桃仁膝康丸对骨性关节炎相关细胞因子和软骨细胞凋亡的影响

目的:用细胞学方法探讨桃仁膝康丸治疗骨性关节炎的作用和机制。方法:人滑膜成纤维细胞采用肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)-α诱导建立急性炎症模型,采用脂多糖诱导建立巨噬细胞M1极化模型,人软骨细胞采用CoCl_(2)诱导建立缺氧凋亡模型,通过CCK-8法检测桃仁膝康丸对细胞的毒性,Western Blot检测全长基质金属蛋白酶9(Full-length Matrix Metalloproteinase-9,Full MMP9)、裂解基质金属蛋白酶9(Cleaved Matrix Metalloproteinase-9,Cleaved MMP9)、TNF-α、白细胞介素(Interleukin,IL)-6、全长半胱氨酸蛋白酶3(Full Caspase-3)和裂解半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)的表达。结果:1μL/mL及以下浓度的桃仁膝康丸不影响细胞活力;Western Blot结果显示,桃仁膝康丸显著抑制滑膜成纤维细胞MMP9生成、活化,以及M1巨噬细胞炎症因子生成和软骨细胞Caspase-3活化。结论:桃仁膝康丸可通过抑制基质降解酶的生成与活化、炎症因子的生成及软骨细胞凋亡发挥治疗骨性关节炎功能,其机制涉及软骨基质降解、炎症生物学过程和细胞凋亡通路,验证了网络药理学分析结果。

桃仁膝康丸治疗骨性关节炎机制的网络药理学分析与验证

目的:以网络药理学方法探讨桃仁膝康丸治疗骨性关节炎的可能作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)搜索和筛选出桃仁膝康丸活性成分及作用靶点,检索GeneCards、OMIM和CTD数据库获得与骨性关节炎相关的非重复靶点,取交集获取中药抗骨性关节炎相关的药物活性成分靶点,使用String软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,利用Cytoscape 3.8.2软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图,筛选核心靶点和构建药物-活性成分-骨性关节炎相关靶点网络;借助DAVID数据库进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;将活性成分与预测疾病核心靶点进行分子对接验证;免疫印迹法(Western Blot)验证对细胞凋亡效应蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase,CASP)3靶点的干预。结果:从桃仁膝康丸中筛选出53个活性成分,主要作用于骨性关节炎相关55个的靶点,靶标作用主要涉及细胞凋亡、炎症、细胞自噬、细胞老化、活性氧代谢、免疫生物过程和通路;分子对接结果发现活性成分与核心靶标结合性能良好;Western Blot结果显示,桃仁膝康丸能显著抑制CASP3活化。结论:桃仁膝康丸治疗骨性关节炎是多靶点、多通路的复杂机制过程,可能主要与抗细胞凋亡、抗炎、诱导细胞自噬、阻滞细胞老化、抗氧化、抑制免疫相关。

桃仁膝康丸治疗膝骨性关节炎分期组方研究

桃仁膝康丸是多年来被用于治疗膝骨性关节炎的医院制剂,实践表明其药少力专,疗效显著,因此探索桃仁膝康丸组方的特点,可以为该药更好地在临床中应用奠定理论基础。此文在中医药理论的指导下,将膝骨性关节炎分早、中、晚三期进行施治,早期瘀血实证多以“破”为主;中期经络通而不畅,脏腑气血津液偏颇,多以“和”为主,使之处于“阴平阳秘”的状态;后期以“补”为主,久病导致的肝脏亏虚、气血不足,故应重视气血补养和肝肾的滋补。通过三期辨证用药,动态治疗膝骨性关节炎。

桃仁膝康丸质量标准研究

目的建立桃仁膝康丸的质量标准。方法用薄层色谱法对桃仁膝康丸中独活、乳香、白芍、牛膝进行定性鉴别,用高效液相色谱法测定桃仁膝康丸中三七人参皂苷Rg1的含量,采用色谱柱Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：以乙腈为流动相A,水为流动相B,进行梯度洗脱：0-12 min乙腈-水（19∶81）,12-15 min乙腈（19%→20%）,15-18 min乙腈（20%→23%）,18-30 min乙腈（23%→27%）;检测波长为203 nm;流速1.0 mL.min-1;柱温30℃,理论塔板数以人参皂苷Rg1计不低于3000。结果薄层色谱鉴别法能定性鉴别独活、乳香、白芍、牛膝,斑点清晰,分离度好,专属性强,且阴性无干扰。含量测定项中人参皂苷Rg1在2.20-11.01μg间呈良好的线性关系,r=0.999 9;平均加样回收率为99.49%,RSD为1.52%。结论该方法简便、准确、精密度高、重现性好,可作为桃仁膝康丸的质量控制标准。

桃仁膝康丸内服配合运动疗法治疗膝骨关节炎疗效观察

目的:观察桃仁膝康丸配合运动疗法治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法 :将148例患者随机分成观察组和对照组,观察组采用桃仁膝康丸内服配合运动疗法治疗,对照组采用关节腔注射玻璃酸钠配合运动疗法。结果:观察组有效率占90.90%,对照组有效率占93.39%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:桃仁膝康丸内服配合运动疗法治疗膝骨关节炎疗效良好,值得推广应用。

桃仁膝康丸联合玻璃酸钠治疗膝关节骨关节炎

目的:观察自制的桃仁膝康丸联合关节腔内注射玻璃酸钠治疗膝关节骨关节炎的疗效。方法:将56例膝关节骨关节炎的病人随机分为治疗组及对照组,治疗组采用口服桃仁膝康丸联合关节腔内注射玻璃酸钠,对照组单纯行关节腔内注射玻璃酸钠。结果:治疗组总有效率达93.33%,对照组总有效率为61.54%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:桃仁膝康丸与玻璃酸钠联合应用可起到相辅相成,相互促进的作用,疗效较单纯应用玻璃酸钠显著。

桃仁通痹丸的质量标准研究

目的建立桃仁通痹丸的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中赤芍、丹参进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对赤芍中芍药苷进行含量测定。结果薄层色谱中能检出赤芍、丹参；芍药苷在7．17～358．59μg·mL^-1范围呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为99．32％（RSD=0．44％）。，结论定性定量方法简便、准确、重现性好。该标准可用于产品质量控制。

HPLC法测定桃仁膝康丸中芍药苷的含量

目的建立桃仁膝康丸中芍药苷的含量测定方法。方法采用HPLC法测定芍药苷的含量。色谱柱Agilent C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-水(13∶87),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长230nm。结果芍药苷进样量在0.6128～3.0640μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.28%,RSD=1.59%。结论本法操作简便,重现性好,可用于桃仁膝康丸的质量控制。

桃仁膝康丸内服配合手法治疗膝关节骨性关节炎154例

目的:观察桃仁膝康丸内服配合手法治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法:采用手法配合桃仁膝康丸内服治疗154例(235膝)膝关节骨性关节炎患者。结果:痊愈55.2%,好转38.3%,总有效率93.5%。结论:桃仁膝康丸内服配合手法治疗膝关节骨性关节炎有良好的治疗效果。

桃仁膝康丸配合盐酸氨基葡萄糖治疗髌软骨软化症64例疗效观察

目的:观察桃仁膝康丸与盐酸氨基葡萄糖配合治疗髌软骨软化症的临床疗效。方法:将128例符合纳入标准的髌软骨软化症患者随机分为治疗组和对照组各64例,治疗组予桃仁膝康丸配合盐酸氨基葡萄糖治疗;对照组予盐酸氨基葡萄糖治疗。两组均以4周为1个疗程,治疗2个疗程后观察患者治疗前后WOMAC评分,评价临床疗效。结果:两组临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组临床疗效优于对照组。治疗前两组患者疼痛、僵硬、日常生活难度、WOMAC总积分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者疼痛、僵硬、日常生活难度、WOMAC总积分均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后疼痛、僵硬、日常生活难度、WOMAC总积分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:桃仁膝康丸与盐酸氨基葡萄糖配合治疗髌软骨软化症有较好疗效,可改善患者症状及膝关节功能。

桃仁膝康丸配合理疗及功能锻炼治疗膝骨关节炎临床观察

目的:观察桃仁膝康丸配合理疗及功能锻炼治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:将120例膝骨关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组60例。治疗组给予桃仁膝康丸,每次6 g,每日2次,口服;对照组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊,每次0.75 g,每日3次,口服。两组均配合理疗及功能锻炼,疗程均为4周。结果:治疗组治愈29例,好转27例,无效4例,总有效率为93.33%;对照组治愈22例,好转27例,无效11例,总有效率为81.67%。两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:桃仁膝康丸配合理疗及功能锻炼治疗骨关节炎具有较好的临床疗效。

桃仁膝康丸配合中药塌渍治疗膝骨关节炎临床观察

目的观察桃仁膝康丸配合中药塌渍治疗膝骨关节炎临床疗效。方法将100例膝骨关节炎患者随机分为治疗组与对照组,每组50例。治疗组给予桃仁膝康丸,每次6 g,每日2次,口服;患膝中药塌渍疗法,每次45 min,每日2次;对照组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊,每次0.75 g,每日3次,口服。2组均配合功能锻炼,疗程均为4周。结果治疗组痊愈10例,显效23例,有效11例,无效4例,脱落2例,总有效率为91.67%;对照组痊愈1例,显效13例,有效21例,无效14例,脱落1例,总有效率为70.83%。2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论桃仁膝康丸配合中药塌渍治疗膝骨关节炎具有较好的临床疗效。

桃仁膝康丸HPLC指纹图谱研究

目的建立桃仁膝康丸高效液相色谱指纹图谱,提供较全面评价、控制制剂质量的方法。方法采用高效液相色谱-紫外检测法分析10批桃仁膝康丸的甲醇提取物。色谱柱Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:203 nm。结果建立了桃仁膝康丸高效液相色谱指纹图谱,共标示26个共有指纹峰,10批被测样品的色谱指纹图谱整体相似度在0.9以上。结论本方法准确可靠,可有效控制桃仁膝康丸的制剂质量。

桃仁膝康丸联合腓骨截骨术治疗膝骨关节炎的疗效观察

目的:探讨桃仁膝康丸联合腓骨截骨术治疗膝骨关节炎的疗效。方法:将60例膝关节骨性关节炎膝内侧疼痛患者随机分为两组各30例,对照组进行腓骨截骨术;治疗组进行腓骨截骨术,术后第1天开始服用桃仁膝康丸,连续服用3个月。采用视觉模拟评分法(VAS)和骨关节炎指数评分法(WOMAC)作为观察指标对两组进行观察。结果:总有效率治疗组为96.7%,对照组为86.7%,治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:桃仁膝康丸联合腓骨截骨术治疗膝关节骨性关节炎有较好疗效,可缓解内侧间隙疼痛。

桃仁膝康丸对膝骨关节炎大鼠血清SOD、MDA、NO的影响

目的:探讨桃仁膝康丸治疗膝关节骨关节炎进程中对大鼠血清SOD、MDA及NO含量的影响。方法:采用随机化原则将60只2月龄健康SD大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、抗骨质增生胶囊组(C)、桃仁膝康丸组(D)4个组,每组15只。A组不予处理,B、C、D三组采用改良Hulth模型法复制大鼠膝关节骨性关节炎模型;造模1周后C、D组分别给予抗骨质增生胶囊和桃仁膝康丸进行灌胃治疗,A、B组给与等量生理盐水灌胃。治疗6周后将大鼠处死,取血清检测SOD、MDA及NO含量。结果:①模型组血清SOD含量较正常组明显降低(P<0.05);两用药组血清SOD含量比模型组明显升高(<P0.05),比正常组SOD含量明显下降(P<0.05)。②模型组血清MDA含量比正常组明显升高(P<0.05),两用药组血清中MDA含量比模型组明显降低(P<0.05),比正常组有所升高(P<0.05)。③模型组血清NO含量明显高于正常组(P<0.05);两用药组血清中NO含量比模型组明显降低(P<0.05),比正常组血清NO含量有所升高(P<0.05)。结论:桃仁膝康丸治疗膝关节骨关节炎有明显效果,可以提高血清中SOD活性,降低血清中MDA、NO水平;保护关节软骨,减轻关节软骨病理改变,从而延缓关节软骨退变,起到治疗膝骨关节炎的作用。

桃仁膝康丸激活软骨细胞自噬延缓骨性关节炎软骨退变的研究

目的观察桃仁膝康丸(TRXK)对外科手术诱导的大鼠骨性关节炎(OA)软骨退变的保护作用并探讨其与软骨细胞自噬的关系。方法将健康雄性SD大鼠40只随机分为:假手术组、模型组、TRXK组和TRXK+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,采用改良的Hulth法制备大鼠膝关节OA模型。术后2周开始TRXK组和TRXK+3-MA组给予TRXK 1.25 g·kg-1·d-1灌胃,TRXK+3-MA组同时给予3-MA 1.5 mg·kg-1·d-1腹腔注射,连续用药12周。光镜下观察软骨组织形态学变化,并进行Mankin评分,Real-time PCR法检测膝关节软骨组织中Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶13(MMP13)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)m RNA的表达,Western Blot法检测软骨组织中ULK1、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ/Ⅱ(LC3-Ⅰ/Ⅱ)蛋白质的表达。结果与模型组比较,TRXK能明显降低Mankin评分,升高软骨组织中COL2A1和Aggrecan,而降低MMP13和ADAMTS5 m RNA表达(P<0.05);另外,TRXK能提高ULK1、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白质表达(P<0.05)。结论桃仁膝康丸可以通过诱导软骨细胞自噬延缓或阻止外科手术诱导的大鼠膝关节OA的软骨退变,其激活软骨细胞自噬的机制有待进一步研究。

桃仁膝康丸基于“温”“消”“补”治疗骨性关节炎的组方分析

目的:桃仁膝康丸作为医院制剂应用于骨性关节炎的治疗,经多年临床实践表明对膝关节骨性关节炎有显著疗效,故探讨桃仁膝康丸的组方特点,为更明确地了解桃仁膝康丸的临床应用奠定理论基础。方法:本文在中医理论的指导下,结合君臣佐使的组方原则对方中14味药进行功效分析。结果:桃仁膝康丸组方合理精当,选药简约质朴,为融合"温""消""补"为一体的中药复方,该复方在用药功效上突出祛风除湿、补益肝肾的功效,活血化瘀贯彻始终。结论:桃仁膝康丸体现了治本为主、标本兼治的中医治疗原则,效果明显,值得临床在治疗骨性关节炎方面进一步推广应用。

桃仁膝康丸的薄层色谱研究

目的建立医院制剂桃仁膝康丸的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对处方中三七、白芍、当归和川芎进行定性鉴别。结果薄层色谱图中斑点显色清晰,阴性对照无干扰。结论所建立的方法重现性好,可用于桃仁膝康丸的质量控制。

桃仁膝康丸质量标准的提升研究

目的:进行桃仁膝康丸质量标准的提升研究,为制剂研发提供理论依据和技术支持。方法:在定性鉴别研究中新增了当归、川芎、细辛、防风、没药的薄层色谱鉴别;在含量测定研究中,新增了用高效液相色谱法测定桃仁膝康丸中独活的指标性成分二氢欧山芹醇当归酸酯的含量。结果:薄层色谱法能有效鉴别当归、川芎、细辛、防风、没药,斑点清晰、重现性好、方法专属性较强。含量测定中二氢欧山芹醇当归酸酯进样量在0.430~3.010μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.66%,RSD为1.01%。结论:试验方法简便、准确、精密度高,为桃仁膝康丸质量标准的提升提供理论依据和技术支持,对该制剂的质量控制和进一步研发具有重要的意义和价值。