西格列汀+二甲双胍治疗2型糖尿病的价值研究

探究西格列汀+二甲双胍治疗2型糖尿病的效果。方法 样本来源于2023.1-2024.1于我院就诊的100例2型糖尿病患者,双盲法分组,对照组50例行单一二甲双胍治疗,观察组50例行西格列汀+二甲双胍治疗,对比疗效差异。结果 对比治疗有效率,观察高于对照,P<0.05;对比血糖,治疗前P>0.05;治疗后均有降幅,且观察低于对照,P<0.05;对比胰岛功能,治疗前P>0.05;治疗后均有变化,且观察HOMA-β高于对照,FINS、HOMA-IR低于对照,P<0.05;对比血脂,治疗前P>0.05;治疗后均有变化,且观察优于对照,P<0.05;对比不良反应率,两组无显著差异P>0.05。结论 西格列汀+二甲双胍治疗2型糖尿病,控糖显著,对胰岛功能、血脂均有改善,且药毒性未增加,安全性良好,值得推广。

琥珀酸曲格列汀对糖尿病模型小鼠胆汁酸代谢的影响

目的 探讨琥珀酸曲格列汀对2型糖尿病(T2DM)胆汁酸代谢的影响。方法 将18只db/db小鼠随机分成模型对照组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组,每组6只,C57小鼠6只为对照组。琥珀酸曲格列汀组给药剂量为17.29 mg·kg^(-1),每周1次,磷酸西格列汀组剂量为16.71mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药8周。苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠的胰腺和肾脏组织病理状态;Real-time PCR和Western blotting法测定小鼠肝脏CYP7A1、法呢醇X受体(FXR)和小异二聚体伴侣(SHP)的mRNA和蛋白表达水平;基于靶向代谢组学检测小鼠回肠内容物中69种胆汁酸的含量。结果 与模型对照组比较,琥珀酸曲格列汀组和磷酸西格列汀组胰腺和肾脏组织病理状态改善;琥珀酸曲格列汀组和磷酸西格列汀组CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);琥珀酸曲格列汀组FXR mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),而磷酸西格列汀组FXR mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);琥珀酸曲格列汀组SHP mRNA和蛋白表达水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),磷酸西格列汀组对SHP mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);琥珀酸曲格列汀组去甲胆酸(NCA)、猪脱氧胆酸(HDCA)、牛磺猪去氧胆酸(THDCA)和α-鼠胆酸(αMCA)显著下调,牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)显著上调;磷酸西格列汀组NCA、HDCA、αMCA、THDCA、牛磺脱氧胆酸(TDCA)和牛磺α-鼠胆酸(TαMCA)显著下调。结论 琥珀酸曲格列汀可增加db/db小鼠FXR和SHP的表达,可能是因为上调TCDCA并下调了NCA和αMCA。

气相色谱法测定琥珀酸曲格列汀原料药中6种残留溶剂

本文提出了用气相色谱法测定琥珀酸曲格列汀原料药中6种残留溶剂的方法。采用毛细管色谱柱DB-624(30 m×0.32 mm×1.8μm)、程序升温方式,载气为N 2,检测器为氢火焰离子化检测器,分流比为10∶1。方法学验证结果表明残留溶剂乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺可以很好分离,6种溶剂的平均回收率为96.40%~100.9%,检测限和定量限远远低于“人用药品注册技术要求国际协调会议”规定的限量浓度,方法的精密度与溶液稳定性均满足测定要求。本方法可作为琥珀酸曲格列汀原料药中残留溶剂的有效测定方法。

LC-MS/MS法测定人血浆中曲格列汀的浓度及2种片剂药动学比较研究

目的建立测定人血浆中曲格列汀浓度的LC-MS/MS法,考察空腹和餐后条件下2种琥珀酸曲格列汀片的人体药动学特征,并初步评价其生物等效性。方法空腹8例健康受试者和餐后8例健康受试者,采用单中心、单剂量、随机、开放、双周期、双交叉试验设计,受试者单次口服琥珀酸曲格列汀片受试制剂100 mg和参比制剂(Zafatekl■)100 mg,清洗期18 d,用LC-MS/MS法测定血浆中曲格列汀的浓度,用WinNonlin7.0软件按非房室模型计算药动学参数,评价受试药物和参比药物的生物等效性。结果空腹试验受试制剂和参比制剂主要药动学参数:Tmax分别为(2.31±1.0)、(1.34±0.94)h;Cmax分别为(0.6±0.2)、(0.56±0.1)mg/L;AUC0-t分别为(6.25±1.16)、(6.14±1.08)(mg·h)/L;AUC0-∞分别为(6.34±1.17)、(6.22±1.09)(mg·h)/L。餐后试验受试制剂和参比制剂主要药动学参数:Tmax分别为(1.69±0.73)、(2.19±1.3)h;Cmax分别为(0.58±0.18)、(0.56±0.18)mg/L;AUC0-t分别为(6.28±0.97)、(6.45±0.95)(mg·h)/L;AUC0-∞分别为(6.37±0.96)、(6.56±0.94)(mg·h)/L。空腹试验受试制剂和参比制剂Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的几何均值比90%置信区间分别为83.64%~129.13%、95.18%~108.54%和95.23%~108.84%。餐后试验受试制剂和参比制剂Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的几何均值比90%置信区间分别为82.41%~131.22%、92.85%~101.92%和92.54%~101.71%。结论所建立的LC-MS/MS法能快速、准确测定人血浆中曲格列汀的浓度;两制剂在本试验空腹及餐后给药条件下Cmax不具有生物等效性。

千克级DPP-4抑制剂氢溴酸替格列汀工艺改进

以(2S)-4-氧代-2-(3-噻唑烷基羰基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(Ⅱ)和1-(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)哌嗪(Ⅲ)为原料、三乙酰氧基硼氢化钠(Ⅴ)为还原剂、甲苯为溶剂,通过胺化还原、脱保护成盐、析晶改进了千克级DPP-4抑制剂氢溴酸替格列汀的合成工艺。采用FTIR、LC-MS、XRD、1HNMR及旋光仪对产物进行了表征和测试。胺化还原和脱保护成盐反应的最佳合成工艺条件为:n(Ⅱ)∶n(Ⅲ)∶n(Ⅴ)=1.0∶1.0∶1.5,反应时间2~3 h。在该条件下,中间体3-({(2S,4S)-1-叔丁氧羰基-4-[4-(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-1-哌嗪基]-2-吡咯烷基}甲酰基)噻唑烷(Ⅳ)的HPLC纯度为98.40%;当n(Ⅱ)∶n(Ⅲ)∶n(HBr)=1.0∶1.0∶3.5、反应时间4 h、析晶温度为0~5℃时,产物总收率为88.33%,HPLC纯度为99.95%,比旋光度[a]_(D)^(20)=–32.5°。

琥珀酸曲格列汀对2型糖尿病小鼠肠道菌群的改变

目的:研究琥珀酸曲格列汀对2型糖尿病小鼠肠道菌群的影响。方法:16S rRNA高通量测序法对健康组、T2DM组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组小鼠肠道菌群进行测序,利用QIME对数据进行过滤,对物种进行分类和注释。对样品的Alpha多样性指数和Beta多样性指数进行了分析,比较4组的样本菌群丰富度和多样性。结果:结果表明健康组、T2DM组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组小鼠肠道菌群结构差异具有统计学意义。与健康组相比,T2DM组的厚壁菌门与拟杆菌门的比值降低,与琥珀酸曲格列汀组比较,T2DM组的Cyanobacteria、Verrucomicrobia、Tenericutes差异具有统计学意义(P<0.05);T2DM组候选生物标志物可能是:Bacilli、Lactobacillales、Lactococcus、Streptococcaceae;琥珀酸曲格列汀组候选生物标志物可能是:Bacteroidia、Bacteroidetes、Bacteroidales、Prevotella、Paraprevotellaceae、Parabacteroides、Porphyromonadaceae;磷酸西格列汀组候选生物标志物可能是:Lactobacillus、Lactobacillaceae、Helicobacter。结论:使用琥珀酸曲格列汀改善小鼠肠道菌落,可能通过改善肠道菌群而达到降糖效果。

琥珀酸曲格列汀对db/db小鼠CYP450酶和药物转运体的影响

目的探讨琥珀酸曲格列汀对db/db小鼠肝组织中2种主要的CYP450酶(CYP3A4、CYP2D6)和3种药物转运体(GLUT2、MRP2、NTCP)的表达水平的影响。方法将18只db/db小鼠随机分成模型对照组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组,6只C57小鼠为正常对照组。琥珀酸曲格列汀组每周灌胃给予琥珀酸曲格列汀17.29 mg·kg^(-1),磷酸西格列汀组灌胃给予磷酸西格列汀16.71 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药8周。苏木精-伊红(HE)染色观察琥珀酸曲格列汀对db/db小鼠肝组织病理学是否有改善作用;酶联免疫吸附测定实验(ELISA)法测定各组糖化血红蛋白水平以评价db/db小鼠的糖化血红蛋白是否相对于C57健康小鼠升高,并探讨琥珀酸曲格列汀能否降低糖化血红蛋白;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各小鼠肝组织中CYP3A4、CYP2D6、GLUT2、MRP2和NTCP的mRNA水平和蛋白表达情况。结果与模型对照组比较,琥珀酸曲格列汀组肝组织病理状态改善,肝细胞空泡变性减轻;CYP3A4 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05),而CYP3A4蛋白表达水平显著升高(P<0.01);CYP2D6 mRNA和蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);GLUT2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);MRP2 mRNA和蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);NTCP mRNA表达水平无明显差异(P>0.05),而NTCP蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论琥珀酸曲格列汀可增加db/db小鼠的CYP3A4、GLUT2和NTCP的表达,而对CYP2D6和MRP2的表达无影响。

高效液相色谱法测定琥珀酸曲格列汀片的含量

目的建立琥珀酸曲格列汀片含量测定的高效液相色谱方法。方法采用安捷伦C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱;以甲醇-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g,加水溶解并稀释至1000m L,加三乙胺2m L,用磷酸调节p H值至5.5）（30∶70）为流动相,流速：1.0m L·min-1,检测波长277nm。结果琥珀酸曲格列汀的线性范围为20-200μg·m L-1,r=1.0000,平均回收率为99.5%,RSD为0.58%（n=9）。结论该方法简便灵敏、结果准确,适用于琥珀酸曲格列汀片的质量控制。

HPLC法同时测定琥珀酸曲格列汀中9个杂质的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定琥珀酸曲格列汀中9个杂质的含量。方法:采用Welch Utimate AQ C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长230 nm。结果:该药与已知杂质Ⅰ~Ⅸ色谱峰之间的分离度良好;该药和已知杂质Ⅰ~Ⅸ分别在各自的线性范围内线性关系均良好(r^(2)≥0.9999),杂质Ⅰ~Ⅸ的校正因子分别为1.3、0.9、0.5、1.2、1.2、1.0、2.1、2.3、1.0,且该药和已知杂质Ⅰ~Ⅸ的平均回收率均在99.0%~101.0%。结论:该方法专属性强,重复性好,可用于测定该药中的有关物质。

离子色谱法测定琥珀酸曲格列汀中琥珀酸含量

目的建立离子色谱法测定琥珀酸曲格列汀中琥珀酸含量的分析方法。方法色谱条件:Dionex IonpacTM AS11-HC(4.0×250 mm)为分析柱;Dionex IonpacTM AS11-HC(4.0×50 mm)为保护柱;20.00 mmol·L^-1 KOH溶液为淋洗液以流速1.00 mL·min^-1等度洗脱;柱温为30℃;检测池温度为35℃;抑制器电流:50m A;进样量为25μL。结果琥珀酸在浓度为0.10~3.00μg/m L范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8);检出限和定量限分别为0.03μg/mL、0.1μg/mL;回收率为99.3%(RSD=1.30%,n=9;稳定性琥珀酸峰面积的RSD为1.40%,25.5 h)。

琥珀酸曲格列汀的合成工艺研究

目的:对琥珀酸曲格列汀的合成路线进行工艺优化。方法:以4-氟-2-甲基苯甲腈为起始原料,经溴代、缩合、取代、成盐4步反应,得到目标产物琥珀酸曲格列汀。结果:通过优化后的合成工艺,总收率可达47.1%,纯度达到99.90%以上。结论:改进后的合成工艺反应条件温和,操作简便,经济环保,更适合工业化生产。

正相高效液相色谱法测定琥珀酸曲格列汀中的(R)-3-氨基哌啶

建立琥珀酸曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶测定的正相高效液相色谱分析方法,用于琥珀酸曲格列汀中对起始原料(R)-3-氨基哌啶盐酸盐残留的质量控制。采用CHIRALPAK AD-H(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以正己烷-无水乙醇(80:20)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;检测波长为210 nm。(R)-3-氨基哌啶在0.10~3.03μg/mL范围与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9993;检测限为0.03048μg/mL,加标平均回收率100.5%(n=15)。本文建立的方法准确、灵敏、可靠,适用于琥珀酸曲格列汀中杂质(R)-3-氨基哌啶含量的检测。

琥珀酸曲格列汀合成路线改进

本文对琥珀酸曲格列汀的合成路线进行了改进。用2-氰基-5-氟苄醇代替刺激性强、对人伤害大的2-氰基-5-氟苄溴,并采用"一锅煮"法合成中间体1,简化了操作。本文描述工艺为工业放大提供了一条可行的路线。

一种替格列汀关键中间体的合成方法

该工艺以L-羟基脯氨酸(HYP)为起始原料,制备了替格列汀关键中间体(2S)-4-氧代-2-(3-噻唑烷基羰基)-1-吡咯烷羧酸叔丁酯(TES)。该过程首先通过酯化反应得到(2S,4R)-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(TES-1),然后二碳酸二叔丁酯(Boc)保护得到(2S,4R)-N-Boc-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(TES-2),经次氯酸钠/四甲基哌啶氮氧化物(TEMPO)体系氧化得到Boc-4-氧代-L-脯氨酸甲酯(TES-3),最后通过氨酯交换得到目标产物TES。

RP-HPLC法测定琥珀酸曲格列汀的有关物质及酸降解杂质的LC-MS/MS分析

目的：建立高效液相色谱法测定曲格列汀的有关物质,并对酸降解产生的主要杂质进行了结构推证。方法：采用sepax C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相A为0.05 mol·L^-1乙酸铵缓冲盐,流动相B为乙腈,梯度洗脱;检测波长为230 nm;流速为1 m L·min^- 1;柱温30℃;曲格列汀样品进样量为20μL。ESI电离源,负离子模式。结果：在该条件下曲格列汀和各有关物质峰分离良好;琥珀酸曲格列汀在0.001-2 mg·m L^-1浓度范围内（r=0.999 9,n=6）,浓度和峰面积呈良好的线性关系;本法的定量限（S/N=9）为0.3μg;检测限（S/N=3）为0.1μg;解析出酸破坏后主要增加杂质结构为2-[（3-甲基-2,4,6-三氧代四氢嘧啶-1（2H）基）-甲基]-4-氟苯甲腈。结论：本方法简便、准确、灵敏、可靠,能有效测定琥珀酸曲格列汀中有关物质的含量。

DPP-4抑制剂曲格列汀治疗2型糖尿病的临床应用评价

目的:拟对首个长效二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂曲格列汀(trelagliptin)进行临床应用评价。方法:通过查阅国内外最新临床研究及综述,对曲格列汀的药效学、药动学、耐受性、不良反应、市场前景等做一综述。结果:1周给药1次的曲格列汀的疗效与1天给药1次的DPP-4抑制剂阿格列汀相当,不良反应为轻度至中度,耐受性良好,患者依从性显著优于其他降糖药是该药的一大优势。结论:作为首个1周给药1次DPP-4抑制剂,曲格列汀能有效控制2型糖尿病(T2DM)患者的血糖和糖化血红蛋白浓度,且不良反应较轻,1周给药1次依从性高,具有较好的临床应用前景。

琥珀酸曲格列汀及其有关物质的UPLC Orbitrap HRMS法测定

建立了超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC Orbitrap HRMS)法测定琥珀酸曲格列汀(1)原料药及其中间体2以及位置异构体3。采用Eclipse Plus-C_(18)色谱柱,以0.05 mol/L的乙酸铵缓冲液∶乙腈(45∶55)为流动相。质谱采用加热电喷雾离子源,正离子扫描模式,扫描范围m/z 200~500,监测离子分别为[M+H]^+m/z 358.167±0.003(1)、[M+H]^+m/z 294.044±0.003(2)、[M+H]^+m/z 358.167±0.003(3)。1琥珀酸盐在100~5 000 ng/ml范围内线性关系良好,有关物质2和3在1~50 ng/ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.48%、97.51%和97.22%,RSD分别为1.63%、1.94%和2.17%;检测限均为0.01 ng/ml。本法定性可靠,定量准确,灵敏度高。

琥珀酸曲格列汀有关物质的合成

目的为了更好地对琥珀酸曲格列汀的原料药进行质量控制,合成琥珀酸曲格列汀的有关物质。方法以1-甲基巴比妥酸为起始原料,经氯代、取代反应得到有关物质A,A再经缩合,取代制得有关物质B,B再经一步反应得到有关物质C。结果与结论有关物质A、B、C的结构经1H-NMR和MS谱确证,本文首次报道了有关物质B和C的合成路线,该路线反应条件温和、操作简单。合成的有关物质可以作为琥珀酸曲格列汀原料药质量控制的对照品。

气相色谱法测定氢溴酸替格列汀中溴乙烷残留量

目的：建立氢溴酸替格列汀中遗传毒性杂质溴乙烷残留量的气相色谱（GC）检测方法。方法采用迪马 DM-624色谱柱（30 m×0.53 mm×3.0μm）；电子捕获检测器（ECD）；程序升温：初始柱温40℃，保持3 min，以20℃/min升温至200℃，保持5 min；进样口温度：210℃；检测器温度：210℃；载气：氮气；分流比：3∶1；进样量1μL。结果溴乙烷在0.75～6.75μg/mL与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9997），最低检测限为0.26μg/mL。平均回收率为99.4%，RSD值为0.3%（n=9）。3批氢溴酸替格列汀样品中均未检测出溴乙烷。结论该方法简便、准确，重复性好，适用于氢溴酸替格列汀中溴乙烷残留量的控制。