腹主动脉瘤患者血清转胶蛋白、基质金属蛋白酶9和核因子-κB p65水平检测及意义

目的:检测腹主动脉瘤(AAA)患者血清转胶蛋白(TAGLN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核因子-κB(NF-κB)p65水平变化,探讨其临床意义。方法:通过酶联免疫吸附法检测肾下AAA患者80例(AAA组)及体检健康者50例(健康组)血清TAGLN、MMP-9和NF-κB p65水平并进行比较。分析三者间的相关性,分析三者对AAA的诊断价值。结果:健康组血清TAGLN水平高于AAA组,MMP-9和NF-κB p65水平低于AAA组(均P<0.05)。血清TAGLN与MMP-9和NF-κB p65呈负相关(r=-0.196、-0.364,均P<0.05),MMP-9与NF-κB p65呈正相关(r=0.213,P=0.015)。TAGLN、MMP-9和NF-κB p65联合诊断AAA的曲线下面积(AUC)高于任意单独指标,而敏感度和特异度不低于任意单独指标(均P<0.05)。结论:AAA患者血清TAGLN水平升高,MMP-9和NF-κB p65水平降低,三者联合检测对AAA的诊断具有较高价值。

肝素结合蛋白、核因子κB亚基p65及神经元特异性烯醇化酶与心脏骤停患者预后的相关性

目的分析心肺复苏(CPR)患者血清肝素结合蛋白(HBP)、核因子κB(NF-κB)亚基p65及神经元特异性烯醇化酶(NSE)对预后的影响。方法收集2020年9月至2022年9月杭州师范大学附属医院急诊重症监护室接受治疗的心脏骤停(CA)患者,经CPR后,将满足入选条件且存活超过48 h的CPR患者纳入分析,根据患者入院治疗1个月后格拉斯哥-匹兹堡脑功能表现分级(CPC)分为预后良好组(CPC评分1~2级)和预后不良组(CPC评分3~5级),并记录两组性别、年龄、基础疾病及CA原因。同时,分别于自主循环恢复(ROSC)即刻、ROSC后6 h、12 h、24 h、48 h五个时间点采集其外周血,监测CPR患者血清HBP、NF-κB亚基p65、NSE的变化,分析HBP、NF-κB亚基p65及NSE与急性生理与慢性健康状况(APACHE)Ⅱ评分、格拉斯哥昏迷评分(GCS)的相关性,并采用ROC曲线分析判断HBP、NF-κB亚基p65及NSE对CPR预后的影响。结果最终共有30例患者CPR成功并存活超过48 h。其中预后良好组11例,预后不良组19例。预后不良组HBP、NF-κB亚基p65、NSE、APACHEⅡ评分较预后良好组升高,预后良好组GCS评分高于预后不良组,差异具有统计学意义(P<0.05)。HBP、NF-κB亚基p65、NSE在CPR后分别在ROSC后6 h、12 h、24 h达到最高峰。血清HBP、NF-κB亚基p65、NSE均与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.01),与GCS评分呈负相关(P<0.01)。ROC曲线分析显示HBP、NF-κB亚基p65、NSE判断CPR预后AUC分别为0.871、0.579、0.802,敏感度分别为96.3%、81.1%、93.8%,特异度分别为91.1%、78.2%、97.8%,提示HBP、NF-κB亚基p65及NSE均可预测CPR患者预后的严重程度。HBP、NF-κB亚基p65、NSE联合预测CPR患者预后不良的AUC和敏感度分别为0.953、97.7%,均高于单一指标预测(P<0.05)。结论CA患者CPR后出现不同程度的炎症反应和神经功能损伤,HBP、NF-κB亚基p65及NSE可用于早期评估复苏后患者病情严重程度及判断预后,且三者联合价值更高。

颗粒蛋白前体对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织核转录因子-κB的表达的影响

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及可能机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组)、急性肺损伤组(CLP组)、颗粒蛋白前体治疗组(CLP+PGRN组)。采用盲肠结扎穿刺术(cecal ligation and puncture,CLP)构建小鼠脓毒症ALI模型,CLP+PGRN组在CLP处理半小时后使用PGRN腹腔注射。24 h后麻醉并处死小鼠,取小鼠肺HE染色观察肺组织病理损伤;TUNEL法检测肺部细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测肺组织中核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)水平;Western blot法检测NF-κB、总p65和磷酸化p65表达水平;RT-qPCR检测NF-κB和炎症细胞因子水平。结果:和Control组相比,CLP组和CLP+PGRN组肺损伤加重,促炎细胞因子升高,肺组织中细胞凋亡增加,NF-κB、p65和p-p65的表达水平明显增加;与CLP组相比,CLP+PGRN组肺组织损伤和凋亡减轻,促炎细胞因子降低,抑炎细胞因子升高,NF-κB、p65和p-p65的表达明显减少。结论:PGRN可以减轻脓毒症小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB、p65表达和p65磷酸化有关。

核转录因子κBp65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系。方法:用免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌中NF-κBp65、IκBα蛋白的表达。结果:p65、IκBα蛋白的胞浆表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关,但p65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移均呈正相关(P值均<0.01),IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关(P<0.05)。在食管鳞癌中IκBα蛋白的胞浆和胞核阳性率均高于p65蛋白,但差异均无统计学意义,也无相关关系。结论:NF-κBp65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的分级、浸润和淋巴结转移有关,IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关。

特应性皮炎患者皮损中热休克蛋白60、Toll样受体4和核因子-kB p65的表达

目的:研究热休克蛋白60(HSP60)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB p65(NF-κB p65)在特应性皮炎(AD)患者皮损中的表达水平及其与疾病发生的关系。方法:采用SP免疫组化法检测17例AD患者急性或亚急性期炎性皮损及12份正常皮肤石蜡标本中HSP60、TLR4、NF-κB p65的表达。结果:HSP60、TLR4、NF-κB p65在重度患者皮损角质形成细胞中均过度表达,与正常对照及中度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HSP60及NF-κB p65在中度患者组中的表达明显高于正常对照,差异具有统计学意义(P<0.05):HSP60、TLR4、NF-κB p65在AD皮损中的表达水平与湿疹面积及严重度指数(EASI)评分间存在正相关(P<0.05)。结论:HSP60、TLR4、NF-κB p65在AD患者皮损中存在过度表达。HSP60的表达上调可能与AD发病有关。

大肠癌组织P-糖蛋白、核转录因子κB p65表达及意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)在大肠癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测69例份大肠癌患者癌组织(均为腺癌)及其癌旁正常组织(41例份)P-gp、NF-κB p65表达。分析P-gp、NF-κB p65阳性表达与患者临床病理参数的关系及P-gp、NF-κB p65表达的相关性。结果大肠癌组织及其癌旁正常组织P-gp阳性表达率分别为89.9%(62/69)、24.4%(10/41),NF-κB p65阳性表达率分别为84.1%(58/69)、19.5%(8/41);两种组织比较P均<0.05。大肠癌组织P-gp阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度相关(P均<0.05),NF-κB p65阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P均<0.05)。大肠癌组织P-gp表达和NF-κB p65表达呈正相关(r=0.490,P<0.05)。结论 P-gp、NF-κB p65可促进大肠癌的发生及发展,二者起协同作用。

人喉鳞状细胞癌组织中核转录因子-κB P65与PTEN蛋白的表达

目的:检测人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中核转录因子-κB P65(NF-κB P65)与PTEN蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例LSCC(男46例,女4例;临床分期:Ⅰ期6例,Ⅱ期17例,Ⅲ期22例,Ⅳ期5例;病理学分级:Ⅰ级10例,Ⅱ级24例,Ⅲ级16例;有淋巴结转移27例,无淋巴结转移23例)和20例声带息肉组织中NF-κB P65和PTEN蛋白的表达情况。结果:LSCC和声带息肉组织中NF-κB P65阳性表达率分别为66.0%和5.0%,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN阳性表达率分别为42.0%和75.0%,差异亦有统计学意义(P<0.05)。LSCC组织中NF-κB P65的表达与淋巴结转移有关(P<0.05),PTEN的表达与临床分期、病理学分级、淋巴结转移均相关(P均<0.05)。LSCC组织中NF-κBP65和PTEN的表达呈负相关(rs=-0.330,P=0.019)。结论:NF-κB P65的高表达和PTEN的低表达可能与LSCC的发生、发展有关。

钩藤降压解郁方对高血压并发抑郁症大鼠海马突触超微结构及TLR4、NF-κB p65和NLRP3蛋白表达的影响

目的:研究钩藤降压解郁方对高血压并发抑郁症(HD)大鼠学习记忆功能、海马突触超微结构、海马炎症反应及海马Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)和NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达的影响。方法:将35只自发性高血压大鼠随机分为模型组、阳性对照组[苯磺酸左旋氨氯地平(0.45 mg/kg)+盐酸氟西汀(1.80 mg/kg)]和钩藤降压解郁方低、中、高(6.35、12.69、25.38 g/kg)剂量组,另取7只SD大鼠作空白对照组。采用慢性不可预知应激联合孤养的方法干预自发性高血压大鼠复制HD模型。造模同时灌胃给药,1次/d,连续6周。用无创血压计测量尾动脉收缩压和舒张压;Morris水迷宫检测学习记忆能力;透射电镜观察海马突触超微结构;酶联免疫吸附法检测海马炎症因子白介素-1β(IL-1β)、IL-18的水平;免疫组化法检测海马CA1区中TLR4、NF-κB p65和NLRP3蛋白的表达。结果:给药干预结束后,与空白对照组比较,模型组大鼠尾动脉收缩压和舒张压较高(P<0.01);模型组大鼠逃避潜伏期和第一次跨越平台时间延长,目标象限总时间和目标象限总路程减少(P<0.01);模型组大鼠海马突触超微结构模糊,部分突触结构出现融合,突触内线粒体嵴肿胀断裂,突触小泡明显减少,突触后致密物质厚度较小(P<0.01);模型组大鼠海马组织IL-1β、IL-18含量及TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组和钩藤降压解郁方低、中剂量组大鼠收缩压和舒张压较低(P<0.05或P<0.01);阳性对照组和钩藤降压解郁方低、中、高剂量组大鼠逃避潜伏期和第一次跨越平台时间较短,目标象限总时间和目标象限总路程增加;钩藤降压解郁方高剂量组大鼠突触结构清晰,突触前膜、后膜存在,突触前膜内突触小泡增多,突触后致密物质厚度增大(P<0.01);阳性对照组和钩藤降压解郁方中、高剂量组大鼠海马炎症因子IL-1β和IL-18含量降低(P<0.05);阳性对照组和钩藤降压解郁方低、中、高剂量组大鼠海马TLR4、NF-κB p65和NLRP3蛋白表达减少(P<0.05)。结论:钩藤降压解郁方能降低HD大鼠尾动脉压,改善其学习记忆功能,缓解认知障碍,其机制可能与抑制TLR4、NF-κB p65和NLRP3蛋白表达,减少炎症因子释放,改善海马突触可塑性有关。

独活寄生汤对腰椎间盘突出症患者核转录因子κBp65及蛋白聚糖酶-4mRNA表达的影响

目的:基于腰椎间盘突出症患者治疗前后核转录因子-kappa Bp56(NF-κBp65)、蛋白聚糖酶-4(ADAMTS-4)m RNA表达及中医证候变化,探讨独活寄生汤防治腰椎间盘突出症可能机制研究。方法:采用简单随机对照设计,将50例符合纳入标准的腰椎间盘突出症患者分为对照组与治疗组各25例。对照组予双氯芬酸钠,治疗组再加用独活寄生汤治疗,疗程2周。采用模糊视觉疼痛评分(VAS)对疼痛程度进行评估,应用实时荧光定量PCR技术检测血清NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA变化。结果:治疗组总有效率为84%;对照组总有效率为80%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达均呈上升趋势;治疗后治疗组NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达呈明显下降(P<0.05)。结论:独活寄生汤可能通过下调NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达,发挥缓解腰椎间盘突出症临床症状的效用。

脉络膜新生血管模型大鼠视网膜核转录因子-κB p65、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的变化

目的观察脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型大鼠视网膜核转录因子-κB p65(nuclear transcription factor kappa-B p65,NF-κB p65)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)表达的变化。方法取BN大鼠12只,随机分为正常组、模型组,每组各6只。正常组不做任何处理,模型组以100 g·L^(-1)水合氯醛腹腔注射麻醉,复方托吡卡胺滴眼液双眼散瞳,倍诺喜行眼表麻醉,在全视网膜镜下用532 nm激光于视盘周围做视网膜光凝建立CNV模型。每周行FFA、OCT检查眼底,观察CNV生成情况。5周后处死大鼠,取大鼠视网膜用免疫组织化学法检测视网膜内NF-κB p65、VEGF、b FGF阳性表达积分光密度。结果造模5周后FFA及OCT检查可见模型组CNV形成。免疫组织化学法检测结果:正常组大鼠视网膜上NF-κB p65阳性表达的积分光密度为9264.33±1479.49,模型组的积分光密度为34 815.83±3873.61,两组比较差异有统计学意义(t=15.095,P<0.01);正常组大鼠视网膜上VEGF阳性表达的积分光密度为1994.93±309.00,模型组为13 318.54±1958.11,两组比较差异有统计学意义(t=13.992,P<0.01);正常组大鼠视网膜上b FGF阳性表达的积分光密度为1608.74±235.55,模型组为15 963.14±2034.12,两组比较差异有统计学意义(t=17.171,P<0.01)。结论 532 nm激光光凝可诱导大鼠视网膜上NF-κB p65的表达,NF-κB p65在CNV发生发展中可能起重要作用。

核转录因子-κBp65在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中的表达水平

目的探讨核转录因子(NF)-κBp65在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中的表达水平。方法采用免疫组化与Western印迹两种蛋白检测技术相结合的研究方法,检测NF-κBp65在口腔扁平苔藓、口腔鳞癌及口腔正常黏膜组织中的表达水平。结果 1NF-κBp65在口腔正常黏膜组、口腔扁平苔藓组、口腔鳞癌组中的表达存在显著差异且逐渐增强(P<0.01)。2NF-κBp65在口腔扁平苔藓组织及口腔鳞癌组织中均存在过度表达,且无显著差异(P=1.00)。结论 NF-κBp65在口腔扁平苔藓组织及口腔鳞癌组织中均过度表达,NF-κBp65可能参与介导了癌前状态——口腔扁平苔藓组织转化成口腔鳞癌的过程。

血管活性肠肽抑制帕金森病MPTP模型小鼠纹状体中核因子-κB p65、肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白-1的上调

目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠纹状体神经炎症及核因子-κB p65(NF-κB p65)水平的影响。方法:C57BL/6J雄性小鼠30只随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组、MPTP+VIP组。免疫组织化学法观察纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合蛋白(Iba-1)的水平变化;ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;免疫印迹检测NF-κB p65的水平变化。结果:与NS组相比,MPTP组小鼠纹状体TH水平显著减少,GFAP和Iba-1水平显著上升,TNFα和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平显著升高。给予VIP后,纹状体TH水平明显增加,GFAP和Iba-1水平显著下降,TNF-和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平明显降低。结论:VIP可能通过降低NF-κB p65的水平从而抑制MPTP诱导的PD小鼠纹状体的神经炎症反应。

卵巢上皮性肿瘤组织中黏蛋白抗原4和核因子-κB/p65蛋白表达及临床意义

目的探讨黏蛋白抗原4(MUC4)及核因子(NF-κB/p65)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法通过免疫组化方法,用MUC4及NF-κB/p65抗原检测正常卵巢组织和卵巢上皮性肿瘤组织中MUC4、NF-Kb/p65的表达,分析其临床意义。结果在卵巢癌中MUC4、NF-Kb/p65蛋白的阳性表达率分别为80%、92.30%,与卵巢交界性、良性及正常卵巢组织两两相比,差异均有统计学意义,且MUC4和NF-Kb/p65阳性表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移明显相关(P<0.05)。结论 MUC4和NF-κB/p65蛋白表达与卵巢癌分化程度、淋巴结转移关系密切,MUC4可望作为卵巢癌早期诊断的标志物,黏附分子的表达可能受核转录因子的调控。

1,25-(OH)_2-D_3对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质巨噬细胞趋化抑制因子及核转录因子κB/P65表达的影响

目的观察巨噬细胞趋化抑制因子(MIF)及核转录因子κB/P65(NF-κB/P65)在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质中的表达及1,25-(OH)2-D3对其的影响。方法采用单侧输尿管结扎手术建立单侧输尿管梗阻模型。将健康成年的雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组(n=10)、模型组(n=10)和VD组(n=10)。VD组采用6ng/(100 g·d)的1,25-(OH)2-D3干预治疗,假手术组和模型组仅给予等量生理盐水灌胃8周。观察3组大鼠第8周肾功能、肾组织病理学改变,免疫组化法检测单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)、NF-κB/P65、MIF在肾组织中的表达。结果与假手术组相比,模型组血肌酐增高(P<0.01),肾间质面积/统计场面积增加(P<0.01),肾组织ED-1阳性细胞明显增加(P<0.01),肾组织MIF的表达显著升高(P<0.01),NF-κB/P65核阳性细胞明显增加(P<0.01)。与模型组比较,VD组大鼠肾组织病理学变化得到一定程度的改善,肾组织ED-1、MIF的表达及NF-κB/P65核阳性细胞明显减少(P<0.01)。结论单侧输尿管梗阻大鼠肾间质MIF的表达和NF-κB/P65的活性明显增加,1,25-(OH)2-D3可能通过下调MIF的表达,抑制NF-κB/P65的活性来减轻肾小管间质的炎症反应,改善肾脏纤维化。

核转录因子-κB p65在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨子宫内膜异位症(EMs)中核转录因子-κB p65(NF-кBp65)表达情况及其在内异症中的作用。方法收集行腹腔镜或开腹下子宫全切术于术中或术后经病理切片证实EMs患者30例作为病例组(分在位内膜组和异位内膜组);收集同年因子宫肌瘤经手术治疗并经病理切片排除EMs的正常子宫内膜30例作为对照组(正常子宫内膜组)。采用免疫组织化学SP法检测3组组织中NF-кB p65蛋白的表达,同时,选取病例组及对照组中各9例子宫内膜组织进行子宫内膜腺上皮细胞的原代分离培养,采用实时荧光定量PCR及western blot的实验方法,分别检测9例对照组及9例病例组的子宫内膜腺上皮细胞中NF-кB p65 mRNA及蛋白的表达情况。结果 EMs在位内膜组、异位内膜组NF-кB p65蛋白表达强于正常子宫内膜组,EMs异位内膜组高于EMs在位内膜组(P<0.05)。细胞中NF-кB p65 mRNA在EMs在位内膜腺上皮细胞中的表达明显高于对照组的正常内膜腺上皮细胞(P<0.05);细胞中NF-кB p65蛋白在EMs在位内膜腺上皮细胞中的表达明显高于对照组的正常内膜腺上皮细胞(P<0.05)。结论 NF-кBp 65在子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜中均高表达,提示其可能在EMs的病理形成中发挥重要作用。

端粒酶逆转录酶与核因子κB/p65在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨端粒酶逆转录酶(telomerasere-verse transcriptase,TERT)和核因子κB/p65(NF–κB/p65)在喉鳞状细胞癌中的表达及两者间可能存在的相互关系。方法采用免疫组化SP法检测41例喉鳞状细胞癌和10例声带息肉组织中TERT和NF-κB/p65的表达水平。结果TERT和NF-κB/p65在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为78.05%和68.29%,声带息肉中几乎未见TERT和NF-κB/p65的表达。定性分析发现TERT与喉鳞状细胞癌的T分级﹑淋巴结转移和肿瘤临床分期有关。相关分析显示NF-κB/p65与TERT呈正相关。结论①TERT和NF-κB/p65参与了喉癌的发展过程;②TERT有望作为防止喉鳞状细胞癌进一步恶化的治疗靶点;③喉鳞状细胞癌中NF-κB/p65促进了TERT的表达。

核因子-κB P65蛋白在大肠癌组织中的表达及意义

目的探讨核因子-κB（NF-κB）P65蛋白在大肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法，检测64例大肠癌组织和11例大肠腺瘤组织、16例癌旁组织中NF-κB P65单克隆抗体的表达，分析其与NF-κB P65蛋白之间的关系。结果NF-κB P65蛋白在大肠癌和大肠腺瘤组织中的阳性表达率分别为54．7％、18．2％,16例癌旁组织中无1例阳性表达。大肠癌组与大肠腺瘤组阳性表达率比较有显著性差异（P〈0.05）。NF-κB P65蛋白在高、中、低分化大肠癌组织中的阳性表达率分别为33．3％、54．2％、61．3％，各组间比较无显著性差异（P〉0．05）。大肠癌有淋巴结转移组中NF-κB P65蛋白阳性表达率（73．1％）高于无淋巴结转移组（42．1％），二者比较有显著性差异（P〈0．05）。结论NF-κB P65蛋白在大肠癌组中的阳性表达显著高于大肠腺瘤组，有淋巴结转移组中阳性表达显著高于无淋巴结转移组，提示NF-κB P65蛋白在大肠癌的发生、发展及淋巴结转移中起重要作用。

微小RNA-7-5p靶向调节锌指蛋白核转录因子4基因抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究

目的探讨微小RNA(miR)-7-5p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及锌指蛋白核转录因子4(KLF4)基因表达调控的影响。方法研究起止时间为2018年3-10月。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-7-5p在人正常口腔黏膜成纤维细胞hOMF及口腔鳞状细胞癌细胞SCC25、Cal127和Tca8113中的表达量。将miR-7-5p模拟物(miR-7-5p mimics)及阴性对照序列(mimics Control)分别转染至SCC25细胞,分为三组:Control组(未转染的SCC25细胞)、NC组(转染mimics Con-trol的SCC25细胞)、miR-7-5p组(转染miR-7-5p mimics的SCC25细胞)。以qRT-PCR检测miR-7-5p在SCC25细胞中的转染效果;MTT法检测miR-7-5p对SCC25细胞增殖的影响;流式细胞术检测miR-7-5p对SCC25细胞凋亡的影响;通过双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blotting)检测miR-7-5p对KLF4的靶向关系。结果miR-7-5p在3种口腔鳞状细胞癌细胞SCC25、Cal127和Tca8113中的表达量[(0.21±0.02)、(0.43±0.04)、(0.48±0.05)]明显低于人正常口腔黏膜成纤维细胞hOMF(1.00±0.09)(P<0.05);转染miR-7-5p mimics能够上调SCC25细胞中miR-7-5p的表达(P<0.05);miR-7-5p过表达能够明显抑制SCC25细胞增殖能力[Control组、NC组72 h吸光度(1.43±0.13)、(1.46±0.15)比miR-7-5p组(0.81±0.09)](P<0.05),并诱导细胞凋亡[Control组、NC组凋亡率(9.48±2.65)%、(10.21±3.02)%比miR-7-5p组(24.41±8.15)%](P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果表明miR-7-5p过表达可抑制KLF4-Wt报告基因载体细胞相对荧光活性;qRT-PCR和Western blotting进一步证实了miR-7-5p能够靶向调节KLF4 mRNA和蛋白表达。结论miR-7-5p直接靶向调控KLF4基因的表达来抑制口腔鳞状细胞癌SCC25细胞增殖,诱导细胞凋亡。

核转录因子NF-κBp65、血管生成素-2和Ki-67在血管瘤组织中的表达及意义

目的:研究核转录因子NF-κB p65、血管生成素-2、Ki-67和CD31在血管瘤增生及退化组织中的表达情况。方法:采用免疫组织化学方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中核转录因子p65、血管生成素-2、CD31、Ki-67蛋白的表达水平。结果:增生期血管瘤内皮细胞CD31表达水平高于退化期,差异有显著性(P<0.05);增生期血管瘤内皮细胞核转录因子p65、血管生成素-2表达水平高于退化期及正常皮肤组,差异有显著性(P<0.05);退化期血管瘤内皮细胞核转录因子p65、血管生成素-2表达水平与正常皮肤组织相比,差异无显著性(P>0.05);核转录因子p65与血管生成素-2相关性分析在血管瘤发展过程中呈正相关(P<0.01);核转录因子p65与Ki-67相关性分析在血管瘤发展过程中呈正相关(P<0.01)。结论:在血管瘤组织中,核转录因子p65的表达与血管生成素-2和Ki-67的表达呈正相关,提示核转录因子p65可能通过正向调控血管生成素-2的表达而促进血管瘤的形成;核转录因子p65可能成为新的血管瘤病理分型标记物。

胃癌及癌前病变中核因子-kappa B和端粒酶逆转录酶的表达与意义

目的 :探讨胃癌及癌前病变中核因子 kappaB(NF κB)和端粒酶逆转录酶 (hTERT)的表达及相互关系。方法 :以 4 1例原发性胃癌和 38例相应非癌组织及 10例正常对照为研究对象 ,采用免疫组化和原位杂交法检测NF κB亚单位 p6 5蛋白、hTERT蛋白和hTERTmRNA。 结果 :①正常胃粘膜、肠型化生、异型增生、胃癌中 ,p6 5的阳性率分别为 0、34 18%、5 3 33%、6 0 98% ;hTERTmRNA为 10 0 0 %、39 13%、6 6 6 7%、85 37% ;hTERT蛋白为 0、30 4 3%、6 0 0 0 %、78 0 5 %。三者在异型增生、胃癌中与正常组相比差异分别有显著性 ,而且肠化与胃癌组比较也分别具有显著性 (P <0 0 5 )。②胃癌中 ,p6 5和hTERT蛋白的表达在低、未分化、进展期、有淋巴结转移和浸润至浆膜层的肿瘤中显著增高 (P <0 0 1～ 0 0 5 )。而hTERTmRNA的表达仅与肿瘤分期相关。③肠化、异型增生和胃癌三组中 ,p6 5和hTERTmRNA ,及hTERT蛋白和mRNA间分别具有中到强正相关 (rs=0 6 0 9～ 0 75 2 ,P <0 0 1)。结论 :NF κBp6 5蛋白和hTERT的过表达是胃癌发生中的早期事件 ,其表达水平随着胃癌恶性程度的增加而增加 ;p6 5在转录水平上激活hTERT可能是胃癌发生发展的重要阶段。