转基因植物核酸检测策略与体外扩增技术研究进展

转基因生物(Genetically modified organisms,GMOs)特别是转基因作物的商品化应用在世界范围内迅猛发展,在推动农业、医药和工业等领域的飞速发展的同时也逐步吸引越来越多公众注意力,生物安全问题成为突出的争论话题。转基因作物及其产品的快速准确检测成为社会发展的急切需求,转基因技术的多样化也要求检测策略和检测技术的不断改进。系统综述针对各种作物转基因技术和转基因产品的检测策略和技术,全面比较各种技术的特点和适用范围,并对目前面临的问题和发展趋势进行分析。

体外核酸扩增技术检测沙眼衣原体和淋球菌采用不同标本的比较分析

目的探讨体外核酸扩增技术(NAATs)检测不同标本沙眼衣原体(CT)和淋球菌(NG)的价值。方法选取2019年1月至2020年6月于本院就诊的3926例疑似STD女性患者为研究对象,无菌操作采集尿液和宫颈拭子标本,采用NAATs法测定CT、NG。比较尿液和宫颈拭子标本中CT感染率、CT感染率一致性,并分析CT感染年龄分布情况。结果尿液和宫颈拭子标本中CT、NG感染率比较差异无统计学意义;Kappa检验显示,尿液和宫颈拭子标本中CT、NG感染的一致性良好(Kappa值=0.814、0.856,P=0.000、0.000);CT感染多发生于31~40岁人群,其次为41~50岁人群;NG感染多发生于>50岁人群,其次为41~50岁人群。结论NAATs能检出不同标本中CT、NG感染情况,并及时发现合并感染,为临床诊治提供参考,进而改善患者预后。

PCR增强剂在核酸体外扩增检测技术的研究进展

聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是一种通过体外酶促合成DNA片段,后通过对DNA片段进行鉴别的技术,是一种核酸体外扩增检测技术,该技术自上世纪80年代应用以来,在临床上得到广泛应用。采用PCR?技术进行疾病检测中,PCR增强剂起到了至关重要的作用。本文将综述近年来PCR增强剂在核酸体外扩增检测技术的研究进展,以为聚合酶链式反应技术在临床中的应用提供数据及技术支持。

NASBA技术及其在检验检疫中的应用

序列特异性核酸体外扩增技术(nucleic acid specific-based amplification,NASBA)是在PCR基础上发展起来的一种扩增RNA的新技术,作为一种新型研究手段,具有便捷、准确性好、灵敏度高、周期短的特点,尤其适用于RNA的分析研究。核酸分析技术是出入境检验检疫工作的重要手段,可用于食品病原微生物、动植物产品中的有害生物、病原的分析及鉴定。本文简要介绍了NASBA技术的基本原理,在论证对比NASBA技术与普通PCR方法、荧光PCR方法及其他恒温扩增等核酸分析技术的差异及相似性后,根据其使用特点进一步对NASBA在进出境检验检疫的食品安全检测及动植物检疫的应用予以综述及展望。

后基因组时代病原微生物诊断新技术

微生物基因组研究和进展深深促进临床微生物实验室诊断新技术的发展。包括核酸杂交、核酸体外扩增和基因芯片等临床诊断新技术给临床实验室感染诊断带来一片光明。

接种乙肝疫苗后不出现抗体怎么办?

接种乙肝疫苗是预防乙肝最好的措施,目前我国生产的基因工程乙肝疫苗的免疫效果非常显著。接种后免疫获得成功的标志是乙肝表面抗体(抗HBs)成为阳性,成年人接种疫苗后,保护性的表面抗体阳转率95％左右,学龄前儿童为96.6％,新生儿为96.2％。但仍会有5％左右的人接种后表面抗体不转阳,也就是说没有起到预防作用,对于这部分人怎么办?根据目前已经掌握的资料,可以采取以下措施:

单引物耐热链替代扩增HBV X区方法的初步探讨

目的 :以HBVX区为模型 ,对单引物耐热链替代扩增 (SDA)反应的影响因素进行初步探讨。SDA是一种等温的体外核酸扩增技术 ,其主要依据限制性内切酶识别并切割半硫酸磷酸化DNA未修饰链 (即打缺口 )以及 5′→ 3′外切酶缺陷的DNA聚合酶在切口处聚合延伸并替代下游链的特性 ,这种“打缺口—聚合 替代”不断循环往复 ,达到靶序列的扩增。方法 :以HBV为模型 ,设计一条典型的SDA引物 (含 5′悬端、BsoBⅠ酶切位点及 3′端靶序列互补区 ) ,采用耐热BsoBⅠ BstDNA聚合酶 5 3℃恒温反应体系 ,微孔板杂交检测最终产物。结果与结论 :对SDA反应的重要的影响因素进行了初步探讨 。