原位核酸分子杂交技术检测宫颈鳞状上皮病变HPV感染

目的:观察宫颈鳞状上皮病变过程中HPV6/11、HPV16/18的表达,探讨其测定的临床意义。方法:选择病理诊断为宫颈慢性炎症50例、鳞状上皮乳头状瘤样增生30例、尖锐湿疣30例、上皮内瘤变89例、鳞癌50例共249例石蜡包埋标本,应用原位核酸分子杂交技术对其进行HPV6/11,HPV16/18检测。结果:慢性炎症组HPV6/11阳性表达4%,HPV16/18阳性表达0%;乳头状瘤样增生组HPV6/11阳性表达10%,HPV16/18阳性表达3.3%;尖锐湿疣组HPV6/11阳性表达93.3%,HPV16/18阳性表达23.3%;CIN组中Ⅰ级HPV6/11阳性表达48.9%,HPV16/18阳性表达42.2%;Ⅱ级HPV6/11阳性表达39.1%,HPV16/18阳性表达69.6%;Ⅲ级HPV6/11阳性表达9.5%,HPV16/18阳性表达66.7%;鳞癌组HPV6/11阳性表达6%,HPV16/18阳性表达82%。结论:应用原位核酸分子杂交技术检测宫颈鳞状上皮病变细胞的HPV6/11、HPV16/18,为临床早期诊断、鉴别诊断及评估预后提供可靠的理论依据。

电镜核酸分子原位杂交技术的探索

显微水平的核酸分子原位杂交技术已广泛地应用于基因在染色体上的定位,发育过程中的基因表达等方面,但电镜水平的原位杂交技术却仍在探索之中,主要因为剧烈的核酸分子杂交条件与样品精细结构的保存之间存在着矛盾,为此,我们分别在分级抽提的整装细胞,L-K_4包埋或Epon812包埋的超薄切片样品以及DGD包埋-去包埋样品中对进行电镜分子原位杂交研究的可行性和杂交条件进行了一些探索,目前在整装细胞样品中已取得初步的结果。

核酸杂交技术及其在分子病理学研究中的应用

核酸杂交技术最初是在1961年建立的。Hall等利用核酸能变性与复性的原理使核酸探针与靶序列在液相中杂交,然后通过平衡密度梯度离心分离到杂交体建立了核酸杂交技术。随后,于1962年Bautz等将糖苷化DNA吸附在硝化纤维素柱上,Bolton等将变性的单链DNA固定在琼脂中。

化学发光技术在核酸分子杂交中的应用

化学发光的发现历史悠久,但把化学发光技术与核酸分子杂交结合起来,建立化学发光核酸分子杂交技术却是近几年的事。1983年Heller和Schneider首先将化学发光技术引入了核酸的分析,这是继建立发光免疫技术之后,化学发光技术应用的又一个新的领域。目前,有关这方面的报道还不多,本文试就化学发光核酸分子杂交技术及有关的应用作一简要的介绍。

核酸分子杂交技术及其应用

核酸分子杂交是利用已知顺序的DNA作为控针来鉴定DNA或RNA的特殊顺序的技术。由于其特异性强,灵敏度高、定位准确等优点,目前已被广泛应用于分子生物学、生理学、遗传学、病毒学等基础学科的研究,现就其基本原理,主要步骤。

白细胞核酸分子原位杂交技术的建立

近年来,国内外不少学者利用斑点杂交和墨迹杂交法证实白细胞内存在HBV-DNA,用原位杂交技术研究白细胞内HBV-DNA存在状态尚未见报道。我们近二年来开展了此项研究,获得了初步结果。现报告如下: 材料慢性HBV感染经斑点杂交证实白细胞HBV-DNA阳性的患者。

肺炎支原体核酸分子杂交检测技术的应用评价

目的探讨肺炎支原体核酸分子杂交技术在呼吸道感染儿童鼻咽分泌物中的应用价值。方法对106例呼吸道感染儿童鼻咽分泌物进行肺炎支原体核酸分子杂交技术检测。结果106例标本，检出肺炎支原体19例，阳性率为17．92％。结论肺炎支原体核酸分子杂交检测技术为一种快速、简捷、敏感性高、特异性强的检验技术。

实时荧光定量PCR技术快速检测麻疹病毒核酸的研究

目的 建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RT PCR方法 ,对麻疹病毒的核酸进行检测。方法 对设计的引物与探针进行了筛选与条件优化 ,克服了常规RT PCR定性检测的不足。结果 具有对麻疹病毒检测的高度特异性与准确性 ,检测的敏感度可达 0 1TCID50 ,从病毒核酸提取至检测完成仅需 3个多小时 ,操作简便 ,而且大大减少了常规PCR扩增产物的污染机会。结论 采用该方法对麻疹病毒与相关的临床样本进行了检测 ,均获得了满意的结果 ,为麻疹病毒的分子生物学检测 。

分子杂交技术用于喉乳头状瘤病因学的研究及其意义

核酸分子杂交（nucleic acid molecuiar hybridization，NAMH)是分子生物学正在迅速发展的新技术，用于病毒基因与肿瘤形成的某些机制的研究已取得重要进展，人乳头瘤病毒（HPV）是近年来颇受重视的一类致瘤病毒，研究表明，HPV在内皮细胞瘤和鳞状细胞瘤病因学上起到重要作用，与泌尿生殖系，

导流杂交基因芯片技术检测人乳头瘤病毒结果分析

目的分析妇产科就诊妇女人乳头瘤病毒(HPV)感染、基因型和年龄特征的流行病学情况。方法对2008年1月—2012年12月妇产科就诊的6230例妇女进行下生殖道HPV感染分型检测,采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术(HybriMax)检测21种亚型,其中高危型(HR-HPV)15种,低危型(LR-HPV)6种。结果在6230例标本中,阳性标本1664(26.71%),单型感染1213例(19.47%),多型感染451例(7.24%)。感染率占前5位的亚型分别是:HPV16型335例(5.38%)、HPV52型334例(5.36%)、HPV58型243例(3.90%)、HPV6型164例(2.63%)、HPV53型152例(2.44%)。高危型HPV16、HPV52和HPV58及低危型HPV8304和HPV11检出率逐年下降;所有患者中≤20岁年龄段HPV检出率最高为52.04%。结论应用HybriMax技术检测HPV的检出率为26.71%,主要为HPV16、HPV52、HPV58、HPV6和HPV53,人群感染高峰在≤20岁年龄段。

超声快速组织处理技术在鼻咽癌病理诊断中的应用

目的探讨超声快速组织处理技术应用于鼻咽癌诊断中的可行性。方法收集2020年1月至2021年5月湖北省中西医结合医院病理科接收的鼻咽肿物标本39例。每例标本取材2块,同时进行超声快速石蜡处理(超声处理组)和常规石蜡处理(常规处理组)。分别对石蜡切片进行HE染色、免疫组织化学染色和显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色。在显微镜下观察2组切片,比较2种不同组织脱水处理方式对诊断结果的影响。结果39例鼻咽肿物标本同时进行超声快速组织处理和常规组织处理,其中诊断为鼻咽癌的均为9例、良性均为30例。显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色阳性者均为7例,且均出现在鼻咽癌患者中。超声处理组HE染色效果优于常规处理组,镜下可见切片透明度好,背景干净,核质对比清晰,色彩明艳,且细胞形态更加饱满,结构完整,无收缩。超声处理组和常规处理组免疫组织化学染色结果相似,镜下均可见阳性细胞强度好,定位准确,无非特异性着色,背景干净。超声处理组和常规处理组显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色结果相似,镜下均可见细胞核呈棕褐色,结果定位准确。结论对鼻咽肿物标本进行超声快速组织处理不会影响染色结果,且能有效缩短出片时间,提高病理诊断效率,可以应用于鼻咽癌的病理诊断。

弓形虫病分子诊断技术研究进展

弓形虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,严重危害人类健康并给世界各国的畜牧业造成巨大的经济损失,但弓形虫病缺乏特异性临床症状,给该病的诊断带来很大困难。分子诊断技术的迅速发展为弓形虫病的诊断提供了快速、灵敏、特异及稳定的检测方法。笔者从核酸分子杂交技术、聚合酶链反应(PCR)、单克隆抗体(McAb)技术及生物芯片技术几个方面介绍了用于诊断弓形虫病的分子诊断技术的研究进展。

分子生物学技术在马铃薯病毒检测中的应用

直接应用于马铃薯病毒检测的分子生物学技术主要有 :RT PCR检测技术、指示分子 NASBA检测技术、核酸杂交检测技术三大类 ,以RT PCR技术应用最为广泛。另外病毒外壳蛋白基因的克隆与表达、DNA介导的抗体制备及病毒单链抗体片段筛选等技术在马铃薯病毒免疫学检测技术中也有成功的应用 ,并解决了传统免疫学方法难以解决的抗原制备问题 ,使后者更具应用前景。

微生物分子生态技术:16S rRNA/DNA方法

综述了以 1 6SrRNA/DNA为基础的分子生物学技术在环境微生物种群分析中的应用 ,目的是使相关的科研人员能够对 1 6SrRNA/DNA技术有一个比较完整的了解 ,并可以开展初步的实验工作。主要内容包括 :DNA指纹技术、 1 6SrDNA文库的建立、DNA测序及微生物分类鉴定 (即系统发育树分析 )、基因探针设计和测试。

分子生物学技术在水产养殖动物细菌性病原检测中的应用

回顾了核酸杂交、基因芯片、PCR等分子生物学技术在水产养殖动物细菌性病原检测中的应用,并对水产养殖细菌性疾病诊断技术的发展方向作了展望。

马铃薯病毒病分子检测技术研究进展

快速、准确地定性或定量检测马铃薯植株中病毒、类病毒的种类和数量是有效地控制马铃薯病毒病害的需要 ,也是马铃薯种薯品质的重要保证。

核酸检测技术在水产养殖病原诊断中的应用

目前核酸检测技术在水产养殖疾病诊断中已广泛应用。现就国内外研究发展动向,对分子杂交技术、PCR技术、PCR分子杂交联用技术、PCR免疫学联用技术、16SrRNA技术和限制性酶切技术等方法进行综述,详细阐明了各个技术的原理、特点及应用。病原体遗传背景的研究状况为决定是否应用这些方法的关键。

分子生物学技术在肠道微生态研究中的应用

肠道菌群对动物的营养、生理、免疫等方面起重要作用,其组成、结构、稳定性及与生理功能的关系已成为探讨食物如何通过肠道微生物影响人体健康的关键。文章旨在总结与分析现代分子生物学技术如RFLP、SSCP、PCR-DGGE/TGGE、ER IC-PCR、核酸分子杂交和基因芯片技术在肠道微生态研究中的优缺点,为深入研究肠道微生态提供了快速、准确、可行的方法。