核酸电泳图像的拍摄方法

本文介绍了核酸电泳图像的拍摄方法及其主要步骤，并谈及了拍摄中一些经验技巧和应注意事项。

用ELISA法和核酸电泳法检测牛轮状病毒

本文用ELISA、核酸电泳法检测腹泻病牛粪便标本。21例中检出轮状病毒抗原有4例为阳性,占19.05%。ELISA法与核酸电泳法结果相符,前者被认为是最值得推广的方法。本研究在江西省首次证明了引起牛腹泻的牛轮状病毒的存在,为防治牛腹泻病采取有效手段提供了病原学依据。

鸡腹泻轮状病毒核酸电泳型及抗原性的研究

本实验利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、琼脂扩散试验(ID)、直接电镜(EM)及免疫电镜(IEM)等方法,在国内首次从腹泻雏鸡粪便及肠内容物中检出禽轮状病毒(AVRV)和非典型轮状病毒(aAVRV)。电镜下发现表面光滑,直径为70nm的完整病毒粒子和表面粗糙、直径约53.5nm的不完整病毒粒子,后者在aAVRV中居多。应用PAGE表明,病毒核酸排列呈现多型性,aAVRV核酸排列为5、2、2、2,AVRV核酸排列不规则。ELISA证实,AVRV与犊牛腹泻轮状病毒(NCDV)和婴儿腹泻轮状病毒有共同抗原性,同属A组;aAVRV与之无共同抗原,结合PAGE结果初步确定为D组。并在MA—104细胞上分离到3株AVRV。

小儿轮状病毒腹泻暴发流行核酸电泳图型特点

国内外对轮状病毒引起腹泻流行的核酸电泳图型已进行不少的调查研究,其结果均呈现多形性电泳图型。可是轮状病毒在局部地区暴发流行的核酸电泳图型有何特点,至今尚未见报道。我省大田县建设乡1982年、1983年及1989年曾发生3次轮状病毒暴发流行;

武汉地区致人腹泻轮状病毒的核酸电泳和血清分型研究

提要本文报告对武汉地区540例腹泻病人的粪便标本进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,并对电泳阳性标本用酶标法检测血清型。结果表明,电泳阳性数59例,其中,电泳短型22型,长型37例,并获得6种电泳异型图谱。病原血清分型结果为Ⅰ型25例(42.37％),Ⅱ型18例(30.51％),Ⅲ型4例(6,78％),Ⅳ型12例(20.34％)。短型与血清Ⅱ型符合率为81.8％,长型与其它血清型符合率为90.2％。

我省首次发现两株C组轮状病毒核酸电泳图型

我国陈广牧等于1988年首先报道发现C组轮状病毒。1989年1～5月间我们从腹泻监测点收集113份5岁以下儿童的腹泻标本,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测轮状病毒,共检出轮状病毒12份,阳性率为10.61％,其中A组10株(8.84％),C组2株(1.77％)。在10株A组轮状病毒中,第Ⅰ亚组4株;第Ⅱ亚组6株。

核酸脉冲电泳场技术在霍乱分子流行病学调查中的应用

目的 :对深圳市某一霍乱疫点进行流行病学调查和传染来源追踪。方法 :采用病原学方法和核酸脉冲电泳场技术 ,分析霍乱阳性菌株的酶切图谱 ,并比较图谱的差异。结果 : 同一疫点的 5株霍乱阳性菌株均表现为 DNA片段大小一致和数量相同的电脉图谱。结论 :5株菌株为同一克隆的流行株。核酸脉冲电泳场分析技术适用于分析菌株的同源性和传染来源追踪。

核酸蛋白电泳图谱的拍摄技术

文章就电泳图谱的种类、胶片的选择、滤色镜的使用，怎样选择正确曝光时间以及相机镜头、光源设备的配置、使用做了介绍，并针对用考马亮兰染色的电泳图谱存在着反差较低的问题，叙述了从电泳图谱拍摄的开始到最后的冲洗胶片以及放大相片的全过程要始终围绕提高反差这一关键问题的方法。

PCR模拟软件在高中生物学实验教学中的应用

Snap Gene具有功能强大、便于操作、可视化程度高等特点,满足了高中生物学实验教学对PCR模拟软件的需求。运用Snap Gene模拟分子克隆实验、核酸电泳以及试题中的情境,清晰地阐述了Snap Gene在高中生物学实验教学中的作用和价值。

应用聚合酶链反应检测伪狂犬病病毒DNA

选用标准的伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）闽Ａ株，经ＢＨＫ２１细胞培养，提取ＰＲＶＤＮＡ作为摸板；合成１对２０－ｍｅｒ寡核苷酸作为引物；选择扩增序列由２６２个碱基对组成的位于编码多糖蛋白ｇｐ５０基因，用耐热的Ｔａｑ－ＤＮＡ聚合酶经３０个循环以后，扩增的产物直接用凝胶电泳检测，并用标准分子量确定。结果表明：以ＰＲＶＤＮＡ作为模板进行扩增，有扩增产物生成，以同科的疱疹病毒ＤＮＡ作为模板在相同的条件下进行ＰＣＲ扩增，无扩增产物生成，说明ＰＲＶＰＣＲ扩增是特异的。ＰＣＲ技术检测ＰＲＶＤＮＡ敏感度为２８．５ｐｇ．ＰＲＶＰＣＲ技术的建立，为伪狂犬病诊断和流行病学研究提供了更敏感、可靠的手段。

不同保存时间和温度对狼山鸡全血基因组DNA的影响

保存好各个世代家禽血样和基因组DNA对于研究家禽各世代变化规律以及更好地监测家禽保种效果具有重要意义。试验分别抽取-20℃保存0.5年、1年、3年、5年、7年、8年和10年的狼山鸡全血基因组DNA样品,以及-70℃保存8年的狼山鸡DNA样品,采用核酸电泳和PCR检测,比较不同年份和不同温度保存DNA的效果。结果表明:DNA样品随着-20℃保存时间的延长,DNA越容易降解。-20℃保存10年的狼山鸡DNA降解率很高,条带模糊;-20℃保存8年和7年的DNA,降解也较严重;-20℃保存5年的狼山鸡DNA总体完好,条带相对清晰;-20℃保存3年、1年和0.5年的狼山鸡DNA条带清晰鲜明。-70℃保存8年的DNA条带清晰,无降解现象。降解的DNA浓度普遍显著低于不降解的DNA。DNA纯度均在1.8~1.9之间。降解和不降解的DNA用鸡内参引物PCR检测,均出现条带,说明DNA的部分降解不影响一般的PCR检测试验。本研究结果表明:-20℃保存5年以内DNA保存效果尚可,如果长期(5年以上)保存DNA,需-70℃超低温保存。

基于PCR技术快速制备DNA Marker的研究

DNA Marker是一组分子量大小已知的DNA片段混合物,用于指示核酸电泳中未知样品的分子量大小。基于PCR方法,设计了不同的引物对,以质粒p32a-CP为模板,分别扩增出大小为2kb、1kb、750bp、500bp、250bp、100bp的DNA片段,初次制备出DNA Marker,并参照商品化的DM2000按一定的比例混合各片段进行优化。经1%琼脂糖凝胶电泳检测,所制备的DNA Marker(命名为DL2000)质量稳定、条带清晰、分布均匀,在分子生物学试验中可用于标记DNA大小。

四川地区小儿轮状病毒腹泻病原流行分析

目的：为了解小儿轮状病毒腹泻病原流行情况。方法：采集四川地区９４９例３岁以下疑诊为冬季腹泻患儿全大便，用ＥＬＩＳＡ法、直接电镜和核酸电泳进行轮状病毒抗原和形态的检测。结果：轮状病毒抗原阳性为７１．１％；直接电镜阳性为８０．０％；核酸电泳阳性为８７．５％。结论：小儿轮状病毒感染季节为每年１１月～次年２月，流行高峰为１２月。１岁以下患儿占７５．６％。性别、男女比例为２∶１。

西藏拉萨成人腹泻流行的病原学研究

1990年9月-1991年3月我们采用SDS-PAGE和EM方法,从西藏拉萨各医院门诊收集的373例份成人腹泻粪便标本中,检出21例份核酸序列呈4211111特征的电泳图型其11条基因带特点为:第Ⅰ区3,4带。

CCD检测和图像处理在分子生物学中的应用

本文论述了用ＣＣＤ图像传感器实现核酸电泳凝胶图像的实时检测及图像处理与分析的系统。该系统不仅可以同时检出核酸的分子量和核酸的浓度等往往需要用不同的方法和多种仪器分析和计算才能得到的参数，还提高了测量的精度和实验工作效率，使传统凝胶图像的记录与分析智能化。

西藏部队HRV健康携带状况的检测(摘要)

人轮状病毒(HRV)健康携带者是引起急性腹泻的重要病毒传染源。了解正常人群携带状态,有助于采用有效的防治措施,为此我们于1990年10—12月和1992年1—4月,采用ELISA—HRV盒和SDS—PAGE方法,在其流行季节以部队人群为基础,研究了HRV感染,携带状况。

婴幼儿轮状病毒腹泻

轮状病毒是婴幼儿胃肠炎的重要病原。每年因轮状病毒感染性腹泻而死亡的儿童数以十万计。因此,许多国家,尤其是发展中国家把它列为重点防治的疾病。

肠出血性大肠埃希菌遗传基因分型方法比较

目的对肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7的遗传基因型别进行不同分子分型方法的对比研究,以对EHEC的分子流行病学追踪提供更为行之有效的方法。方法采用核酸脉冲场凝胶电泳（PFGE）与多位点串联重复序列（VNTR）分析（MLVA）两种方法对16株EHEC O157：H7进行分析。结果在PFGE的研究中,依据经XbaI及确认BlnI酶切后,具有相同电泳图谱的菌株被定义为PFGE同一群落的菌株,将16株菌株分成6个型别。MLVA通过对9个位点的串联重复序列的比较研究,16株菌株在3个位点上没有显示出区别,在另外6个位点上等位基因的数目为2~7种,16株细菌被分为14个MLVA的型别。流行病学资料表明,这些菌株为散发病例分离株,分离地域上基本没有关联,因此,MLVA的结果与流行病学信息高度相关。结论MLVA能够区分无法区分的PFGE型别,且可以区分来自于不同地理区域的散发菌株,具有区分肠出血性大肠埃希菌O157：H7的潜力。