吴茱萸碱通过调节核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1/核因子-κB信号通路对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎性损伤的影响

目的观察吴茱萸碱(Evo)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎性损伤的影响及对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核因子κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法将人软骨细胞HCCs分为对照组、模型组、Evo低剂量组、Evo高剂量组、Evo高+ML385组,对照组用DMEM培养基培养,其他组用加入50 ng/mL的IL-1β培养基培养,同时Evo低、高剂量组再加浓度分别为10、30μmol/L的Evo处理,Evo高+ML385组先用2μmol/L的Nrf2抑制剂ML385处理30 min,再用30μmol/L的Evo处理。CCK-8检测细胞增殖活力;流式细胞术检测HCCs细胞凋亡;酶联免疫吸附法检测HCCs细胞上清液中IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测HCCs细胞中炎症介质环氧合酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平;Western blot法检测HCCs中Nrf2/HO-1/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组凋亡率、IL-6、IL-18、TNF-α、MDA水平,COX-2、iNOS mRNA表达水平,以及磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκB-α)、细胞质Nrf2、细胞核p65 NF-κB蛋白水平均升高(P<0.05),细胞存活率、SOD活性及HO-1、IκB-α、细胞核Nrf2、细胞质p65 NF-κB蛋白水平均降低(P<0.05)。与模型组相比,Evo低、高剂量组细胞凋亡率、IL-6、IL-18、TNF-α、MDA水平,COX-2、iNOS mRNA表达水平,p-IκB-α、细胞质Nrf2、细胞核p65 NF-κB蛋白水平均降低(P<0.05),细胞存活率、SOD活性及HO-1、IκB-α、细胞核Nrf2、细胞质p65 NF-κB蛋白水平均升高(P<0.05),且Evo高剂量组以上指标与Evo低剂量组组间比较差异也均有统计学意义(P<0.05)。与Evo高剂量组相比,Evo高+ML385组中Nrf2的抑制剂ML385消除了Evo高剂量对上述指标的影响。结论Evo可能通过激活Nrf2和HO-1的表达,抑制下游转录因子NF-κB的表达,改善IL-1β诱导的软骨细胞炎性损伤。

基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路探讨益气康肺方对脂多糖感染急性肺损伤地鼠氧化损伤的影响

目的基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)信号通路探讨益气康肺方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染的金黄地鼠肺氧化损伤的影响及其作用机制。方法将60只SPF级叙利亚金黄地鼠,随机分为空白组、模型组、地塞米松组、益气康肺方低剂量组、益气康肺方中剂量组、益气康肺方高剂量组,每组雌性5只,雄性5只。造模开始前予以预防性给药,空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃,地塞米松组于造模前连续腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液4天,益气康肺方低、中、高剂量组于造模前连续灌胃给予相应剂量中药混悬液14天。预防性给药结束后第2天,开始LPS气管滴注建立急性肺损伤(acute lung injury,ALI)地鼠模型,造模结束48小时后解剖取材。BCA法检测肺泡灌洗液蛋白含量水平并计算地鼠肺指数;HE染色检测肺组织病理改变;荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;TBA法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;WST-1法检测肺组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活力;Western blot法检测肺组织Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组肺指数及BALF中蛋白浓度升高,肺组织病理损伤严重,ROS及MDA水平升高,SOD和GSH-PX活力较低,Nrf2、HO-1蛋白含量较低。药物干预处理后,与模型组比较,地塞米松和各中药组肺指数及BALF中蛋白浓度较低,肺组织病理损伤轻,ROS及MDA水平低,SOD和GSH-PX活力高,Nrf2、HO-1蛋白含量高,尤以益气康肺方高剂量组疗效最为显著(P<0.05)。结论益气康肺方可能是通过激活Nrf2/HO-1通路,增强SOD、GSH-PX的活力,抑制LPS引起的炎症和氧化损伤。

核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1在劳力型热射病大鼠肝损伤中作用机制研究

目的观察劳力型热射病大鼠肝损伤的病理变化特点及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO)-1的表达情况。方法选用健康雄性SD大鼠,随机分为空白组(Con组)、劳力型热射病组(构建劳力型热射病大鼠动物模型,分为EHS 2 h组、EHS 6 h组和EHS 12 h组)共4组,每组6只大鼠。所有大鼠均经过梯度强度适应性跑台后开始实验。Con组大鼠在经过适应性跑台训练后正常饲养。劳力型热射病组进行跑台训练直至大鼠发生劳力型热射病。按照发病后2、6、12 h随机选取EHS组大鼠,并留取肝组织备用。采用苏木精伊红染色观察肝形态学,利用免疫组织化学染色法检测大鼠肝Nrf2、磷酸化核因子E2相关因子2(pNrf2)、HO-1蛋白表达情况。结果与正常组比较,热射病各组肝细胞肿胀、胞浆脂肪变性及肝细胞坏死明显,门静脉淤血、扩张。免疫组织化学染色结果显示:Nrf2、pNrf2、HO-1在EHS组不同时间点阳性细胞表达均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Nrf2/HO-1信号通路在劳力型热射病大鼠肝损伤中存在保护作用。

核因子E2相关因子/血红素加氧酶1及血栓素B2T/6-酮-前列腺素F1α信号通路在宫颈癌根治术后发生深静脉血栓大鼠模型中的作用机制

目的:本研究旨在探讨核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)及血栓素B2(TXB2)/6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)信号通路在宫颈癌根治术后发生深静脉血栓大鼠模型中的作用机制。方法:购买60只4~6周龄裸鼠,体重(180±20)g,随机将60只大鼠分为空白对照组、模型组及深静脉血栓组各20只。其中空白组正常饲养1周;模型组及深静脉血栓组均建立宫颈癌动物模型,模型组造模成功后,正常饲养;深静脉血栓组给予宫颈癌根治术治疗,正常饲养。观察宫颈癌根治术后发生深静脉血栓HE染色切片,原位末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠血管组织内皮细胞凋亡情况,全自动凝血分析仪检测各组大鼠凝血指标,酶联免疫吸附法测定TXB2/6-Keto-PGF1α水平,免疫印迹检测Nrf2/HO-1信号通路。结果:实验过程中,三组大鼠均未出现意外死亡,存活率均为100%。模型组未形成血栓,深静脉血栓组造模后1、3、7、14 d成栓率依次为50.00%(10/20)、95.00%(19/20)、100%(20/20)。大鼠下腔静脉产生的血栓尾部为红色血栓、中间为混合血栓、头部为白色血栓。深静脉血栓组血管内皮凋亡率高于模型组(P<0.05)。深静脉血栓组凝血酶时间、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间低于模型组及空白对照组,D-二聚体高于模型组及空白对照组(均P<0.05);模型组凝血酶时间、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间低于空白对照组,D-二聚体高于空白对照组(均P<0.05)。深静脉血栓组TXB2、TXB2/6-Keto-PGF1α高于模型组及空白对照组,6-Keto-PGF1α低于模型组及空白对照组(均P<0.05);模型组TXB2、TXB2/6-Keto-PGF1α高于空白对照组,6-Keto-PGF1α低于空白对照组(均P<0.05)。深静脉血栓组Nrf2、HO-1低于模型组及空白对照组,模型组Nrf2/HO-1低于空白对照组(均P<0.05)。结论:TXB2/6-Keto-PGF1α、Nrf2/HO-1信号通路在宫颈癌根治术后深静脉血栓大鼠中异常表达,也是宫颈癌根治术后深静脉血栓形成的作用机制之一。

基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路延缓衰老防治绝经后骨质疏松症及药物干预的研究进展

骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是绝经后妇女常见疾病,是由于多种因素致全身骨密度下降,微结构破坏,脆性增加,而易于骨折的全身性骨病。2001年美国国立卫生研究院将其定义为以骨强度下降和骨折风险增加为特征的骨骼疾病。研究证明衰老是绝经后骨质疏松症(Post Menopausal Osteoporosis,PMOP)的重要危险因素之一,细胞衰老与机体衰老密切相关,相关研究证明过氧化氢和超氧化物等活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是细胞衰老的重要诱因,并且自由基生物学领域的传统观点认为,ROS是氧化应激(Oxidative Stress,OS)的主要原因。目前临床工作中常用的治疗PMOP的药物如双膦酸盐、甲状旁腺激素等存在或多或少的不良反应,中医药作为中国传统文化的瑰宝,相比于PMOP的主流治疗方式具有众多的靶点、更多的有效成分,以及可以从整体观念来出发,宏观的调节身体机能,缓解该疾病导致的诸多疾病。相关研究表明核因子类红细胞2相关因子2(Nuclear Factor Erythroid 2-related Factor 2,Nrf2)与血红素加氧酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)可以通过消除ROS及抗炎等相关作用来调控OS的损伤,因此,文章将中医基础理论与现代医学分子层面相结合,探究通过调控Nrf2/HO-1信号通路干预OS以延缓衰老来预防PMOP的相关机制。

急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1、脂肪酸结合蛋白4、缺氧诱导因子1α表达意义及其与肝功能指标相关性研究

目的:探讨急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达意义及其与肝功能指标的相关性。方法:回顾性选取62例急性药物性肝损伤患者的临床资料作为病例组,另选80例健康体检者的临床资料作为对照组。比较两组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及肝功能指标水平,用Pearson相关性分析急性药物性肝损伤患者血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平与肝功能的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值。结果:病例组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)水平高于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,急性药物性肝损伤患者血清Nrf2水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.763、-0.741、-0.685,均P<0.05);血清HO-1水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.489、-0.524、-0.568,均P<0.05);血清FABP4水平与血清AST、TBIL水平呈正相关(r=0.509、0.512,均P<0.05);血清HIF-1α水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈正相关(r=0.527、0.486、0.542,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测诊断急性药物性肝损伤的曲线下面积(AUC)值为0.919,高于血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平单独检测(0.787、0.822、0.824、0.772,均P<0.05)。结论:血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α在急性药物性肝损伤患者中呈高表达,其表达水平与患者肝功能损伤有关,且四者联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值更高。

核转录因子红系2相关因子2和血红素加氧酶-1在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的观察核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在食管鳞癌和癌旁组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测Nrf2和HO-1在食管鳞癌和癌旁组织中的阳性表达情况,并分析二者表达之间的相关性。结果在食管鳞癌组织中,Nrf2、HO-1均呈高表达,二者表达水平与食管鳞癌的浸润深度、分化程度、有无淋巴结转移、TNM分期均有相关性(均P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤部位均无相关性(均P>0.05),且二者在食管鳞癌中的表达有明显的相关性(P<0.05)。结论Nrf2和HO-1在食管鳞癌中均呈高表达,二者在食管鳞癌中的表达有明显的相关性,联合检测能够为食管鳞癌的诊断和预后评估提供客观、准确的参考。

棕榈酸和硬脂酸对HepG2细胞血红素加氧酶-1和核转录因子Nrf2表达的影响

研究棕榈酸(PA)和硬脂酸(SA)作用HepG2细胞后,对其血红素加氧酶-1(HO-1)和核转录因子Nrf2在转录和蛋白质水平的影响。PA和SA分别以0.25、0.5、0.75、1.0mmol·L-1浓度刺激HepG2细胞24h后,采用荧光定量PCR以及蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞HO-1和Nrf2的mRNA转录及蛋白质表达量的变化。结果表明:PA作用细胞后,与对照组相比,随着PA浓度的递增HepG2细胞中Nrf2和HO-1的mRNA转录及蛋白质的表达量均极显著增加(P<0.01);而SA组浓度为0.25、0.5、0.75 mmol·L-1时,Nrf2和HO-1的mRNA转录及蛋白质的表达量与对照组相比极显著增加(P<0.01),当SA浓度为1.0mmol·L-1时其增加量相对减少。在1mmol·L-1范围内,较高浓度的PA和较低浓度的SA对HepG2细胞Nrf2和HO-1的mRNA转录及其蛋白质的诱导作用显著。

蛋白激酶C-核因子相关因子2调节大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶-1的表达

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:将25只SD大鼠的气道上皮细胞随机分为对照组、CSE3h组、RO318220(PKC抑制剂)组、Nrf2 siRNA组和Nrf2 siRNA+RO318220组,每组5只。对照组用DMEM/F12正常培养,CSE3h组用10%CSE共培养3 h;RO318220组则用3μmol/L RO318220预处理0.5h,余处理同CSE3h组;Nrf2 siRNA组先用Nrf2 siRNA预处理,余处理同CSE3h组;Nrf2 siRNA+RO318220组则先用3μmol/L RO318220和Nrf2 siRNA预处理,余处理同CSE3h组。用Western印迹法分别检测HO-1,Nrf2和PKC蛋白表达,细胞免疫化学法观察HO-1蛋白表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HO-1mRNA表达,免疫荧光法观察Nrf2核转位,测定HO-1活性。结果:CSE明显诱导Nrf2核转位,其诱导作用可被RO318220阻断。HO-1蛋白在CSE3h组强阳性表达,在对照组、RO318220组、Nrf2 siRNA组和Nrf2siRNA+RO318220组均弱阳性表达。CSE3h组PKC蛋白、HO-1 mRNA和蛋白表达较对照组显著升高,HO-1活性较对照组明显增强(P<0.05)。PKC蛋白表达水平在Nrf2 siRNA组和CSE3h组无明显差异(P>0.05)。结论:CSE通过PKC信号通路诱导Nrf2核转位,上调HO-1的表达水平。

N-乙酰半胱氨酸对术后认知功能障碍模型小鼠认知功能及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路的影响

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对术后认知功能障碍(POCD)模型小鼠认知功能和海马核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法采用随机区组设计,利用随机数字表法将雄性3~4月龄C57BL/6J小鼠54只随机分为3组(n=18),分别为对照组、手术组、手术+NAC组。在异氟醚吸入麻醉下,手术组和手术+NAC组小鼠行左下肢胫骨骨折内固定术。手术+NAC组分别于麻醉前30 min、术后3 h和6 h腹腔内注射NAC 150 mg/kg,对照组和手术组腹腔注射生理盐水。术后第3天利用随机数字表法每组随机取6只小鼠,行Morris水迷宫测试小鼠空间认知和记忆功能,术后第7天完成测试。术后第1、3天取小鼠海马组织,酶联免疫吸附法检测小鼠海马组织中白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)浓度,Western blot及实时荧光定量PCR检测小鼠海马组织中Nrf2和HO-1的蛋白与mRNA表达。结果 3组小鼠的游泳速度差异均无统计学意义(F=2.135,P=0.114);与对照组和手术+NAC组小鼠相比,手术组小鼠的逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01),目标象限停留时间减少(P<0.01)。与对照组相比,手术组和手术+NAC组术后1 d海马组织IL-6和MDA含量均明显增高(P均=0.000),术后第3天手术组仍高于对照组(P=0.000),手术+NAC组IL-6(P=0.251)和MDA(P=0.103)含量降至对照组水平;与手术组相比,手术+NAC组术后第1、3天海马组织IL-6和MDA含量均明显降低(P均=0.000)。与对照组相比,手术组和手术+NAC组海马组织Nrf2和HO-1蛋白表达均增高(P均=0.000);与手术组相比,手术+NAC组海马组织Nrf2和HO-1蛋白表达均明显增高(P均=0.000)。与对照组相比,手术组和手术+NAC组Nrf2和HO-1 mRNA表达在术后第1天均明显增加(P均=0.000),手术+NAC组明显高于手术组(P=0.000)。术后第3天,Nrf2和HO-1的mRNA表达进一步增强。结论 NAC预处理后的POCD小鼠降低海马组织氧化应激和炎性反应,改善认知功能,此作用与激活Nrf2/HO-1信号通路相关。

香烟烟雾提取物通过蛋白激酶C-核因子相关因子2调节大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶1表达

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响。方法:通过CSE刺激雄性SD大鼠气道上皮细胞,使用PKC抑制剂RO318220和Nrf2 siRNA,将细胞分为对照组、CSE 3 h组、RO318220组、Nrf2 siRNA组和RO318220+Nrf2 siRNA组,用Western blotting法分别检测HO-1、Nrf2和p-PKC蛋白表达,免疫细胞化学法观察HO-1蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HO-1 mRNA表达,免疫荧光法检测Nrf2蛋白定位,测定HO-1活性。结果:暴露CSE 3 h后,Nrf2蛋白主要表达在胞核,胞核蛋白表达增强,p-PKC蛋白、HO-1的mRNA和蛋白高表达,HO-1活性增强。预先给予RO318220,PKC蛋白、Nrf2胞浆和胞核蛋白、HO-1的mRNA和蛋白表达均明显减弱,HO-1活性显著降低。预先用siRNA沉默Nrf2,胞浆和胞核的Nrf2蛋白表达均减弱,HO-1活性、mRNA和蛋白水平明显降低。RO318220联合Nrf2 siRNA处理后,PKC蛋白、Nrf2胞浆和胞核蛋白、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显降低,HO-1活性明显降低。结论:CSE通过PKC激活Nrf2,诱导Nrf2核转位,从而上调HO-1的表达水平。

原发性胆囊癌中核因子E2P45相关因子与血红素加氧酶-1的表达及其与临床病理的相关性

目的检测核因子E2 p45相关因子2(Nrf2)与血红素加氧酶-1(HO-1)在原发性胆囊癌组织中的表达,探讨其与胆囊癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化SP法检测59例原发性胆囊癌患者Nrf2和HO-1的表达水平。结果原发胆囊癌组织中Nrf2和HO-1表达的强阳性率分别为76.3%、80.7%。随着转移程度、Nevin分级以及病理分级的增加,Nrf2和HO-1的强阳性表达率增加,且具有统计学差异(P<0.05)。两者的强阳性表达与年龄、性别等临床特征无相关性;Nrf2和HO-1表达之间具有相关性(r=0.376,P<0.05)。结论 Nrf2和HO-1在原发性胆囊癌组织中存在高表达,对胆囊癌的发生、发展起一定作用。

牛磺酸缓解镉诱导的鸡胚睾丸细胞氧化损伤的核转录因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1途径

为探索牛磺酸对镉诱导的鸡胚睾丸细胞氧化损伤的缓解作用,采用18日龄鸡胚睾丸细胞培养模型,通过形态观察、细胞活力检测、生化指标检测、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine, BrdU)掺入、原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP nick end labelling, TUNEL)、蛋白质印迹法、荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)和免疫荧光染色等方法,从细胞增殖、内质网应激、线粒体凋亡、核转录因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor-erythroid 2 related factor-2/hemeoxygenase-1, Nrf2/HO-1)信号通路等方面研究其作用机制。结果显示,镉导致鸡胚精原细胞发生了氧化损伤。与对照组相比,镉处理组精原细胞出现了细胞核固缩、空泡化和染色质周缘化等变化,且镉处理后的细胞活性和精原细胞数目显著降低,过氧化氢、丙二醛和活性氧水平显著升高,超氧化物歧化酶活性显著降低,细胞增殖能力显著降低,凋亡细胞显著增多,内质网应激相关基因(GRP78和XBP-1)和凋亡相关基因(Cyt C、p53和caspase 9)mRNA表达水平显著上升,Nrf2、p-Nrf2蛋白的表达和HO-1mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。然而,牛磺酸与镉联合处理后,镉引起的氧化损伤得到明显缓解,鸡胚精原细胞数目和睾丸细胞活性回升,抗氧化水平和内质网应激得到改善,凋亡细胞显著减少,Nrf2蛋白表达和细胞增殖能力趋于正常。以上结果说明,牛磺酸一方面通过恢复氧化系统与抗氧化系统平衡,另一方面通过抑制睾丸细胞凋亡和恢复睾丸细胞增殖,缓解镉引起的生殖毒性。

核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号轴在心血管疾病中作用的研究进展

目前,心血管疾病仍是危害人类健康的最常见的疾病,而导致心血管疾病的主要原因之一是由于细胞的氧化应激。最新研究证明,核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related actor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)处在氧化应激的中心位置,激活后能发挥抗炎、抗氧化、减少线粒体损伤、调节细胞凋亡、自噬、焦亡等作用。激活Nrf2/HO-1信号轴在大多数情况下对心血管疾病具有保护作用,但也可能产生不良作用。本文就Nrf2/HO-1信号轴在心血管疾病中的最新研究进展进行综述。

急性药物性肝损伤患者血清中核因子E2相关因子2和血红素加氧酶-1的含量及临床意义

目的观察核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)在急性药物性肝损伤(acute drug-induced liver injury, ADILI)患者血清中的含量及临床意义。方法收集ADILI患者60例,及60名健康对照者的外周血并分离血清,采用ELISA法检测样本中Nrf2及HO-1的含量,比较两组中Nrf2及HO-1的差异,并分析二者与疾病临床特征及生化指标的相关性。结果 Nrf2、HO-1在ADILI患者血清中的含量显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);胆汁淤积型ADILI患者血清中Nrf2的含量显著高于肝细胞损伤型(P<0.001),HO-1的含量在胆汁淤积型、肝细胞损伤型及混合型中差异无统计学意义(P>0.05);Nrf2、HO-1与肝损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)及胆汁酸(TBA)呈负相关(P<0.05);而与碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰基转移酶(GGT)无明显相关性(P>0.05);以Nrf2=516.14 U/L作为最佳截断值,预测ADILI疾病的敏感度为95.0%,特异度为77.1%,曲线下面积为0.918(P<0.05);以HO-1=15.19 U/L作为最佳截断值,预测的该疾病的敏感度为75.1%,特异度为60.9%,曲线下面积为0.799(P<0.05)。结论 Nrf2、HO-1在ADILI患者血清中的含量明显升高,且与肝细胞损伤程度呈负相关,二者在血清中的水平可以作为ADILI疾病程度较为敏感的预测指标。

核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号在川崎病诱发心肌损伤中的作用

目的 探讨核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1信号通路在川崎病(KD)诱发心肌损伤中的作用。方法 60只4周龄SD大鼠随机分为对照组、干酪乳杆菌细胞壁成分(LCWE)模拟川崎病组(KD)和叔丁基对苯二酚(TBHQ)干预KD组(KD+TBHQ),每组20只;对照组腹腔注射生理盐水0.5ml,KD组和KD+TBHQ组腹腔注射LCWE0.5ml(1mg/ml)。4周后,小动物超声检测大鼠心脏功能,酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌组织内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和Caspase-3的活性,Westernblot检测心肌组织内Nrf2和HO-1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果 注射LCWE4周后,成功制备KD模型鼠。同时发现,与对照组相比,KD组左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)均明显降低(P<0.05),心肌组织凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax比值显著降低(P<0.05),Caspase-3活性明显升高(P<0.05),心肌组织中MDA含量增加,而SOD活性降低(P<0.05),Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05);而应用Nrf2激动剂TBHQ后,可显著改善KD引起的心肌损伤,并且明显降低心肌组织氧化应激程度(P<0.05)。结论 KD抑制心肌中Nrf2/HO-1信号,导致氧化应激程度增强,引起细胞凋亡增加,进而引发心脏损伤,TBHQ激活Nrf2可明显改善KD的上述作用。

还原型谷胱甘肽通过核因子E2相关2因子/血红素加氧酶-1信号通路对肝叶切除术患者的保肝作用

目的探究还原型谷胱甘肽通过核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路对肝叶切除术患者的保肝作用。方法选取2019年5月至2021年6月九江市第一人民医院收治的80例原发性肝癌患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与观察组,各40例。术后对照组给予250ml支链氨基酸、2.0g肌苷、0.2g维生素B6、2.0g维生素C静脉滴注治疗,观察组在对照组基础上于250ml 5%葡萄糖溶液中加入1.08 g还原型谷胱甘肽静脉滴注治疗。比较两组外周血Nrf2、HO-1 mRNA相对表达量与氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]和肝功能指标[总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]。结果术后第7天,两组外周血Nrf2、HO-1mRNA相对表达量均高于术后第1天,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第7天,两组MDA水平均低于术后第1天,SOD水平均高于术后第1天,且观察组MDA水平低于对照组,SOD水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第7天,两组TBIL、TBA、AST、ALT水平均高于术后第1天,但观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论还原型谷胱甘肽能通过激活Nrf2/HO-1信号通路有效保护肝叶切除术患者的肝功能,值得临床推广应用。

阿托伐他汀钙对脂多糖诱导急性肺损伤小鼠核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1通路的影响

目的探讨阿托伐他汀钙(AVT)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的影响。方法2021年9―12月,采用随机数字表法把15只BALB/c雌性小鼠分为NS组(尾静脉注射生理盐水)、LPS组(尾静脉注射LPS诱导ALI模型)、LPS+AVT组(经AVT灌胃治疗的ALI模型),每组各5只。收集动脉血,测定血氧分压(PaO_(2))、氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2));处死后取出双肺,HE染色观察肺组织,测定湿干重比(W/D),酶联免疫吸附(ELISA)法测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,蛋白质印迹法(Western blotting)测肺组织中Nrf2、HO-1的表达。结果NS组、LPS组及LPS+AVT组PaO_(2)[(89.66±8.54)、(50.88±6.26)、(67.84±5.76)mmHg]、PaO_(2)/FiO_(2)[(426.95±40.67)、(242.29±29.79)、(323.05±27.42)mmHg]、W/D(3.12±0.54、4.95±0.60、3.85±0.46)、IL-1β[(37.95±6.18)、(115.09±12.42)、(75.61±7.89)ng/L]、TNF-α[(63.66±20.71)、(330.99±41.71)、(220.87±28.89)ng/L]、Nrf2(0.43±0.03、0.08±0.02、0.22±0.03)及HO-1(0.59±0.07、0.09±0.03、0.22±0.03)。与NS组相比,LPS组肺泡结构混乱不清,肺泡壁增厚,腔内炎性细胞大量渗出堆积,PaO_(2)及PaO_(2)/FiO_(2)降低,W/D比值增加,BALF IL-1β、TNF-α含量增多,肺组织Nrf2、HO-1蛋白表达相对降低(均P<0.05)。与LPS组相比,LPS+AVT组肺泡结构清晰度高,肺泡壁厚度及腔内炎性渗出改善,PaO_(2)及PaO_(2)/FiO_(2)升高,W/D比值降低,BALF IL-1β、TNF-α含量减少,肺组织Nrf2、HO-1蛋白含量增多(均P<0.05)。结论AVT可减轻LPS诱导ALI小鼠的炎症反应,这可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

外周血中核转录因子红系2相关因子2对子宫内膜癌的诊断效能及其与淋巴结转移的关系

目的探究外周血核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)及其靶基因血红素加氧酶-1(HO-1)对子宫内膜癌(EC)的诊断效能及其与淋巴结转移的关系。方法选取2020年6月至2022年5月第二军医大学附属第三医院收治的80例EC患者与50例子宫良性病变患者分别作为EC组和子宫良性病变组,同时纳入体检中心50例无生殖系统疾病的健康女性作为对照组。检测3组外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平及血清糖类抗原125(CA125)、人附睾蛋白4(HE4)水平,并分析上述指标在不同国际妇产科联盟(FIGO)病理分期EC患者中的变化。利用Pearson相关分析对外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平与血清CA125、HE4水平进行关联探讨。采用受试者工作者特征(ROC)曲线分析外周血Nrf2、HO-1 mRNA单项及联合预测EC发生淋巴结转移的效能。结果EC组血清CA125、HE4水平均高于子宫良性病变组与对照组,且子宫良性病变组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);EC组外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平均低于子宫良性病变组与对照组,且子宫良性病变组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析发现,外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平与血清CA125、HE4水平均呈负相关(P<0.05),血清CA125水平与HE4水平呈正相关(P<0.05)。EC组血清CA125、HE4水平随FIGO病理分期增加均呈升高趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。EC组外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平随FIGO病理分期增加均呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平预测EC发生淋巴结转移的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.695、0.667,当两项联合诊断时AUC、灵敏度最高,分别为0.839、81.01%,均高于单独指标诊断价值,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论检测外周血Nrf2、HO-1 mRNA表达水平可辅助诊断EC,且Nrf2、HO-1 mRNA表达水平在FIGO病理分期中存在差异,能为判断肿瘤淋巴结转移及制定治疗方案提供参考依据。

苦黄注射液联合多烯磷脂酰胆碱对慢性乙型肝炎合并肝内胆汁淤积症患者血清炎症因子、HO-1、Nrf2水平的影响

目的:探讨苦黄注射液联合多烯磷脂酰胆碱治疗慢性乙型肝炎(CHB)合并肝内胆汁淤积症(IHC)的疗效,以及对患者血清炎症因子、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)水平的影响。方法:选取2022年2月至2023年6月收治的78例CHB合并IHC患者,按随机数字表法分为观察组(n=39)与对照组(n=39)。对照组患者静脉滴注多烯磷脂酰胆碱注射液,观察组患者在对照组患者治疗基础上静脉滴注苦黄注射液治疗,疗程4周。观察两组患者临床疗效及血清炎症因子、HO-1、Nrf2水平。结果:观察组患者总有效率87.18%,高于对照组患者的66.67%(P<0.05)。治疗后,两组患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)等肝脏生化指标水平、瘙痒评分、12项健康调查简表(SF-12)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平降低(P<0.05),且观察组患者比对照组低(P<0.05)。观察组患者黄疸消退时间短于对照组(P<0.05)。治疗后,血清HO-1、Nrf2水平升高,且观察组患者比对照组高(P<0.05)。观察组患者不良反应发生率为10.26%,与对照组患者的7.69%差异无统计学意义(P>0.05)。结论:苦黄注射液联合多烯磷脂酰胆碱治疗CHB合并IHC疗效及安全性更佳,能有效改善肝功能,促进胆汁淤积症状缓解及提高生活质量,其作用可能与调节患者体内炎症因子和HO-1、Nrf2表达有关。