基于恒温无蛋白酶核酸扩增反应的生物传感器研究进展

恒温无蛋白酶的核酸扩增反应具有操作简单、条件温和、反应效率高,以及不需要温度循环和蛋白酶参与的特点,可以实现对生物分子的高灵敏检测,已经被广泛应用于生物分析和生物医学应用等领域.本文总结了近年来基于恒温无蛋白酶的核酸扩增反应的生物传感器在检测领域中的发展和应用,并对当前存在的问题进行了讨论.

不同检测方法对念珠菌性阴道炎的诊断效能比较

目的:比较乳胶凝集法、显微镜镜检法、荧光聚合酶链反应(PCR)核酸扩增法对念珠菌性阴道炎的诊断效能。方法:纳入2020年7月-2022年7月郑州市妇幼保健院130疑似念珠菌性阴道炎患者,并行凝集法、镜检法、荧光PCR核酸扩增法检验。比较上述方法对念珠菌性阴道炎的诊断效能。结果:130例疑似患者中念珠菌性阴道炎101例,占比77.69%。经Kappa一致性度量,乳胶凝集法检查念珠菌性阴道炎结果与真菌培养结果的一致性一般(Kappa=0.589);显微镜镜检法检查一致性一般(Kappa=0.589);荧光PCR核酸扩增法检查一致性较好(Kappa=0.888)。荧光PCR核酸扩增法检测的准确度、灵敏度高于前二者(P<0.05)。结论:与乳胶凝集法、显微镜镜检法比较,荧光PCR核酸扩增法检查念珠菌性阴道炎的准确度、灵敏度高。

3种方法检测286例生殖道沙眼衣原体的分析

目的分析比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、核酸扩增聚合酶链反应(PCR)荧光法和免疫层析法在检测泌尿生殖系统沙眼衣原体(CT)感染中的应用效果。方法分别采用ELISA、核酸扩增PCR荧光法和免疫层析法检测泌尿生殖系统的CT抗原,同时用细胞培养法作为"金标准"。结果共检286例标本,ELISA、核酸扩增PCR荧光法和免疫层析法的特异性和灵敏度分别为99.1%和95.5%;98.2%和97.0%;99.5%和73.6%。结论 ELISA法与核酸扩增PCR荧光法具有较一致灵敏度和特异性,均可为临床治疗和监测性病提供可靠的依据;免疫层析法虽然操作简便,但灵敏度较差。

Mutations of mitochondrion DNA in mouse tumors

Objective： To ascertain the variations of mitochondrion DNA （mtDNA） in mouse tumors and to inquire into the relationship between mutations of mtDNA and carcinogenesis Methods： The variations of D-loop, ND3 and tRNA^Met＋Glu＋Ile gene fragments of mtDNA from six tumor cell lines of mice were analyzed by PCR technology with restriction fragment length polymorphism analysis （polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP） and single strand conformation polymorphism analysis （SSCP-PCR） method. Results： ND3 and tRNA^Met＋Glu＋Ile gene fragments ofmtDNA from the tumors showed no variation in 27 endonuclease sites; D-loop ofmtDNA from Hca-F had an additional endonuclease sites of Hinf I in contrast to that of the inbred mouse. Deeply analyzed by PCR-SSCP, the D-loop ofmtDNA was found to possess mutations in 4 of 6 tumors. Conclusion： D-loop is the hot spot of tumor mtDNA mutation which can act as contributors to the carcinogenic

口腔三用气枪煮沸消毒的实验研究

目的评价煮沸消毒法对口腔科三用气枪的消毒效果。方法用乙型肝炎病毒及结核分枝杆菌对三用气枪进行污染,用煮沸方法对污染气枪消毒,用聚合酶链反应(PCR)荧光定量核酸扩增技术进行乙型肝炎病毒DNA及结核分枝杆菌的检测,评价消毒效果。结果对气枪煮沸消毒10 min,乙型肝炎病毒及结核分枝杆菌均无检出,消毒合格率均达100.0%,与消毒25、mim比较差异有统计学意义(P<0.01);消毒10 min和15 min对乙型肝炎病毒及结核分枝杆菌的灭菌效果差异无统计学意义;煮沸消毒10 min,生理盐水和血清中结核分枝杆菌与HBV DNA的阳性检出率均为0。结论煮沸消毒可达到与2%戊二醛浸泡消毒、高压蒸汽灭菌同样可靠的消毒效果,对口腔科三用气枪消毒,方法简单、有效。