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基于核酸切割酶与脱氧核酶的荧光循环放大系统检测铅(Ⅱ) 被引量:10
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作者 赵永席 齐林 +2 位作者 杨卫军 魏帅 王亚玲 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1236-1240,共5页
利用核酸切割酶(Nicking endonuclease)识别特定DNA双链并切割其中某条单链的性质,构建了基于8-17E脱氧核酶(8-17E DNAzyme)的Pb2+荧光循环放大检测方法。Pb2+可激活8-17E脱氧核酶水解RNA底物,产生并释放出的单链与分子信标探针(Molecul... 利用核酸切割酶(Nicking endonuclease)识别特定DNA双链并切割其中某条单链的性质,构建了基于8-17E脱氧核酶(8-17E DNAzyme)的Pb2+荧光循环放大检测方法。Pb2+可激活8-17E脱氧核酶水解RNA底物,产生并释放出的单链与分子信标探针(Molecular beacon,MB)杂交,导致其茎环结构被破坏,荧光信号恢复;同时形成含有核酸切割酶Nt.BbvCΙ识别位点的双链区域。在核酸切割酶Nt.BbvCΙ的作用下,分子信标探针被切割释放,游离出来的单链可与其它分子信标重新杂交,从而触发下一轮酶切,引起荧光检测信号的循环放大。本方法避免了8-17E脱氧核酶与底物链的修饰,最低可以检测出水溶液中1.0×10-10mol/L Pb2+,并在2倍浓度的Zn2+,以及5倍浓度的其它干扰金属离子存在的情况下对Pb2+显示出良好的选择性。本方法对环境水样中Pb2+的标准加样回收率为96.1%~108.0%。 展开更多
关键词 铅? 脱氧核酶 核酸切割 荧光循环放大检测
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核酸切割酶在病原微生物检测中的研究进展
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作者 王昕 朱龙佼 +3 位作者 许文涛 翟晨 王书雅 黄蔚霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期182-192,共11页
DNA是遗传信息的重要载体,其空间构象折叠性质使其具有很多的功能。利用核酸切割酶(cleaving DNAzyme)识别特定单链DNA分子并能够切割其中某条单链的性质来构建传感器,将特异性识别过程转化为凝胶电泳表征、释放荧光、比色现象的信号输... DNA是遗传信息的重要载体,其空间构象折叠性质使其具有很多的功能。利用核酸切割酶(cleaving DNAzyme)识别特定单链DNA分子并能够切割其中某条单链的性质来构建传感器,将特异性识别过程转化为凝胶电泳表征、释放荧光、比色现象的信号输出,同时能很好的和扩增反应结合来实现信号放大。核酸切割酶通过体外筛选技术获得,可以与靶物质(小分子、蛋白质,甚至整个细胞)特异性结合。由于具有制备简单,易于修饰和良好稳定性等优点,核酸切割酶被用于构建生物传感器以检测病原微生物,已应用到现场检测甚至医疗中的体内检测,结合已经成熟的检测设备血糖仪、横流层析试纸条带进行微生物检测,并广泛地应用到生物传感、食品安全、医疗在内的重要领域中。综述了近年来核酸切割酶在微生物检测中的应用,讨论了核酸切割酶在微生物检测中的切割机理和产物、靶标以及表征手段,探索核酸切割酶在微生物实际检测中的意义。对该技术的发展前景及其面临的问题进行展望,以期核酸切割酶在微生物检测领域能够更好的发展。 展开更多
关键词 核酸切割 微生物 生物传感 信号放大 检测
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人工核酸切割试剂研究进展 被引量:6
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作者 万荣 赵刚 +2 位作者 陈晶 麻远 赵玉芬 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第8期785-798,共14页
人工核酸切割试剂尤其是定点切割试剂在生物化学和分子生物学领域中有着重要的应用价值,近20年来有关的研究一直非常活跃.目前人工核酸切割试剂的切割机理可以分为自由基机理、磷酸酯水解机理和消去机理3大类综述了这3类切割试剂... 人工核酸切割试剂尤其是定点切割试剂在生物化学和分子生物学领域中有着重要的应用价值,近20年来有关的研究一直非常活跃.目前人工核酸切割试剂的切割机理可以分为自由基机理、磷酸酯水解机理和消去机理3大类综述了这3类切割试剂以及定点切割试剂的研究现状。 展开更多
关键词 人工核酸切割试剂 定点切割试剂 消去机理
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大环配合物在核酸切割中的应用 被引量:4
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作者 李凤莲 石硕 姚天明 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期731-738,共8页
核酸切割试剂的研究是化学和分子生物学中最为活跃的前沿领域之一。研究核酸切割试剂,不仅是因为对核酸酶催化机理进行深入了解之需,同时还因为人工核酸酶在基因治疗中有着诱人的前景。大环配合物的合成、结构及其对核酸的切割作用已有... 核酸切割试剂的研究是化学和分子生物学中最为活跃的前沿领域之一。研究核酸切割试剂,不仅是因为对核酸酶催化机理进行深入了解之需,同时还因为人工核酸酶在基因治疗中有着诱人的前景。大环配合物的合成、结构及其对核酸的切割作用已有广泛的文献报道。本文综述了作为重要的核酸切割试剂的大环多胺配合物和氮杂冠醚配合物对核酸的切割作用及其规律性,并展望了今后的发展与应用方向。 展开更多
关键词 大环配合物 多胺 氮杂冠醚 核酸切割
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丝组二肽对DNA的切割作用的研究 被引量:8
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作者 万荣 王宁 赵玉芬 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期598-600,共3页
Linear and supercoiled DNA were cleaved by HPLC purified seryl histidine dipeptide(SH). It was found that the DNA fragments produced by the reaction of SH and DNA could be ligated together by T 4 DNA ligase. This resu... Linear and supercoiled DNA were cleaved by HPLC purified seryl histidine dipeptide(SH). It was found that the DNA fragments produced by the reaction of SH and DNA could be ligated together by T 4 DNA ligase. This result implied that the SH was the first example of the ion free artificial DNA cleavage agent that could split DNA by hydrolysis mechanism. 展开更多
关键词 丝组二肽 DNA 切割 水解机理 人工核酸切割试剂
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丝组二肽所含基团在其切割DNA反应中的作用 被引量:5
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作者 万荣 王宁 +1 位作者 赵刚 赵玉芬 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1864-1866,共3页
The effects of the amino, hydroxyl, imidazole and carboxyl groups of Ser His on DNA cleavage reaction were studied. It was found that the amino and hydroxyl groups were essential for the DNA cleavage activity of Ser H... The effects of the amino, hydroxyl, imidazole and carboxyl groups of Ser His on DNA cleavage reaction were studied. It was found that the amino and hydroxyl groups were essential for the DNA cleavage activity of Ser His, and that anyone of them blocked would result into the loss of cleavage activity. The carboxyl group was not the necessary group. The presence of the imidazole group would enhance the cleavage activity. However, the histidyl serine dipeptide, as the formula isomer of Ser His with the inverse peptide sequence, could not cleave DNA at all. Based on the above experimental results, a presumed cleavage mechanism of Ser His on DNA was proposed. [WT5HZ] 展开更多
关键词 丝组二肽 DNA 切割 切割机理 人工核酸切割试剂
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多核配合物与核酸作用的研究 被引量:11
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作者 吴建中 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期697-709,共13页
综述了近年来各种多核金属配合物与核酸作用的研究,作为抗肿瘤药物、核酸探针、核酸切割剂等的应用概况。讨论了结构与作用机理之间的关系。
关键词 多核配合物 核酸 抗肿瘤药物 探针 核酸切割
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丝组二肽--现代蛋白酶分子进化过程中的原始雏形
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作者 刘艳 林铭堃 +4 位作者 陈培燕 留筱厦 杜海莲 麻远 赵玉芬 《中国科学:化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期579-586,共8页
系统阐述了我们实验室近十五年来对丝组二肽的生物活性的研究.丝组二肽是目前报道的具有多种切割活性的最小活性肽,它不仅能够切割DNA,而且可以切割蛋白质及羧酸酯.丝组二肽是迷你的磷酸酯酶和蛋白水解酶,是现代蛋白酶分子进化过程中的... 系统阐述了我们实验室近十五年来对丝组二肽的生物活性的研究.丝组二肽是目前报道的具有多种切割活性的最小活性肽,它不仅能够切割DNA,而且可以切割蛋白质及羧酸酯.丝组二肽是迷你的磷酸酯酶和蛋白水解酶,是现代蛋白酶分子进化过程中的原始雏形. 展开更多
关键词 丝组二肽 核酸切割 蛋白切割 蛋白酶的分子进化
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anti-CRISPR的起源、发展和应用
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作者 裴晨辰 李英俊 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期3353-3367,共15页
细菌和古菌等微生物与病毒(噬菌体)之间的生存之战是一场"军备竞赛"。细菌和古菌已经进化出多种先天和适应性的免疫系统来抵御噬菌体的入侵。噬菌体则利用不同的对抗策略来躲避这些噬菌体防御机制。CRISPR-Cas(Clustered Regu... 细菌和古菌等微生物与病毒(噬菌体)之间的生存之战是一场"军备竞赛"。细菌和古菌已经进化出多种先天和适应性的免疫系统来抵御噬菌体的入侵。噬菌体则利用不同的对抗策略来躲避这些噬菌体防御机制。CRISPR-Cas(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats-CRISPR-Associated)系统就是细菌和古菌广泛编码的一种抵御噬菌体等外源遗传元件的获得性免疫系统,与此同时,噬菌体也进化出特异性的anti-CRISPR来抵抗CRISPR-Cas系统的免疫。本文系统综述了anti-CRISPR的发现过程、分类和作用机制,并展望了其潜在的应用。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas anti-CRISPRs 获得性免疫 核酸切割
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