猴空泡病毒40核酸序列检测法的优化研究

目的对通常使用的猴空泡病毒40（Simian vacuolating virus40，SV40）核酸序列检测法进行优化，寻找敏感性高、特异性强、适用面广的SV40核酸序列检测引物。方法以21个SV40毒株完全基因组为基础数据，用Primer Premier5．00软件重新设计两对SV40 DNA检测引物，用Oligo 6．71软件和DNAMAN 6．0．40软件对引物参数进行分析，将分析结果与通常使用的检测引物进行比较。用不同稀释度SV40核酸序列作模板，比较4对引物检测的敏感性。分别用无菌水、Vero细胞DNA、SV40DNA作模板检测4对引物的特异性。结果对于21个SV40病毒株，优化引物对VP1和T的序列是保守的；对于接受号为J02400、NC_001669、AF316139和AF316141的4个病毒株，通常使用的引物对GCVP1和GCT的序列是保守的；用同一稀释度的SV40DNA作模板，引物对VP1和T的扩增效率明显高于引物对GCVP1和GCT；在特异性检测比较中，引物对VP1和T没有出现非特异性扩增条带，引物对GCVP1和GCT在100bp处出现非特异性扩增条带。结论优化的SV40核酸序列检测法具有敏感性高、特异性强、检测面广、引物及其PCR产物序列保守等特点。

基因芯片在海洋微藻研究中的应用前景

基因芯片通常指DNA芯片,其基本原理是将大量的寡核苷酸分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号从而获取结果。多年来,我国在医药疾病研究、微生物检测等领域已成功研制出多种基因芯片,取得了骄人的成绩,但在对海洋微藻研究的应用上成果较少。现着力从实际应用的角度阐述基因芯片及其在海洋微藻研究中的应用。

Detection of ＂ Candidatus Phytoplasma asteris＂ in Brussels Sprout and Its Possible Association with Flower Bud Failure in Poland

Severe growth abnormalities including shoot stunting, leaf blade reduction and flower bud failure of Brussels sprout were observed in Poland. The presence of phytoplasma in diseased as well as in healthy looking plants, was demonstrated by nested polymerase chain reaction assay employing phytoplasma universal rRNA primer pairs-P1/P7 followed by R16F2n/R16R2. Products of PCR primed by R 16F2n/R 16R2 primer pair from naturally infected Brussels sprouts were sequenced. Comparison of the obtained 16S rDNAs revealed high nucleotide sequence identity between analyzed phytoplasma isolates （99.8%-100%）. They were also nearly identical with the sequences of other phytoplasmas isolates from sub-group 16SrI-B, and they were classified as members of ＂Candidatus Phytoplasma asteris＂.

非结核分枝杆菌实验室诊断研究进展

近年来,我国非结核分枝杆菌的分离率逐渐增加,且多项文献表明在全球范围内非结核分枝杆菌感染率出现明显地区差异性与种型差异性,国内外研究人员对非结核分枝杆菌实验室诊断的研究不断获得突破性进展。我国作为非结核分枝杆菌检出率较高的发展中国家,始终关注非结核分枝杆菌诊断的研究方向与较为有效的检出方法。本文对于非结核分枝杆菌在国内外的现状与国内外诊断非结核分枝杆菌的实验室研究进展作出如下综述。