天然油松叶-枝-根氮磷含量随降水和温度的变化规律

【目的】对油松叶、枝、根的氮、磷含量随水热变化的响应规律进行研究,有助于加深对我国暖温带地区森林植物应对气候变化策略的认识。【方法】本文基于生态化学计量学理论,在我国天然油松林主要分布区选择7个代表性样点,对优势种油松叶、枝、根的氮、磷含量进行定量分析。【结果】(1)油松叶、枝、根器官间氮、磷含量存在显著差异,叶的氮、磷含量均高于枝和根的氮、磷含量,其中当年生叶、当年生枝的氮、磷含量高于多年生叶、多年生枝的氮、磷含量。吸收根氮、磷含量高于次生根氮、磷含量。当年生叶、当年生枝的氮磷比低于多年生叶、多年生枝的氮磷比,次生根氮磷比高于吸收根氮磷比。(2)油松叶、枝、根的氮、磷含量的变异程度存在差异,整体变异系数范围为12.3%~44.4%,其中吸收根磷含量的变异系数最大,多年生叶氮含量的变异系数最小。(3)油松不同器官的氮磷化学计量特征随环境变化的响应存在差异,油松多年生叶氮含量、多年生及当年生枝氮、磷含量随降水量的增加呈显著下降的趋势。多年生及当年生叶磷含量、枝磷含量均随温度的升高呈显著上升的趋势。多年生及当年生叶氮磷比、枝氮磷比随温度的升高呈显著下降的趋势。次生根磷含量随温度的升高呈显著上升的趋势,次生根氮磷比随温度升高呈显著下降的趋势。【结论】降水、温度对我国天然油松林优势物种油松叶、枝、根的氮磷化学计量特征有显著影响,不同器官应对这两个环境因子的响应趋势及适应机制不同。

8种杀菌剂对甘薯匍枝根霉的室内毒力及贮藏期药效评价

甘薯软腐病是贮藏期的一种重要真菌病害,发生普遍,为害严重,匍枝根霉为软腐病的主要致病菌。为测定不同药剂对匍枝根霉的毒力水平,明确药剂对甘薯软腐病的防治效果,对实际生产提供有效指导,采用平皿分析法测定8种杀菌剂对匍枝根霉的毒力并进行了贮藏期药效试验。毒力测定结果表明,8种杀菌剂EC50由低到高分别为:50%咯菌腈、10%苯醚甲环唑、50%异菌脲、32.5%苯甲嘧菌酯、12.5%腈菌唑、80%烯酰吗啉、50%咪鲜胺锰盐、25%溴菌·多菌灵,EC50分别为0.1422、7.5133、8.4786、11.3104、16.3595、62.6331、78.6684、91.1605μg/mL。其中50%咯菌腈EC50值显著低于其他7种药剂,毒力最强,抑制效果最好。贮藏期药效试验结果表明,贮藏45 d时,50%咯菌腈处理薯块发病率最低,为3.33%,防效最高,为90.63%,显著高于其他各处理,10%苯醚甲环唑、50%异菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑处理防效均在60%~80%间;贮藏90 d时,50%咯菌腈处理薯块发病率仍最低,为5.56%,防效仍最高,为86.49%,显著高于其他各处理。10%苯醚甲环唑、50%异菌脲、32.5%苯甲·嘧菌酯和12.5%腈菌唑处理防效均在60%~75%间。在甘薯软腐病的防治中,生产上可推广使用50%咯菌腈可湿性粉剂对贮藏期甘薯软腐病进行防治。

匍枝根霉和半裸镰刀菌侵染甜瓜果实产生的胞壁降解酶与侵染方式

匍枝根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒ）和半裸镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｅｍｉｔｅｃｔｕｍ）以不同的机制侵染甜瓜果实。匍枝根霉侵染时，菌丝分泌大量的果胶甲酯酶（ＰＭＥ）、多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）、果胶甲基半乳糖醛酸酶（ＰＭＧ），迅速消解组织中胶层，引起细胞电解质外渗、质壁分离和软腐。菌丝在胞外和细胞间隙生长，不能穿透细胞壁。半裸镰刀菌侵染甜瓜果实时分泌高活力的果胶甲酯酶、果胶裂解酶类（ＰＭＬ）和纤维素酶（Ｃｅｌｕｌａｓｅ）而缺少果胶水解酶类，菌丝不能迅速消解中胶层，但以直接穿透细胞壁方式侵染组织细胞。这两种病原对甜瓜不同的致腐方式是由它们不同的外泌胞壁降解酶种类和酶学特性所决定的。

固定化全细胞葡枝根霉YF6合成生物柴油的研究

以聚氨酯为葡枝根霉(Rhizopus Stolonifer)YF6全细胞固定化载体,以2%全脂豆粉、0.5%菜籽油为主要氮碳源,150r/min振荡培养48h后,再加入0.1%的大豆油继续培养24h;滤出固定化菌丝载体,真空干燥,制成干燥的固定化YF6全细胞催化剂。在醇油摩尔比为3:1,甲醇分3次等量加入(可避免脂肪酶在甲醇溶液中失活),反应温度35℃,固定化酶加量3%条件下,其催化酯化反应的酯化率达到89%左右。该生物催化剂不仅能催化菜籽油、大豆油等植物油经酯化反应生成脂肪酸甲酯,而且也能催化高酸值废弃油酯化反应形成生物柴油。

山梨酸钾对面包上匍枝根霉的抑制作用

以匍枝根霉孢子为研究对象，通过改良固体培养法进行培养，并观察和统计匍枝根霉孢子的萌发情况、菌落大小和色泽、菌丝生长变化情况及孢子囊的形态特征，分析不同浓度山梨酸钾对抑制匍枝根霉生长的效果。结果表明：山梨酸钾对匍枝根霉具有显著的抑制作用，且抑制作用随其浓度升高而增强，当浓度≥0．8g／100mL时，抑菌效果已达到显著水平；当浓度为1．0—1．2g／100mL时，可抑制79％～90％根霉孢子的萌发，抑制菌丝及菌落生长且加速其老化、衰退。

匍枝根霉和半裸镰刀菌侵染引起甜瓜采后呼吸代谢途径的变化

采后健康甜瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏＬ．）果皮组织以高抗氰、高残余、无巴斯德效应和以磷酸戊糖代谢为主的呼吸方式，维持着较低的呼吸强度水平。当感染匍枝根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒ（Ｅｈｒｅｎｂ．）Ｖｕｉｌ）和半裸镰刀菌（ＦｕｓａｒｉｕｍｓｅｍｉｔｅｃｔｕｍＢｅｒｋｅｔＲａｖ．）后，抗氰呼吸减弱，残余呼吸消失，巴斯德效应出现，磷酸戊糖途径消失，糖酵解－三羧酸循环－细胞色素电子传递呼吸系统加强，最终导致病斑形成，组织溃烂，巴斯德效应消除，乙醇高度积累，无氧呼吸高度增加。病原不同，病症不同。

酸性硫酸钙处理对水蜜桃采后匍枝根霉致病力的影响

为研究酸性硫酸钙(ACS)溶液对水蜜桃果实采后致腐匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)的抑菌效果,在离体和体内条件下,探究其对匍枝根霉细胞膜渗透率、细胞壁降解酶、呼吸相关酶活性和桃果发病率的影响。结果表明,不同稀释倍数的ACS溶液对匍枝根霉均有不同程度的抑菌作用,其中ACS-10^(-3)处理组的抑菌效果最强。在作用120 min时,ACS-10^(-3)组菌丝细胞膜渗透率达到52.76%,较CK高出39.72%;匍枝根霉在含有50%ACS稀释液的带药培养基中培养9 d时,ACS-10^(-3)组的PG、PMG、C_X和GLU等细胞壁降解酶活性得到了抑制,较CK分别降低38.41%、41.96%、59.31%和35.52%;且在很大程度上抑制了呼吸能量代谢系统中酶活性的上升,培养第9天时匍枝根霉的SDH、MDH和IDH活性分别为0.02±0.01、0.68±0.12、106.13±3.54 nmol·min^(-1)·g^(-1),均显著低于CK(P<0.05)。同时,ACS稀释液可显著降低损伤接种桃果实的匍枝根霉病斑面积和接种发病率,与CK相比,ACS-10^(-3)组桃果实的匍枝根霉病斑面积和接种发病率分别降低了99.61%和73.33%。因此,适宜稀释倍数的ACS溶液能够有效抑制水蜜桃采后因匍枝根霉侵染引起的软腐病。

匍枝根霉纤维素酶发酵条件优化及分批发酵动力学模型的构建

以滤纸酶活为检测指标,通过单因素实验和均实验设计优化匍枝根霉产纤维素酶培养条件,并以此为基础进行分批发酵,并利用Logistic方程和Luedeking-Piret方程构建动力学模型。优化结果表明:滤纸酶活在发酵时间为84 h时达到13.16 IU/mL,比优化前提高了149%,其中,内切酶活、外切酶活和β-葡萄糖苷酶活高值分别为45.81 IU/mL、0.537 IU/mL和12.45 IU/mL且所建模型拟合良好。

匍枝根霉TP-02内切葡聚糖酶基因eg2的克隆表达及功能分析

从匍枝根霉TP-02的cDNA文库中克隆得到内切葡聚糖酶基因eg2,在大肠杆菌BL21中成功表达,通过对其结构功能进行初步分析,并对EGⅡ的纤维素结合模块CBM1及催化结构域GH45区进行突变研究。结构分析表明:N39S可影响CBM1亲水平面的形成,V136D及E260D对GH45活性中心的改变较大。突变株的发酵特性显示,N39S可缩短达到峰值的时间,V136D及E260D可显著提高酶活。其中,突变株EGⅡ-F在发酵21 h后,酶活达到最高为1.321 IU/mL,比突变前提高了82.7%。

基于响应面法优化匍枝根霉TP-02液态发酵纤维素酶条件

利用Plackett-Burman设计法(Plackett-Burman,PB),对影响根霉TP-02液态发酵产纤维素酶的8个因子进行了筛选,结果表明,影响该菌发酵产纤维素酶的主要因子为麸皮与稻草的比例、槐糖、Tween 80。利用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,在此基础上,采用响应面法(ResponseSurface Methodology,RSM)对这3个因子的影响进行研究,得出纤维素酶产量的数学模型,通过对二次多项回归方程求解,得到3个因子的最优用量:麸皮稻草比例为:3.7:1,槐糖量为:0.62%,Tween 80为0.68 g/L,在优化后的条件下培养96 h,纤维素酶滤纸酶活可达到8.13 IU/mL比优化前提高了38.97%。

葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)YF6脂肪酶基因的克隆及其序列分析

筛选并鉴定了1株高产脂肪酶菌株葡枝根霉YF6,并采用简并PCR等分子技术从中克隆到1个新的脂肪酶基因lipRs及其对应的全长cDNA,序列分析表明,该基因编码区全长1173bp,不含内含子序列,编码1段由26个氨基酸残基组成的信号肽和1个由365个氨基酸残基组成的成熟蛋白,该成熟蛋白计算分子量(Mr)为39268.27,等电点为pH7.66,有5个可能的N-糖基化位点,含有脂肪酶特征序列GHSLGGA,与来自米根霉(Rhizopus oryzae)的脂肪酶(AAF32408)同源性最高,一致性为83%,相似性为89%.该基因序列已提交GenBank,登录号为DQ139862.

葡枝根霉NG0305酶催化甾体C_(11)α羟基化的研究

应用本实验室保藏的葡枝根霉RhizopusstoloniferNG0 30 5对甾体化合物烯睾丙内酯 (3 oxo 4 ,6 diene Pregna 17 alpha hydroxy 2 1 carboxylicacidgama lactone)进行酶催化C1 1 α 羟基化反应的研究。研究结果表明 ,菌体培养的碳源供应对菌体所产羟化酶的活力有重要影响。采用葡萄糖和淀粉组合碳源 ,并加入适量的黑曲霉糖化酶的方式 ,解决了葡萄糖抑制的问题 ,并缩短了菌体培养反应时间 ,得到高羟化转化率。酶转化反应 88h后 ,提取吸附在菌丝球内的产物 ,应用液相色谱测定 ,结果表明C1 1 α 羟基化转化率达到了 5 3 0 %。

二氧化氯在巨峰葡萄表面杀灭匍枝根霉效果的研究

用ClO2溶液浸泡处理已接种匍枝根霉孢子的巨峰葡萄,研究了ClO2浓度,处理时间和pH值三个因素对杀菌效果的影响。结果表明:(1)ClO2浓度是影响杀菌效果的重要因素,随着浓度的增加杀菌效果有大幅度的提高;(2)处理时间延长可提高杀菌效果,但其上升趋势随时间延长将变得平缓;(3)较低的pH值有利于ClO2杀菌作用的发挥。

拮抗匍枝根霉的生防菌R1B的筛选鉴定和抑菌活性分析

为防治梨软腐病,从不同植物内生菌中筛选匍枝根霉拮抗菌,同时研究其生防活性。用对峙培养法筛选拮抗匍枝根霉的内生菌;采用果实打孔接种法检验R1B对梨软腐病的防治效果,初步探讨其抗菌活性物质。结果显示来自霍山石斛的菌株R1B对匍枝根霉具有较好的拮抗活性,生理生化和分子鉴定表明R1B与贝莱斯芽孢杆菌具有最近的亲缘关系。菌株R1B几乎完全抑制匍枝根霉菌丝的生长;接种匍枝根霉4 d后,R1B完全抑制梨软腐病的发生,而对照全部腐烂。R1B中含有抗菌肽合成基因bacA(溶杆菌素)、ituC(伊枯草菌素)、bmyB(杆菌抗霉素)及fenD(丰原素)。抗菌二肽溶杆菌素以及伊枯草菌素和丰原素可能是菌株R1B合成的抗菌物质。R1B具有防治梨软腐病的良好潜力。

匍枝根霉固态发酵产木聚糖酶条件研究

木聚糖酶作为环保型饲料添加剂广泛应用于畜牧业,因其具有改善消化道功能、降低食糜黏度和抗营养性、提高饲料利用率及减少环境污染等特点而备受关注。试验首先通过单因素试验法得到了最佳的氮源、料液比、无机盐和表面活性剂,为进一步提高产木聚糖酶的水平,以玉米芯粉为主要基质,采用响应面分析法优化匍枝根霉产木聚糖酶发酵培养基。优化的培养基为尿0.15、ZnSO40.022、Tween-80 0.08及含水量3 g/g干基质(DS),在最佳培养条件下,经7 d发酵酶活达到最大值:13.899 8 U/g DS。

匍枝根霉液态发酵产木聚糖酶培养基优化研究

利用响应面法对匍枝根霉液态发酵产木聚糖酶的培养基进行优化研究.采用单因素实验,得到最佳的碳源、氮源、无机盐.采用Plackett-Burman对影响匍枝根霉产木聚糖酶发酵的相关因素进行评价,确定有显著效应的3个因素.采用最陡爬坡实验确定接近响应值区域显著因素的浓度,利用3因素3水平的Box-Behnken实验进行培养基优化.结果表明,培养基组成:3.9%麦麸玉米芯粉混合碳源,0.35%(NH4)2SO4,0.2%KH2PO4,0.2%MgSO4·7H2O,0.4%CaCl2,0.06%吐温-80,1%微量元素液,装液量为100mL,pH自然,接种量为10%,在30℃,180r/min条件下培养,其木聚糖酶酶活达到最高为101.697U/mL,比优化前木聚糖酶酶活提高了3.5倍.

匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)As3.38△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与酵母表达

通过气相色谱法(GC)快速分析8种真菌的脂肪酸成分,发现匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)具有较高的γ-亚麻酸含量,利用RT-PCR和RACE方法获得了全长为1475bp的匍枝根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因的cDNA序列,其中开放阅读框为1380bp,编码459个氨基酸。生物信息学分析所克隆的基因具有△6-脂肪酸脱氢酶的典型结构:N端具有细胞色素b5结构、具有3个保守的组氨酸区序列和跨膜结构;把该基因的开放阅读框序列连接到表达载体pYES2.0上,构建重组表达载体pYRnD6D,并将其转入缺陷型酿酒酵母INVScl中进行表达。GC分析表明,该序列在酵母中获得了表达,表达产物表现出△6-脂肪酸脱氢酶的酶学活性,能将底物亚油酸转化为γ-亚麻酸。新生成的γ-亚麻酸占酵母细胞总脂肪酸的12.25%。

费孝通与日本学者中根千枝的学术交往和友情

中国著名学者费孝通和日本著名学者中根千枝,早年师从英国人类学功能学派大师马林诺斯基门下,学习社会人类学。回国后,都用在西方学到的现代理论和方法指导实践,在各自的国家创建了辉煌业绩。从20世纪70年代中期,两人开始接触。本文介绍了他们之间近30年的学术交往和深厚友情,同时介绍了他们为两国年轻学者的成长、建立拓展两国学术交流合作所付出的辛勤努力,反映了两国老一辈人类学家、民族学家的道德风范和学术认同。

不同直径的樟树茎枝和樟树根提取物主要药效学比较研究

目的:比较不同直径的樟树茎枝与樟树根提取物的抗炎镇痛止泻及肠运动的作用,为樟树茎枝替代肠炎宁糖浆处方中主要成分樟树根的开发研究提供一定的依据。方法:(1)通过小鼠毛细血管通透性抗炎实验观察测试药物抗炎作用;(2)通过小鼠热板法镇痛实验、小鼠醋酸扭体实验观察测试药物的镇痛作用;(3)通过新斯的明致小鼠推进功能亢进的小肠运动实验研究测试药物对肠功能的影响;(4)通过蓖麻油致小鼠泄泻实验研究测试药物的止泻作用。结果:直径2-3cm、直径3cm以上的樟树茎枝能明显降低小鼠依文思蓝的渗出量而具有抑制毛细血管通透性抗炎作用;直径3cm以上的樟树茎枝明显减少醋酸致小鼠扭体次数具外周性镇痛作用;1-2cm的樟树茎枝能明显抑制新斯的明引起的肠推进功能亢进作用。结论:樟树茎枝具有抗炎、镇痛、抑制肠蠕动作用,与樟树根具有抗炎和抑制肠蠕动作用比较,两者作用具有相似性,樟树茎枝作用甚至强于樟树根。

匍枝根霉cbh2基因的克隆表达与结构分析

采用反向PCR技术从匍枝根霉中克隆cbh2基因,该基因编码440个氨基酸的蛋白质。利用DS2.5软件进行同源模拟和建立分子动力学模型,研究cbh2催化纤维六糖水解过程中结合区（CBM）上的关键位点,催化区（CD）上催化隧道关键位点的相互依赖作用,水解β-1,4糖苷键,生成纤维二糖。把cbh2基因与p ET22-b（＋）载体连接,实现了在E.coli BL21（DE3）中原核表达。通过镍柱层析、DEAE FF层析和G-75层析三步纯化法获得46 k Da的酶蛋白,比活力为4.67 IU/mg。纯化的重组酶具有高水平的催化活性,对微晶纤维素具有较好的水解特性,CBHII酶的Km为7.358（mg/m L）。研究CBHII酶的基本特性,其最适反应温度为50℃,最适反应p H为5.0,CBHII酶在p H 4～7下具有较宽的稳定性,在65℃以下热稳定性较好,在催化过程中保持较高的活力。