脊柱骨折并发脊髓损伤患者血清miRNA-133a和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3表达水平及其与预后的相关性研究

目的探究脊柱骨折并发脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)患者血清微小RNA(microRNA,miR)-133a和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors protein 3,NLRP3)表达水平及其与预后的关系。方法选取2019年1月~2022年3月在贵州省骨科医院治疗的90例脊柱骨折并发SCI患者作为并发SCI组,统计手术后3个月患者预后情况,并依据预后分为预后良好组和预后不良组;另以同期单纯脊柱骨折患者90例作为对照组,记录患者一般资料。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测脊柱骨折患者血清NLRP3水平,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测miR-133a水平;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-133a和NLRP3水平预测脊柱骨折并发SCI患者预后的价值;采用多因素Logistic回归分析脊柱骨折并发SCI患者预后不良的影响因素。结果与对照组比较,并发SCI组血清miR-133a水平(0.68±0.19 vs 1.01±0.24)降低,NLRP3水平(136.42±32.78 pg/ml vs 86.35±15.95 pg/ml)升高,差异具有统计学意义(t=10.227,13.030,均P<0.001)。与预后良好组比较,预后不良组椎管侵占率≥50%比例(64.71%vs 23.21%)、受伤至激素类药物使用时间≥8 h比例(70.59%vs 25.00%)、Frankel分级A级比例(41.18%vs 1.79%)和血清NLRP3水平(162.11±46.74 pg/ml vs 120.82±29.75 pg/ml)升高,miR-133a水平(0.58±0.14 vs 0.74±0.18)降低,差异均具有统计学意义(t=4.430~45.267,均P<0.001)。ROC分析显示,血清miR-133a,NLRP3及二者联合预测脊柱骨折并发SCI患者预后不良的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.779(95%CI:0.681~0.877),0.770(95%CI:0.673~0.868)和0.834(95%CI:0.750~0.918)。Logistic回归结果显示,miR-133a[OR(95%CI)=0.824(0.727~0.934)]、NLRP3[OR(95%CI)=2.673(1.359~5.256)]、椎管侵占率≥50%[OR(95%CI)=1.562(1.146~2.129)]和受伤至激素类药物使用时间≥8h[OR(95%CI)=1.305(1.009~1.687)]均是脊柱骨折并发SCI患者发生预后不良的独立影响因素(均P<0.05)。结论脊柱骨折并发SCI患者血清NLRP3水平较高,miR-133a水平较低,与预后密切相关,两者联合对脊柱骨折并发SCI患者预后有较高预测效能。

模式识别受体与自噬

模式识别受体识别微生物病原体是天然免疫反应起始的一个重要因素。这些受体可以识别病原微生物共享的保守的分子结构,并诱导下游的信号通路,调节免疫反应。自噬是一个特殊的生物过程,通过隔离并降解细胞大分子、细胞器和病原微生物及其产物,维持细胞的稳态,是调节细胞内代谢反应的重要机制,同时也在天然免疫反应中起到了关键作用。不同的模式识别受体(包括Toll样受体、核酸低聚结构域蛋白样受体、视黄酸诱导基因Ⅰ样受体和DNA感受器)与自噬在天然免疫反应过程中相互调节,模式识别受体参与了自噬的诱导与成熟,自噬也调节了模式识别受体启动的天然免疫反应。本文就模式识别受体与自噬的相互调节领域的研究内容进行综述。

急性脑梗死患者血清miR-22-3p、NLRP3水平与炎性因子及预后不良的关系

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平与炎性因子及预后不良的关系。方法选取2021年1月—2022年12月上海中医药大学附属第七人民医院神经内科收治ACI患者106例为ACI组,根据预后情况分为预后不良亚组37例和预后良好亚组69例,另选取同期体检健康者60例为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-22-3p水平,酶联免疫吸附法检测血清NLRP3和炎性因子[白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。通过Pearson相关性分析ACI患者血清miR-22-3p、NLRP3与IL-1β、IL-18、TNF-α的相关性。分析ACI患者预后不良的影响因素,绘制2项指标的受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测预后的价值。结果与健康对照组比较,ACI组血清miR-22-3p水平降低,NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α水平显著升高(t/P=18.698/<0.001、27.091/<0.001、30.154/<0.001、35.104/<0.001、39.834/<0.001)。Pearson相关性分析显示,ACI患者血清miR-22-3p与NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈负相关(r/P=-0.733/<0.001、-0.719/<0.001、-0.683/<0.001、-0.680/<0.001),血清NLRP3与IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈正相关(r/P=0.716/<0.001、0.715/<0.001、0.707/<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,NIHSS评分、IL-1β、IL-18、TNF-α、NLRP3升高为ACI患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.244(1.034~1.497)、1.373(1.067~1.767)、1.047(1.011~1.086)、1.577(1.061~2.343)、1.084(1.022~1.149)],miR-22-3p升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.933(0.888~0.980)]。ROC曲线分析显示,血清miR-22-3p、NLRP3水平联合预测ACI患者预后不良的曲线下面积为0.875,大于两者单独预测的0.786、0.759(Z/P=2.405/0.016、2.517/0.012)。结论ACI患者血清miR-22-3p水平降低和NLRP3水平升高,与炎性因子水平升高和预后不良密切相关,血清miR-22-3p、NLRP3水平联合对ACI患者预后不良的预测价值较高。

低聚原花青素调控TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白质表达保护过度训练大鼠脾脏的作用机制

目的研究低聚原花青素(oligomeric proanthocyanidins,OPCs)调控Toll样受体4 (TLR4)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/核因子-κB (NF-κB)信号通路相关蛋白质表达保护过度训练大鼠脾脏的作用机制。方法雄性Wistar大鼠分为对照组(C组,n=12)、过度训练组(OM组,n=12)、OPCs+过度训练组(OOM组,n=13)。C组不进行任何运动干预,OM组、OOM组大鼠进行6w递增负荷游泳训练。训练期间,OOM组以5 ml/kg (150 mg/kg bw·d)OPCs灌胃,其他组灌胃等体积蒸馏水。末次训练后24 h取材,称重计算脾脏指数,HE染色观察脾脏组织病理学变化,Tunel法检测脾脏组织细胞凋亡水平,免疫组化法检测脾脏p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)、NF-κB、B淋巴细胞瘤因子-2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白质表达水平,流式细胞术检测单核细胞表面TLR4表达率,酶联免疫吸附法检测脾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)和白细胞介素-10 (IL-10)水平,放射免疫法检测血清睾酮(T)和皮质酮(Cor)水平。结果与OM组相比,OOM组大鼠体重、脾脏指数及血清T/Cor比值均显著升高(P<0.05或P<0.01),脾脏单核细胞表面TLR4表达率显著降低(P<0.05),脾脏p38 MAPK、p-p38 MAPK和NF-κB蛋白质表达水平及p-p38/p38 MAPK比值均降低(P<0.05),脾脏TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.01),脾脏Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05),脾脏细胞凋亡水平降低(P<0.05),组织形态明显改善。结论 6 w递增负荷游泳训练期间补充OPCs可以通过调控TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白质表达,有效缓解过度训练,抑制脾脏炎症因子过度表达及细胞凋亡,保护脾脏。[营养学报,2020,42 (5):479-484]

糖尿病视网膜病变患者血清miR-20b-3p、miR-192表达与NLRP3炎症小体和预后不良的关系

目的探讨糖尿病视网膜病变(DR)患者血清微小核糖核酸(miRNA)-20b-3p、miR-192表达与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体和预后不良的关系。方法选取2021年1月至2022年3月我院收治的DR患者165例。根据临床分级标准分为增生型DR(PDR)组89例和非增生型DR(NPDR)组76例,另选取同期我院收治的100例单纯2型糖尿病(T2DM)患者纳入T2DM组及100例体检健康志愿者纳入对照组。检测并对比4组血清miR-20b-3p、miR-192和外周血单核细胞NLRP3 mRNA、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA表达、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平。采用Pearson相关性分析DR患者血清miR-20b-3p、miR-192表达与NLRP3炎症小体相关指标的相关性。DR患者出院后随访1年,根据是否发生视力残疾分为预后不良组47例和预后良好组118例,比较预后不良组和预后良好组血清miR-20b-3p、miR-192水平。收集DR患者的临床资料,单因素和多因素Logistic回归分析影响DR患者预后不良的因素。结果对照组、T2DM组、NPDR组、PDR组血清miR-20b-3p、miR-192表达依次降低,外周血单核细胞NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA和血清IL-1β、IL-18水平依次升高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,DR患者血清miR-20b-3p、miR-192表达与NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA、IL-1β、IL-18水平呈负相关(P<0.05)。随访1年,165例DR患者视力残疾发生率为28.48%(47/165)。多因素Logistic回归分析显示,T2DM病程偏长、PDR占比偏高和糖化血红白蛋白(HbA1c)、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA、IL-1β、IL-18水平升高为影响DR患者预后的独立危险因素,miR-20b-3p、miR-192升高为独立保护因素(P<0.05)。结论DR患者血清miR-20b-3p、miR-192低表达,与NLRP3炎症小体激活和预后不良密切相关,可能成为DR患者病情和预后评估的指标。

探讨引发颅脑损伤术后并发颅内感染的高危因素及预后预测研究

目的探讨颅脑损伤患者术后并发颅内感染的高危因素及血清S-100B蛋白、正五聚体蛋白3(pentraxin 3,PTX3)、寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-bindingoligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)对患者预后的预测效能。方法选取2018年1月至2022年1月在北京市大兴区人民医院确诊为颅内损伤并接受手术治疗的患者443例,按照其术后是否发生颅内感染分为颅内感染组202例和未感染组241例。收集患者临床资料数据,检测患者血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3指标。单因素分析两组患者临床资料数据差异,采用二元logistic回归分析患者术后并发颅内感染的危险因素;对比两组患者血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3水平,采用受试者工作特征(receiver operator characteristic curve,ROC)曲线分析血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3指标对颅脑损伤患者术后并发颅内感染的预测效能。结果两组患者年龄、术前GCS评分结果、手术用时、伤口性质、脑脊液情况、脑室外引流等对比,差异有显著性(P<0.05)。二元logistic回归分析显示:年龄≥60岁、术前GCS评分<8分、手术用时>4h、脑室外引流、脑脊液漏、开发性伤口均是造成患者并发颅内感染的危险因素。颅内感染组血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3水平均明显高于未感染组,差异有显著性(P<0.05)。采用ROC曲线分析显示,血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3指标预测患者术后颅脑损伤的诊断效能较高,但三项指标联合检测的预测效能更高(P<0.05)。结论年龄≥60岁、术前GCS评分<8分、手术用时>4h、脑室外引流、脑脊液漏、开发性伤口是造成患者并发颅内感染的高危因素,且血清S-100B蛋白、PTX3、NLRP3指标对预测颅脑损伤患者术后颅内感染具有一定效能,三项指标联合检测模式预测效能更高。

颅脑损伤患儿早期COR、ACTH、NLRP1及NLRP3表达与预后的相关性研究

目的研究颅脑损伤患儿早期皮质醇(cortisol,COR)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、核苷酸结合低聚体结构域样受体蛋白(nucleotide-binding leucine-rich repeat pyrin domain containing protein,NLRP)1及NLRP3水平与预后的相关性。方法选取西安市中心医院2013年3月至2016年3月收治的急性颅脑损伤患儿62例,依据患儿入院时格拉斯哥昏迷评分(Glasgow coma score,GCS)进行病情严重程度评估,将其分为重-特重度组(3~8分)34例和轻-中度组(9~15分)28例。另外选取同期于西安市中心医院住院治疗的非颅脑损伤患儿30例纳入对照组。记录并比较三组患儿伤后24小时血清COR、ACTH水平及伤后24小时脑脊液NLRP1和NLRP3水平,并分析其与患儿创伤严重程度及预后的相关性。结果颅脑损伤患儿的COR、ACTH及NLRP3水平均显著高于非颅脑损伤患儿(P<005);重-特重度组患儿的COR、ACTH及NLP3水平均显著高于轻-中度组患儿(P<0.05)。各组患儿的NLRP1水平均无显著差异(P>0.05)。重-特重度组患儿预后不良比例显著高于轻-中度组(P<0.05)。预后不良患儿的COR、ACTH及NLRP3水平均显著高于预后良好患儿(P<0.05),NLRP1水平组间比较无显著差异(P>0.05)。COR、ACTH及NLRP3水平与GOS呈显著负相关(P<0.05)。结论颅脑损伤患儿早期COR、ACTH及NLRP3水平均显著升高,创伤越严重,上述指标水平越高。早期COR、ACTH及NLRP3水平可以用来判断颅脑损伤的严重程度和预后,而NLRP1水平则与病情和预后关系不大。

PM_(2.5)通过激活NLRP3/Caspse-1通路诱导大鼠子宫炎症反应

颗粒物(PM)对呼吸系统、心血管系统、神经系统和免疫系统均有损害,但目前关于吸入颗粒物对生殖损伤的研究较少。本研究旨在探讨细颗粒物(PM_(2.5))短期暴露对大鼠子宫炎症损伤及其作用机制。PM_(2.5)暴露30 d后,高剂量组大鼠的子宫脏器系数、内膜上皮细胞厚度和腺上皮高度均明显高于对照组(P<0.05),抑制剂MCC950则能明显降低PM_(2.5)对子宫的影响。子宫组织免疫荧光双染色结果显示,PM_(2.5)暴露组子宫内CD45白细胞和CD11b巨噬细胞均明显增加(P<0.05)。Elisa法检测子宫组织和血清中白介素1β(IL-1β)和转化生长因子-β1(TGF-β1),暴露组子宫组织和血清中IL-1β和TGF-β1含量明显升高(P<0.05)。Western印迹法检测结果显示,PM_(2.5)上调核苷酸结合低聚体结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、pro-IL-1β、pro-Caspase-1和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的蛋白质表达量(P<0.05)。与高剂量组相比,NLRP3抑制剂MCC950能明显降低NLRP3/Caspase-1通路中关键蛋白质表达水平(P<0.05)。综上,PM_(2.5)通过激活NLRP3/Caspase-1信号,诱导大鼠子宫炎症反应,为PM_(2.5)生殖毒性预防和治疗提供理论基础。

血清CK-18、PTX3、NLRP3在非酒精性脂肪性肝病中的表达及其与肝纤维化的关系

目的探究血清细胞角蛋白18(CK-18)、正五聚体蛋白3(PTX3)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达及其与肝纤维化的关系。方法选取我院2017年7月至2019年7月收治的NAFLD患者105例作为研究组,另选取同期健康体检者102名作为对照组。检测对比两组、研究组不同肝纤维化程度患者血清CK-18、PTX3、NLRP3的水平,分析各血清指标与NAFLD发病及肝纤维化指标的关系,并评价其对肝纤维化风险的预测价值。结果研究组血清CK-18、PTX3、NLRP3水平均高于对照组(P<0.05);NAFLD发病与血清CK-18、PTX3、NLRP3异常升高显著相关(P<0.05);血清CK-18、PTX3、NLRP3与血清HA、PCⅢ、PCⅣ间存在正相关关系(P<0.05);血清CK-18、PTX3、NLRP3联合预测肝纤维化风险的曲线下面积(AUC)为0.843,大于各指标单独预测的AUC,联合预测的最佳灵敏度为69.77%,特异度为90.32%。结论NAFLD患者的血清CK-18、PTX3、NLRP3呈异常高表达状态,参与NAFLD的发生发展,且与肝纤维化指标间存在正相关关系,明确其表达情况有助于临床预测患者肝纤维化风险,开展针对性干预措施。

降钙素相关基因肽在小鼠巨噬细胞炎症调控中的作用研究

目的探讨降钙素相关基因肽(CGRP)在炎症调控中的作用,验证CGRP可通过活性氧簇-核苷酸结合低聚体结构域样受体3(ROS-NLRP3)信号通路抑制小鼠巨噬细胞炎症因子的分泌。方法实验分为对照组、脂多糖(LPS)100 ng/ml组(LPS组)、CGRP 10 ng/ml组(CGRP 10组)、CGPR 30 ng/ml组(CGRP 30组)、CGRP 100 ng/ml组(CGRP 100组)及CGRP 30 ng/ml+LPS 100 ng/ml组(CGRP 30+LPS组)。作用12 h后,分别收集各组细胞的培养上清,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达。同时收集各组细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测炎症因子IL-1β、TNF-α和炎症复合体NLRP3 mRNA的表达水平。流式细胞术检测各组细胞内活性氧簇(ROS)水平,Western blotting检测ROS-NLRP3信号通路相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β及TNF-α的蛋白表达。结果与对照组比较,LPS组细胞中IL-1β、TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平升高,培养上清液中IL-1β和TNF-α的蛋白表达水平升高,细胞内ROS水平升高,且细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β及TNF-α的蛋白表达水平升高(P<0.05);与LPS组比较,CGRP 10组、CGRP 30组、CGRP 100组、CGRP 30+LPS组细胞中IL-1β、TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平降低,培养上清液中IL-1β和TNF-α蛋白表达水平降低,细胞内ROS水平降低,且细胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β及TNF-α蛋白表达水平也降低,所有指标中CGRP 30组降低最明显(P<0.05)。结论CGRP可降低巨噬细胞内ROS和NLRP3的表达,使炎症因子IL-1β和TNF-α的释放减少,CGRP可能在减弱局部炎症反应中发挥重要的调控作用。

低聚半乳糖对AD模型小鼠认知功能及炎性反应的调节作用

目的探讨低聚半乳糖(GOS)改善阿尔茨海默病(AD)模型小鼠认知功能的作用及机制。方法将5月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠分成AD模型组(AD组)和AD干预组(AD+GOS),将同窝出生野生型小鼠分成野生对照组(WT)和野生干预组(WT+GOS),每组10只。干预组喂饲含有5%GOS的饲料,WT和AD组喂饲普通饲料,连续干预6月。采用Morris水迷宫进行神经行为学检查,采用硫黄素T染色法检测脑组织Aβ沉积情况,采用qRT-PCR和Western Blotting法检测大脑皮质GFAP(反应性星形胶质细胞标记物)、CD86(小胶质细胞M1型活化标记物)以及Toll样受体-2(TLR2)、白介素-1β(IL-1β)mRNA和蛋白表达水平,Western Blotting法检测大脑皮质核转录因子(NF-κB)p65蛋白表达水平。结果与WT组相比,AD模型组小鼠逃避潜伏期增加,停留时间、穿台次数减少,脑组织Aβ沉积个数增多,GFAP、CD86、IL-1β、TLR2 mRNA和蛋白、NF-κBp65蛋白相对表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与AD组相比,AD+GOS组小鼠逃避潜伏期降低,停留时间、穿台次数增加,脑组织Aβ沉积个数减少,GFAP、CD86、IL-1β、TLR2mRNA和蛋白、NF-κBp65蛋白相对表达水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论GOS可下调TLR2表达,降低反应性星形胶质细胞和小胶质细胞M1型活化,减少NF-κBp65活化和IL-1β表达,减轻Aβ沉积,改善AD模型小鼠的认知功能损伤。

新型生物标志物在冠心病中的研究进展

近年来,冠心病的生物标志物的研究逐渐引起人们的重视。大量研究发现冠心病生物标志物参与冠心病发生发展的各个阶段,在冠心病的发生发展中起着十分重要的作用。目前生物标志物已成为诊治冠心病不可缺少的一种手段。本文就亲环素A、心型脂肪酸结合蛋白、正五聚蛋白3、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体这四种新型生物标志物在冠心病中的研究进展做一综述,以期为冠心病的诊治及预后评估提供新的依据。

NLRP3 mRNA表达水平与急性酒精性肝炎的相关性

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信使核糖核酸(mRNA)表达水平与急性酒精性肝炎的相关性。方法选取2019年1月~2020年10月我院收治的82例急性酒精性肝炎患者(AH组,其中重症AH组20例,轻症AH组62例)、46例酒精性脂肪肝患者(脂肪肝组)以及30例健康体检者(健康对照组)。检测中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒/淋巴细胞比值(NLR)、血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、血清白蛋白、血清总胆红素,采取荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测NLRP3 mRNA。结果AH组的中性粒细胞计数、NLR比值高于脂肪肝组、健康对照组(P<0.05);AH组的血清AST、血清ALT、AST/ALT比值、血清白蛋白、血清总胆红素、血清ALP水平高于脂肪肝组、健康对照组(P<0.05)。AH组的NLRP3 mRNA水平高于脂肪肝组、健康对照组(P<0.05)。重症AH组的NLRP3 mRNA水平高于轻症AH组(P<0.05)。AH病情程度与NLRP3 mRNA水平呈正相关(r=0.633,P<0.05);中性粒细胞计数、NLR比值、AST/ALT比值与NLRP3 mRNA水平呈正相关(r=0.392,r=0.337,r=0.252,P<0.05)。NLRP3 mRNA鉴别诊断AH的灵敏度为91.46%,特异度为77.63%;NLRP3 mRNA评估AH病情程度的灵敏度为90.00%,特异度为72.58%。结论NLRP3 mRNA水平与急性酒精性肝炎的发生发展、病情严重程度具有密切关联,发病机制可能与NLRP3 mRNA表达上调有关,NLRP3 mRNA对酒精性肝炎的病情严重程度具有一定的辅助诊断评估价值,临床应用价值高。

湖北金粟兰中倍半萜二聚体化合物(+)-chlorahupetenes B对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的抗炎作用

目的评价湖北金粟兰中倍半萜二聚体化合物(+)-chlorahupetenes B[(+)-CHB]对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的影响及作用机制。方法RAW264.7细胞分为对照组(给予等体积DMSO)、模型组(给予等体积DMSO)、地塞米松磷酸钠注射液(Dex,阳性对照,1μmol·L^(-1))组和(+)-CHB低、中、高浓度(5、10、20μmol·L^(-1))组。各组分别加入相应药物孵育细胞1 h,除对照组外,其余组加入LPS(1μg·mL^(-1))诱导24 h造成炎症应答模型。细胞增殖检测法用于评估细胞活力;Griess反应检测一氧化氮(NO)浓度;酶联免疫分析检测炎症细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的生成;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IL-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-6和TNF-αmRNA表达;Western blotting检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)p65、p-NF-κBp65、NLRP3、嘌呤能受体(P2X7)蛋白表达水平。结果与模型组比较,(+)-CHB减少了梭形细胞数量,使大部分细胞恢复正常形态;显著抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β生成(P<0.01),显著降低COX-2、iNOS、IL-6、TNF-α、NLRP3、IL-1βmRNA水平(P<0.05、0.01);显著降低TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65、NLRP3、P2X7蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论(+)-CHB通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路和P2X7/NLRP3/IL-1β炎症小体轴激活缓解LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。

人体生物化学

9708347 在体外与 GnRH-刺激 LH 分泌的同源脱敏作用发生在内源性 GnRH峰值期间/Weiss J//Endocrinol.-1995,136(1).-138～144

胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平及其预测价值

目的为探究胎膜早破(PROM)合并绒毛膜羊膜炎(CA)血清NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、可溶性肿瘤坏死因子受体-Ⅰ(sTNFR-Ⅰ)、微小核糖核酸(miR)-182水平及其预测价值。方法选取2019年1月-2023年6月天津市第五中心医院收治的PROM合并CA产妇52例为研究组,另选同期收治的PROM未合并CA产妇54例为对照组,研究组根据CA分期分为I期组25例和Ⅱ~Ⅲ期组27例。比较研究组和对照组、不同CA分期血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平;Spearman分析PROM产妇血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平与CA分期的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析三指标对PROM合并CA的预测价值。结果与对照组相比,研究组血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平升高(P<0.05);与Ⅰ期组相比,Ⅱ~Ⅲ期组血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平升高(P<0.05);血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平与CA分期呈正相关(P<0.05);血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182联合检测诊断PROM合并CA的曲线下面积(AUC)比单个指标检测值高(P<0.05),且联合检测的敏感度、特异度为86.54%、90.74%。结论PROM产妇合并CA血清NLRP3、sTNFR-Ⅰ、miR-182水平呈高表达,三指标与CA分期呈正相关,且三指标联合检测可提高PROM产妇合并CA的预测价值。

急性呼吸窘迫综合征合并肺部感染血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达及临床意义

目的分析急性呼吸窘迫综合征(ARDS)合并肺部感染血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、微小核糖核酸(miR)-155-5p、miR-98-5p表达及临床意义。方法将2020年1月-2023年5月潍坊医学院附属医院收治的ARDS合并肺部感染患者104例纳入感染组(其中轻度组40例、中度组39例和重度组25例,入院28 d死亡31例),ARDS未合并肺部感染患者105例纳入未感染组。分析两组临床资料,比较两组、不同病情、不同预后ARDS合并肺部感染患者血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平单独及联合检测对ARDS合并肺部感染患者预后的预测价值。结果相较未感染组,感染组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平升高,而血清miR-98-5p表达水平降低(P<0.05)。轻、中和重度组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平呈升高趋势,血清miR-98-5p表达水平呈降低趋势(P<0.05)。相较预后良好组,预后不良组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平更高,血清miR-98-5p表达水平更低(P<0.05)。绘制ROC曲线,血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平联合检测对ARDS合并肺部感染预后的预测价值较高(P<0.05),曲线下面积(AUC)为0.899。结论ARDS合并肺部感染患者肺部感染程度、ARDS病情加重与血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达密切相关,联合检测对ARDS合并肺部感染患者预后具有良好的预测。

槲皮素诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

目的探究槲皮素(Quer)诱导乳腺癌细胞凋亡的机制。方法将人乳腺癌细胞MCF-7分为4组,分别为对照组、实验组、阴性对照(NC)组和miR-373-3pmimics组。对照组细胞在正常条件下培养;实验组用80μmol·L^(-1)槲皮素处理;NC组用80μmol·L^(-1)槲皮素处理后,转染50nmol·L^(-1)miR-373-3p的阴性对照;miR-373-3pmimics组用80μmol·L^(-1)槲皮素处理,转染50nmol·L^(-1)miR-373-3p。用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中微小核糖核酸-373-3p(miR-373-3p)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况,用原位末端标记法(Tunel)实验检测各处理组细胞的凋亡率。结果对照组、实验组、NC组、miR-373-3pmimics组的miR-373-3p相对表达水平分别为1.00±0.15、0.61±0.08、0.67±0.05和1.19±0.16,TXNIPmRNA相对表达水平分别为1.00±0.12、1.83±0.21、1.71±0.19和1.26±0.14,NLRP3mRNA相对表达水平分别为1.00±0.11、0.73±0.06、0.65±0.08和1.27±0.15,Bcl-2mRNA相对表达水平分别为1.00±0.15、0.43±0.06、0.37±0.04和0.83±0.11,BaxmRNA相对表达水平分别为1.00±0.12、2.13±0.25、1.96±0.21和1.38±0.17,凋亡率分别为(100.00±13.55)%、(217.24±25.13)%、(196.37±21.53)%和(134.71±16.42)%。实验组的上述指标与对照组比较,miR-373-3pmimics组的上述指标与NC比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论槲皮素通过调控miR-373-3p/TXNIP/NLRP3通路诱导乳腺癌细胞凋亡。

血清PTX3和NLRP3联合检测在颅脑损伤术后颅内感染早期诊治中的应用研究

目的研究血清正五聚体蛋白3(PTX3)、寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)联合检测在颅脑损伤术后颅内感染早期诊治中的应用。方法2018年4月-2020年10月于海南西部中心医院及上海交通大学医学院附属第九人民医院就诊的72例于术后发生颅内感染的颅脑损伤患者,作为感染组;另选择同期接受治疗且未发生术后颅内感染的80例颅脑损伤患者,作为未感染组。比较感染组与未感染组患者术后早期血清PTX3、NLRP3的表达水平,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PTX3、NLRP3因子及联合检测对术后颅内感染发生的诊断价值,根据严重程度将感染组患者分为轻度感染组(n=35)、中度感染组(n=22)、重度感染组(n=15),根据术后颅内感染类型将感染组患者分为单一感染组(n=43)和混合感染组(n=29),根据颅内感染的预后控制情况将感染组患者分为控制有效组(n=51)和控制无效组(n=21),比较不同亚组患者血清PTX3、NLRP3的表达水平。结果感染组患者术后1 d血清PTX3、NLRP3水平均高于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05);PTX3、NLRP3及联合诊断颅内感染的曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.698、0.837,联合诊断价值高于单一指标诊断价值,差异有统计学意义(P<0.05)。重度感染组术后1 d血清PTX3、NLRP3水平高于中度感染组、轻度感染组,中度感染组术后1 d血清PTX3、NLRP3水平高于轻度感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。单一感染组血清PTX3、NLRP3水平低于混合感染组,差异有统计学意义(P<0.05);控制有效组血清PTX3、NLRP3水平低于控制无效组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清PTX3、NLRP3联合检测较单一指标对颅脑损伤术后颅内感染的诊断效能更高,颅脑损伤患者术后早期血清PTX3、NLRP3水平与颅内感染程度、感染类型及预后情况相关。

槐绛方调控NLRP3/Caspase-1通路抗溃疡性结肠炎损伤的机制研究

目的探讨槐绛方对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用以及对NOD样受体热蛋白结构域3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组以及槐绛方低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8g/kg)组,对照组给予正常饮用水,其余各组自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)水溶液诱导UC模型,连续7 d。造模同时各给药组灌肠不同剂量槐绛方,对照组和模型组灌肠等体积0.9%氯化钠溶液,每日记录各组小鼠体质量、便血、便形等症状改变,并进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,采用苏木素-伊红(HE)染色评估小鼠结肠黏膜组织病理改变,ELISA法检测结肠组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,Western blotting法检测结肠组织中NLRP3、Caspase-1、GasderminD(GSDMD)蛋白表达。结果与模型组比较,槐绛方明显减缓小鼠体质量下降,有效减轻小鼠结肠炎症状,降低炎症因子(TNF-α、IL-1β)和焦亡相关蛋白(NLRP3、cleavedCaspase-1、GSDMD-N)表达(P<0.05、0.01),对UC损伤有较好的改善作用,且呈剂量相关性。结论槐绛方具有改善UC小鼠炎症状态、恢复结肠形态、抑制细胞焦亡作用,其作用机制与调控NLRP3/Caspase-1通路密切相关。