核酸联检反应性鉴别非反应性献血者中隐匿性乙肝感染状况分析

研究联检反应性鉴别非反应性献血者(Non⁃discriminating reactive donation,NDRD)中隐匿性乙肝感染(Occult hepatitis⁃B virus infection,OBI)情况,对既往在绍兴地区献血的NDRD进行追踪,首先使用化学发光试验检测HBsAg,使用核酸检测技术检测HBV DNA,首次追踪检测增加化学发光试验检测HBsAb,同时选取HBsAg阴性且HBV DNA也阴性合格献血者标本76份和确认为OBI的献血者标本52份作为对照检测HBsAb,经追踪检测HBsAg阴性且HBV DNA阳性的献血者判定为OBI,对不同人群血清中HBsAb阳性比例进行统计分析,对不同性别、不同年龄、不同学历、不同血清HBsAb浓度及不同追踪检测次数确定为OBI的情况进行统计分析。本次研究共追踪检测66人,其中经确认为OBI的12人,NDRD中OBI的比例18.18%,不同性别、不同学历的献血者确认为OBI的比例差异无统计学意义(P>0.05),不同年龄组的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),HBsAg阴性且HBV DNA阴性合格献血者、NDRD和确认为OBI的献血者中HBsAb阳性的比例差异无统计学意义(P>0.05),NDRD中不同血清HBsAb浓度的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),不同追踪检测次数组OBI检出比例有统计学差异(P<0.05)。NDRD中OBI的比例较高,年龄越大的NDRD确定为OBI比例越高,血清HBsAb浓度大于300IU/L的NDRD中未发现OBI,HBsAb浓度大于300IU/L可以用作NDRD归队和保留的指标,追踪检测5次及以上的NDRD确认为OBI的比例明显增高,为增加NDRD中OBI的检出率,可以增加核酸检测次数至5次及以上。

核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认

目的对单个标本核酸检测呈初始反应性（Initial reactive,IR）但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性（NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR）,且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus（盖立复）进行单个标本核酸检测（Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT）。应用超高速离心技术（25 0000 g×3 h）与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较。NAT NRR标本补充电化学发光法（ECL,罗氏）的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测。结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NAT NRR标本85份（0. 11%）,其中有79份标本进行了确认试验。超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份。配对比较显示超离体系明显优于推荐流程（McNemar test,P〈0. 05）：有48份（60. 7%）标本至少被1种流程确认,其中27份（34. 2%）标本同时被2种流程确认,16份（20. 2%）标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份（6. 3%）标本被推荐流程确认。HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc＋（92%和80%）和抗-HBs＋（42%和55%）的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布（中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL）明显低于未确认组（P〈0. 05）。在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染（Occult Hepatitis B virus infection,OBI）献血者45位（94%）、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染。结论加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60%的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBV DNA。NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感染献血者的排除; HBV DNA低水平感染构成了血液安全的潜在风险,对NAT NRR献血者进行屏蔽是防范此类风险的合理措施。

合肥地区献血者血液筛查非重复反应性标本与OBI标本间HBV血清学特征分析

目的 了解血液筛查非重复反应性标本与隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)标本间HBV血清学特征的相关性。方法 收集本科室2021年1月—2023年1月血液筛查ELISA结果均为阴性,仅NAT反应性的标本共144份,其中TMA法联检反应性标本92份,PCR法单人份检测HBV DNA反应性标本52份。联检反应性标本补充TMA法鉴别检测和PCR法单人份检测,2种方法检测均无反应性的标本纳入NRR标本组,任1种方法检出HBV DNA反应性的标本纳入OBI标本组。对2组标本完成HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc检测,分析NRR标本与OBI标本在血清学模式和阳性率上是否存在差异。结果 联检反应性标本补充检测均阴性标本53份,纳入NRR标本组。91份标本在任1种方法中检测出HBV DNA反应性,纳入OBI标本组。2组标本血清学检测均未检出HBsAg和HBeAg,抗-HBs检出率NRR标本组为64.15%,OBI标本组为47.25%;抗-HBc检出率NRR标本组为86.79%,OBI标本组为94.51%;抗-HBe检出率NRR标本组为35.85%,OBI标本组为52.75%。2组标本血清学模式:NRR标本组表现最多的模式为抗-HBs+、抗-HBc+(32.08%),OBI标本组表现最多的模式为抗-HBe+、抗-HBc+(37.36%)。结论 NRR标本与OBI标本在HBV血清学检测中的部分检测结果间存在差异,但NRR标本中较高的抗-HBc阳性率提示仍有较高的可能存在HBV感染风险。

卡介菌多糖核酸治疗非变应性高反应性鼻炎的临床研究

目的:观察卡介菌多糖核酸应用于非变应性高反应性鼻炎的临床治疗效果和安全性。方法:采用随机单盲对照试验的方法,将80例非变应性高反应性鼻炎患者随机分为试验组和对照组,分别给予卡介菌多糖核酸注射液(BCG-PSN)和二丙酸倍氯米松(BDP)治疗,前组予BCG-PSN肌注,每次0.5mg,2d1次,18次为1疗程;后组给予BDP鼻腔喷雾,2次/d,连续36d。均随访至停药后半年。观察并记录治疗后0、1、3、6个月时两组患者的症状及体征评分和不良反应。结果:治疗结束时,试验组总有效率为95.0%,对照组为97.5%,两组差异无显著性。治疗停止后1、3、6个月时试验组的总有效率明显高于对照组,且差异有显著性。两组均无全身不良反应发生,对照组有轻度局部不良反应。结论:BCG-PSN对非变应性高反应性鼻炎有较好的治疗效果,且安全性好。

HBsAg、抗-HCV、抗-HIV酶免阴性及单试剂反应性献血者核酸检测结果分析

目的通过对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV酶免结果双阴性及单试剂反应性献血者进行核酸检测(NAT),分析两种检测方法的结果差异和鉴别试验的反应性项目,为假反应性献血者的归队提供理论依据。方法分别用两种酶免试剂对献血者血液进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV血清学检测,对酶免阴性及单试剂反应性标本8人份混样进行HBV、HCV、HIV三联核酸定性检测,对NAT呈反应性的标本进行鉴别试验确定反应性的具体标本。结果 31 065份血液标本中酶免双试剂阴性30254份,单试剂反应性241份,其中进口试剂180份,国产试剂61份,主要集中在HCV和HIV进口试剂,两者差异有统计学意义;进行8人份混样NAT检测共有54份呈反应性,包括46份HBV、3份HCV、5份HIV。拆分鉴别实验检出39份HBV,其中ELISA阴性标本鉴别出37份阳性,单试剂反应标本中鉴别出2份,未拆分出HCV、HIV阳性标本,总拆分阳性率为72.2%。结论酶免单试剂反应性结果的假阳性率较高,核酸检测能提高对病毒的检测能力,有效降低经输血途径传播病毒的风险,选择两者互补的检测模式,对酶免单试剂反应性献血者进行追踪随访和复查,可为假反应性献血者的归队提供理论支撑,有利于献血者的召回。

核酸检测单反应性献血者归队情况分析

目的分析核酸检测(NAT)单反应性献血者的归队情况。方法回溯2012-2017年我中心无偿献血者血液NAT单反应性和鉴别情况,以我中心在2016-2017年归队的233名献血者为研究对象,进行ALT速率法检测,HBV、HCV、HIV、梅毒螺旋体(TP)两种不同厂家ELISA试剂检测,HBV、HCV、HIV单人份NAT检测。并对其中归队检测反应性的11名献血者进行追踪检测。结果2012-2017年491159名无偿献血者,0.33%血液NAT检测单反应性,其中30%鉴别为HBVDNA。233名归队献血者中,24.5%(57/233)归队检测反应性,75.5%(176/233)归队检测非反应性。233名归队献血者中,76名既往鉴别为HBVDNA,44.7%(34/76)归队检测非反应性;157名既往鉴别为不可鉴别,90.4%(142/157)归队检测非反应性。11名追踪试验献血者追踪检测结果为反应性8名,非反应性3名。结论核酸检测单反应性献血者归队有其必要性和现实意义;血站应根据实际情况,建立适合的核酸检测单反应性献血者归队策略并不断完善。

献血者HBV核酸检测非重复反应性确认及追踪结果分析

目的分析献血者乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测非重复反应性确认及追踪结果。方法对1200例于我站无偿献血者的血液样本进行非重复反应性确认,补充乙肝“两对半”检测,并对其部分单项核酸检测反应的患者予以回访结果追踪。结果1200份无偿献血血液样本单项核酸检测有反应性者150份(12.50%)。150份单项核酸检测有反应性样本经重新病毒核酸检测后,仍有58例样本有反应性(38.67%)、92例样本为非反应性(61.33%)。其中有18例献血者实际召回抽血,完成两次追踪,第一次追踪60~125天,第二次追踪间隔天数在160~356天,第一次追踪HBV DNA有反应(+)8例,第二次追踪仍存在反应(+);7例HBV DNA有反应者存在抗-HBc阳性(+)。核酸反应检测HBV-DNA阳性值10~17有37.25%,高于核酸反应检测值<10的4.17%(P<0.05)。结论部分单项核酸检测反应无偿献血者存在一定的输血传播HBV风险,多为HBV隐匿性感染,此时需要重视其输血情况,屏蔽单项核酸反应性献血者。

快速法测定C-反应蛋白对儿科感染性疾病诊断的意义

目的 用快速法测定小儿C-反应蛋白(CRP)值，鉴别诊断细菌、支原体和病毒感染。方法 采集末梢血，用快速CRP分析仪测定CRP值和用全自动血球计数仪测定白细胞(WBC)。结果 细菌感染CRP阳性率为100％，CRP值均>8mg／L；病毒感染CRP阳性率为19％，CRP值基本<8mg／L；支原体感染CRP阳性率为34．1％，阳性平均值为32．7mg／L。在细菌感染病例中有。73％以上WBC值升高，非细菌感染疾病WBC平均值为正常。结论 CRP对儿科感染性疾病有重要的诊断价值，在鉴别细菌和病毒感染方面比WBC更敏感。

良恶性腹水鉴别诊断的研究进展

在正常情况下．人体的腹腔仅有少量起润滑作用的液体，而在病弹状态下，如感染、恶性肿瘤、器官功能衰竭、变态反应性疾病及结缔组织病等．都可形成腹腔积液。腹腔积液有良性和恶性之分．良性包括结核性和非结核性．恶性腹腔积液是肿瘤侵袭和转移的一个突出表现．在成人腹腔积液中38％～52％为恶性．部分腹腔积液良恶性的鉴别诊断一直是临床和实验诊断的难题．直接影响患者的治疗和预后评估。

核酸扩增技术在动物源性食品掺假中的研究进展

核酸扩增技术是一种在体外快速扩增特定DNA片段的分子生物学技术,目前已广泛应用于传染病检测、生物勘测、食品安全检测、临床诊断和公共卫生监测等研究领域。其中,食品安全领域的问题日渐成为人们关注的焦点,尤其是动物源性食品掺假的现象屡禁不止。在过去的科学研究中,动物源性食品掺假的核酸扩增技术发展迅速,取得了很大进展。该文就核酸扩增技术中的凝胶电泳PCR、实时荧光定量PCR、数字液滴PCR、环介导等温扩增、交叉引物扩增、滚环扩增、重组酶聚合酶扩增等技术的原理及在动物源性食品掺假检测中的应用进行综述。讨论了各类核酸扩增技术的关键优势和局限性,简要介绍了现有的挑战和进一步的研究进展,旨在为动物源性食品掺假核酸扩增技术的发展指明方向。

PCR在诊断慢性非细菌性前列腺炎中的应用价值

目的建立基于16S rRNA基因的PCR细菌学检测方法,用于慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液的细菌学检查。方法应用PCR方法检测105例慢性非细菌性前列腺炎患者的前列腺液中细菌16S rRNA基因。用PCR技术扩增10株实验室保留株的16S rRNA基因,以HBV-DNA、白假丝酵母菌和人类基因组DNA为对照,检测该方法的特异性;采用10倍比稀释法进行该方法的灵敏度检测。结果细菌16S rRNA基因的检出率在前列腺液中为35.2%。对所测细菌株均获得371 bp扩增产物,而与HBV-DNA、白色假丝酵母菌和人类基因组DNA无交叉反应;PCR最低能检测15 CFU/mL大肠杆菌。结论PCR具有快速、特异性和敏感性高的特点,可用于慢性非细菌性前列腺炎患者的前列腺液中细菌16S rRNA基因的检出。

血清降钙素原和白细胞介素6检测在感染和非感染性全身性炎症反应鉴别诊断中的作用

目的 评价降钙素原 (PCT)和白细胞介素 6 (IL 6)对感染和非感染引起的全身炎症反应综合征 (SIRS)的鉴别作用。方法 共有 2 0例感染性全身性SIRS及 31例非感染性SIRS患者入选。患者临床出现炎症表现 2 4h内测定血清PCT、IL 6和C反应蛋白 (CRP)水平。同时记录白细胞计数 ,中性粒细胞比例 ,中性粒细胞绝对计数和最高体温。结果 全身性感染患者血清PCT[3 6(1 8,2 7 5)μg/L]、IL 6 (81 0ng/L± 51 6ng/L)、CRP(1 80g/L± 1 0 8g/L)水平及最高体温 (38 6± 1 2℃ )明显高于SIRS患者 [0 5(0 2 ,1 8) μg/L ,2 35ng/L± 1 77ng/L ,1 0 9g/L± 70g/L ,37 9± 0 9℃ ]。所有炎症指标中 ,IL 6和PCT的敏感性 (≥ 80 % )和特异性 (>70 % )最高。由IL 6和PCT构成的感染评分对全身性感染的辨别力最佳 (受试者工作特征曲线下面积为 0 92 3)。结论 与传统炎症指标相比 ,IL 6和PCT有助于鉴别全身性感染和SIRS。

广州地区献血者HBV核酸检测非重复反应性样本确认及追踪研究

目的研究无偿献血乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测中非重复反应性样本确认方法,探讨此类献血者血液安全性及归队屏蔽策略。方法对391例HBV单项NAT(Grifols Proleix Elite Assay)反应性样本使用原NAT检测系统进行重复检测,非反应性样本使用罗氏MPX 2.0核酸检测试剂进行确认,并补充乙肝"两对半"试验,对部分HBV单项NAT反应性献血者进行回访追踪。结果 391例单项HBV NAT反应性样本原系统重测,90例样本仍为反应性(占23.01%),301例样本为非反应性(占76.99%)。296例非重复反应性样本在罗氏MPX 2.0试剂复核阴性,5例样本呈反应性,推断为低水平HBV隐匿性感染。HBV NAT重复检测非反应性样本组在抗-HBs项的阳性率高于重复检测反应性样本组(x^2=7.629,P<0.05),在抗-HBc项则反之(x^2=15.303,P<0.05)。8例HBV NAT非重复反应性献血者随访复检NAT合格,18例献血者复检呈单项NAT反应性,后用双NAT系统重测,6例献血者单或双NAT系统为反应性(抗-HBc均为阳性),12例献血者为阴性(抗-HBc阳性9例)。结论在鉴定HBV NAT非重复反应性样本及献血者复查时,在原有检测基础上补充另外一种灵敏度相当的核酸检测系统进行复试,并增加抗-HBs和抗-HBc检测能进一步甄别假反应性样本和隐匿性乙肝病毒感染样本,建议采供血机构以3-6个月为间隔对核酸检测中HBV NAT非重复反应性的献血者进行一次以上复检。

淋巴组织反应性增生与恶性淋巴瘤组织学鉴别诊断

淋巴组织反应性增生(RH)与恶性淋巴瘤(NHL与HL)组织学鉴别诊断最核心的问题是抓住RH复杂多变的组织形态的免疫反应本质,以量变为主,病原消失可以复原。而恶性淋巴瘤因发生了质的变化,瘤细胞产生了相对无限制的克隆性增生,有破坏性和转移性。HL更要注意以诊断性R-S细胞为代表的系列R-S细胞的形态分布特殊性。

鸡肿瘤病快速鉴别诊断试剂盒及其应用研究

建立快速鉴别诊断鸡肿瘤病的聚合酶链式反应技术并研制成配套的诊断试剂盒。应用该试剂盒及其配套的操作程序 ,在 2 0 0 0年 5月～ 2 0 0 4年 7月检测来源于广西 6个地区 2 0 2个禽群共 6 85羽病、死鸡和火鸡的肿瘤和可疑肿瘤组织病料以及来源于安徽省不同地区的 4 6个鸡群的疑似肿瘤病、死鸡 30 5羽 ;同时 ,检测广西、安徽、山东、河南主要养鸡地区临床表现为生长缓慢、消瘦、贫血、疫苗免疫应答不佳、发病率和死亡率偏高等疑为免疫抑制状态的 15 4个鸡群中的 6 4 4羽病、死鸡。结果 ,在肿瘤和可疑肿瘤病料的检测中 ,马立克氏病、网状内皮增生症和禽白血病的阳性率分别为 5 7.17%、11.84 %和 5 .4 7% ,其中二重、三重混合感染总检测率为 16 .2 5 %。在疑似免疫抑制性疾病病料的检测中 ,3种鸡肿瘤病的阳性率分别为 2 8.2 6 %、7.4 5 %和 4 .19% ,其中二重、三重肿瘤病以及与其它免疫抑制性疾病的混合感染率达 35 .92 %。建立的鸡肿瘤病快速鉴别诊断程序及试剂盒 ,操作简便快捷、结果准确可靠、保存方便、检测成本低 ,适用于临床鸡肿瘤病的鉴别诊断 ,对鸡肿瘤病的流行病学调查、免疫抑制病检测以及兽医检疫有重要价值。

核酸检验技术在洛阳市血液筛查中的初步应用与研究

目的通过对比ELISA阳性、灰区、阴性标本与核酸检测结果,评估2种检测方法在降低经血传播疾病中的作用。方法对2011年4月～2012年3月498份HBsAg、抗-HCV、抗-HIV阳性、灰区标本,以及2012年3月～5月4010份ELISA阴性标本,进行核酸检测,对比其结果。观察核酸阳性检出率,灰区设置的意义。结果498份标本中双阳和单阳试剂的ELISA与核酸检测结果有所不同,灰区标本中仅HBsAg检出4.1%(3/73)的反应性标本,而抗-HCV、抗-HIV均无核酸检测反应性标本。4010份ELISA阴性标本中,核酸检测出6份反应性,鉴别试验结果5份为HBV DNA阳性,阳性率0.012%(5/4010),

长链非编码RNA THRIL与疾病关系研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)TNF-α和异质性胞核核糖核蛋白L(hnRNPL)相关的免疫调节lncRNA(THRIL)与hnRNPL结合形成功能性THRIL-hnRNPL复合物,结合在TNF-α的启动子上进而调节TNF-α的表达。研究表明THRIL可能通过调节TNF-α的表达参与多种炎症性疾病、肿瘤和其他疾病的发生与进展,THRIL可能成为疾病药物治疗的新靶点。该文主要综述THRIL在多种疾病中的表达水平和可能的调节机制。

核酸检测在献血筛查中的应用

目的分析单人份核酸检测方法 (NAT)在无偿献血者血液筛查中的应用。方法采用Procleix TIGRIS全自动核酸检测系统,结合血站常规的血清学检测,平行检测无偿献血者血液标本。对部分仅核酸检测阳性的献血者,特别是仅HIV核酸单阳性献血者和非重复反应性献血者进行追踪检测,并进行人群特性的描述性分析。结果在304 103份标本中,ELISA阴性NAT初始反应性标本608份(0.20%)。经鉴别实验检出HBV-DNA阳性标本232份,鉴别阴性复试阳性标本74份,非重复反应性阳性标本301份。追踪分析17名非重复反应性献血者,发现4人有HBV-DNA可鉴别的阳性。结论核酸检测技术用于献血者的常规血液筛查能进一步保障输血安全。非重复反应性的标本存在着真阳性的可能,应重视核酸检测非重复性的标本。