嗜肝DNA病毒核衣壳装配的研究进展

嗜肝 DNA 病毒核衣壳装配是病毒复制周期的一个中心环节,需要3种病毒成分(前基因组 RNA、核心蛋白、多聚酶蛋白)特异和有次序地相互作用。研究表明:核心蛋白的氨基端具有自我组装核壳的能力,而羧基端具有结合核酸、稳定核壳的作用;多聚酶蛋白的4个区域均为介导前基因组 RNA 包装所需:前基因组 RNA 上存在的包装信号决定其选择性包装。本文最后讨论了嗜肝 DNA 病毒核衣壳装配研究的潜在应用价值。

甜菜夜蛾核多角体病毒VP39蛋白在苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒中的功能研究

【目的】构建表达甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)VP39蛋白的vp39假型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica MNPV,AcMNPV),明确SeMNPV VP39是否能取代AcMNPV VP39在AcMNPV中行使功能,为深入探究杆状病毒的核衣壳装配机理打下理论基础。【方法】利用Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统在AcMNPV vp39缺失型重组bacmid(bAcvp39KO)的基础上构建携带SeMNPV vp39基因、绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,egfp)和多角体蛋白基因(Polyhedrin,polh)的重组病毒(vAcSevp39:FLAG)。利用Western blotting检测分析SeMNPV vp39在vAcSevp39:FLAG转染的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)IPLB-Sf21-AE clonal isolate 9(Sf9)细胞中的表达情况,通过荧光显微镜观察vAcSevp39:FLAG在Sf9中的感染和扩散情况,采用病毒滴度测定并绘制病毒生长曲线检测vAcSevp39:FLAG的感染性芽生型病毒粒子产量,并以电子显微镜观察vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中的形态发生情况。【结果】Western blotting检测结果表明,SeMNPV VP39能在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中获得表达;荧光显微镜观察和病毒生长曲线测定结果表明,在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中无感染性的芽生型病毒粒子产生,与AcMNPV vp39缺失型重组病毒(vAcvp39KO)的现象一致;电子显微镜观察发现,与vAcvp39KO不同的是,在vAcSevp39:FLAG转染的细胞中虽然未产生核衣壳,但在感染细胞的核中存在大量空的透明长管状衣壳结构,表明SeMNPV VP39能挽救vAcvp39KO的衣壳结构装配,但在AcMNPV中不具备装配核衣壳的能力。【结论】SeMNPV VP39在AcMNPV中虽能形成衣壳结构,但不能有效装配核衣壳,导致无芽生型病毒粒子和包埋型病毒粒子产生。

乙型肝炎病毒核衣壳蛋白装配抑制剂--甲磺酸莫非赛定

乙型肝炎病毒(HBV)是引起乙型肝炎的病原体,属嗜肝DNA病毒科,具有较强的传染性、突发性等特点,在临床上表现多样化,易发展为慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化并可转变为原发性肝癌,是一类严重影响我国民众健康的重大疾病,现有的治疗药物在使用中有明显的局限性。甲磺酸莫非赛定(GLS4JHS)是由我国广东东阳光药业自主研发的一款二氢嘧啶类药物,按作用机制属于靶向HBV核衣壳蛋白装配抑制剂,可呈剂量依赖性减少病毒衣壳的正确组装,加速异常衣壳形成,从而强烈抑制HBV的复制和成熟病毒颗粒的产生。目前,已进入Ⅱ/Ⅲ期临床试验,现已公布的试验数据表明,甲磺酸莫非赛定对HBV DNA抑制作用十分明显,且安全性较好。本文就甲磺酸莫非赛定的基本信息、作用机制、药物代谢动力学及临床研究等作一概述。

新型抗乙型肝炎病毒药物研发进展

现有的抗乙型肝炎病毒药物不能有效清除病毒cccDNA,难以实现慢性乙型肝炎的功能性治愈。本文结合乙型肝炎病毒生物学周期,探讨了靶向乙型肝炎病毒胞内受体、病毒DNA聚合酶、核衣壳装配、表面抗原分泌以及病毒cccDNA的前导药物的最新研发进展,以期获得抗乙型肝炎病毒的新思路及新方法。