应用抗体“框架重塑”技术构建人源化抗体fSM03

目的:应用抗体“框架重塑”(framework-reengineering)技术构建人源化抗体fSMO3。方法:互补决定区(CDRs)克隆来源于嵌合抗体SMO3;VL框架FR1,FR2,FR3和FR4分别优选自人源基因JOH,Vd’CL,WES和RZ;VH框架FR1,FR2,FR3和FR4优选自人源基因WAS,WAS,GAL和DOB,无须涉及任何鼠源残基的回复突变。分别合成轻链表达载体pEκ及重链表达载体pEγ,转染宿主细胞SP2／0。结果:fSM03保持了原有亲本抗体的功能特性,如CD22特异性和亲和力、细胞内化以及淋巴瘤细胞毒效应等。结论:应用框架重塑技术成功构建了人源化抗体fSMO3,无须引入新的鼠源残基,较CDRs移植更为简便灵活。