麻黄桃仁颗粒对实验性自身免疫性甲状腺炎体液免疫作用的研究

目的:通过应用麻黄桃仁颗粒治疗实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)进行研究,来观察其对EAT小鼠体液免疫的作用。方法:联合应用甲状腺球蛋白(TG)与弗氏完全佐剂成功复制EAT小鼠模型后,随机分组实验,检测EAT小鼠血清甲状腺激素及血清甲状腺抗体水平,并进行组间比较。结果:麻黄桃仁颗粒具有抑制体液免疫系统产生自身抗体的作用,能降低血清中TGA、TMA、TPoAb含量。结论:麻黄桃仁颗粒对自身免疫性甲状腺炎具有治疗效果,能剂量依赖性抑制体液免疫。

麻黄桃仁颗粒对自身免疫性甲状腺炎小鼠血清性激素的影响

目的观察雌二醇、睾酮对自身免疫性甲状腺炎(AIT)的影响和麻黄桃仁颗粒对雌二醇、睾酮水平的干扰。方法在建立小鼠自身免疫性甲状腺炎(EAT)的基础上,将麻黄桃仁颗粒分为高、中、低剂量组,并设立模型组、对照组和正常组等,经治疗后采用双抗体放射免疫法测定各组雌二醇、睾酮水平并进行比较。结果模型组小鼠血清雌二醇水平高于正常组,而睾酮水平低于正常组,与正常组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。麻黄桃仁颗粒高、中剂量组小鼠血清雌二醇水平低于模型组,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。麻黄桃仁颗粒3个剂量血清睾酮水平与模型组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论雌二醇、睾酮对AIT有一定作用,而麻黄桃仁颗粒具有一定的降低EAT小鼠血清雌二醇水平作用。

赤芍桃仁颗粒微生物限度检查方法适用性试验研究

目的:建立赤芍桃仁颗粒的微生物限度检查方法,并对方法进行验证。方法:按照2020版《中国药典》四部通则1105、1106、1107规定,对需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数及控制菌的检查方法进行验证。结果:赤芍桃仁颗粒具有一定的抑菌性,采用培养基稀释法(1∶10,0.2mL/皿)进行需氧菌总数的计数,采用供试品溶液稀释法(1∶100,1mL/皿)进行霉菌和酵母菌总数的计数,控制菌可采用常规法检查。结论:所选方法通过微生物限度检查方法适用性试验,可用于本品的微生物限度检查。

赤芍桃仁颗粒质量标准研究

目的:建立赤芍桃仁颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对方中薏苡仁、红花、桃仁、川芎进行定性鉴别;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对芍药苷、阿魏酸进行含量测定。结果:在TLC中能检出薏苡仁、红花、桃仁、川芎的特征斑点,阴性样品无干扰。芍药苷检测浓度在48.2～482.0μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998);平均加样回收率为98.5%,RSD=2.24%(n=6)。阿魏酸检测浓度在1.36～13.55μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9996);平均加样回收率为98.4%,RSD=1.87%(n=6)。结论:本方法简单、快速、精密度高、重现性好,所建标准可用于赤芍桃仁颗粒的质量控制。

HPLC法测定桃仁配方颗粒中苦杏仁苷的含量

[目的]建立桃仁配方颗粒中苦杏仁苷的含量测定方法。[方法]采用HPLC法,色谱柱为Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(17︰83)为流动相,检测波长为210 nm,流速1.0 ml/min。[结果]苦杏仁苷在0.4004～4.004 mg/ml浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=869.0X+50.06(r=0.9998),平均回收率为101.07%,RSD为1.02%。[结论]本法简便易行、分离度高,重复性好,可用于桃仁配方颗粒中苦杏仁苷的含量测定。

基于差向异构体分离的桃仁配方颗粒中苦杏仁苷含量测定

目的:采用超高效液相色谱串联二极管阵列检测器法(UPLC-DAD)对桃仁配方颗粒中苦杏仁苷的2种差向异构体(D型与L型)分离后进行测定。方法:以Waters ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)为色谱柱,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1;检测波长为210 nm;进样体积为1μL;柱温为20℃。结果:D-苦杏仁苷与L-苦杏仁苷能有效分离,D-苦杏仁苷在质量浓度为4.08~407.92μg·mL^-1,线性回归方程为Y=0.0378 X-0.0123,r=0.9998;准确度为96.09%~104.51%。结论:本方法能准确测定桃仁配方颗粒中D-苦杏仁苷的含量。

TRIB3基因和TLR4蛋白在糖尿病血管病变中的表达及桃仁干预作用

目的:观察糖尿病大血管纤维化大鼠模型中假性蛋白激酶3(TRIB3)及Toll样受体4(TLR4)的表达情况。方法:雄性SD大鼠200只,随机选30只为对照组;余170只予高脂高糖饲料喂养,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)、高脂高糖饲料持续喂养,进行糖尿病血管纤维化造模,造模成功后选取30只为模型组,30只为桃仁干预组。前者予生理盐水10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,后者予桃仁颗粒剂水溶液10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃连续7周。7周后三组分别取材,保存标本。免疫组化法检测TLR4沉积部位,Western blotting检测TLR4表达情况,实时荧光定量PCR技术检测TRIB3基因的表达情况。结果:免疫组化检测分析,对照组及桃仁干预组大鼠血管内皮细胞及中膜平滑肌细胞中有散在黄色物质,呈弱阳性改变;模型组可见大量棕黄色物质表达呈强阳性改变。TLR4的Western blotting检测,桃仁干预组表达(0.5513±0.0432)较对照组(0.4021±0.0449)高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组(1.8342±0.0342)比较,表达明显减低,差异具有统计学意义(P<0.01);模型组与对照组比较,TLR4表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR技术检测TRIB3基因在桃仁干预组(1.3638±0.0948)较模型组(2.3241±0.0654)表达低,差异具有统计学意义(P<0.01);桃仁干预组较对照组(1.0000±0.0000)表达高,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组较对照组表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:糖尿病大血管纤维化大鼠股动脉中TRIB3基因和TLR4蛋白出现高表达,中药桃仁可以降低其表达。

桃仁膝康颗粒水提取及纯化工艺优选

目的:优选桃仁膝康颗粒的水提取及纯化工艺。方法:以芍药苷和干浸膏收率为指标,采用正交试验法,考察提取次数、提取时间和加水量对提取工艺的影响;采用水提醇沉法对提取液进行纯化,以芍药苷和干浸膏收率为指标,对乙醇体积分数进行考察。结果:最佳提取工艺为加8倍量水,提取2次,每次1.5 h;乙醇体积分数为70%。结论:优选的工艺合理可行,可为工业生产提供参考。