖仪检测各组血糖水平,苏木素-伊红(HE)染色检测各组基底动脉病理情况,免疫荧光法检测基底动脉核增殖指数(Ki67)表达水平,Western印迹检测点各组基底动脉Nrf2和HO-1蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组血糖显著升高,基底动脉动脉血管壁厚管腔内径管腔外径和中膜面积均明显增加,Ki67表达显著增加,基底动脉平滑肌细胞排列紊乱,出现线粒体空泡化等现象,Nrf2及HO-1表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,试验组血糖水平下降,基底动脉动脉血管壁厚管腔内径管腔外径和中膜面积均明显降低,Ki67表达水平显著降低,超微结构病理学结构有所好转,Nrf2及HO-1表达水平显著上升(P<0.05)。结论SGLT-2抑制剂可以对2型糖尿病合并高血压大鼠基底动脉重构发挥干预作用,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路的调控相关。

XPO1抑制剂塞利尼索治疗急性髓系白血病的研究进展

急性髓系白血病(AML)是以骨髓和血液中的骨髓原始细胞克隆性增殖为特征的血液系统恶性肿瘤。尽管研究者们不断提出新的治疗方案,但患者的总体预后并没有产生显著改善。核输出蛋白1(nuclear export protein 1,XPO1)抑制剂通过抑制导致肿瘤发生的关键物质穿过癌细胞核膜而在癌症中发挥重要作用,其能促进AML细胞的细胞周期停滞和凋亡,与其他靶向药物或化疗方案组合能发挥广泛的抗癌作用并有较好的安全性。该文主要对XPO1抑制剂塞利尼索治疗AML的研究进展进行综述。

人组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1基因真核表达重组质粒的构建

目的 构建人基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 1(TIMP - 1)真核表达重组质粒 ,并进行序列分析。方法 利用人卵巢癌组织进行RP -PCR扩增TIMP - 1基因cDNA ,获目的片段 (6 31bp)连接至pcDNA4 。载体 ,转化大肠杆菌TOP1 0 筛选阳性克隆共鉴定 ,并对克隆的全长片段进行DNA序列测定。结果 经与GeneBank分布的序列进行分析比较证实 ,构建的真核表达重组质粒pcDNA4 -TIMP - 1含人TIMP - 1全长cDNA编码序列 ,仅 5 92位的碱基发生错义突变。结论 成功构建了TIMP - 1的真核表达质粒 ,为下一步研究TIMP - 1在卵巢癌侵袭转移中的作用打下物质基础。

放射性标记成纤维活化蛋白抑制剂PET/CT在心脏疾病诊断中的应用进展

活化的心肌成纤维细胞(CF)与心室重构直接相关,而成纤维活化蛋白(FAP)在活化的CF中高表达,它可以作为CF的标志物。靶向FAP PET/CT成像在心脏疾病的诊断和疗效评价等方面具有很大的应用潜力。就靶向FAP PET/CT分子探针及其在心肌梗死、肿瘤心脏病、心力衰竭、肺动脉高压、心肌病和心肌淀粉样变等心脏疾病中的应用予以综述。

蛋白激酶C抑制剂在防治家兔脑血管痉挛中对核因子-κB的影响

目的探讨蛋白激酶C抑制剂对核因子-кB在实验性家兔脑血管痉挛中表达变化的影响机制及对脑血管痉挛的防治作用.方法中国白兔60只,体重1.5～2 kg,其中45只经枕大池2次(间隔72 h)注入自体动脉血(1 ml/kg)制成脑血管痉挛模型,再随机分为4组:(1)单纯2次注血组(15只);(2)给药组(15只),动物每次经枕大池注血前注射蛋白激酶抑制剂等渗盐水稀释液0.1 ml,剂量为100 μg/kg;(3)等渗盐水组(15只),每次经枕大池注血前注射等量等渗盐水代替蛋白激酶抑制剂;(4)假穿刺组(15只).于第4、7、10天将动物分批处死,取基底动脉进行形态学观察,应用免疫组化、蛋白印迹及电泳迁移率改变分析等方法检测核因子-кB、кB抑制蛋白活性表达变化,评价不同剂量蛋白激酶抑制剂对其影响程度.结果单纯2次注血组家兔较假穿刺组在4～10 d基底动脉出现明显管腔狭窄、炎性浸润等改变,7 d时最明显;核因子-кB的活性于4～10 d也明显增高,与炎性变化一致;抑制蛋白кB表达下降,与核因子-кB呈负相关.给药组家兔与单纯注血组相比,基底动脉痉挛程度和炎性浸润明显减轻,抑制蛋白кB表达明显上升,核因子-кB活性下降,而等渗盐水组较单纯注血组则无明显差异.结论蛋白激酶抑制剂不仅能够显著减轻脑血管痉挛的程度,而且可减轻其管壁炎性浸润程度,其作用可能是通过抑制кB抑制蛋白的磷酸化作用减弱核因子-кB的表达来实现的.

抗艾滋病作用新靶点——HIV衣壳蛋白及其抑制剂研究概况

目的综述HIV衣壳蛋白及其抑制剂的研究概况。方法以国内外有代表性的论文为依据,进行分析、整理和归纳。结果与结论HIV衣壳蛋白正在成为一个具有潜在抗病毒作用的靶点,目前已经发现抑制HIV-1衣壳蛋白的化合物CAP-1在体内具有显著的抗病毒作用,化合物PA-457已经成为目前抗艾滋病化合物中唯一一种抑制HIV衣壳蛋白的成熟抑制剂正处于临床研究阶段。

核输出蛋白抑制剂的抗病毒作用研究进展

核输出蛋白(CRM1)是一种相对分子质量为120 kDa的蛋白质,参与大分子蛋白的核输出过程。本文从CRM1的结构及功能出发介绍了该蛋白在货物蛋白或核酸的核输出过程中的作用,以及在多种病毒感染宿主、病毒复制与成熟过程中扮演重要的角色。同时,还介绍了核输出蛋白抑制剂对CRM1功能的抑制作用中所展现出的抗病毒复制与组装、阻止病毒成熟、降低病毒对宿主的感染的作用与机制。提出了CRM1具有作为抗病毒复制的细胞靶标开发潜力,为新型抗病毒药物的开发提供了参考价值。

HIV-1衣壳蛋白抑制剂体外筛选方法研究进展

HIV-1的感染高度依赖其圆锥形的"富勒烯"型衣壳。衣壳由大约1 500个衣壳蛋白组装而成。近年来,衣壳蛋白已成为设计和筛选抗HIV-1药物的理想靶点。目前,文献已报道了多种基于不同原理的HIV-1衣壳蛋白抑制剂的筛选方法,该文将对这些体外筛选方法进行综述。

融合gp67信号肽的慈菇蛋白酶抑制剂基因在蚕体内表达

用ＡｃＭＮＰＶ的ｇｐ６７信号肽与慈菇蛋白酶抑制剂基因（ＡＰＩ２）融合，并整合到昆虫病毒表达载体ＢｍＢａｃＰＡＫ６中，受多角体蛋白基因启动子控制。慈菇蛋白酶抑制剂在蚕体内成功地得到了高效表达。比较了ｇｐ６７信号肽和慈菇蛋白酶抑制剂信号肽在昆虫表达系统中对表达产物的影响，发现表达产物都能分泌到血淋巴中，表达量很相似，但这两种信号肽在表达过程中都没有被切除，且不同信号肽对表达产物的生物活性有很大影响。

蛋白酶体抑制剂调控癌性恶病质的实验研究

目的:探讨蛋白酶体抑制剂对恶病质小鼠炎症细胞因子的合成和调控作用。方法:采用C26结肠癌细胞接种小鼠皮下,诱导恶病质模型,每天监测小鼠体重、食物摄入量和肿瘤体积,于肿瘤接种后第6、9、12和15天,每天给予荷瘤鼠腹腔注射生理盐水和不同剂量的蛋白酶体抑制Bortezomib(0.1、0.5和1.0mg/kg),第16天处死小鼠,检测肿瘤组织NF-κB活性、IL-6以及血清IL-6和IL-10水平。结果:第16天时,生理盐水组出现显著的体重和去瘤体重的下降(P<0.01)、腓肠肌萎缩及附睾脂肪的降解(P<0.01),同时血清IL-6、IL-10和肿瘤组织IL-6水平显著升高(P<0.01)。Bortezomib不同程度地抑制了去瘤体重、腓肠肌和附睾脂肪的降解。Bortezomib剂量依赖性地抑制了肿瘤组织NF-κB的激活及IL-6的合成,以1.0mg/kg组最显著。0.5mg/kg组显著抑制了血清IL-6水平的升高(P<0.01)。0.5和1.0mg/kg组明显抑制肿瘤生长(P<0.01)。结论:蛋白酶体抑制剂通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活,从而抑制癌性炎性反应和组织成分降解,改善恶病质。

蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及其机制

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及作用机制。方法(1)30只SD大鼠随机分为空气对照组、高氧组和高氧+MG-132组。(2)建立高氧肺损伤大鼠模型。(3)进行肺损伤病理评分、肺湿/干重比例测定。检测泛素肺组织泛素化蛋白及NF-κBp65的表达。检测蛋白酶体20S及肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性,检测肺组织TNF-α、IL-6表达。结果(1)高氧组肺损伤明显,肺湿/干重比例、肺损伤病理评分均增高(P<0.01),MG-132能使肺湿/干重比例、肺损伤病理评分降低(P<0.01)。(2)免疫组化和Western blotting结果均显示高氧组泛素化蛋白表达增强(P<0.01),MG-132增强其表达(P<0.01)。(3)高氧组蛋白酶体20S活性较空气对照组明显升高(P<0.01),MG-132抑制其活性(P<0.01)。(4)高氧组MPO活性、NF-κB表达均较空气组增强(P<0.01),同时TNF-α、IL-6表达也增强(P<0.01)。而高氧+MG-I32组均降低(P<0.01)。结论(1)MG-132可以减轻高氧引起的肺损伤。(2)MG-I32可能通过抑制NF-κB/炎性因子通路而实现保护作用。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与心血管疾病的关系

Cystatin C（Cys C）又称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C，是20世纪80年代中期瑞典的Simonsen等通过一系列研究发现的一种特异性高、准确性好、较肌酐清除率更为敏感的评价肾小球滤过率（glomerular filtration rate，GFR）的新指标。Cys C是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族2中的成员之一，表达于所有的有核细胞，参与细胞内外蛋白水解的调控，保护细胞免受不适当的内源性或外源性蛋白酶水解。以往的研究已经发现Cys C参与机体许多生理与病理过程，包括肿瘤的浸润性生长及转移、炎症的发生与发展以及脑血管疾病等。而新近的研究发现，Cys C还可能与心血管疾病的发生与发展有关，本文就该方面的研究进展作如下综述。

利用家蚕生产慈姑蛋白酶抑制剂

将慈姑蛋白酶抑制剂Ｂ（ＡｒｒｏｗｈｅａｄＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒ，Ｂ，ＡＩＢ）基因插入转移载体ｐＵＢＭ—４中，得到重组转移载体ｐＵＢＭ（ＡＩＢ）；与Ｂｍ—ＮＰＶＤＮＡ共转染家蚕细胞，经空斑纯化，得到不含多角体的重组病毒ＢｍＮＰＶ（ＡＩＢ）；感染家蚕幼虫，利用家蚕高效表达了ＡＩＢ，其表达量为１．０×１０５Ｕ／ｍＬ血淋巴，比活为３．２９×１０３Ｕ／ｍｇ。