3种植物生长调节剂对桃儿七种子萌发特性的影响

目的:掌握珍稀藏药材桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum)种子萌发特性及休眠解除方法。方法:以采集的野生桃儿七种子为研究对象,使用3种植物生长调节剂乙烯利(ETH)、褪黑素(MLT)、赤霉素(GA_(3)),对桃儿七种子萌发特性进行研究,设置不同浸种浓度、浸种时间探究对桃儿七种子萌发特性的影响。结果:ETH最佳处理条件为10 mg·L^(-1)浸种24 h,种子第45 d时萌发率达90.0%,萌发时滞为17 d;MLT最佳处理条件为50μmol·L^(-1)浸种12 h,种子第45 d时萌发率达83.3%,萌发时滞为16 d;GA_(3)最佳处理条件为200 mg·L^(-1)浸种24 h,种子第45 d时萌发率达80.0%,萌发时滞为18 d。三者相比,ETH对促进桃儿七种子萌发效果最显著。结论:桃儿七种皮坚硬,酸蚀组和对照组种子的吸水饱和时间明显不同;种子内含有萌发抑制性物质是导致桃儿七种子休眠的主要原因;3种植物生长调节剂对桃儿七种子萌发均有显著影响(P<0.05)。本研究探讨了打破桃儿七种子休眠并提高萌发率的有效方法,可为桃儿七规模化人工栽培提供科学指导及技术支撑。

甘肃太子山保护区桃儿七资源调查与保护

桃儿七是一种多年生草本植物,药用价值较高,属于“太白七药”之一。本文对甘肃太子山国家级自然保护区开展了桃儿七调查与保护研究,查清保护区内桃儿七资源分布状况,研究其生长习性和濒危原因,并立足保护区实际,提出了加强日常巡护与经营管理、开展人工培育繁殖及合理开发利用的保护措施,以期为今后保护区内野生桃儿七资源的严格保护、科学开发利用、人工培育繁殖及更好地发展林下经济产业打下坚实基础。

小桃儿七HPLC指纹图谱的建立及5个成分含量测定

目的:建立小桃儿七HPLC指纹图谱,并测定5个乙型强心苷类成分的含量。方法:采用Thermo HyPU-RITY C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;建立HPLC指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”软件进行相似度评价,SPSS 19.0软件进行聚类分析,同时测定5个成分的含量。结果:11批小桃儿七指纹图谱确定23个共有峰,相似度均>0.900,聚类分析与相似度评价结果基本一致。5个成分在其各自进样量范围内与峰面积的线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3.00%,平均加样回收率为98.65%~99.52%,RSD为0.63%~0.95%。结论:该研究建立的方法稳定可行,可为小桃儿七药材质量控制和评价提供参考。

基于熵权TOPSIS模型的桃儿七种子超低温保存条件筛选

探索适宜桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum)种子超低温保存的条件,为桃儿七种子的长期保存提供技术支撑。以桃儿七种子为试验材料,利用硅胶干燥法、自然阴干法及浸泡法获取1.6%、9.6%、20.9%、30.5%的4种不同含水量种子,并通过直接冷冻、缓慢冷冻及玻璃化冷冻3种方式对其进行超低温保存,同时测定超低温保存前后桃儿七种子生活力及其种子内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)、可溶性淀粉、可溶性糖的含量变化。研究结果发现:(1)不同含水量的桃儿七种子经3种超低温冷冻方式保存后,种子生活力均呈现不同程度的下降,但含水量为1.6%、9.6%和20.9%的桃儿七种子经缓慢冷冻后较对照组无显著差异(P>0.05);(2)4种含水量的桃儿七种子经超低温保存后,其种子内可溶性糖和总蛋白含量总体呈上升趋势,且可溶性糖含量增幅最大,而种子内淀粉含量、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性总体呈下降趋势,但超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性在含水量为1.6%和9.6%时降幅较小,丙二醛含量在含水量为1.6%和30.5%时呈上升趋势,而在含水量为9.6%和20.9%时表现为下降趋势,说明不同含水量的桃儿七种子经液氮冷冻后均受到不同程度损伤,引起抗氧化酶活性下降,同时蛋白含量的增加和淀粉降解导致的可溶性糖含量积累又提高了种子的低温耐性,导致冷害产物丙二醛含量呈现不同的变化趋势;(3)熵权TOPSIS综合排序在前3位的分别是含水量为1.6%的玻璃化冷冻组种子、含水量为9.6%的直接冷冻组和缓慢冷冻组的种子。结果表明,桃儿七种子液氮超低温保存技术是可行的,含水量为9.6%的种子经直接冷冻或缓慢冷冻为最佳的超低温保存条件。

桃儿七种子休眠与萌发机制研究进展

休眠与萌发的调控是由种子本身的休眠水平和外界环境因素共同决定的复杂的生理生化过程,其调控伴随各种不同的休眠机制且根据植物的生存环境而演变。桃儿七根茎中鬼臼毒素含量达到2%~10%,鬼臼毒素是一种成功商品化的天然木脂素化合物,其及其衍生物在治疗尖锐湿疣、抗癌与抗肿瘤、抗病毒及乳腺癌治疗方面已得到广泛应用。因桃儿七独特与显著的药理学活性,导致桃儿七药材长期过度采挖致使其野生资源面临濒危。目前,通过化学合成和生物技术等手段获取大量鬼臼毒素仍难以满足商业化需求,供求矛盾日渐突显。通过本综述总结和概述桃儿七种子萌发、休眠特征及破除休眠的技术方法,一方面有利于指导桃儿七人工规范化生态种植,另一方面有利于桃儿七野生资源的保护、合理利用及鬼臼毒素用药的可持续发展。

四唑染色法快速测定珍稀中藏药材桃儿七种子生活力

为找到快速测定珍稀中藏药材桃儿七种子生活力的测定方法,以野生植株种子为研究材料,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法(TTC法),运用4因素4水平的正交试验L_(16)(4^(4))设计,研究不同浸种时间、染色温度、TTC溶液浓度和染色时间对桃儿七种子生活力的影响。结果表明,桃儿七种子生活力测定的最佳条件为30℃下浸种24 h,35℃于1%TTC溶液中染色3 h,种子胚部染成红色,生活力达到了95.6%。该测定方法操作简单、准确、高效,在合适的条件下反应速度快,可得到明显的试验结果。

桃儿七种子休眠解除过程中细胞壁代谢及种皮超微结构的变化

为探究低温层积过程中桃儿七种子细胞壁代谢及种皮超微结构与休眠解除的内在联系,该研究通过低温层积解除桃儿七种子休眠,分析休眠解除过程中种子不同部位细胞壁组分及相关代谢酶的变化,同时利用扫描电镜对种皮的超微结构进行观察。结果表明,(1)桃儿七种皮主要由角质层、栅状石细胞层及海绵组织层3层构成,在层积过程中,种皮内部的海绵组织逐步疏松膨胀,种皮表面破损加剧;(2)种子不同部位的细胞壁组分具有明显差异,整个层积过程中,种胚、种皮和胚乳中的纤维素含量均在层积中期(45 d和60 d)降至最低,3个部位的纤维素酶活性在层积中期对应升高;种胚和种皮内的半纤维素含量均在层积中期显著下降,种皮中甘露聚糖酶活性和木糖苷酶活性在层积中期时相应达到最大;3个部位的果胶含量均在层积后期(75 d和90 d)时显著下降,而种皮和胚乳中多聚半乳糖醛缩酶活性也在层积后期相应升高;(3)种胚和胚乳内过氧化物酶活性在层积75 d和90 d时明显下降,而SOD活性在此时显著上升。(4)种子不同部位3种木质素单体的组成比例具有明显区别,同时3种木质素单体含量均随层积时间的延长而显著降低,且胚乳和种皮中的S-木质素含量对种子萌发存在显著的负向影响关系。研究认为,在低温层积过程中,桃儿七种子内细胞壁组分纤维素、半纤维素及木质素的逐步酶解,活性氧作用下的细胞壁松弛以及海绵组织层的疏松膨胀和种皮的破裂,破坏了细胞壁的刚性结构,促使种子机械束缚力降低,吸水性能提高、胚根生长能力增强,最终导致其休眠解除。

秦岭特色药用植物桃儿七内生真菌代谢产物的分离鉴定及生物活性研究

以秦岭无病害健康桃儿七内生烟色拟盘多毛孢菌为研究对象,采用萃取法从菌丝中分离活性代谢产物,并对其结构进行鉴定,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测了代谢产物的细胞毒活性,采用Ellman光度法检测了代谢产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性,并检测了代谢产物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,在桃儿七内生烟色拟盘多毛孢菌代谢产物中分离并鉴定了10个萜类化合物,其中化合物1-1、1-2、1-3和1-4为新化合物。化合物1-3、1-4和1-8对A549、HeLa和HepG2细胞均表现出明显的细胞毒活性;化合物1-3对乙酰胆碱酯酶表现出较强的抑制活性;化合物1-1、1-2、1-3和1-4对α-葡萄糖苷酶均未表现出明显的抑制活性。表明,基于桃儿七内生烟色拟盘多毛孢菌分离出具有抗肿瘤活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性的萜类化合物,为桃儿七内生真菌用于抗肿瘤及治疗阿尔兹海默病新药开发提供了新思路。

遮光对桃儿七植株生长的影响

目的:探索适宜桃儿七人工栽培的最佳遮光条件。方法:以一、二、三年生桃儿七植株为试验材料,设置30%、50%、70%遮光处理,以不遮光为对照。结果:一年生桃儿七植株移栽成活率为30%~40%,二年生桃儿七植株移栽成活率为50%~70%,三年生桃儿七植株移栽成活率为70%~90%;综合株高、株幅、茎基部粗、根长、根粗、须根数、根鲜重、折干率等农艺性状的结果表明,6至8月是桃儿七植株根部快速生长期,30%和50%遮光率有利于桃儿七植株根部的营养生长。遮光处理的单根鲜重增加量均大于对照,增加量由大到小为50%遮光率>30%遮光率>70%遮光率>CK;桃儿七根折干率随生长时间的延长,整体呈下降-上升-下降的趋势。结论:30%~50%遮光能够提高桃儿七植株移栽成活率,且有利于其生长,建议桃儿七人工栽培时可选择此遮光率,并于植株地上部分枯萎前进行采收。

太子山保护区桃儿七人工繁育技术

桃儿七为小檗科桃儿七属多年生草本植物,是国家二级珍稀濒危植物,其根茎中含有丰富的鬼臼毒素和黄酮类化合物,具有极高的药用价值。但受多方面因素的影响,目前桃儿七数量较少,一度濒临灭绝。开展桃儿七人工栽培工作可对桃儿七野生资源进行保护,但人工繁育难度较大、成苗率不高,仍存在一定的困难。为加强对桃儿七的保护、合理开发其利用价值,于太子山保护区设立桃儿七繁育试验区,从种子选育、田间管理和病虫害防治等方面着手优化桃儿七人工繁育技术,以期扩大太子山保护区内桃儿七的种群分布并对其人工繁育提供理论依据。

野生桃儿七引种繁育与栽培技术研究

桃儿七既有美丽的外观可以用来观赏,又有显著的医学作用,应用于药物研发中,当然后者比前者的潜力更大,只是桃儿七的原生状况并不理想,野生种群的数量在持续下降,在气候变暖的背景下以及自然繁殖这两个因素的影响下,即使桃儿七的生存能力再强,也会因为被野鹿吃掉大部分果实、鸟类啄食桃儿七的幼芽影响桃儿七的成长以及产量。而桃儿七的人工种植在其原生地并不难,可以在秋季采种,选择在当年的秋季与次年春天播种,实现当年种植当年收获。桃儿七作为中国特有物种,在抗癌方面有显著的贡献,希望在经过引种繁育之后对人类的健康做出更多的贡献。

浅谈太子山桃儿七保护现状及改善措施

桃儿七在生态环境中占据着至关重要的地位,然而人类对自然的过度索取却使很多地区的桃儿七濒临灭绝,为了保护生态环境,人们的焦点逐渐转移到自然保护区的建设上,而自然保护区不仅能保护生物多样性,维护生态平衡,对森林旅游业也带来显著收益,其对桃儿七保护做出的贡献也意义重大。近年来,我国的桃儿七保护现状仍然不容乐观,在太子山自然保护区范围内,桃儿七的分布范围较广,这是一种濒临灭绝的多年生草本植物,太子山自然保护区内的保护状况并没有得到根本性扭转,桃儿七的濒危原因难以得到根治。基于此,本文将分析太子山桃儿七的保护现状,并针对性提出改善自然保护区管理,改善保护现状的具体措施。

洮河林区野生桃儿七的人工栽培

桃儿七,又名白根七,为茜草科植物桃儿七的根,是一种具有较高药用价值的名贵药材,素有“百草之王”的美誉。由于采摘不当和生境破坏等原因,导致野生桃儿七资源逐渐减少,已经成为一种濒危物种。为了保护和开发利用野生桃儿七资源,对其进行人工栽培十分必要,也是实现野生桃儿七可持续发展的有效途径。基于此,对洮河林区野生桃儿七的人工栽培进行了探讨。

桃儿七的研究进展

主要综述了国内外对桃儿七的研究进展。介绍了桃儿七的地理分布、系统发育、化学成分、生物学特性、资源现状及解决办法 ,特别介绍了利用植物组织培养、细胞培养、生物反应器、毛状根培养等生物技术方法来生产鬼臼毒素的研究新进展。

四川西部濒危植物桃儿七遗传多样性的RAPD分析

桃儿七是一种具有重要药用价值的珍稀濒危植物。采用RAPD分子标记技术,对在四川西部地区的桃儿七7个自然种群的遗传多样性水平和遗传结构进行了分析。用12个RAPD引物对7个种群共140个样品进行了扩增,共得到111条清晰带,其中32条具有多态性,在物种水平上多态位点百分率(PPB)为28.83%,在种群内的多态位点百分率变动幅度为4.50%至16.22%。同其它一些濒危植物相比,桃儿七种群具有较低的遗传多样性(He=0.0622,Ho=0.0987)。7个自然种群间出现了很强的遗传分化,分化指数接近70%。种群间的基因流低(Nm=0.2240)。造成上述结果的可能原因是与桃儿七的繁育方式和有限的基因流等因素有关。应将遗传多样性相对较高的松潘县牟尼沟种群作为原位保护的核心种群进行保护,尽量保护所有现有种群。

药物植物桃儿七不同种群种子产量初步研究

对药用植物桃儿七 5个不同种群种子产量的研究表明 :各种群中每花平均胚珠数、每果实平均种子数及种群平均结实率与种群所在的海拔高度呈正相关 ;不同种群个体平均胚珠数的变异范围为 5 8.97～ 87.97,平均种子数变异范围为 40 .0 2～ 80 .5 8,平均结籽率变异范围为 6 1.2 9%～ 91.6 0 % ;果实内单粒种子平均干重与种群分布海拔呈明显负相关 ,与果实内种子数呈弱负相关 ;同一种群在不同年份间平均种子产量差异不大 ;种子产量除主要受个体营养状况影响外 ,还受海拔及其它因素的影响 ;果实内种子数与果实大小及重量呈正相关 ,但单粒种子平均重量与果实大小及果实内种子总重量无显著相关 .

响应面法优选桃儿七中的鬼臼毒素的超声提取工艺

以桃儿七为原料,采用超声提取的方法提取鬼臼毒素,考察了超声提取时间、乙醇体积分数、料液比和超声功率等因素对提取工艺的影响,并通过响应面法进行工艺优化,得到提取过程优化的工艺条件:乙醇体积分数为55.43%、料液比为1∶9.97、超声时间和功率分别为49.87min和206.71W。最佳条件下的验证实验表明:桃儿七鬼臼毒素提取率13.36%,浸膏纯度为2.78%。拟合得到的模型较好的符合实际。

桃儿七和南山荷叶内生真菌的生物活性研究

通过研究桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum)与南方山荷叶(Diphylleia sinensis)的内生真菌的生物活性,探讨内生真菌作为生物活性物质资源开发利用的价值。测定内生真菌发酵液的抗细菌、抗真菌、抗卤虫活性后,发现大多数菌株的发酵液都具有不同的生物活性。高活性菌株集中于镰孢霉属、柱孢属、木霉属、色串孢属。桃儿七内生真菌抗真菌活性较强,南方山荷叶内生真菌抗细菌和抗卤虫活性较强。桃儿七和南方山荷叶内生真菌是寻找有价值的活性成分的良好资源。

桃儿七中黄酮类成分的分离与鉴定

目的对桃儿七的95%(φ)乙醇提取物的化学成分进行研究。方法利用反复硅胶、SephadexLH-20、开放ODS柱色谱等方法进行分离纯化;根据理化性质及波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果分离得到8个黄酮类化合物,分别鉴定为山柰酚(kaempferol,1)、槲皮素(querce-tin,2)、杨梅素-3',4'-二甲醚(myricetin-3',4'-dimethyl ether,3)、3-O-甲基-槲皮素(3-O-methyl-quercetin,4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside,5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside,6)、芦丁(rutin,7)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(kaempfer-ol-3-O-rutinoside,8)。结论化合物3、4、8为首次从该属植物中分离得到。

桃儿七茎叶组织内生真菌多样性

通过用两种传统培养基(PDA、SDA)分离方法对5个自然野生分布的桃儿七群落(分布于青海省、甘肃省和四川省)茎叶组织内的内生真菌多样性进行研究,并用形态学与分子生物学的方法鉴定菌株。实验结果显示,720个茎叶组织块中共分离到141株内生真菌。依据真菌在培养基上的形态初步划分为52个分类单元,经鉴定归属于19属,其中茎组织中16属>叶组织中6属,桃儿七茎叶组织中的真菌优势属为拟青霉属,相对分离频率为26.34%。5个采样点间内生真菌的香浓维纳多样性指数为0.71—1.41,Sorenson相似性系数为0.13—0.50,定殖率为14.58%—28.47%。通过对PDA、SDA两种培养基以及茎、叶组织的定殖率进行统计,结果显示:PDA(17.50%)<SDA(21.67%),茎(29.72%)>叶(9.44%)。研究结果表明,桃儿七茎叶组织中内生真菌的多样性较低,不同采样点间宿主植物内内生真菌群落的相似性较低,真菌群落结构存在差异。研究为进一步扩大从桃儿七中筛选产鬼臼毒素等活性物质内生真菌提供了一种新的思路。