血管紧张素Ⅱ对人肺微血管内皮细胞核因子-κB的活化作用

目的探讨不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在不同时间点对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)核因子-κB(NF-κB)的活化作用。方法采用原代培养的HPMEC,分别以浓度为10-8、10-7、10-6、10-5mol.L-1的AngⅡ刺激HPMEC0、0.5、1、2、4 h,用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)观察NF-κB对DNA的结合活性。结果各浓度组AngⅡ均能活化HPMEC中NF-κB;与0 h比较,AngⅡ10-8mol.L-1组在4 h表现出明显的NF-κB活化作用(P<0.05),AngⅡ10-7mol.L-1组在1 h开始活化NF-κB(P<0.05),随后各时间点的效应逐渐增强;AngⅡ10-6mol.L-1组在1 h开始活化NF-κB(与0 h比较,P<0.05),2 h时达到高峰(与1 h比较,P<0.05),4 h活化水平下降(与2 h比较,P<0.05);AngⅡ10-5mol.L-1组在0.5 h即明显活化NF-κB(与0 h比较,P<0.05),随后各时间点NF-κB活化效应逐渐减弱。结论AngⅡ刺激HPMEC后能引起NF-κB活性增加,这可能是AngⅡ促炎作用的重要环节。

抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织核因子κB、血管紧张素Ⅱ及其受体表达的影响

目的:观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织核因子κB(NF-κB)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)及其受体(AT1R)表达的影响。方法:采用5/6肾切除法建立慢性肾衰大鼠模型,4周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组和抗纤灵低、中、高剂量治疗组,8周后测定肾组织NF-κB、ATⅡ和AT1R-mRNA表达。结果:模型组大鼠肾组织NF-κB及ATⅡ、AT1RmRNA表达均较正常组明显升高(P<0.01);三个剂量治疗组与模型组比较均有不同程度下降。结论:抗纤灵可通过降低模型大鼠肾组织NF-κB及ATⅡ、AT1RmRNA表达延缓肾纤维化进展。

血管紧张素Ⅱ通过核因子κB上调巨噬细胞基质金属蛋白酶诱导因子的表达

目的观察血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞表达基质金属蛋白酶诱导因子的影响及其相关通路。方法血管紧张素Ⅱ体外刺激人巨噬细胞,应用逆转录聚合酶链反应和Western blot测定基质金属蛋白酶诱导因子基因和蛋白表达;RNA干扰技术沉默核转录因子核因子κB p65亚基,评价核因子κB通路在血管紧张素Ⅱ上调巨噬细胞细胞基质金属蛋白酶诱导因子的表达中的作用。结果血管紧张素Ⅱ刺激巨噬细胞后,基质金属蛋白酶诱导因子mRNA和蛋白表达均显著增加,核因子κB p65亚基沉默后,血管紧张素Ⅱ对基质金属蛋白酶诱导因子mRNA和蛋白表达无上调作用。结论血管紧张素Ⅱ上调基质金属蛋白酶诱导因子的表达,此调控过程有核因子κB通路的参与。

NF-κB/IκB信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞促炎性细胞因子表达

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)/IκB信号通路在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的肾小球系膜细胞促炎性细胞因子表达中的作用。方法:应用核酸酶保护法检测系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1α和IL-1β mRNA表达;应用凝胶电泳迁移率和Western blot检测肾小球系膜细胞中NF-κB活化、p65亚基核转让以及IκBα和IκBβ的降解。结果:正常培养状态下,系膜细胞可组成型表达TNF-α和IL-1β,而不表达IL-1αmRNA,AngⅡ刺激后促炎性细胞因子表达显著上调,NF-κB特异性抑制剂2-疏代氨基甲酸吡咯烷显著抑制Ang Ⅱ诱导的促炎性细胞因子基因表达;Ang Ⅱ诱导系膜细胞NF-κB活化,p65核转位及胞质内IκBα和IκBα的降解。结论:Ang Ⅱ诱导肾小球系膜细胞中促炎性细胞因子表达可能通过NF-κB/IκB信号转导通路来实现。

高浓度葡萄糖条件下血管紧张素Ⅱ对内皮细胞核因子κB和单核细胞趋化蛋白1的影响

观察高糖环境下血管紧张素Ⅱ对内皮细胞核因子κB活性、单核细胞趋化蛋白1表达及氯沙坦的干预作用。应用激光共聚焦显微镜观察核因子κB活性变化,逆转录-聚合酶链反应测定内皮细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达,酶联免疫吸附法检测培养基中单核细胞趋化蛋白1含量变化。结果发现,高糖(25 mmol/L)、107mol/L血管紧张素Ⅱ均能显著刺激内皮细胞核因子,κB活化、单核细胞趋化蛋白1-mRNA表达,培养基中单核细胞趋化蛋白1含量及其对单核细胞趋化活性亦显著增强,高糖环境显著增加血管紧张素Ⅱ诱导的核因子κB活化、单核细胞趋化蛋白1表达,氯沙坦有显著抑制作用。提示高糖促进血管紧张素Ⅱ对内皮细胞的刺激作用,氯沙坦通过抑制内皮细胞核因子κB活化和单核细胞趋化蛋白1的表达,对动脉粥样硬化发展起到防治作用。

核因子κB受体活化因子配体对血管紧张素Ⅱ诱导人肾小球足细胞分泌血管内皮细胞生长因子的影响

目的观察核因子κB受体活化因子配体(RANKL)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人肾足细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探究AngⅡ是否通过RANK/RANKL信号通路影响足细胞表达VEGF。方法以分化为树枝状的人肾足细胞为研究对象,以不同浓度(0、1、10、100 nmol/L)的AngⅡ处理,分别于不同时间(0、6、12、24 h)通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测基因VEGF、RANK和RANKL的m RNA表达变化。然后以不同剂量的RANKL与100 nmol/L AngⅡ共同刺激足细胞24 h后,通过RT-PCR检测VEGF的m RNA表达变化,流式细胞术检测足细胞凋亡率变化。结果 AngⅡ呈剂量和时间依赖性地诱导足细胞表达VEGF、RANK和RANKL(P<0.05),而过量RANKL表现出剂量依赖性地阻断VEGF表达增高(P<0.05);与对照组比较,AngⅡ可以显著诱导足细胞凋亡(P<0.05),而RANKL可以抑制由AngⅡ诱导的足细胞凋亡(P<0.05)。结论 AngⅡ可能通过RANK/RANKL信号通路影响足细胞表达VEGF,RANKL通过反馈调节下调VEGF基因表达来抑制AngⅡ引起的足细胞凋亡,保护肾脏。

血管紧张素(1-7)阻断细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路影响泡沫细胞内胆固醇含量

目的研究血管紧张素(1-7)对THP-1源性泡沫细胞中细胞外信号调节激酶1/2及核因子κB信号转导通路的影响,以进一步探讨血管紧张素(1-7)促进胆固醇逆转运的调节机制以及细胞外信号调节激酶1/2与核因子κB信号通路之间是否相互影响。方法采用体外培养的THP-1单核细胞构建泡沫细胞模型,用不同的干预方法处理细胞72 h,将细胞分为单核细胞(空白对照)组、泡沫细胞组、分别预先经10-6mol/L血管紧张素(1-7)、10μmol/L核因子κB特异性阻断剂、10μmol/L细胞外信号调节激酶1/2特异性阻断剂、10-6mol/L血管紧张素(1-7)+10μmol/L核因子κB特异性阻断剂、10-6mol/L血管紧张素(1-7)+10μmol/L细胞外信号调节激酶1/2特异性阻断剂干预的泡沫细胞组。油红O染色后显微镜下观察细胞形态;高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化;免疫组化法检测细胞内核因子κB(p65)活性的表达;免疫印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白的表达。结果血管紧张素(1-7)显著降低了泡沫细胞内胆固醇的含量,下调了磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB(p65)活性的表达(P<0.05),细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路被特异性阻断后泡沫细胞内胆固醇含量降低(P<0.05);血管紧张素(1-7)联用细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路的特异性阻断剂后泡沫细胞内胆固醇含量显著降低(P<0.01);核因子κB信号通路被阻断后核因子κB(p65)活性表达显著降低(P<0.01),而磷酸化细胞外信号调节激酶1/2活性表达无明显降低(P>0.05),细胞外信号调节激酶1/2信号通路被阻断后磷酸化细胞外信号调节激酶1/2和核因子κB(p65)活性表达均降低(P<0.05)。结论血管紧张素(1-7)可能通过降低磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB(p65)的活性,减少细胞内胆固醇的蓄积;细胞外信号调节激酶1/2、核因子κB信号通路被特异性阻断后可减少泡沫细胞内胆固醇的含量;细胞外信号调节激酶可能是核因子κB(p65)信号通路的上游信号。

室旁核内血管紧张素Ⅱ对大鼠胃缺血/再灌注后胃黏膜NF-κB表达的影响

目的研究室旁核(paraventricular nucleus,PVN)内注射血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠胃缺血/再灌注(gastric ischemia/reperfusion,GI/R)后的胃黏膜核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法采用核团微量注射法以及夹闭大鼠腹腔动脉30 min后松开动脉夹血流复灌1 h的GI/R模型,计数胃黏膜损伤指数并应用免疫组化方法检测胃黏膜NF-κB p65的表达。结果①GI/R可引起胃黏膜损伤,PVN内微量注射AngⅡ(0.3μl含30 ng)后GI/R损伤显著减轻;侧脑室注射(icv)AngⅡ受体拮抗剂洛沙坦,能阻断AngⅡ对GI/R损伤的保护作用,使GI/R损伤明显加重;②正常大鼠胃黏膜可见NF-κB表达,并主要在胞质表达;GI/R后,NF-κB表达增多,尤其是胞核表达明显增加;PVN内微量注射AngⅡ后,可使胃黏膜NF-κB表达量减少;icv给予洛沙坦可阻断AngⅡ的效应,即GI/R损伤后胃黏膜NF-κB阳性细胞数表达量增加。结论PVN内微量注射AngⅡ对大鼠GI/R损伤有明显的保护作用,且该作用可被洛沙坦翻转;NF-κB在PVN内微量注射AngⅡ减轻大鼠GI/R损伤过程中可能发挥着重要作用。

核转录因子NF-κB在血管内皮细胞组织因子表达中的作用

目的 探讨核转录因子NF-κB在肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管内皮细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法用发色底物法测定血管内皮细胞表面TF活性。分别采用凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)和Western印迹法检测血管内皮细胞核转录因子NF-κB的DNA结合活性和含量。结果100 U/ml TNF-α、10-6 mol/l AngⅡ作用下，内皮细胞表面TF 活性明显增高，分别较对照增高1.65 倍和1.61 倍。TNF-α、AngⅡ作用组核抽提物与NF-κB特异DNA序列结合活性分别为正常对照组的2.07倍和3.89倍。TNF-α、AngⅡ处理后细胞核内NF-κB含量明显增加，分别为正常对照组的1.77倍和1.52倍。结论TNF-α、AngⅡ可增强内皮细胞TF活性，这可能与其促进内皮细胞核转录因子NF-κB的核转位和DNA结合活性有关，进一步证实NF-κB在内皮细胞TF诱导表达中的重要作用。

消耗还原型谷胱甘肽抑制血管紧张素Ⅱ激活巨噬细胞c-Jun/ATF-2及NF-κB

目的 :探讨还原型谷胱甘肽 (GSH)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )激活巨噬细胞转录因子c -Jun/ATF - 2及NF -κB中的作用。方法 :用荧光分光光度法测定细胞内GSH含量 ;用丁基硫堇硫氧胺 (BSO)消耗细胞内GSH ;用免疫印迹法测定细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达及NF -κBp6 5表达 ;用凝胶滞留法测定细胞NF -κB活性 ;用细胞免疫组化观察细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达的时间模式。结果 :AngⅡ (1μmol/L)刺激 30 - 6 0min可降低RAW2 6 4 7细胞内GSH ;而后GSH逐渐适应性恢复。同时 ,AngⅡ刺激 6 0min ,呈剂量依赖性降低RAW 2 6 4 7细胞内GSH。GSH特异性消耗剂BSO(0 5mmol/L)与RAW 2 6 4 7细胞共同孵育 18h ,即可完全消耗细胞内GSH。AngⅡ (1μmol/L)可诱导RAW 2 6 4 7巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达 ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能诱导巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化。同样 ,AngⅡ (1μmol/L)可激活RAW 2 6 4 7巨噬细胞NF -κB ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能激活巨噬细胞NF -κB。结论 :还原型谷胱甘肽可能参与调控巨噬细胞转录因子c-Jun/ATF - 2及NF

伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞NF-κB激活与ICAM-1表达的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ1型受体(ATlR)拮抗剂伊贝沙坦(irbesartav,Irb)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)核因子-κ B(NF-κB)激活与细胞间牯附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:体外培养的第3～5代HUVEC用于实验。采用免疫组织化学分析检测细胞NF-κB亚单位p65、ICAM-1的表达程度。结果AngⅡ有效激活NF-κB并诱导HUVEC表达ICAM-1增加Irb预先孵育2h能抑制NF-κB并减轻AngⅡ诱导的HUVEC ICAM-1表达。结论AngⅡ通过激活NF-κB使ICAM-1表达增加损伤血管内皮功能Irb能抑制NF-κB激活降低HUVEC ICAM-1表达,从而保护血管内皮功能,这有可能减轻心m管疾病损伤的进展。

胰岛素、血管紧张素Ⅱ对人血管内皮细胞NF-κB的激活和血脂康干预的影响

目的 观察胰岛素、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelialcells，HUVECs）NF-κB的激活及血脂康干预后的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株（ECV-304），2～3代用于实验。细胞用0．5％胎牛血清培养液培养24小时后分成七组；正常对照组、胰岛素组（100Ld／ml）、Ang11组（5×10^-8mol／ml）、胰岛素＋AngⅡ组、胰岛素＋血脂康组（150ug／m1）、AngⅡ＋血脂康组、胰岛素＋AngⅡ＋血脂康组。加血脂康的各组，血脂康预先孵育2h，再加胰岛素或／和AngⅡ共同孵育。在4h时间点上，分别用免疫细胞化学方法测各组内皮细胞NF-κBp65的核易位阳性率，用免疫荧光和流式细胞仪检测其活性。结果①胰岛素、AngⅡ、胰岛素＋AngⅡ刺激4h后，内皮细胞NF-κBp65的核易位阳性率（％）分别为95．5±3、96．6±3、96．4±4，显著高于对照组（4．5±2）（P〈0．05），血脂康几乎完全抑制胰岛素、AngⅡ、胰岛素＋AngⅡ所致的NF-κBp65核易位阳性率的增加（7．3±3、6．9±4、6．3±2）（P〈0．05）。②胰岛素、AngⅡ、胰岛素＋Ang／／刺激4h后。内皮细胞NF-κB活性分别为6．55±0．53、7．23±0．36、10．29±0．69，显著高于对照组（3．26±0．37）（P〈0．05）；与单用胰岛素或AngⅡ比，胰岛素＋AngⅡ使NF-xB活性增加更明显（P〈0．05）；血脂康能明显抑制NF-κB的活性（4．44±0．49、3．98±0．24、5．02±0．39）（P〈0．05）。结论 胰岛素、AngⅡ均能激活内皮细胞NF-κB，促进NF-κBp65的核易位，有致动脉粥样硬化（As）作用。血脂康能抑制内皮细胞NF-κB的激活，具有调脂外的抗AS作用。

血管紧张素Ⅱ-1型受体基因静默对肝枯否细胞NF-κB活性的影响

目的探讨肝枯否细胞血管紧张素Ⅱ1型受体(AT-1受体)基因静默对肝枯否细胞NF-κB信号通路的影响。方法采用原代分离培养的肝枯否细胞,免疫组化检测AT-1受体在肝枯否细胞的表达。构建pSilencer/AT-1α受体siRNA质粒,将其转染肝枯否细胞,予10-6mol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激60min,设立阴性对照。凝胶电泳移动抑制实验检测NF-κBDNA结合活性。结果肝枯否细胞可以表达AT-1受体。AngⅡ可刺激肝枯否细胞NF-κBDNA结合活性增强;pSilencer/AT-1α受体siRNA转染细胞后可显著抑制AngⅡ诱导的NF-κBDNA结合活增强。结论AngⅡ可经肝枯否细胞AT-1α受体激活肝枯否细胞NF-κB活性。

PPARγ/NF-κB信号通路参与替米沙坦抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌纤维化及改善心功能作用

目的观察替米沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌纤维化及心脏功能的作用,并探讨其可能分子机制。方法 40只4周龄雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组(Vehicle/Veh)、血管紧张素Ⅱ组(AngⅡ)、血管紧张素Ⅱ+替米沙坦组(AngⅡ+Telm)和替米沙坦组(Telm)。采用皮下渗透压缓释泵持续泵入生理盐水(对照组)或AngⅡ(AngⅡ组)制作心肌纤维化大鼠模型,随后应用替米沙坦灌胃法对其进行干预,分别建立替米沙坦组和AngⅡ+替米沙坦组。分别应用M型超声心动图评价每组大鼠短轴缩短率(fraction shortening,FS),心脏血流动力学检查每组大鼠左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压力(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)以评估心脏功能;采用天狼猩红染色法评估心肌纤维化程度;为评估PPARγ/NF-κB信号通路的活化,采用蛋白免疫印迹法检测过氧化物增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor,PPARγ)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白水平,应用免疫荧光法检测细胞核NF-κB活化入核情况。结果与对照组大鼠心脏相比,AngⅡ组大鼠心脏FS显著下降(P <0. 05),LVSP显著下降(P <0. 05),LVEDP显著升高(P <0. 05);胶原表达显著增加(P <0. 05);组织PPARγ蛋白水平下调(P <0. 05),细胞核NF-κB蛋白水平上调(P <0. 05)且活化入核。与AngⅡ组相比,AngⅡ+替米沙坦组大鼠FS显著升高(P <0. 05),LVSP显著升高(P <0. 05),LVEDP显著下降(P <0. 05);胶原表达显著减少(P <0. 05);组织PPARγ蛋白水平上调(P <0. 05),细胞核NF-κB蛋白水平下调(P <0. 05)且活化入核受抑。与对照组相比,替米沙坦组大鼠心脏FS,LVSP,LVEDP,胶原表达量,组织PPARγ蛋白水平,细胞核NF-κB蛋白水平均无显著变化,NF-κB入核不明显。结论 PPARγ/NF-κB信号通路参与替米沙坦抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌纤维化以改善心功能作用。

川芎嗪抑制血管紧张素II诱导的平滑肌细胞NF-κB激活和骨形成蛋白-2表达降低(英文)

本文旨在观察血管紧张素II (angiotensin II, Ang II)对血管平滑肌细胞核转录因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)的活性及骨形成蛋白-2 (bone morphogenetic protein-2, BMP-2)表达的影响,以探讨Ang II参与动脉粥样硬化的机制,并探讨川芎嗪是否能抑制Ang II的促动脉粥样硬化作用。采用Western blot、免疫组化和原位杂交等方法分别检测Ang II刺激和川芎嗪干预后NF-κB活性、BMP-2 蛋白和 mRNA 表达的变化。结果显示:(1) Ang II 刺激激活 NF-κB。Ang II 刺激 15 min 即有 NF-κB p65核转移,30 min 达高峰(P<0.01),1 h 后减退。川芎嗪抑制 Ang II诱导的NF-κB激活,与Ang II组比较,川芎嗪 + Ang II组NF-κB活性显著降低 (P<0.01)。 (2) Ang II 刺激 6 h 时 BMP-2 表达增强(P<0.05),12 h 时减弱(P<0.01),24 h 时更弱(P<0.01)。川芎嗪 + Ang II组中,川芎嗪干预6 h 时BMP-2 表达亦增强,12 与24 h 时保持正常水平。 (3) 川芎嗪对正常细胞的NF-κB活性和BMP-2 表达无影响。以上结果表明,Ang II刺激后激活NF-κB并最终使生长抑制因子BMP-2 表达下降,这可能是其参与动脉粥样硬化发生的机制之一。BMP-2 一过性增高可能不依赖NF-κB通路的激活。川芎嗪可抑制Ang II诱导的NF-κB激活与 BMP-2 表达降低,提示它在抗动脉粥样硬化形成中起重要作用。

云芝多糖B抑制血管紧张素Ⅱ诱导的巨噬细胞骨调素基因上调表达

目的探讨野生云芝多糖水溶性新组分CVPS-B对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的RAW264.7巨噬细胞骨调素(OPN)基因表达的影响及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及其转录因子ATF-2可能的调控作用。方法用RT-PCR检测CVPS-B对AngⅡ诱导的RAW264.7巨噬细胞OPN基因表达的影响;用Western blot测定AngⅡ(1μmol.L-1)诱导RAW264.7细胞p38MAPK转录因子-激活转录因子2(ATF2)表达的时间模式;用Western blot测定CVPS-B对RAW264.7巨噬细胞p38MAPK及其转录因子ATF2磷酸化表达的影响。结果CVPS-B(10mg·L-1)在AngⅡ(1μmol·L-1)刺激前30min加入培养基抑制作用最明显,共同孵育12h,抑制率达到50.3%(P<0.01);不同浓度CVPS-B1、10、50mg·L-1在AngⅡ(1μmol·L-1)刺激前30min加入培养基,共同孵育12h,其抑制率分别为13.8%、41.2%(P<0.01)及63.7%(P<0.01)。不同浓度CVPS-B及SB202190预孵12h,SB202190在5μmol·L-1(高浓度)时能明显抑制p38MAPK的磷酸化表达,相反,CVPS-B在10、50mg·L-1(高与低浓度)时均不能明显抑制p38MAPK的磷酸化表达。CVPS-B能明显抑制ATF2的磷酸化表达并呈剂量依赖性;而且,SB202190加CVPS-B在低剂量时(SB2021901μmol·L-1加CVPS-B10mg·L-1)也能明显抑制ATF2的磷酸化表达。结论CVPS-B能明显抑制AngⅡ诱导的RAW264.7巨噬细胞OPN基因表达。CVPS-B的抑制作用可能是通过调控转录因子ATF-2的活性实现的。

丹参酮ⅡA对肥厚心肌细胞核因子-κB的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的心肌细胞肥大的影响。 方法 利用体外细胞培养技术 ,用AngⅡ刺激新生大鼠心肌细胞肥大 ,通过免疫组织化学方法观察丹参酮ⅡA对肥大心肌细胞核因子 (NF κB)表达的影响。 结果 与正常细胞相比 ,AngⅡ组细胞直径明显增加 ,细胞核NF κB呈强表达。加入丹参酮ⅡA干预后 ,心肌细胞直径明显减小 ,NF κB表达减弱 (P <0 0 1)。 结论 丹参酮ⅡA具有保护心肌 ,防止心肌肥厚作用 ,其抑制心肌细胞肥厚的机制可能与抑制NF

沙库巴曲缬沙坦钠抑制血管紧张素Ⅱ诱导THP-1巨噬细胞基质金属蛋白酶-9的表达

目的探讨沙库巴曲缬沙坦钠(LCZ696)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导(THP)-1巨噬细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的机制。方法0.1μmol/L佛波酯(PMA)加至THP-1单核细胞48 h,将其诱导分化为THP-1巨噬细胞,随机分为4组:①PMA组,即对照组;②PMA+AngⅡ组(100μmol/L,1 h);③PMA+AngⅡ+LCZ696组(10μmol/L,1 h);④PMA+AngⅡ+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)组(100μmol/L,1 h)。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MMP-9 mRNA的变化,用蛋白质印迹法检测胞质MMP-9蛋白的表达。结果与对照组相比,AngⅡ诱导的THP-1巨噬细胞MMP-9 mRNA表达上调(P<0.05),MMP-9蛋白量也增加(P<0.05),而使用LCZ696及PDTC后显著抑制MMP-9 mRNA的转录(P<0.05),MMP-9蛋白量也减少(P<0.05)。结论沙库巴曲缬沙坦钠可能通过核因子(NF)-κB信号途径抑制THP-1巨噬细胞MMP-9的表达。

血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞移动抑制因子mRNA表达的影响

目的探讨血管紧张素(Ang)Ⅱ是否能通过核因子(NF)-κB途径调节巨噬细胞移动抑制因子(MIF) mRNA的表达。方法佛波酯诱导THP-1细胞48 h并使其转化为巨噬细胞,用CD68进行免疫细胞化学鉴定。第一组:对照组、AngⅡ1×10^(-8)mol/L组、AngⅡ1×10^(-7)mol/L组、AngⅡ1×10-6mol/L组、AngⅡ1×10^(-5)mol/L组。第二组:对照组、AngⅡ(1×10(-6)mol/L)组、AngⅡ(1×10^(-6)mol/L)+吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)组、PDTC组。Western印迹方法检测第一组细胞核内NF-κB的表达。Real time RT-PCR方法检测第二组巨噬细胞MIF mRNA的表达。结果 Western印迹随着AngⅡ浓度的升高,NF-κBp65的表达逐渐增强。Real time RT-PCR:AngⅡ组MIF mRNA表达明显高于对照组;给予NF-κB特异性抑制剂PDTC后,由AngⅡ诱导的MIF mRNA表达明显降低。结论 AngⅡ能通过NF-κB信号通路促进巨噬细胞MIF mRNA的表达。