防治橡胶树褐根病0.5%戊唑醇膏剂的研制

由木层孔菌属有害层孔菌Phellinus noxius Corner引起的褐根病是我国橡胶树的主要根部病害之一。生产上常用挖隔离沟和灌根施药方式进行防治,但其耗费人力物力,防治成本高。为了寻求经济高效且环保的新技术,本研究通过对不同杀菌剂、填料、增稠剂、渗透剂和保湿剂进行筛选,制备了一种防治橡胶树褐根病的膏剂。随后,通过对外观、附着性、黏度、pH值、稳定性、成膜性及固含量流失率等性能指标的综合评价,确定了膏剂的最佳配方为:0.5%(质量分数,余同)戊唑醇、20%纳米硅藻土、2%羧甲基纤维素钠、6%乌迪尔树皮穿透剂、5%凡士林、5%棕榈油、5%乙二醇,余量为水。制备的膏剂为乳白色黏稠状,呈弱碱性,附着性强,黏度高,冷热储合格,成膜薄且有韧性,膜的固含量流失率为13.95%,耐雨水冲刷能力强。0.5%戊唑醇膏剂经过橡胶植株茎基部施药,通过气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)结合QuEChERs法检测橡胶根中戊唑醇的含量。结果表明,施药后24 h即可在植株根部检测到戊唑醇,96 h含量达到5.49 mg/kg,说明戊唑醇能穿透茎部树皮向下传导至根部。综上所述,膏剂剂型的研制为橡胶树褐根病的化学防治提供了一种新途径。

橡胶红根病生防深海真菌的筛选、鉴定及拮抗效果评价

橡胶树红根病是我国热带地区橡胶产业的毁灭性病害之一,严重影响我国橡胶产业的发展和热带人工林生态系统恢复。为克服实际生产中物理防治和化学防治的弊端,亟需寻找一种相对高效、安全的防治措施。随着科技发展和环境保护的需求日益扩增,生物防治成为病虫害防治最具发展潜力的研究方向。为了获得对橡胶树红根病病原菌具有较高拮抗活性的生防真菌,以橡胶树红根病的病原菌为靶标,以深海沉积物可培养真菌为指示菌,采用平板对峙法进行初筛,对有活性菌株进一步分别采用平板对峙法、对扣平板法与圆盘滤膜法测定发酵液、易挥发产物与难挥发产物等各自的抑菌率,全面评估其拮抗效果。结果表明,供试的56株深海真菌中,有9株具有平板对峙活性。复筛结果表明,9株真菌菌株发酵液、易挥发性代谢产物与难挥发性代谢产物对病原菌的的抑制率分别为–29.55%~48.45%、–3.56%~51.46%与–10.00%~50.00%。其中,菌株DSF034的发酵液、易挥发性代谢产物与难挥发性代谢产物对病原菌的抑制率分别为21.69%、32.04%与33.33%;菌株DSF073的发酵液、易挥发性代谢产物与难挥发性代谢产物对病原菌的抑制率则分别为48.45%、51.46%与50.00%,明显高于其他菌株。结合形态学观察与rDNA-ITS序列分析,分别将菌株DSF034与DSF073鉴定为青霉属(Penicillin sp.)和曲霉属(Aspergillus sp.),其生防潜力较好,可为橡胶树红根病生防菌剂的选择提供新的菌种资源。

不同Ca^(2+)浓度对蒲公英和橡胶草种子萌发及根系生长的影响

【目的】研究黄蒲蒲公英和科根橡胶草2个品系种子萌发和根系生长对不同Ca^(2+)浓度的响应,分析其种子及根部对Ca^(2+)的响应特征。【方法】以新疆当地黄蒲蒲公英、科根橡胶草为材料,2020年设置室内试验。设0(CK)、0.04、0.08、0.12、0.16 mol/L 5个Ca^(2+)浓度处理。【结果】与CK相比,0.04 mol/L Ca^(2+)处理未显著影响黄蒲蒲公英和科根橡胶草的种子发芽率、发芽势、发芽指数,其余Ca^(2+)处理下的种子萌发参数均随着浓度增加呈降低趋势。根系参数与种子萌发参数表现一致,根系总长度、表面积、体积均随着Ca^(2+)浓度的增加逐渐降低,科根橡胶草的细根长度(直径(d)<0.5 mm)在0.04、0.08 mol/L Ca^(2+)浓度处理下大于黄蒲蒲公英。【结论】黄蒲蒲公英和科根橡胶草在不同的Ca^(2+)浓度处理下的根系生长适应性不同。尤其在0.04、0.08 mol/L Ca^(2+)浓度处理下科根橡胶草细根长度要大于黄蒲蒲公英,发芽率也要大于黄蒲蒲公英。

橡胶树红根病病原菌rDNA-ITS序列鉴定

为了更好地对橡胶树红根病病原菌进行鉴定,从海南省和云南省发病严重的胶园采集病害样本、分离得到12个灵芝属菌株,并对其rDNA-ITS序列绘制Ganoderma属系统发育树。结果表明,采集得到的12个菌株中有11个鉴定为Ganoderma philippii、1个鉴定为G.gibbosum。

不同地区橡胶树红根病菌的生物学特性及室内毒力测定

橡胶树红根病是我国分布最广、危害最重的橡胶树根部病害。为明确我国海南和云南地区橡胶红根病菌的生物学特性及对杀菌剂的敏感性,采用十字交叉法研究了不同培养条件对病菌菌丝生长的影响,并测定了10种不同杀菌剂对病菌的抑制作用。结果表明,病原菌在玉米+橡胶根的培养基上生长最快,对温度、pH等适应范围广,温度在13～31℃,pH在3～10均能生长,最适生长温度为28℃,多数菌株最佳pH为7～9,且能利用多种碳氮源;不同的碳源中,果糖、半乳糖、麦芽糖、葡萄糖和甘露糖较适合该菌的生长;在供试氮源中,菌丝在酪氨酸、牛肉浸膏的基础培养基上生长最快,在色氨酸和尿素的基础培养基上生长最慢;光照对病菌有抑制作用,黑暗有利于菌丝生长;菌丝的致死温度为47℃,10 min。不同地区的病原菌株间药剂敏感性存在一定差异,戊唑醇抑菌效果最好,其EC_(50)为0.0312μg/mL,其次为嘧菌酯、十三吗啉、咪鲜胺和腈菌唑,EC_(50)分别为0.5581、0.6759、1.3763和1.5603μg/mL。

8株木霉菌对橡胶树红根病的拮抗作用

木霉菌具有抑制植物病原真菌生长的能力,因而成为开发土传根部病害生防菌的首选之一。利用对峙培养法,测定8个木霉菌菌株对3个橡胶树红根病病原真菌的体外拮抗作用,并对筛选出来的木霉菌进行相互间的对峙培养分析。结果表明:有6个木霉菌对3个红根病病原菌具有显著拮抗效果;所选出的6个木霉菌之间尽管多数可以共存,但存在空间和营养竞争,尤其是棘孢木霉,很容易被其它木霉菌抑制和侵占,因此,在今后使用时不适宜混配。该实验结果可为进一步筛选和利用生防菌防治橡胶树根部病害提供理论依据。

橡胶树红根病菌Fip-gpo基因的克隆及启动子分析

为预测橡胶树红根病菌(Ganoderma pseudoferreum)真菌免疫调节蛋白基因的序列特点和表达模式,采用同源克隆获得Fipgpo的c DNA和DNA的全长序列。结果表明:该基因编码区全长934 bp,编码111个氨基酸残基,分子量为12.54 k D,等电点4.66,有4个ATM磷酸化位点,与赤灵芝(G.lucidum)的Fip序列相似性为91%;其启动子区域含有59 bp的内含子,除了含有TATA-box、CAAT-box基本元件外,还含有参与光应答/调控元件、赤霉素响应元件、茉莉酸甲酯应答元件、厌氧诱导作用元件、调控在胚乳中特异表达的顺式作用元件、分生组织特异激活顺式元件及生长素反应元件。推测Fip-gpo基因的表达受激素、非生物诱导、光照等的调控。

橡胶树红根病菌具有差异化的营养需求

将分离自云南、海南两地的9株橡胶树红根病菌,分别在面粉培养基,MS培养基及二者各一半混合而成的培养基(1/2 MS)上培养,结果发现,其中7个菌株在1/2 MS上生长最佳,2个菌株在面粉培养基上生长最佳。同时,5个菌株在MS培养基上生长最慢,3个菌株在面粉培养基上生长最慢,一个菌株在1/2 MS培养基上生长较慢,这说明橡胶树红根病菌具有差异化的营养需求,而1/2 MS可以作为最有利于红根病菌生长的培养基。另外,病原菌在3种培养基上具有不同的形态特征,而且在1/2 MS培养基上最早出现黄化色变。

橡胶树根-土界面摩阻效应试验研究

研究了橡胶树根表面与土体之间的摩阻效应,推导出树根抗拉拔力的公式,并估测橡胶树根表面与土体的摩擦系数为0. 172～0. 222,根据土体的固结压缩程度和根-土界面的摩阻力成正相关的线性关系,设计橡胶树根-土界面摩阻效应试验.试验结果表明,根部直径和树根埋深与抗拉拔力呈线性关系,土体固结时间和抗拉拔力呈正相关对数函数关系,在相对较短的时间内,固结载荷与抗拉拔力成线性关系.

不同培养基对橡胶树红根病菌的生长影响

将7个橡胶树红根病菌(Ganoderma pseudoferreum)不同株系,分别在玉米培养基(CMA培养基),PDA培养基,PDA + 胡萝卜培养基,1/2(MS + CMA)培养基(玉米和MS培养基二者各一半混合而成的培养基)上培养,结果发现,其中5个菌株在CMA培养基上生长最佳,2个菌株在PDA + 胡萝卜培养基上生长最佳。同时,3个菌株在1/2(MS + CMA)培养基上生长最慢,2个菌株在CMA培养基上生长最慢,2个菌株在PDA+胡萝卜培养基上生长较慢,这说明橡胶树红根病菌营养需求具有差异性,但也有一定的共性,PDA + 胡萝卜培养基可以选为红根病菌生长的较好培养基。本研究结果为筛选合适的红根病菌培养基,探寻病原菌的生理代谢途径及病害防控奠定基础。

75%十三吗啉乳油防治橡胶红根病田间药效试验

应用75%十三吗啉乳油防治橡胶红根病的田间药效试验结果表明:应用75%十三吗啉乳油50、100和150倍液,第2次药后30 d,防治效果分别为80.73%、76.33%和67.61%;第3次药后30 d,防效分别提高到83.82%、78.93%和71.91%,可见,75%十三吗啉乳油对已发红根病的橡胶树具有很好的防治效果,既起保护作用,也有治疗效果。

橡胶树根病的发生及综合防治措施

橡胶树是澜沧县的主要支柱产物之一,橡胶树根病是一种传染性根系传播病毒,橡胶树根病的发生,轻者直接影响橡胶树的正常生长,重者导致整个植株的死亡,造成橡胶树产量下降,品质降低,影响胶农的收入。介绍橡胶树根病的症状和发生规律,并提出综合防治措施,以供参考。

用胶乳生产橡胶石棉盘根的探索

用水溶性氯丁胶乳代替（汽）油溶性胶浆生产橡胶石棉盘根，产品质量提高，且因不用天然橡胶和汽油而具有较好的社会、经济效益。

枯草芽孢杆菌菌株Czk1挥发性物质的抑菌活性及其组分分析

【目的】明确橡胶树内生枯草芽孢杆菌菌株Czk1挥发性物质的抑菌活性及其组分,为橡胶树病害的生物防治提供参考。【方法】以橡胶树红根病菌GP010为指示菌,分别以5种不同培养基LB、TSB-YE、TSB、NB和PDA为营养来源,利用双皿对扣法和菌丝生长速率法评定不同营养条件下Czk1挥发性物质对病原菌的作用活性强弱,筛选产抑菌挥发性物质的最优培养基;通过双皿对扣法测定Czk1挥发性物质对橡胶树5种根病菌(红根病菌、褐根病菌、白根病菌、紫根病菌和臭根病菌)和橡胶树炭疽病菌的抑菌活性,并利用顶空固相微萃取—气相色谱—质谱法(HSSPME-GC-MS)鉴定Czk1的挥发性物质组分。【结果】在LB培养基中,Czk1在不同浓度下的抑菌活性均优于其他培养基,是Czk1产抑菌挥发性物质的最优培养基。Czk1挥发性物质对6种参试病原菌均表现出良好的抑制作用,Czk1菌液浓度为105 CFU/mL时抑制率均在50.00%以上,Czk1菌液浓度为108 CFU/mL时抑制率在90.00%以上;Czk1挥发性物质可抑制紫根病菌、炭疽病菌和臭根病菌色素的产生,促进褐根病菌产生色素,并导致紫根病菌、褐根病菌和炭疽病菌菌丝生长畸形;其对橡胶树炭疽病菌孢子萌发抑制率为71.30%;其在土壤中对橡胶树红根病菌和褐根病菌仍具有较好的抑菌效果,抑制率分别为63.37%和54.57%。利用HS-SPME-GC-MS对Czk1所产挥发性物质组分进行分析,共分离鉴定获得包括碳氢化合物、胺类、醇类、烯类、酚类、酯类、吡嗪类、醛类、酮类及其他类等33种挥发性物质。【结论】Czk1所产挥发性物质可作为生防资源应用于橡胶树病害防治。

橡胶褐根病拮抗放线菌17-7的筛选、鉴定及发酵条件优化

[背景]由有害木层孔菌(Phellinus noxius Corner)侵染引起的橡胶树褐根病是严重危害橡胶树的一类病害,给橡胶产业造成巨大的经济损失。[目的]从橡胶树根际土壤中筛选对橡胶树褐根病菌具有高拮抗活性的放线菌菌株,为该病害生防药剂的研发提供基础。[方法]采用稀释涂布法分离放线菌,平板对峙法、抑制菌丝生长速率法筛选拮抗菌株,通过培养特征、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析确定其分类地位;利用单因子试验和正交试验相结合确定其最优发酵配方及培养条件。[结果]筛选到一株对橡胶褐根病具有较强抑制作用的放线菌菌株17-7,其对橡胶树上的5种病原菌均有较好的抑制作用。菌株17-7与桑树链霉菌(Streptomyces samsunensi)亲缘关系较近,且形态特征、培养特征和生理生化特征基本相符。该菌株最优发酵配方和培养条件分别为:葡萄糖20.0 g/L、大豆粉25.0g/L、KH2PO4 1.0g/L、NaCl 0.5 g/L、CaCO30.5g/L,培养基装瓶量为150 mL/500 mL,起始pH 8.0,摇瓶培养转速为140 r/min,接种量为10%,培养温度为28℃,培养时间为5 d。[结论]菌株17-7被鉴定为桑树链霉菌(Streptomyces samsunensi),其对橡胶褐根病具有较强的拮抗作用。

Study on the Explant Disinfection of Root Culture of Hevea brasiliensis

[Objective] The aim was to look for an effective way of decreasing explants contamination in the root tissue culture of Hevea brasiliensis.[Method] In order to study root tissue culture of H.brasiliensis,new roots from forest section after treatment for one month were as explants,and 1 g/L carbendazim,75% ethanol,0.1% mercuric chloride and Yipeilong with different concentrations were used as disinfectants for roots disinfection.[Result] Before conventional disinfection,root explants were treated by 1 g/L carbendazim for 2.5 h,and disinfected by 75% ethanol for 30 s and 0.1% HgCl2 for 6 min,then cultured on the callus induction medium supplemented with 0.1% Yipeilong.The results showed that the contamination rate of explants decreased to 44.59%,and 25.60% explants survived after cultured for 30 d.[Conclusion] The study could provide theoretical foundation for the decrease of explant contamination in the root tissue culture of H.brasiliensis.

巧用承压盒五例

自然仪器“物体沉浮实验盒”中有一个承压盒。我通过实践,发现它除了可以用来测气体、液体压力外,还有以下妙用: 1.自制医用听诊器 所需器材是:一个承压盒,三根橡胶管(20CM左右),一支丫形管,一块橡皮膜,一根橡皮筋。做法是:将橡皮膜蒙在承压盒上,在盒上接一根橡胶管,橡胶管另一头接丫形管下端,丫形管上端分别接两根橡胶管。使用时,将丫形管上的两根橡胶管塞入耳中,将承压盒的橡皮膜压在心脏处或胸部其它部位,则心跳和呼吸声清晰可闻。其效果并不比市售的听诊器差多少,如果想套在耳上不掉下,则可在橡胶管端安上弯曲的塑料管作为耳塞。

在学生的惊喜与掌声中想到的

上学期的自然课堂教学中,曾有多次学生在惊喜之余情不自禁地鼓起掌来。第一次是学习《正电和负电》一课的“同种电相互排斥,异种电相互吸引”的内容,当同学们在实验操作中发现用毛皮摩擦过的橡胶棒与用丝绸摩擦过的玻璃棒接近时相互吸引、用毛皮摩擦过的两根橡胶棒或用丝绸摩擦过的两根玻璃棒接近时相互排斥的现象时,同学们欣喜若狂,情不自禁地鼓起掌来。第二次是学习“

橡胶园根部病害的菌物生态

引起橡胶树根腐病害的大型真菌主要有担子菌门层菌纲、子囊菌门核菌纲的一些真菌。这些大型根腐真菌所致植物病害主要有红根病、褐根病、黑根病、白根病、紫根病、臭根病及黑纹根病等,大多病害较难防治且危害严重,可导致植株死亡,但是症状不明显而往往被忽视。基于此,主要记述橡胶树红根病和白根病的生物学特性、危害特征、防治措施和近几年的研究进展。

橡胶树红根病菌GPFTR1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

高亲和性铁通透酶FTR1是参与铁元素由胞外转移到胞内过程的重要铁转运蛋白。为了解橡胶树红根病菌(Ganoderma pseudoferreum (Wakef.) V. Over. et Steinm)的高亲和性铁通透酶编码基因GPFTR1,通过同源克隆技术,从橡胶树红根病菌中克隆得到GPFTR1的基因序列,并对其编码的氨基酸序列进行蛋白理化性质分析、保守结构域及跨膜区分析和系统进化树分析,并构建植物表达载体pBIN-GPFTR1-GFP进行该蛋白的亚细胞定位分析。利用生长速率法测定己唑醇和青蒿琥酯对橡胶树红根病菌的抑制率,并在EC50条件下进行橡胶树红根病菌的GPFTR1基因表达分析。结果表明,该基因编码区全长1 191 bp,编码396个氨基酸,推测其分子量为43.23 kD,等电点为6.92,为疏水性蛋白,具有保守基团REXLE和7个跨膜结构域;系统进化树分析显示GPFTR1与紫芝(Ganoderma sinense J. D. Zhao, L. W. Hsu&X. Q. Zhang)同类基因(登录号PIL27756.1)的亲缘关系最近,氨基酸同源性为89%;亚细胞定位结果显示GPFTR1蛋白定位在细胞膜上;生长速率法测定己唑醇和青蒿琥酯EC50分别为0.192 mg/L、26.288 mg/L;实时荧光定量PCR技术检测到GPFTR1蛋白编码基因分别在红根病菌受己唑醇和青蒿琥酯胁迫处理6 h和4 h表达量最高。为进一步研究橡胶树红根病菌GPFTR1基因功能提供了理论参考,对橡胶树红根病的防治具有重要意义。