桃潜隐花叶类病毒中国分离株P_3的克隆与序列分析

本研究以提取的类病毒cRNA为模板,采用RT-PCR方法,从5株表现明显花叶症状的'雨花露'桃树上检测到桃潜隐花叶类病毒(PLMVd),并对其中的样品P3通过2次RT-PCR扩增,然后分别将扩增产物回收、克隆测序,确定了该分离株(命名为PLMVd-P3分离株)的全长核苷酸序列,其cDNA分子全长为337 nt,这与已经报道的PLMVd典型分离株基因组大小相似.序列比较分析结果表明,该分离株与已经报道的不同地区来源的其它分离株相似性为90%～96%.

桃潜隐花叶类病毒RT-PCR和分子杂交检测技术的建立

本研究从武汉周边采集表现典型花叶症状的桃样品,提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法对这些样品进了分析,结果显示所分析的5个样品(P1～P5)均获得了预期大小约为337bp的目标扩增条带,表明样品均带有PLMVd.通过回收RT-PCR产物,用生物素标记制备探针,分别采用DNA斑点杂交、RNA斑点杂交和组织印迹杂交3种杂交方法对这些样品进行检测比较,3种杂交方法中,组织印迹杂交操作步骤相对简单快捷,适合于对PLMVd进行大田快速检测.

桃潜隐花叶类病毒花叶分离物的分子和生物学特性分析

桃潜隐花叶类病毒(peach latent mosaic viroid,PLMVd)是桃树上的重要类病毒。PLMVd侵染桃树后会引起花叶、黄化和白化等不同的叶片症状。目前,PLMVd侵染引发花叶的机制不明。本文克隆了来自我国田间油桃样品的花叶(M)分离物和无症状(N)分离物的86条PLMVd全长序列,大小为336~338 nt。用DnaSP 5.0对克隆的序列进行分析,获得31条单体型(变体)序列,来自M分离物的单体型多样性(Haplotype diversity)较低为0.79,N分离物较高为0.90。与无症状的N分离物序列相比,M分离物序列变异主要发生在全序列的五个核苷酸区,来自M分离物的MY1单体型序列为优势序列,与少数其他序列变体聚在系统发育树的Group I,并与已报道的典型白化P1.148分离物序列相似性为89.4%。通过PLMVd侵染性克隆和基因合成的构建、接种方法的比较,构建了有侵染性的PLMVd二倍体和有效接种技术。构建的PLMVd MY1二倍体cDNA质粒,通过强化茎切接种法接种,能系统侵染山毛桃并表现典型的花叶症状。研究结果为进一步研究PLMVd引发花叶的分子机制奠定了基础。

桃树病毒病研究现状与防控对策

【导读】近年来，桃树病毒的侵染日益严重，严重影响了桃产业的正常发展。目前．桃树上已经报道的病毒和类病毒病原主要有苹果褪绿叶斑病毒、李属坏死环斑病毒、李痘病毒、李矮缩病毒、樱桃绿环斑驳病毒、杏假褪绿叶斑病毒和李树皮坏死茎纹孔伴随病毒、桃潜隐花叶类病毒和啤酒花矮化类病毒等。