喉癌组织中核表皮生长因子受体与Aurora-A激酶的表达及其临床意义

目的分析喉癌组织中核表皮生长因子受体(nuclear EGFR)、Aurora-A激酶的表达及其在评价喉癌生物学行为和预后中的价值。方法回顾性分析50例喉癌患者临床病理资料及随访结果,免疫组化法检测肿瘤组织中核表皮生长因子受体(EGFR)、Aurora-A激酶的表达。结果 50例喉癌患者的组织中,核EGFR、Aurora-A激酶阳性表达率分别为50%(25/50)、58%(29/50),均高于癌旁组织(P<0.05);核EGFR的表达与喉癌的原发灶分期、区域淋巴结转移、复发有关(P均<0.05);Aurora-A的表达与原发灶分期、区域淋巴结转移有关(P值均<0.05);核EGFR与Aurora-A表达的相关分析差异有统计学意义(r=0.446,P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示患者3年和5年生存率分别为84.0%和67.8%,Log-rank检验显示原发灶分期、区域淋巴结转移、核EGFR、Aurora-A的表达和患者预后有关(P<0.05)。Cox比例分析模型分析显示原发灶分期、区域淋巴结转移、核EGFR表达为影响喉癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论在喉癌发生和发展过程中存在核EGFR、Aurora-A激酶的异常表达,并与肿瘤的生物学行为和预后有关。

VEGF、核内EGFR及CD105在早期非小细胞肺癌的表达及临床意义研究

目的探讨VEGF、核内EGFR及CD105在早期非小细胞肺癌的表达情况及其与早期非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法选择30例手术切除的早期非小细胞肺癌组织及癌旁正常组织,应用免疫组化方法检测VEGF、核内EGFR及CD105的表达情况,分析3者之间的相互关系及临床意义。计量资料采用t检验,计数资料用卡方检验或四格表确切概率检验,两者相关性采用非参数Spearman等级相关性分析。结果 VEGF在30例早期非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织中的阳性表达率分别为53.5%和26.7%,差异具有统计学意义(P<0.05)。核内EGFR在癌组织和癌旁正常组织中的阳性表达率分别为16.7%和0%,差异无统计学意义(P>0.05),CD105标记的微血管密度值(MVD)在癌组织与癌旁正常组织中分别为(17.3±5.6)和(8.9±4.2),差异具有统计学意义(P<0.05)。VEGF与核内EGFR的表达与肿瘤复发转移有关,差异具有统计学意义(P<0.05),VEGF、核内EGFR的表达及CD105标记的MVD值与与患者年龄、性别、吸烟、肿块大小、病理类型、临床分期、分化程度、解剖学类型差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF在癌组织中的表达与MVD呈正相关性(r=0.516,P=0.004),VEGF的阳性表达与核内EGFR的阳性表达、核内EGFR的阳性表达与MVD之间无相关性(P>0.05)。结论 VEGF、核内EGFR及CD105在早期NSCLC均有表达,VEGF、核内EGFR的表达与早期非小细胞肺癌的复发转移有关。

EGFR核内迁移与食管癌顺铂耐药的相关性研究

目的分析表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在食管鳞癌中的表达,并探讨其细胞核内迁移与食管癌顺铂耐药之间的相关性。方法 1用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测10例顺铂化疗敏感者食管癌组织标本(敏感组)、10例顺铂化疗耐药食管癌组织标本(耐药组)EGFR表达情况及其与顺铂化疗耐药的关系;2用免疫组化法检测食管癌标本及其细胞株EGFR的表达情况;3用顺铂干预食管癌EC9706细胞,并用荧光显微镜观察细胞核内EGFR的表达情况;结果 1顺铂耐药组食管癌组织中EGFR的表达率显著高于顺铂化疗敏感组(P<0.05)。2 EC-9706细胞膜上EGFR高表达。3顺铂干预后EC9706细胞核内EGFR表达增高。结论 EGFR核内迁移与食管癌顺铂化疗耐药可能有关。

埃克替尼抑制肺泡上皮细胞上皮间充质转化进程改善博来霉素诱导的肺纤维化

目的探究埃克替尼(icotinib,ICO)的抗肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)作用及其潜在的分子机制。方法C57BL/6小鼠随机分为假手术(Sham)组、PF组、ICO 30 mg·kg^(-1)剂量组及ICO 60 mg·kg^(-1)剂量组,每组n=8。单次气管注射博来霉素(BLM,3 mg·kg^(-1))建立小鼠PF模型。HE及Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况。免疫组化检测肺组织Ⅰ型胶原(collagenⅠ)的表达。体外培养肺泡上皮细胞,实验设对照(control)组、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)组(100 ng·mL^(-1))及EGF联合ICO(0.1、1、10 mmol·L^(-1))3个剂量组。免疫荧光法检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达及核因子-κB(NF-κB)p65核转移情况。Western blots检测肺组织和(或)细胞collagenⅠ、E-cadherin、α-SMA、Vimentin、磷酸化表皮生长因子受体(phosphorylation epidermal growth factor receptor,p-EGFR)、磷酸化核因子κB抑制物α(p-IκBα)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)的蛋白水平及NF-κB p65核转移情况。结果动物实验表明,ICO抑制了BLM诱导的胶原沉积,减少了Ⅰ型胶原的表达,减轻了博来霉素诱导的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)(E-cadherin表达增加,Vimentin和α-SMA表达减少),降低了EGFR,IκBα和NF-κB p65的磷酸化水平并抑制了NF-κB p65的核转移。细胞实验发现,EGF可激活肺泡上皮细胞EMT和EGFR/NF-κB信号通路,而ICO可逆转这一作用。结论ICO可能通过抑制EGFR/NF-κB信号通路的活化,逆转了EGF诱导的EMT和博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。

Tip30调节EGFR核内化及其与核内EGFR靶分子或基因的关联性研究

目的探讨肿瘤转移抑制基因(Tip30)调节表皮生长因子受体(EGFR)核内化及与核内化EGFR靶分子或基因的关联性,为针对EGFR分子靶向治疗提供依据。方法采用野生型Balb/c小鼠(Tip30+/+小鼠,对照组)和Tip30基因敲除、Balb/c纯背景的小鼠(Tip30-/-小鼠)作为动物模型(每组6只),饲养18个月后处死,取肺组织,福尔马林固定,酒精脱水,石蜡包埋,组织切片后,进行组织学检查、免疫组化检测、组织免疫荧光检测、体外培养细胞免疫荧光/激光共聚焦检测、免疫印迹检测、细胞计数试剂盒-8方法体外细胞抑制实验、荧光定量PCR检测和基因芯片数据库分析。结果 Tip30基因敲除促进肺上皮细胞增殖、上调细胞周期蛋白cyclin D1表达;基因转染后Tip30-SH1、Tip30-SH2细胞抑制Tip30表达;Tip基因抑制致EGFR在早期内涵体滞留;表皮生长因子(EGF)处理可诱导Tip30细胞核内化;Tip30基因抑制可促进EGF诱导EGFR细胞核内化,Tip30蛋白可在早期内涵体内聚集。结论 Tip30基因抑制干扰EGFR分选,抑制EGF诱导EGFR降解,延迟EGFR下游信号分子激活时间,同时促进EGF诱导的EGFR细胞核内化,促进肺癌细胞生长,而与细胞膜或细胞浆内EGFR信号通路激活的关联性较小。