鼻咽癌组织中核连蛋白2、整合素β3表达及其临床预后评估价值

目的研究鼻咽癌(NPC)组织中核连蛋白2(NUCB2)、整合素β3(ITGB3)的表达及其对NPC患者预后评估价值。方法回顾性收集2017年3月—2018年3月海军军医大学第一附属医院耳鼻喉科收治的NPC术后患者94例的癌组织及癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化学法检测癌组织和癌旁组织中NUCB2、ITGB3 mRNA和蛋白表达;Kaplan-Meier法分析NUCB2、ITGB3 mRNA表达对NPC患者生存预后的影响;Cox回归分析NPC患者预后的影响因素。结果NPC患者癌组织NUCB2、ITGB3蛋白表达阳性率分别为95.74%(90/94)、87.23%(82/94),高于癌旁组织的8.51%(8/94)、10.64%(10/94),差异有统计学意义(χ^(2)/P=143.323/<0.001、29.139/<0.001);NPC患者癌组织中NUCB2、ITGB3 mRNA的相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(t/P=49.760/<0.001,43.704/<0.001);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的NPC癌组织中NUCB2、ITGB3 mRNA表达水平高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期(t/P=17.443/<0.001,14.275/<0.001)。NUCB2高表达组5年总生存率为52.17%(24/46),低于NUCB2低表达组的83.33%(40/48)(Log-rankχ^(2)=10.941,P=0.001);ITGB3高表达组5年总生存率为53.33%(24/45),低于ITGB3低表达组的81.63%(40/49)(Log-rankχ^(2)=9.832,P=0.002)。Cox回归分析结果表明,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、NUCB2 mRNA升高、ITGB3 mRNA升高为影响NPC患者预后的独立危险因素[OR(95%CI)=1.608(1.225~2.112),1.839(1.228~2.753),1.738(1.246~2.426)]。结论NPC组织中NUCB2、ITGB3 mRNA和蛋白表达上调,两者参与NPC肿瘤的进展过程,是评估NPC患者预后的标志物。

子宫内膜癌患者癌组织中核连蛋白-2表达与临床病理特征及预后的相关性分析

目的:探讨子宫内膜癌患者癌组织中核连蛋白-2(nucleobindin-2)表达与临床病理特征及预后的相关性。方法:选取本院妇科确诊的98例子宫内膜癌患者为子宫内膜癌组,同时设置正常子宫内膜组(24例)、复杂性增生病例组(36例)、子宫内膜不典型增生病例组(42例),采用酶联免疫吸附法及免疫组化方法测定各组nucleobindin-2表达。结果:复杂性增生组、子宫内膜不典型增生组、子宫内膜癌组nucleobindin-2表达水平高于正常子宫内膜组,且子宫内膜不典型增生组nucleobindin-2表达水平高于复杂性增生组,子宫内膜癌nucleobindin-2表达水平高于复杂性增生组、子宫内膜不典型增生组,差异均有统计学意义(t=10.231、11.343、13.432、12.453、10.871、11.094,均P<0.05);正常子宫内膜组、复杂性增生组、子宫内膜不典型增生组、子宫内膜癌组nucleobindin-2阳性率逐渐升高,且差异有统计学意义(χ~2=26.241,P<0.05)。子宫内膜癌患者nucleobindin-2表达与年龄相关性不明显,差异无统计学意义(χ~2=0.232,P>0.05);与病理分型、病理学分级、TMN分期、浸润深度、淋巴血管间隙浸润、淋巴结转移相关性明显,且子宫内膜样腺癌、病理学分期越高、TMN分期越高、浸润深度越深、有淋巴血管间隙浸润、有淋巴结转移,nucleobindin-2阳性表达率越高,差异有统计学意义(χ~2=6.112、20.312、10.121、24.152、7.723、8.734,P<0.05或P<0.01)。nucleobindin-2阴性组3年生存率及生存期均明显高于nucleobindin-2阳性组,差异有统计学意义(χ~2=14.697、12.993,P<0.05)。结论:nucleobindin-2在子宫内膜癌组织的表达量高于正常子宫内膜组织,nucleobindin-2在子宫内膜癌的发生发展过程中起促进作用;nucleobindin-2低表达的患者能获得较好的预后。

百草枯诱导的SH-SY5Y细胞中核连蛋白2基因的表达变化

目的检测核连蛋白(NUCB)2在百草枯(PQ)诱导的SH-SY5Y细胞中的表达变化,分析NUCB2在PQ引起的SH-SY5Y细胞凋亡中的作用机制。方法采用MTT法进行SH-SY5Y细胞毒性分析。选择PQ作用的最佳浓度和时间点,进一步收取经PQ处理后的SH-SY5Y总RNA,首先采用RT-PCR方法观察NUCB2的表达趋势,然后采用real-time PCR方法进行NUCB2基因进行表达变化检测,采用ΔΔCt法进行定量比较分析。结果 MTT方法在酶标仪490 nm波长下,分析得到PQ的最佳作用浓度和时间是0.5 mmol/L作用24 h,此时细胞活力较对照组低约41.67%;采用ΔΔCt法进行定量比较分析,发现NUCB2在mRNA水平的表达量明显降低(P=0.001 6);Western印迹检测发现SH-SY5Y细胞经PQ诱导后引起了caspase-3酶原形式的表达量降低(P<0.05)。结论 NUCB2基因在经PQ诱导后的SH-SY5Y细胞中表达量明显降低,分析其可能在神经细胞的凋亡机制中发挥重要作用。

胭脂鱼核连蛋白2/Nesfatin-1基因克隆及其在间脑与肝胰脏中的差异表达

为探索核连蛋白2(nucleobindin-2,NUCB2)对中国胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)生长发育的调节规律,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆其cDNA全长,并应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)和免疫荧光染色检测主要功能蛋白Nesfatin-1神经肽在3龄和6龄胭脂鱼间脑和肝胰脏中的表达分布。结果显示:NUCB2全长为2090 bp,包括99 bp的5′非翻译区、1449 bp的开放阅读框和542 bp的3′非翻译区,编码482个氨基酸,分为23个氨基酸编码的信号肽区和459个氨基酸编码的功能肽区,后者由前肽裂解位点赖氨酸106-精氨酸107和赖氨酸179-精氨酸180分成Nesfatin-1、Nesfatin-2和Nesfatin-33个功能区域,且Nesfatin-1的M30区域在鱼类中高度保守。在2个鱼龄期,Nesfatin-1在肝胰脏中的表达均极显著高于间脑(P<0.01),而在间脑和肝胰脏中的表达无明显龄期差异(P>0.05);在肝胰脏中其主要在米粒状的胰腺细胞中呈强阳性反应;而在间脑的结节外侧核、室周前核和室前核的少量大神经元细胞中呈阳性反应。综上所述,在胭脂鱼2个典型发育阶段,Nesfatin-1在间脑中的表达水平明显低于肝胰脏,说明Nesfatin-1对胭脂鱼生长发育的调节存在明显的中枢和外周差异。

子宫内膜癌组织残疾基因同源物2、核连蛋白-2、黏蛋白4的表达及与预后的关系研究

目的:研究子宫内膜癌组织残疾基因同源物2(DAB2)、核连蛋白-2(nucleobindin-2)、黏蛋白4(MUC4)的表达及与预后的关系。方法:将我院从2015年1月2017年1月收治的子宫内膜癌患者82例纳入研究。分别采集所有患者的子宫内膜癌组织以及癌旁正常组织,以免疫组化法检测不同子宫内膜组织中的DAB2、nucleobindin-2、MUC4表达情况并进行对比。分析子宫内膜癌组织DAB2、nucleobindin-2、MUC4阳性率与临床病理特征的关系。此外,通过Kaplan-Merier生存曲线分析上述蛋白表达与预后的关系,并以Cox比例风险回归模型分析子宫内膜癌患者预后的影响因素。结果:子宫内膜癌组织DAB2阳性率低于癌旁正常组织,而nucleobindin-2、MUC4阳性率均高于癌旁正常组织(均P<0.05)。TNM分期ⅢⅣ期、淋巴结转移子宫内膜癌患者的DAB2阳性率低于TNM分期ⅠⅡ期、无淋巴结转移患者,而nucleobindin-2、MUC4阳性率均高于TNM分期ⅠⅡ期、无淋巴结转移患者(均P<0.05)。所有患者均进行时长360个月的随访,中位随访时间为31个月,至随访结束,DAB2蛋白阳性患者的无进展生存率分别为66.67%(20/30),明显高于DAB2蛋白阴性患者的19.23%(10/52);而nucleobindin-2、MUC4蛋白阳性患者的无进展生存率分别为22.95%(14/61)、24.56%(14/57),明显低于nucleobindin-2、MUC4蛋白阴性患者的76.19%(16/21)、64.00%(16/25),差异均有统计学意义(均P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析结果可得:TNM分期、淋巴结转移以及DAB2蛋白阴性、nucleobindin-2蛋白阳性、MUC4蛋白阳性均是子宫内膜癌患者预后的影响因素(均P<0.05)。结论:子宫内膜癌组织DAB2存在异常低表达,而nucleobindin-2、MUC4均存在异常高表达,联合检测上述三项蛋白表达情况可能有助于子宫内膜癌的诊断和预后评估。

nesfatin-1抑制摄食的作用及其机制研究进展

nesfatin-1是最近研究发现的一种新的厌食分子。其前体蛋白核连蛋白2(NUCB2)水解形成3个片段:nesfatin-1、nesfatin-2和nesfatin-3。nesfatin-1的中间片段(M30)具有强烈的抑制摄食的作用,nesfatin-2和nesfatin-3不抑制摄食且其生物学功能目前尚不清楚。此外,nesfatin-1还参与行为、情绪、生殖、睡眠、癫痫和糖尿病等的调控。作者综述了nesfatin-1的发现、命名、结构、分布、主要的生物学功能及其抑制摄食的机制。

利用网络数据库预测脂肪因子APLN、NUCB2、RARRES2在胶质母细胞瘤中的表达

目的探讨脂肪因子爱帕琳肽(APLN)、核连蛋白2 (NUCB2)及维甲酸受体反应蛋白2(RARRES2)在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及意义。方法通过基因表达谱交互式分析网站(GEPIA)分析APLN、NUCB2及RARRES2的mRNA在GBM组织及对照组织的表达,分析三者与血管内皮生长因子A (VEGFA)、CD34分子(CD34)及基质金属蛋白酶14(MMP14)的相关性;运用GEPIA和Survexpress分析三者与GBM预后的联系;使用癌细胞系百科全书(CCLE)分析APLN及其受体、NUCB2、RARRES2及其受体在4种胶质瘤细胞系中的表达。结果 APLN、NUCB2及RARRES2的mRNA在GBM患者组织中的表达均上调(P<0.05);APLN与VEGFA(R=0.52,P<0.05)、CD34(R=0.39,P<0.05)相关;NUCB2与M M P14相关(R=0.43,P<0.05);RARRES2的表达水平与GBM的预后呈负相关(GEPIA:Log rank P=0.027;Survexpress:Log rank P=0.007)。NUCB2在4种细胞系中均高表达。APLN受体在A172中表达最高;RARRES2受体在U87MG中表达最高。结论 APLN、NUCB2及RARRES2在GBM组织高表达,APLN与GBM血管生成、NUCB2与GBM侵袭及RARRES2与GBM预后相关。

Nesfatin-1调节脂肪代谢的研究进展

Nesfatin-1是一种新型饱腹因子,其前体蛋白NUCB2被激素原转化酶裂解为nesfatin-1、nesfatin-2和nesfatin-3等3个片段。Nesfatin-1广泛地分布在中枢神经系统和外周组织中,尤其是在下丘脑、垂体、肝和脂肪组织中大量表达。Nesfatin-1具有调节脂肪代谢、摄食、睡眠、生殖、胃功能、心血管和血糖等多种生物学功能。该文综述了nesfatin-1的发现、结构、组织分布和调节脂肪代谢的机制,以期为肥胖和脂肪肝的防控提供理论依据。

Nucleobindin-2在乳腺癌中表达的临床病理意义

目的:探讨NUCB2在乳腺癌中的表达及临床病理意义。方法:收集乳腺癌病例及相应的临床资料包括随访资料应用免疫组织化学技术检测良性病变,有/无淋巴结转移的乳腺癌及配对淋巴结转移灶中NUCB2的表达,分析NUCB2表达与乳腺癌临床病理指标和生存状态间的关系。结果:免疫组化结果:显示NUCB2在BBD、MBC、NMBC、PMLN的阳性表达率分别为90.0%(45/50),82.1%(87/106)、48.2%(40/83)、47.2%(50/106)。其中,NUCB2在BBD的阳性表达率显著高于NMBC、PMLN,而与MBC无显著性差异;在MBC中的阳性表达率显著高于NMBC;在MBC中的阳性表达率显著高于PMLN。临床病理分析结果:显示乳腺癌原发灶中NUCB2表达与淋巴结转移(p=0.000)、临床分期(p=0.001)、雌激素阳性表达(p=0.020)具有显著性相关。而与年龄、肿块大小、组织学分级、组织学类型、孕激素受体、HER2表达、绝经情况无显著相关。Kaplan-Meier分析结果:显示NUCB2阳性表达病例的总生存率比阴性病例更短(P=0.004)。结论:NUCB2在乳腺癌中表达与淋巴结转移、临床分期、雌激素受体表达和生存状态相关,可能在乳腺癌恶性演进和预后中具有重要意义。