低密度脂蛋白受体基因NcoⅠ、apoC-Ⅲ基因SacⅠ多态性与动脉粥样硬化脑梗死的关系

目的:探讨低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因和载脂蛋白(apo)CⅢ基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(AC I)的关系。方法:用聚合酶链反应(PCR)技术检测中国辽宁籍汉族健康人104例和AC I患者77的LDL-R基因NcoⅠ、apoC-Ⅲ基因SacⅠ多态性及血脂、脂蛋白含量。结果:对照组N+及S+等位基因频率为0.667、0.274;AC I组为0.662、0.329,差异不显著(P>0.05),但AC I组S-S+与N-N+、N+N+联合存在时的频率为0.45,显著高于对照组(P<0.05),致AC I的发病相对风险率(RR)为4.2(P<0.05),致血清TG、TC、LDL-C升高的RR依次为14.30、9.40、17.40。结论:LDL-R基因N-N+、N+N+、apoC-Ⅲ基因S-S+联合存在与AC I患者血清高TG、高TC、高LDL-C相关,可能是致AC I的遗传易患因子。

葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的探讨葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法将载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机分为模型组、葛根总黄酮低剂量组、葛根总黄酮高剂量组及阿托伐他汀阳性药物组。常规生物化学法测定血清总胆固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇水平;采用主动脉根部连续石蜡切片、苏木素伊红染色观察组织形态学改变,测定载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样硬化斑块大小、动脉粥样硬化斑块与管腔面积比。结果4组小鼠共检出斑块65个,4组虽都有典型的粥样斑块或/及纤维斑块等中晚期动脉粥样硬化病变形成,但组织学观察发现模型组部分斑块体积较大,汇合成片,管壁弥漫性增厚,管腔较狭窄,而葛根总黄酮治疗组及阿托伐他汀阳性药物组动脉粥样硬化斑块病变较局限,管腔狭窄程度较轻,并且葛根总黄酮高、低剂量组及阿托伐他汀阳性药物组斑块面积与管腔面积之比值显著低于模型组(分别为0.11%±0.04%、0.27%±0.04%和0.76%±0.33%,P<0.01),葛根总黄酮高剂量组斑块面积与管腔面积比值显著低于葛根总黄酮低剂量组(P<0.01)。结论葛根总黄酮一定程度抑制载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块进展,该作用可能与降低小鼠血脂作用无明显关系。

血清载脂蛋白A5 ELISA法的建立及评价

目的建立定量测定人血清中载脂蛋白A5(apoA5)浓度的ELISA双抗体夹心法,评价该法的敏感性、特异性、批内批间变异系数(CV),并分析apoA5与血脂指标的相关性。方法方阵法确定apoA5单克隆抗体的最佳检测浓度,建立apoA5标准曲线,ELISA双抗体夹心法测定重组apoA5蛋白,确定最低检测限及批内、批间CV,并检测300例正常人apoA5浓度和血脂指标,应用百分位数法计算apoA5的参考值。结果制备的apoA5单克隆抗体的最佳检测浓度为1∶800,最低检测限为2.12μg/L;特异性检测试验表明:apoA5单克隆抗体只针对重组apoA5蛋白和血清中天然的apoA5,apoA1和BSA的A值均<0.2;批内CV<3.5%,批间CV<5.5%。血清apoA5的参考值范围为255.92～383.81μg/L。相关性分析表明:apoA5与TG呈负相关(r=-0.27,P<0.05),与TC存在负相关趋势,与HDL-C呈正相关(r=0.36,P<0.05)。结论本实验室建立的ELISA双抗体夹心法灵敏度和特异性均较好,为apoA5的临床检测提供了可行的方法。

氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激及动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激及主动脉粥样斑块中血管平滑肌细胞、巨噬细胞数量影响,探讨氯沙坦稳定斑块的作用及可能机制。方法27只8周龄雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠随机等分三组:对照组、氯沙坦低剂量组[5 mg/(kg.d)]及氯沙坦高剂量组[25 mg/(kg.d)],20周后处死动物。常规生物化学法测定血清一氧化氮含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛及血脂水平;采用HE染色法观察小鼠主动脉粥样硬化病变形成;免疫组织化学法分析粥样斑块中血管平滑肌细胞和巨噬细胞数量。结果三组间血脂水平无显著性差异;与对照组相比,氯沙坦低、高剂量组血清一氧化氮水平和超氧化物歧化酶活性均明显升高(P<0.01)、丙二醛水平显著减低(P<0.05和P<0.01),且氯沙坦低剂量和高剂量组间也有明显差异(P<0.01);氯沙坦干预后动脉粥样斑块纤维帽厚,脂质核心小;氯沙坦治疗组斑块中平滑肌细胞数量显著增加(P<0.01)、巨噬细胞数量明显降低(P<0.01),且氯沙坦高剂量组较低剂量组作用更明显(P<0.01)。结论氯沙坦在不影响血脂水平情况下,可通过减轻载脂蛋白E基因缺陷小鼠氧化应激,增加斑块中平滑肌细胞数量,降低巨噬细胞数量,可能起到稳定粥样斑块作用,且随剂量增加作用增强。

Ⅱa和Ⅱb型高脂血症血清高密度脂蛋白亚类分布及与载脂蛋白的关系

目的探讨Ⅱa和Ⅱb型高脂血症患者血清高密度脂蛋白亚类分布特征及与载脂蛋白水平的关系。方法采用双向电泳—免疫印迹检测法分析68例Ⅱa型、67例Ⅱb型高脂血症患者以及233例正常对照者血清高密度脂蛋白亚类的组成及含量。结果与血脂正常组比较,Ⅱa和Ⅱb型高脂血症组前β1高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3b、高密度脂蛋白3a含量显著增加(P<0.01),而高密度脂蛋白2a、高密度脂蛋白2b含量显著降低(P<0.01或P<0.05)。Ⅱb型高脂血症组前β1高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3a含量较Ⅱa型高脂血症组显著增加(P<0.05),而高密度脂蛋白2a、高密度脂蛋白2b含量显著减少(P<0.01)。无论是Ⅱa还是Ⅱb型高脂血症组,低载脂蛋白AI患者血清前β1高密度脂蛋白、高密度脂蛋白3c、高密度脂蛋白3b、高密度脂蛋白3a含量较高载脂蛋白AI患者显著增加(P<0.01或P<0.05),而高密度脂蛋白2a、高密度脂蛋白2b含量显著降低(P<0.01)。相关分析发现Ⅱa及Ⅱb型高脂血症患者血清载脂蛋白AI与高密度脂蛋白各亚类含量均显著正相关(P<0.01);载脂蛋白B100,载脂蛋白CⅢ与前β1高密度脂蛋白含量显著正相关(P<0.01或P<0.05),而与高密度脂蛋白2a、高密度脂蛋白2b含量显著负相关(P<0.01或P<0.05)。结论Ⅱa及Ⅱb型高脂血症患者血清小颗粒高密度脂蛋白含量显著增加而大颗粒高密度脂蛋白含量显著减少,其中Ⅱb型高脂血症患者这种改变趋势更加明显。Ⅱa和Ⅱb型高脂血症患者血清载脂蛋白尤其是载脂蛋白AI水平影响高密度脂蛋白亚类分布。

载脂蛋白E基因多态性、超敏-C反应蛋白与2型糖尿病合并冠心病的相关性探讨

目的:探讨载脂蛋白E(apoE)基因多态性、超敏C-反应蛋白(hsCRP)与2型糖尿病合并冠心病的关系。方法:采用等位基因特异性多重聚合酶链反应(PCR-multi-ARMS)技术,分别检测2型糖尿病、冠心病、2型糖尿病合并冠心病患者及正常对照人群载脂蛋白E基因多态性、hsCRP,同时结合血脂水平的测定,探讨它们之间的关系。结果:1冠心病组载脂蛋白Eε4等位基因频率明显高于对照组;22型糖尿病组,2型糖尿病合并冠心病组的载脂蛋白E基因型及等位基因频率与正常对照组分布差异无统计学意义;33组病例组别中hsCRP水平与对照组相比较均有显著性差异;2型糖尿病合并冠心病组的hsCRP水平与2型糖尿病组、冠心病组比较差异有统计学意义;4Logistic回归分析显示:hsCRP,高血压是2型糖尿病合并冠心病的独立危险因素,载脂蛋白E基因多态性不是2型糖尿病合并冠心病的重要危险因素。结论:血清中的hsCRP水平与2型糖尿病合并冠心病密切相关,联合检测hsCRP及血脂水平对早期发现2型糖尿病合并冠心病有一定意义。

载脂蛋白B基因结构变异与冠心病和血浆脂质关联程度的研究

目的 研究97例冠心病患者及90例正常人载脂蛋白B基因2个位点的限制酶切片段长度多态性(RFLP)分布情况。方法 应用聚合酶链反应扩增DNA,扩增产物采用限制性内切酶xbal及EcoR1消化。结果 在冠心病组中,xbal和EcoR1酶切位点以X^-和E^+等位基因占绝大多数,其频率为0.959和0.897,而X^+和E^-等位基因较少,其频率为0.103和0.041。冠心病组与对照组比较,TC和TG水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论ApoB基因Xbal变异可能与冠心病发病及血浆脂质水平有一定关联,ApoB基因的X^-X^-基因型变异成X^+X^-可能对冠心病临床表现有一定影响,等位基因X^+和单体型X^+E^+可以成为冠心病遗传标记。

外膜炎症诱发载脂蛋白E基因敲除鼠冠状动脉粥样硬化病灶

研究载脂蛋白E基因敲除(载脂蛋白E°)小鼠冠状动脉内粥样硬化病灶的分布、组成与动脉外膜炎症的关系.取载脂蛋白E°小鼠心脏作连续切片,Movat法染色,追踪冠状动脉主干及其心肌内的小分支;寻找病灶,观察病灶内组成,分析其分布规律.复制小鼠股动脉外膜无菌性炎症模型,用免疫组织化学方法检查内膜粘附分子的表达.结果发现,冠状动脉主干内有延伸病灶,在主干以下分支(包括心肌内小分支)内有在原位生成的病灶,在两类病灶相邻的外膜有炎性细胞浸润,外膜炎症面积大于动脉粥样硬化病灶累及的内膜面积,亦发现一些部位血管外有炎性细胞浸润,而尚无病灶形成.原位病灶均发生于心室壁,大的原位病灶多发生在左室壁心肌内、血管分支处和乳头肌附近的冠状动脉分支内.股动脉外膜炎症可诱发内膜表达细胞间粘附分子1和血管细胞粘附分子1,同时伴白细胞的附壁.以上提示:血管外膜炎症是小鼠冠状动脉内病灶的一个始动环节.

多囊卵巢综合征患者瘦素与载脂蛋白A_5的相关性研究

目的通过研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清瘦素(Leptin)和载脂蛋白A5(apoA5)之间的关系,探讨二者在多囊卵巢综合征诊疗中的作用。方法选择62例PCOS门诊患者为研究组,正常人群26例为对照组。测定血清瘦素、空腹血糖(FBG)、apoA5、空腹胰岛素(Fins)等水平,并计算胰岛素抵抗指数(HO-MA-IR)。结果 PCOS患者血清的瘦素、Fins和HOMA-IR明显高于对照组,而apoA5水平则明显低于对照组。相关性分析显示PCOS血清apoA5水平与BMI、leptin、FINS、TG和HOMA-IR之间均呈显著性负相关性。结论PCOS患者血清瘦素水平增高而apoA5含量降低,二者具有负相关,可能与胰岛素抵抗密切相关。

中青年脑梗死患者载脂蛋白B基因多态性研究

目的研究中青年脑梗死患者载脂蛋白B(Apo B)基因多态性、不同基因型的血脂水平特点。方法采用病例对照的方法对55岁以下脑梗死患者及对照组Apo B基因的EcoRI和XbaI等位基因频率及不同基因型的血脂水平进行测定。结果中青年脑梗死组E-等位基因频率(0.35),明显高于对照组(0.16),OR=2.76,χ2=4.127,P=0.042;具有E-基因型者,脑梗死组的Apo B水平明显高于对照组,t=2.375,P=0.028;而且中青年脑梗死者具有X+基因型者的TG水平明显高于X-基因型对照组及脑梗死组,P值分别为0.012和0.013。结论E-、X+等位基因型是引起中青年人脑梗死的重要危险基因型,并通过影响脂代谢而起作用。

肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1和细胞因子水平与肝功能损伤的相关性探讨

目的探讨了肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1、可溶性L-Selection(L-选择素)和SICAM-I(细胞黏附分子-I)在肝硬化时造成肝功能损害过程中的作用。方法应用免疫比浊法和酶联免疫吸附法(ELISA法)对63例肝硬化患者进行了血清中载脂蛋白ApoA_1、L-选择素和SICAM-I水平检测及相关的肝功能生化指标进行相关分析,并与30例健康对照组比较。结果血清中载脂蛋白ApoA_1水平非常显著地低于健康对照组(P<0.01),而L-选择素、SICAM-I水平则显著高于健康对照组(P<0.01),且载脂蛋白ApoA_1水平与ALT(谷丙转氨酶)、TBIL(总胆红素)呈明显负相关,L-选择素、SICAM-I水平与ALT、TBIL呈明显正相关。结论检测肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1、L-选择素和SICAM-I水平在一定程度上反映了机体的免疫功能状态和肝细胞损伤的程度,具有临床应用价值。

载脂蛋白B基因3′端可变数目串联重复序列研究进展

ApoB基因3′端可变数目串联重复序列(VNTR)具有高度多态性,是人类第2号染色体上重要的遗传学标记之一,且在血脂转运和代谢过程中发挥重要的调节作用。本文对VNTR结构特点、检测方法、在遗传学中的应用及与心血管疾病的关系作一综述。

红细胞膜载脂蛋白A_1、B及胆固醇的相关性探讨

通过高特异性、高敏感性的抗原抗体反应,应用透射比浊法,对86例健康人红细胞膜(RBC_m)载脂蛋白(apo)A_1、B及胆固醇作了测定分析,其中apoB,A_1的参考范围分别为23.25±4.02×10^(12)mg/cell、7.32±1.95×10^(12)mg/cell,胆固醇为0.28±0.44×10^(12)mmol/cell。其批内变异系数均<5％。膜胆固醇与apoA_1、B均存在显著相关性。apoA_1与apoB亦有相关性。显然,膜载脂蛋白A_1、B均与膜胆固醇的代谢有密切关系。即提示其在RBC_m与血浆脂蛋白、胆固醇交换中起到转运并维持膜胆固醇的稳定性作用。另外对40例糖尿病人(DM)的红细胞膜的apoA_1、B及胆固醇作了相应测定。结果表明RBC_m的apoA_1有显著性增高,spoB有显著性降低,而膜胆固醇无明显变化。而且其膜胆固醇/膜apoA_1有显著性降低,而膜胆固醇/膜apoB有显著性增高。

河北省保定市绝经女性载脂蛋白E与冠心病合并脑梗死的关系研究

目的检测并分析河北省保定市绝经女性中载脂蛋白E（apoE）基因多态性与冠心痛合并脑梗死的关系。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法，分析98例冠心病合并脑梗死绝经女性患者和90例健康对照者绝经女性的apoE的3种等位基因ε2，ε3，ε4，进行基因频率和基因型多态性分析。结果健康人群组apoE基因呈多态性，有6种基因型。结论河北省保定市绝经女性的冠心痛合并脑梗死患者中ε3／3、ε2／3基因型频率较低，ε4等位基因频率在绝经女性的冠心病合并脑梗死患者中增高，ε4可能是冠心病、脑梗死的遗传易患因子之一。

脂代谢变化在老年人认知功能障碍发病中的作用

目的探讨脂代谢异常在认知功能障碍病因中的作用。方法选取76例认知功能障碍患者(cognition impairmentgroup,CIG)及100例正常对照者(control group,CG),抽取其静脉空腹血,运用单克隆抗体-免疫酶联吸附法(monoclonal anti-en-zyme linked immunosorbent assay,McAb-ELISA)测定其血清载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)含量,同时测定血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(low densitylipoprotein,LDL-C)、极低密度脂蛋白(very low-density lipoprotein,VLDL-C)、载脂蛋白B(apolipoproteinB,ApoB)和载脂蛋白A(apolipoproteinA,ApoA)含量,并对结果进行比较。结果与对照组比较,认知功能障碍组TC、TG、LDL-C、VLDL-C、ApoA、ApoE水平较高,而HDL-C水平则较低,但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。认知功能障碍组的ApoB水平较对照组明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂代谢异常在认知功能障碍病因中可能发挥重要作用。

蛋白酶体抑制剂MG132诱导人巨噬细胞THP-1凋亡

泛素-蛋白酶体途径是生物体内进行蛋白质选择性降解的重要途径之一,广泛参与细胞周期调控、DNA修复、细胞信号转导、细胞凋亡等多种生理过程。为了研究调控泛素-蛋白酶体途径表达对巨噬细胞THP-1凋亡和细胞内载脂蛋白B的蓄积的影响,本实验采用蛋白酶体抑制剂MG132(5μmol/L)处理THP-1细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内载脂蛋白B含量,用半定量逆转录-聚合酶链反应检测细胞内UPP途径相关基因的表达。结果发现:MG132可以诱导THP-1细胞凋亡;实验组细胞内载脂蛋白B蓄积增加;实验组细胞内泛素活化酶、泛素缀合酶和泛素-蛋白连接酶mRNA表达均降低,而26S蛋白酶体mRNA无显著改变。结果提示,蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导THP-1细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制泛素-蛋白酶体途径中泛素活化酶、泛素缀合酶和泛素-蛋白连接酶活性,使细胞内栽脂蛋白B经泛素-蛋白酶体途径降解减少,在细胞内蓄积而使细胞凋亡率增加。

甲状腺功能减退症患者治疗后的血脂水平变化

目的 :探讨甲状腺功能减退症患者甲状腺激素治疗后的血脂变化。方法 :5 2例患者给予甲状腺片口服治疗 ,每日 2 0～ 80mg ,治疗前及甲状腺功能恢复正常后分别检测总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白 (a) [Lp(a) ] ,低密度脂蛋白 (LDL C)经公式换算得出数值。结果 :TC、LDL C、ApoB、Lp(a)经治疗后显著降低 ,分别降低 3 0 %、42 %、40 %、47% ,TG、HDL C、ApoA1变化不大。结论 :甲状腺功能减退症患者经甲状腺片治疗后使血浆TC、LDL C、ApoB、Lp(a)

高血压病患者餐后血脂水平的动态分析

目的 :探讨高血压病患者脂肪餐后血脂的代谢变化。方法 :测定 37例原发性高血压患者和 4 5例正常血压者空腹、脂肪餐后 2 h、4 h、6 h、8h的血清甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TC)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- C)、低密度脂蛋白胆固醇 (L DL - C)、脂蛋白 (a) [L p(a) ]、载脂蛋白 A1 (Apo A1 )和载脂蛋白 B(Apo B)。结果 :高血压病组空腹及餐后各时间点的 TG和 TC曲线下面积均显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;高血压病组餐后 2 h、4 h、6 h、8h的 HDL - C降低 (P<0 .0 5 ) ,TC、HDL- C、Apo B则显著升高 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1,P<0 .0 1)。结论 :高血压病患者脂肪餐后 TG水平异常升高 ,伴 HDL- C的降低是其血脂代谢异常的重要内容之一。

非酒精性脂肪性肝病的临床特点和相关危险因素

目的:探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的相关危险因素和临床特点,为 NAFID 的早期诊断、预防、治疗提供科学的依据。方法:运用回顾性的病例对照研究,结合多元 Logistic 回归分析,探讨 NAFLD 的相关危险因素和临床特点。结果:BMI、舒张压、高脂饮食、甘油三脂(TG)、载脂蛋白 B(ApoB)等5个因素为 NAFLD 独立危险因素,高密度脂蛋白(HDL)为 NAFLD 的保护因素。NAFLD 组血清转氨酶异常率与对照组相比差别有统计学意义。重度脂肪肝与轻中度脂肪肝相比主要以转氨酶和尿酸(UA)的升高为主。肥胖、Ⅱ型糖尿病、心脑血管疾病、高脂血症等为 NAFLD 的伴发疾病。结论:控制体重,改变生活方式,定期体检为预防 NAFLD 的重要措施。