顶端钠离子依赖性胆汁酸转运体在小肠癌组织中的表达及其意义

目的:研究顶端钠离子依赖性胆汁酸转运体(ASBT)在小肠癌组织中的表达,探讨其在小肠癌发生中可能的意义。方法:采用免疫组织化学显色和蛋白印迹检测ASBT在人小肠腺癌、黏液腺癌、小细胞癌及其癌旁正常组织中的表达。结果:ASBT在癌旁正常小肠组织主要表达于小肠吸收细胞游离面的胞膜;在小肠癌中,ASBT表达明显下调,在小肠黏液腺癌和小细胞癌还可见ASBT的细胞核异位表达。结论:ASBT在小肠癌组织中表达下调和异位表达提示编码ASBT的基因第10溶质转运蛋白家族第2成员(SLC10A2)可能作为一种新的抑癌基因在小肠癌的发生过程中起重要作用。

顶端钠依赖性胆酸转运体及其在相关疾病中的作用研究进展

胆汁酸(BA)的肠肝循环由肝脏和肠道中特定的信号分子控制,在机体代谢及消化系统中发挥重要作用。胆汁的分泌、转运和重吸收均受肠肝循环的调节。在此过程中,肝脏分泌的BA大部分通过顶端钠依赖性胆酸转运体(ASBT)被回肠末端肠上皮细胞吸收,然后转运至门静脉,对于维持机体胆汁酸循环稳态具有重要意义。ASBT的表达和功能异常可能导致一些与肠肝循环和代谢稳态紊乱相关的疾病,如糖尿病、高胆固醇血症、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、原发性胆汁性胆管炎(PBC)等。现对ASBT及其在相关疾病中的作用研究进展进行综述。

顶端钠依赖性胆酸转运体及其抑制剂的研究进展

胆汁酸的肠肝循环对于胆固醇及脂类的吸收和代谢具有极其重要的作用。顶端钠依赖性胆酸转运体(apical sodium-dependent bile acid transporter ASBT)主要表达在回肠壁腔侧膜上,负责肠道中绝大部分胆酸的重吸收,在胆固醇代谢中的地位非常重要。药理学试验证明抑制ASBT活性可以有效地降低血清胆固醇和低密度脂蛋白,因此ASBT可以作为降酯药物开发的新靶点。本文阐述了ASBT的生物学功能及特性,并对以ASBT为靶点的抑制剂进行了综述。

痰瘀同治方药对Caco-2单层细胞胆汁酸吸收的抑制作用及机制研究

目的探究复方中药对人结肠腺癌Caco-2细胞胆汁酸吸收的抑制作用及机制。方法Transwell细胞小室接种Caco-2细胞,培养21d以建立单层细胞模型,随机分为空白对照组、胆汁酸刺激组及复方中药+胆汁酸组,其中选取了4种胆汁酸,分别为胆酸(CA)、脱氧胆酸(DCA)、甘氨胆酸(GCA)以及牛磺胆酸(TCA)。观察各组胆汁酸跨膜转运量、相关基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与相应的胆汁酸刺激组相比,复方中药干预可显著降低胆酸(CA)、甘氨胆酸(GCA)以及牛磺胆酸(TCA)在Transwell细胞小室下室中的浓度,差异有统计学意义(P<0.05),但对DCA无明显作用(P>0.05)。同时,复方中药可对抗CA、GCA以及TCA导致的Caco-2细胞顶端钠依赖性胆汁酸转运体(ASBT)、有机溶质转运体β(OSTβ)mRNA及蛋白表达水平的升高,差异有统计学意义(P<0.05),但对回肠胆汁酸结合蛋白(IBABP)的mRNA表达无显著影响(P>0.05);对脱氧胆酸(DCA)刺激所引起的ASBT和OSTβmRNA及蛋白表达水平的改变无显著影响(P>0.05),但可对抗IBABPmRNA表达水平的下降,差异有统计学意义(P<0.05)。复方中药干预可对抗GCA以及TCA所导致的OSTαmRNA表达水平的升高,差异有统计学意义(P<0.01),但对CA、DCA无显著影响(P>0.05)。结论复方中药可有效抑制肠道上皮细胞对胆汁酸的吸收,其作用可能主要是通过下调ASBT和OSTβ基因mRNA及蛋白的表达来实现,可能是复方中药抑制胆汁酸吸收的潜在作用靶点。

胆汁酸转运体与相关疾病及药物研发进展

胆汁酸(bile acids, BAs)是胆汁的主要成分之一,在人体的脂肪代谢过程中起到重要作用。人体中95%的胆汁酸中通过肠肝循环而维持,在肠肝循环过程中,存在4个主要介导胆汁酸进行跨膜转运的转运体,每一个转运体都发挥着不可或缺的作用。已有病例报道,胆汁酸转运体的基因缺陷会导致肠肝循环被破坏,引发严重的代谢性疾病,甚至威胁到患者生存。另一方面,代谢性疾病状态下的患者胆汁酸转运体表达也会发生改变,这提示胆汁酸转运体的改变或许是某些代谢性疾病发生的重要病理机制。因此,以胆汁酸转运体为靶点的新药研发正在成为研究热点。本综述探讨了不同胆汁酸转运体与疾病发生的关系,并对胆汁酸转运体靶点药物研发的最新进展进行总结,为后续针对胆汁酸转运体的研究提供指导。

miR-221/222及其靶基因在妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制中作用的研究

目的:研究微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)221/222 及其靶基因在正常孕妇和妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepaticcholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘中表达的差异,并通过细胞实验过表达方法研究 miR-221/222 对靶基因表达影响,探讨其在 ICP 发病机制中的作用。方法:搜集 2015 年 9 月到 2016 年 3 月在重庆医科大学附属第二医院妇产科行剖宫产分娩的正常孕妇和 ICP 孕妇的胎盘组织各 20 例,直接提取 miRNA,采用实时荧光定量逆转录 PCR(qRT-PCR)检测 miR-221/222 在 2 组胎盘组织中的表达情况;预测 miR-221/222 的靶基因是顶端钠依赖性胆酸转运体(apical sodium-dependent bile acid transporter,ASBT,又称 SLC10A2);Western blot 检测 ASBT 在 ICP 和正常胎盘组织中的表达情况;用 Lipofectaine2000 脂质体包裹合成的miR-221/222 mimic 转染正常滋养细胞 HTR-8;qRT-PCR 检测 miR-221/222 表达水平;蛋白质印迹法检测转染后 ASBT 蛋白表达。结果:①经过内参 U6 的校正,miR-221 在 ICP 胎盘表达量为 1.066±0.044,正常胎盘表达量为 0.053±0.009;miR-222 在ICP胎盘表达量为 13.724±4.355,正常胎盘表达量为 0.833±0.189。可见 miR-221/222 在 ICP 胎盘中的表达明显上调(P<0.05)。②SLC10A2 在 ICP 组中的表达量为 0.328±0.102,在正常组中的表达量为 0.604±0.119,其在 ICP 组的表达较正常组的表达下调(P=0.000)。③经过内参 ACTIN 校正,ASBT 在转染 miR-221 组细胞内表达量为 0.338±0.064,对照组表达量为 0.583±0.040;ASBT 在转染 miR-222 组细胞内表达量为 0.371±0.024,对照组表达量为 0.624±0.031,可见 ASBT 在转染组中较对照组表达下调。结论:miR-221/222 在 ICP 胎盘组织中表达升高,而其预测靶基因 ASBT 的表达则下降;细胞实验中 miR-221/222 转染组靶基因 ASBT 表达下降。两者之间可能存在负调控关系。可能由此影响了孕妇胆汁酸在肠道的重吸收及在肝脏的转运而导致妊娠期肝内胆汁淤积。