脑源性神经营养因子对颅脑外伤大鼠核转录因子p65、干扰素-γ和细胞凋亡的影响及机制研究

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对颅脑外伤大鼠核转录因子κB(NF-κB)p65、IFN-γ和细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 将1 12只健康雄性SD大鼠随机分为BDNF组(56只)及对照组(56只),BDNF组通过改良Feeney法建立颅脑外伤模型后立即予腹腔注射BDNF 0.5μg/μl,对照组建模后予腹腔注射0.9%氯化钠注射液2ml/kg,以后两组每24h分别腹腔注射1次等量BDNF或0.9%氯化钠注射液,直至大鼠被处死,根据处死时间分为1、3、6、12、24h、3d和7d共7个亚组,每亚组各8只。比较脑挫伤灶周围脑组织NF-κB p65及IFN-γ的表达情况,同时采用TUNEL法观察并比较脑挫伤灶周围细胞凋亡情况。结果 BDNF组NF-κB p65及IFN-γ蛋白表达较均对照组明显降低(均P<0.05),且两组中两者表达均呈显著正相关(均P<0.01);同时BDNF组细胞凋亡率较对照组也有所减低(P<0.05)。结论 颅脑外伤后BDNF能够发挥神经保护作用,可能与BDNF降低NF-κB p65活性,控制炎症反应,减少细胞凋亡有关。

血清视黄醇结合蛋白4人核转录因子p65内脂素水平在妊娠期糖尿病患者中的表达及与妊娠结局的关系分析

目的探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)、人核转录因子p65(NF-κBp65)及内脂素水平在妊娠期糖尿病(GDM)患者中的表达,分析其与妊娠结局的关系。方法回顾性分析2020年10月—2021年12月义乌市中心医院收治的96例GDM孕妇的临床资料。将96例GDM孕妇纳入GDM组,另选取同期92例正常孕妇作为对照组。比较两组孕妇血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平。分析GDM组孕妇不同妊娠结局的发生情况,并对比不同妊娠结局孕妇血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平。对可能影响GDM发生的因素进行单因素与多因素logistic回归分析。结果GDM组血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平均明显高于对照组(均P<0.05)。GDM组不良妊娠结局发生率为19.79%,高于对照组的5.43%(P<0.05)。GDM组中,发生不良妊娠结局者19例(不良组),妊娠结局良好者77例(良好组)。不良组血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平明显高于良好组(均P<0.05)。单因素分析显示:孕妇孕前体质量指数、妊娠期高血压疾病分度、血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平为GDM孕妇发生不良妊娠结局的影响因素(均P<0.05)。logistic回归分析结果显示:孕前体质量指数(≥25 kg/m^(2))、妊娠期高血压疾病分度(中重度)、血清RBP4(>42 mg/L)、NF-κBp65(>362 mg/L)及内脂素(>6.25 pg/ml)是GDM孕妇发生不良妊娠结局的危险因素(均P<0.05)。结论血清RBP4、NF-κBp65及内脂素水平在GDM孕妇及不良妊娠结局孕妇中均呈高表达,通过检查上述指标水平可辅助临床监测GDM孕妇病情,评估妊娠结局。

核转录因子NF-κBp65、血管生成素-2和Ki-67在血管瘤组织中的表达及意义

目的:研究核转录因子NF-κB p65、血管生成素-2、Ki-67和CD31在血管瘤增生及退化组织中的表达情况。方法:采用免疫组织化学方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中核转录因子p65、血管生成素-2、CD31、Ki-67蛋白的表达水平。结果:增生期血管瘤内皮细胞CD31表达水平高于退化期,差异有显著性(P<0.05);增生期血管瘤内皮细胞核转录因子p65、血管生成素-2表达水平高于退化期及正常皮肤组,差异有显著性(P<0.05);退化期血管瘤内皮细胞核转录因子p65、血管生成素-2表达水平与正常皮肤组织相比,差异无显著性(P>0.05);核转录因子p65与血管生成素-2相关性分析在血管瘤发展过程中呈正相关(P<0.01);核转录因子p65与Ki-67相关性分析在血管瘤发展过程中呈正相关(P<0.01)。结论:在血管瘤组织中,核转录因子p65的表达与血管生成素-2和Ki-67的表达呈正相关,提示核转录因子p65可能通过正向调控血管生成素-2的表达而促进血管瘤的形成;核转录因子p65可能成为新的血管瘤病理分型标记物。

苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR模型大鼠卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路的影响

目的 探讨苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR (polycystic ovarian syndrome-insulin resistance, PCOS-IR)模型大鼠卵巢Toll受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路的调控作用。方法 48只♀大鼠随机分为正常组8只和模型组40只。来曲唑(1 mg·kg^(-1))联合高脂饮食建立肥胖型PCOS-IR大鼠模型,快速革兰染色法观察动情周期,挑选24只模型大鼠随机分为:模型组、阳性药(二甲双胍135 mg·kg^(-1))组、苍附导痰汤高、低剂量(57.96、14.49 g·kg^(-1))组,每组各6只,药物干预21 d。观察动情周期、卵巢和子宫指数变化;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂(甘油三酯TG和总胆固醇TC)变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定空腹胰岛素(FINS)水平;免疫组化法和荧光定量PCR法检测卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及基因的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢多囊性改变明显,FBG、TG、TC含量和FINS、HOMA-IR水平上调,卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA表达均增加(P<0.05);与模型组比较,苍附导痰汤高剂量组大鼠排卵周期得到改善,卵巢多囊性改变减轻,上述指标出现明显逆转(P<0.05)。结论 苍附导痰汤能有效改善肥胖型PCOS-IR大鼠卵巢排卵和糖脂代谢功能,作用机制可能与调控卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织IκB-α和NF-κBp65的影响

目的:探讨降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织κB抑制蛋白α(IκB-α)、核转录因子肽p65(NF-κBp65)的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组,采用高脂饮食喂养4周,链脲佐菌素(STZ)腹膜内注射建立糖耐量异常大鼠模型,治疗8周后,观察骨骼肌组织病理变化,测定空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、骨骼肌组织IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA水平、骨骼肌组织白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平。结果:正常组大鼠骨骼肌组织结构正常,模型组骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂、可见明显炎症细胞浸润;盐酸二甲双胍及降糖方干预后,骨骼肌炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于整齐。模型组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平、血清TG、TC、LDL-C水平、骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白水平高于对照组(P<0.01);盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平,血清TG、TC、LDL-C水平,骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白表达水平低于模型组(P<0.01)。结论:降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢具有明显改善作用,其机制可能与降糖方抑制骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达有关。

逍遥散对雷公藤多苷致胃黏膜损伤大鼠TNF-α、IL-1β、NF-κB P65表达的影响

目的:研究逍遥散对雷公藤多苷致大鼠胃黏膜损伤的治疗效果及机制。方法:将24只SD大鼠随机分为空白对照组、雷公藤多苷组、逍遥散组,每组8只。雷公藤多苷组和逍遥散组通过灌胃雷公藤多苷混悬液(0.037 5 g·kg^(-1))制备胃黏膜损伤模型大鼠,逍遥散组在灌服雷公藤多苷混悬液1 h前灌服逍遥散水煎液(19.27 g·kg^(-1)),给药每日1次,持续5周。观测各组大鼠体质量、摄食量;采用苏木素-伊红染色法(HE)观察各组大鼠胃黏膜病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;免疫组化、实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(WB)检测胃黏膜IL-1β、TNF-α、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)蛋白和基因表达。结果:胃黏膜损伤模型大鼠体质量及摄食量明显低于正常大鼠,胃黏膜细胞排列紊乱,腺上皮萎缩呈囊状,黏膜层变薄,毛细血管充血明显,细胞发生水肿现象,肠上皮化生明显,黏膜固有层内有大量中性粒细胞浸润,核分裂多见,核大深染,异型性明显,细胞增生、细胞凋亡与坏死明显,血清中IL-1β、TNF-α含量升高(P <0.05),胃黏膜IL-1β、TNF-α、NF-κB P65蛋白与基因表达增加(P <0.05)。逍遥散干预后,大鼠体质量及摄食量增加,大鼠胃黏膜病理形态有不同程度减轻,血清中IL-1β、TNF-α含量降低(P <0.05),胃黏膜IL-1β、TNF-α、NF-κB P65蛋白与基因表达降低(P <0.05)。结论:逍遥散可在一定程度上缓解雷公藤多苷所致胃黏膜损伤,其机制可能与调节IL-1β、TNF-α、NF-κB P65的异常表达、减轻炎症级联反应有关。

西红花苷调节TLR4/NF- κ B p65通路抑制大鼠糖尿病肾病的研究

目的观察西红花苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的作用,并探讨相关机制。方法将30只DN大鼠随机分为DN组、西红花苷组、西红花苷联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)[Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)/核转录因子κB(nuclear transcription factorκB,NF-κB)p65通路激活剂]组,各10只;另取10只大鼠,设为对照组。西红花苷联合LPS组灌胃西红花苷(40 mg·kg^(-1)),尾静脉注射LPS(0.4 mg·kg^(-1));西红花苷组灌胃西红花苷(40 mg·kg^(-1)),尾静脉注射等量生理盐水;对照组、DN组分别灌胃、尾静脉注射等量生理盐水。每日1次,干预2周。检测糖脂指标及肾功能指标;检测血清炎症因子水平;Western blotting检测肾组织TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白的表达量。结果与DN组比较,西红花苷组血液空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting serum lisulin,FINS)、三酰甘油(triglycerides,TG)和总胆固醇(triglycerides,TC)水平、24 h尿蛋白、微量白蛋白与尿肌酐比值(albumin/creatinine ratio,UACR)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平及肾组织TLR4、MyD88蛋白表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05);与西红花苷组比较,西红花苷联合LPS组上述指标均升高(P<0.05)。结论西红花苷可改善糖脂代谢及肾功能,减轻炎症反应,从而抑制DN进展,推测其作用机制与抑制TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

疏金利肺汤辅助治疗咳嗽变异性哮喘对抗氧化物、NF-κB p65蛋白的变化研究

目的 研究疏金利肺汤辅助治疗咳嗽变异性哮喘对患者抗氧化物、核转录因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的变化影响。方法 选取医院2018年10月-2020年5月收治的符合中西医诊断,并经支气管激发和舒张试验确诊的咳嗽变异性哮喘患者90例,采用随机数字法分为对照组(常规对症治疗)和观察组(加用疏金利肺汤辅助治疗),分析两组临床效果。结果 观察组完全缓解21例,显效和好转分别为18例和4例,总有效率达95.56%(43/45),高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前肺功能比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后第1秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)(68.51%±6.11%)、FEV1[(2.38±0.33)L]、最大呼气峰流速(PEF)[(64.11±5.76)L/min]水平高于对照组(P<0.05)。两组治疗前抗氧化物、NF-κB p65蛋白、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-12(IL-12)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后丙二醛(MDA)、过氧化物酶(LPO)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)、NF-κB p65蛋白、IL-5低于对照组,IL-12高于对照组(P<0.05)。结论 疏金利肺汤辅助治疗咳嗽变异性哮喘可调节氧化应激、炎症因子的表达水平,改善肺功能,提高疗效。

退热六法对脂多糖致热兔toll样受体4/核转录因子-κB及炎症因子的影响

目的明确退热六法对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致热幼兔的退热效果及抗炎机制。方法选取24只新西兰幼兔随机分为正常组、模型组、推拿组,每组8只,推拿组和模型组通过耳缘静脉注射0.5μg/kg LPS建立发热模型,1小时内肛温升高0.6℃为造模成功。推拿组于造模后1小时进行手法干预,干预方法为退热六法,即开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊,连续监测6小时肛温变化,比较造模前、造模后1小时、造模后3小时中性粒细胞比率变化,用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)含量变化,用蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测肝、肺组织toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核转录因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)表达含量。结果推拿后1小时、2小时、3小时,推拿组肛温显著低于模型组(P<0.05);造模后3小时,模型组中性粒细胞比率(neutrophil granulocyte,NEU%)高于造模前(P<0.05),推拿组NEU%显著低于模型组(P<0.05),推拿组血清中TNF-α、IL-1β含量低于模型组(P<0.05),推拿组肝、肺组织TLR4表达含量低于模型组(P<0.05),推拿组肝、肺组织NF-κB p65表达含量与模型组无明显差异(P>0.05)。结论退热六法降温作用明确,下调中性粒细胞比率、外周炎症因子TNF-α、IL-1β水平,从而影响TLR4信号通路实现调节体温作用,而这一作用不是通过NF-κB信号通路介导。

大黄素通过抑制核转录因子-κB信号途径对脂多糖诱导的ARDS小鼠发挥肺保护作用

目的探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺保护作用的可能机制.方法选择72只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为对照组、模型组和大黄素高、中、低剂量组及p65信号通路上游分子核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂激酶β(IKKβ)活化抑制剂BAY65-1942(BAY)组,每组12只.采用经气道雾化吸入LPS 40μL的方法复制ARDS小鼠模型;对照组雾化吸入等量磷酸盐缓冲液(PBS).大黄素低、中、高剂量组于制模前1 h通过腹腔注射5、10、20 mg/kg大黄素预处理;BAY组腹腔注射BAY 5 mg/kg预处理;对照组与模型组给予等量生理盐水.制模后48 h处死动物,取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,光镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变,用蛋白质免疫印迹试验检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-8、IL-1β)、p65及p65/磷酸化p65(p-p65)、IKKβ、磷酸化IKKβ(p-IKKβ)的蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中髓过氧化物酶(MPO)水平及NF-κBp65与DNA的结合力,流式细胞术检测BALF中表面分子CD11b+Gr-1+中性粒细胞(PMN)的比例.结果与对照组比较,模型组肺泡结构破坏明显、肺泡间隔明显增宽、炎症细胞浸润明显增多;肺损伤评分明显升高;BALF中MPO水平、CD11b+Gr-1+PMN比例均明显升高;同时组肺组织IL-8、TNF-α、IL-1β、p65、p-p65、IKKβ以及p-IKKβ的蛋白表达水平均明显增加,NF-κBp65与DNA的结合力也明显增强.与模型组比较,不同剂量大黄素组小鼠肺泡结构破坏减少,肺泡间隔增宽程度减轻,肺组织炎症细胞浸润减少,肺损伤评分明显下降;BALF中MPO水平、CD11b+Gr-1+PMN比例明显降低,NF-κBp65与DNA的结合力也明显减弱;肺组织TNF-α、IL-8、IL-1β、p65、p-p65、IKKβ与p-IKKβ的蛋白表达水平下降,且以大黄素高剂量组的作用比低、中剂量组更明显〔肺损伤评分(分):2.10±0.48比3.03±0.49、2.83±0.53,MPO(ng/L):486.04±35.74比683.07±79.12、585.06±87.35,CD11b+Gr-1+PMN百分比:(6.61±1.52)%比(20.68±4.17)%、(11.54±2.39)%,NF-κB p65与DNA的结合力(A值):1.64±0.23比2.41±0.16、2.10±0.12,TNF-α/GAPDH:0.81±0.09比1.07±0.11、0.83±0.16,IL-8/GAPDH:0.64±0.05比1.17±0.03、0.98±0.02,IL-1β/GAPDH:0.73±0.06比1.07±0.09、0.89±0.08,p65/GAPDH:0.82±0.11比0.97±0.06、0.86±0.05,p-p65/GAPDH:0.50±0.06比0.61±0.03、0.53±0.04,IKKβ/GAPDH:0.69±0.10比0.95±0.05、0.76±0.06,p-IKKβ/GAPDH:0.63±0.07比1.00±0.03、0.77±0.08;均P<0.05〕.BAY组的作用与大黄素高剂量组相当.结论大黄素能剂量依赖性抑制LPS诱导的ARDS小鼠肺组织炎症,减轻肺损伤,该作用机制可能与抑制NF-κB的信号通路活化有关.

调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移灶miR-34a-5p、Notch1/NF-κB表达的影响

目的探讨调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移(colorectal cancer liver metastasis,CLM)灶组织中MicroRNA-34a-5p(miR-34a-5p)及其靶基因Notch1/核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路表达的影响。方法选取30只雄性Balb/c裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组10只。脾脏原位注射HCT-116人结肠癌细胞(细胞数约为1×107个/mL)法构建CLM模型。中药组在CLM造模完成2周后开始调脾安肠方(2 g/mL,每日0.2 mL)灌胃2周,空白组和模型组同期予等体积0.9%生理盐水灌胃。苏木素—伊红染色观察肝转移灶病理组织形态;蛋白免疫印迹法测定肝转移灶Notch1、NF-κB p65蛋白水平;实时荧光定量PCR测定肝转移灶miR-34a-5p及Notch1、NF-κB p65 mRNA水平。结果与模型组比较,中药组裸鼠镜下病理转移灶面积明显减小,核分裂像减少,提示调脾安肠方抑制了结直肠癌细胞在肝脏的定植和迁移。与空白组比较,模型组肝转移灶中miR-34a-5p含量显著降低(P<0.01),Notch1、NF-κB p65蛋白表达升高(均P<0.05),Notch1、NF-κB p65的mRNA表达显著升高(均P<0.01)。与模型组比较,中药组Notch1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB p65的mRNA表达显著降低(P<0.01)。miR-34a-5p与Notch1 mRNA在结肠癌肝转移灶组织中表达水平呈负相关(r^(2)=0.8845,P<0.05),Notch1与NF-κB p65在结肠癌肝转移灶组织中mRNA表达水平呈显著正相关(r^(2)=0.9291,P<0.01)。结论中药复方调脾安肠方能抑制裸鼠结肠癌肝转移灶形成,其机制可能与通过抑癌基因miR-34a-5p靶向负性调节Notch1/NF-κB通路表达有关。

平喘宁调节IRE-1α-XBP-1s信号轴干预哮喘大鼠气道炎症的机制研究

目的:探究平喘宁对哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法:将105只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制大鼠哮喘模型,造模21 d后,各给药组分别灌胃给予相应药物,正常组、模型组灌胃给予等体积的生理盐水,1次/d,连续4周。4周后,在进行哮喘激发试验后2 h内解剖大鼠并取出肺组织,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。HE染色观察肺组织中平滑肌厚度、炎症细胞浸润程度等相应病理的改变;ELISA法检测BALF中IL-5、IL-17水平;RT-qPCR法检测肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA、Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量;Western blotting法检测肺组织中IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果:HE染色结果显示,与模型组比较,各给药组(平喘宁低剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁高剂量组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组)大鼠肺组织病理情况都有不同程度的缓解。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显降低(P<0.01),且平喘宁具有剂量依赖性;平喘宁低、中剂量组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01);平喘宁高剂量组大鼠BALF中IL-5水平明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),而IL-17水平与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显升高(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显升高(P<0.05或P<0.01);平喘宁低剂量组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显低于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01);平喘宁中剂量组大鼠肺组织XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显低于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.05或P<0.01),而IRE-1αmRNA相对表达量与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05);平喘宁高剂量组大鼠肺组织IRE-1αmRNA相对表达量均明显低于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),而Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA相对表达量均明显高于地塞米松组(P<0.01);平喘宁高剂量组Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA相对表达量与桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05),XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA、Scara3 mRNA与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肺组织IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺组织IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显降低(P<0.01);平喘宁低剂量组大鼠肺组织IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01);平喘宁中剂量组大鼠肺组织XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.05或P<0.01),IRE-1α蛋白相对表达量明显高于桂龙咳喘宁组(P<0.05),而IRE-1α蛋白相对表达量与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05);平喘宁高剂量组大鼠肺组织IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:平喘宁可通过调节IRE-1α-XBP-1s信号轴改善OVA诱导的哮喘大鼠气道炎症性损伤。

苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞凋亡的诱导及对NF-κB P65及CDK2表达的影响

目的：探讨苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞凋亡的诱导及对NF-κB P65及CDK2表达的影响.方法：从苦丁茶老叶中提取熊果酸并纯化与鉴定,用10,20,40,80,100 μmol/L 5个梯度浓度的熊果酸持续作用于鼻咽癌细胞48 h,流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率;免疫印迹法检测NF-κB P65及CDK2表达.结果：成功从苦丁茶老树叶中提取熊果酸,苦丁茶熊果酸能阻滞鼻咽癌细胞于G0～G1期;浓度达40 μmol/L时抑制效果较为明显.NF-κB P65及CDK2蛋白表达有同向变化趋势,在0～100μmol/L熊果酸浓度范围内,上述两蛋白随着浓度增高表达趋以减弱,当熊果酸浓度增至40 μmol/L后,两者表达逐渐消失.结论：苦丁茶熊果酸能诱导鼻咽癌细胞发生凋亡,对NF-κB P65及CDK2表达产生干预作用,有望成为化学治疗的候选新药.

地塞米松诱导的危重病性肌病中PKB/Akt、PKC及NF-κB p65的表达

目的探讨地塞米松诱导的危重病性肌病中PKB/Akt、PKC及NF-κB p65的表达情况。方法健康大鼠随机分为对照组和实验组,实验组再被分为7、9、11 d亚组(n=10)。实验组采用地塞米松(5 mg/kg)连续腹腔注射,1次/d,对照组注射等量的生理盐水。动物处死后采用免疫组化法检测比目鱼肌中PKB/Akt、PKC及NF-κB p65的表达情况。结果对照组可见少量PKB/Akt、PKC及NF-κB p65阳性表达细胞。与对照组比较,PKC、PKB/Akt于实验7 d显著升高,随时间延长,表达量逐渐降低,至11 d接近正常水平;NF-κB p65于9 d表达升高,11 d亚组略有降低。结论地塞米松诱导的危重病性肌病中PKC、PKB/Akt及NF-κB p65的表达增强。

清肺通络敷胸膏对流感病毒肺炎大鼠肺组织ERK/NF-κB p65蛋白表达的影响

目的探讨清肺通络膏对流感病毒诱导的肺炎大鼠肺组织中ERK/NF-κB p65信号通路的调控机制。方法将30只Wister大鼠随机分为正常组、模型组、清肺通络敷胸膏组,每组10只。除正常组外,采用鼻腔接种流感病FM1株诱导Wister幼龄大鼠肺炎,在感染后各治疗组采用清肺通络膏贴敷于大鼠背部肺脏投影区治疗。观察各组大鼠的一般状态(饮食量、进水量、毛发、活动量、精神状态、呼吸频率);光镜下观察肺组织形态学;采用免疫组织化学法检测各组大鼠肺组织磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK),核转录因子(NF-κB p65)的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织中p-ERK,NF-κB p65蛋白表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),清肺通络膏组p-ERK、NF-κB p65蛋白的表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论清肺通络膏通过抑制ERK磷酸化,使NF-κB p65表达降低,从而减轻了肺组织的病理损伤,达到治疗目的。

五味子醇甲对APP/PS1小鼠学习记忆和NF-κB p65的影响

目的研究五味子醇甲(SCH)对APP/PS1双转基因痴呆小鼠行为学和NF-κB p65的影响。方法将35只APP/PS1双转基因痴呆小鼠随机分为模型(APP/PS1)组、五味子醇甲(SCH+APP/PS1)组;另以同背景同月龄的C 57 BL/6 J阴性小鼠为空白(WT)组。SCH+APP/PS1组给予SCH悬浊液灌胃(2.6 mg·kg^-1·d^-1),模型组和空白组给予等量蒸馏水灌胃。各组灌胃30 d进行Mirror水迷宫空间探索试验后取材。HE染色法观察皮层及海马CA1区神经细胞的形态结构。运用DCFH-DA法检测脑组织活性氧(ROS)含量。Western印迹检测法检验磷酸化核转录因子(NF-κB p65,pp65)的表达。结果与APP/PS 1组相比,APP/PS 1+SCH组有效区停留距离及时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);APP/PS 1+SCH组穿越有效区次数和平台区停留距离增加,均差异有统计学意义(P<0.01)。APP/PS 1+SCH组HE染色观察皮层有部分神经细胞萎缩、减少,较APP/PS1组明显好转,海马细胞排列整齐度尚可、较均匀。与APP/PS1组相比,APP/PS1+SCH组能降低ROS含量,差异有统计学意义(P<0.05)。APP/PS 1+SCH组皮层及海马pp65蛋白相对表达量下调(P<0.05,P<0.01)。结论SCH可能通过降低ROS含量和抑制pp65保护脑组织形态结构和提高APP/PS1鼠空间探索记忆能力。

蛹虫草抑制NF-κB p65表达对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨蛹虫草通过抑制核转录因子p65(NF-κB p65)表达对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法健康成年大鼠分成正常对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、蛹虫草低剂量治疗组(250 mg/kg)、蛹虫草高剂量治疗组(500 mg/kg),再灌注48 h后采用免疫印迹法测NF-κB p65蛋白表达水平,采用免疫组化检测海马组织中突触素阳性细胞,苏木素-伊红染色(HE)法观察大鼠海马组织病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测海马组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-10含量。结果 I/R组大鼠海马组织损伤明显,NF-κB p65蛋白、TNF-α的表达明显增多,突触素阳性细胞及IL-10表达明显下降,与其他组比较差异显著(P<0.05),蛹虫草高剂量治疗组其NF-κB p65蛋白、TNF-α的表达均下降,而突触素阳性细胞及IL-10表达明显升高,与I/R组比较差异明显(P<0.05),与HE法观察海马组织结果相一致。结论蛹虫草可抑制NF-κB p65表达的活化和表达,减轻脑缺血再灌注损伤。

NIBP和NF-κB p65在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨NIBP和NF-κB p65在胃癌中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法、Western blot法和免疫组化SP法,检测55例胃癌、癌旁及正常胃组织中NIBP和NF-κB p65蛋白及mRNA的表达。结果胃癌组织中NIBP和NF-κB p65mRNA和蛋白阳性表达率均高于癌旁及正常组织(P<0.05);胃癌组织中NIBP和NF-κB p65的mRNA及蛋白相对表达水平均高于癌旁及正常组织(P<0.05)。胃癌组织中NIBP与NF-κB p65呈正相关(P<0.05)。胃癌组织中NIBP和NF-κB p65阳性表达率与肿瘤浸润程度、分化程度、有无远处转移及临床分期有关(P<0.05)。结论 NIBP和NF-κB p65在胃癌组织中高表达,可能参与了胃癌的发生和发展,且NIBP激活NF-κB p65信号通路途径可能在胃癌的浸润和转移过程中起重要作用。

死亡结构域沉默子和p65在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及与化疗的关系

目的探讨凋亡调控基因死亡结构域沉默子(SODD)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达、临床意义及与磷酸化-NF-κB-p65表达的相关性,研究ALL2种常用化疗药物对SODD表达的影响,试图寻找化疗新靶点。方法免疫组织化学SABC法检测25例儿童ALL骨髓细胞SODD、p65蛋白表达水平;长春新碱(VCR)处理Jurkat细胞后,Annexin-V-Fluorescence/PI双标记的流式细胞术检测细胞凋亡发生率,免疫印迹法检测SODD及p65在化疗药物作用下的表达变化。结果25例ALL中,SODD和p65表达的阳性率较健康对照组高,其中高危病例组SODD阳性表达率较标危病例组阳性表达率高,有显著性差异(Pa<0.05),且骨髓细胞中SODD与p65表达呈正相关(r=0.69P<0.01);VCR能有效诱导Jurkat细胞凋亡,在该凋亡过程中,SODD及p65表达下调,并呈时间依赖性,但柔红霉素(DNR)不能有效下调SODD的表达。结论SODD和p65均参与了ALL的发生发展,且存在一定的协同关系,SODD与ALL临床分型及预后有密切关系;VCR特异下调白血病细胞中SODD的表达及抑制NF-κB的活化,恢复白血病细胞的凋亡敏感性。

风湿性心脏病患者致心力衰竭心肌组织中IL-1β TGF-β1和NF-κB/p65的表达及意义

目的:研究风湿性心脏病(风心病)致心力衰竭(心衰)患者心肌组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子β1(TGF-β1)和核转录因子κB/p65(NF-κB/p65)的表达及其临床病理意义。方法:18例风心病(实验组)和10例正常人(对照组)左心室心肌组织,经4%甲醛固定后常规制作石蜡包埋切片,应用EnvisionTM免疫组化法检测IL-1β、TGF-β1和NF-κB/p65的表达。结果:风心病NYHA分级Ⅲ级或Ⅳ级心衰患者的IL-1β、TGF-β1和NF-κB/p65的表达阳性率及其评分明显高于NYHAⅠ级(P<0.05);实验组(包括pAF组和cAF组)的IL-1β、TGF-β1和NF-κB/p65的表达阳性率及其评分明显高于对照组(RSR组)(P<0.05);IL-1β、TGF-β1和NF-κB/p65的表达评分互相均存在密切正相关(P<0.05),且与左心室射血分数呈负相关,与左心室舒张末期直径呈正相关。结论:IL-1β、TGF-β1和NF-κB/p65在风心病心衰、心室重构的发生、发展中起着重要的促进作用。