利用根部真空侵染法在烟草中瞬时表达外源蛋白

由于植物瞬时表达系统具有经济、安全、快速、高效的特殊优势,已经成为药用蛋白表达和生产的最理想的"分子工厂"。我们利用根部真空侵染法在烟草(Nicotiana tabatum L.)中瞬时表达了报告基因GFP,并利用半定量RT-PCR和Western Blot对外源蛋白的表达水平进行了分子水平上的检测。结果表明外源蛋白GFP在烟草(N.tabacum)中成功获得了表达。此外,我们优化了新表达体系的各种侵染条件,为利用新型生物技术生产药用蛋白提供了帮助。

真菌免疫调节蛋白FIP在烟草中的瞬时表达

当短时间内需要高水平的基因表达时,采用病毒载体介导的植物瞬时表达系统是具有一定优势的。本研究中我们构建了植物瞬时表达载体p35S-30B-FIP,并将表达载体转化农杆菌EHA105,建立了植物瞬时表达体系。利用一种瞬时表达体系的新型农杆菌侵染技术(根部真空侵染法)在烟草(Nicotiana tabatum L.)中进行真菌免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)的瞬时表达,并采用Trizal法提取植物总RNA进行了半定量RT-PCR检测。研究结果表明:外源蛋白FIP在烟草(N.tabacum)中获得了瞬时表达。本研究为新型农杆菌侵染技术的利用以及药用蛋白的生产奠定了实验基础。