桑枝95%乙醇提取物抗炎作用的实验研究

目的:研究桑枝95%乙醇提取物(EER)的抗炎作用。方法:用0.5％CMC-Na配成100mg·kh^(-1)～400mh·kg^(-1)的乳剂,小鼠灌胃给药,研究EER的抗炎作用。结果:EER在二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、鸡蛋清性小鼠足跖肿胀及滤纸片诱导的肉芽增生等模型上具有抗炎作用。

维药毛菊苣95%乙醇提取物对刀豆蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制研究

目的:考察维药毛菊苣95%乙醇提取物(CG-I)对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制,为后期筛选其有效部位提供参考。方法:将60只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性对照组(甘草酸二铵,100 mg/kg)和CG-I高、中、低剂量组(以生药量计分别为200、100、50 g/kg),每组10只,每天ig给药1次,连续给药10 d。末次给药后1 h,除空白对照组外的其余各组小鼠均通过尾iv刀豆蛋白A(Con-A)诱导免疫性肝损伤。造模8 h后,检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,计算肝、脾指数,观察肝组织病理学变化并检测肝组织中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-1β含量显著增加,肝、脾指数及肝组织中AST、ALT、GST、AKP、T-SOD水平显著升高,肝组织中MDA水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);小鼠肝索排列杂乱,肝细胞出现肿胀、坏死等病变。与模型组比较,除CG-I低剂量组小鼠肝组织中AST、ALT、AKP水平以及CG-I中、低剂量组小鼠血清中MDA、IFN-γ含量降低不显著外,其余各指标均显著改善(P<0.05或P<0.01);肝组织病理变化均不同程度地减轻。结论:CG-I对Con-A所致小鼠免疫性肝损伤具有保护作用,尤其以高、中剂量效果较好;其机制可能与抗氧化、抗炎作用有关。

野菊花60%乙醇提取物的酚类成分组成及其清除自由基和防霉变能力分析

对野菊〔Dendranthema indicum（L.） Des Moul.〕花的60%乙醇提取物中酚类成分的组成与含量进行了分析,并研究了该提取物对.O^2-、.OH和DPPH自由基的清除能力以及防牛奶霉变的能力。结果表明,野菊花60%乙醇提取物主要含有黄酮类成分和一定量的酚酸类成分;酚酸类成分中绿原酸和咖啡酸的含量分别为20.74 mg.g-1和1 420.57μg.g-1;总黄酮含量为490.50 mg·g^-1,其中槲皮素、木犀草素、芹菜素、刺槐素和蒙花苷的含量分别为31.05、22.67、23.09、30.71和107.23 mg·g^-1,分别占总黄酮含量的6.33%、4.62%、4.71%、6.26%和21.86%。该提取物对.O2^-、.OH和DPPH自由基均有一定的清除能力,在实验设置的浓度范围内,对3种自由基的清除率与该提取物浓度基本呈正相关关系,回归方程分别为y=0.273x＋38.540、y=1.208x＋2.761和y=2.032x＋45.330,IC50分别为41.98μg.mL-1、39.11 mg·mL^-1和2.30 mg·mL^-1,其中对DPPH自由基的清除能力最强,且其IC50略高于VC。在牛奶中添加一定量的野菊花60%乙醇提取物（质量体积分数0.012 5%-0.2%）,牛奶中的各级霉斑数量、病情指数以及霉菌孢子数均低于空白处理组,且该提取物的这种防霉变能力与其浓度呈一定的正相关关系;其中0.2%的野菊花60%乙醇提取物的防霉变能力高于质量体积分数0.01%山梨酸钾。实验结果显示,野菊花60%乙醇提取物具有较高的抗氧化能力和显著的防霉变能力,可作为食品防腐剂进行开发利用。

制白附子70%乙醇提取物的完全急性毒性研究

目的:评价制白附子70%乙醇提取物的急性毒性作用。方法:灌胃给予大鼠25.0g/kg、50.0g/kg、100.0g/kg制白附子70%乙醇提取物1次,测定d1(给药当天)、d2、d3、d7、d14大鼠体重及给药前、给药后4h～28h、28～52h的饲料消耗量,计算摄食量,并于d3和d14各处死50%动物进行尸体解剖、血液生化学检查和血液细胞学检查。结果:给药第3d,低剂量组大鼠脾脏、胸腺系数增大(1.25±0.40,0.27±0.06),高、低剂量组血清CREA含量下降(45.4±6.12μmol/L,41.7±21.4μmol/L),高剂量组血清CK含量上升(2068.3±877.8IU/L),以上数据与对照组比较均有统计学差异。给药14d,低、中剂量组血清CREA含量升高(70.6±15.6μmol/L,67.8±8.10μmol/L)。未观察到对大鼠体重、摄食量及血液细胞学指标有所影响。结论:制白附子70%乙醇提取物的三个受试剂量对大鼠急性毒性作用不明显。

奇蒿80%乙醇提取物对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响

目的 :探讨中药奇蒿 80 %乙醇提取物对大鼠背部深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。方法 :采用大鼠背部深Ⅱ度烧伤模型 ,创面直径 3cm ,创面外用奇蒿 80 %乙醇提取物的生理盐水溶液 ,每个创面用药液 0 .2ml,通过伤后不同时相点创面取材 ,检测羟脯氨酸 (OHP)和细胞周期变化 ,并统计创面愈合时间 ,以生理盐水组 (每个创面 0 .2ml)作为对照组 ,观察奇蒿 80 %乙醇提取物对深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。结果 :奇蒿80 %乙醇提取物组创面OHP含量及S期细胞百分比明显高于生理盐水组 (P <0 .0 1) ;创面愈合时间 ,奇蒿80 %乙醇提取物组为 17.88± 1.2 4天 ,生理盐水组为 2 0 .13± 0 .83天 (P <0 .0 1) ,提示奇蒿 80 %乙醇提取物可促进创面愈合。结论 :奇蒿 80 %乙醇提取物有明显的促进创面愈合的作用 ,局部OHP含量增高 ,S期细胞百分比升高 ,创面愈合时间缩短。

制白附子70%乙醇提取物的长期毒性试验研究

目的:评价制白附子70%乙醇提取物的长期毒性作用。方法:灌胃大鼠25.0 g·kg-1、50.0 g·kg-1及100.0 g·kg-1制白附子70%乙醇提取物或蒸馏水3月,观察给药期间大鼠的一般情况、活动度、毛色、排泄物等,每周称体重和摄食量,于给药末期和恢复末期各处死50%动物进行系统尸解、生化学、血液学及病理学检查。结果:给药3月大鼠的体重、脏器系数、生化学及血液学指标均有一定波动,部分动物见肝脏、前列腺及心肌组织病理学改变,在恢复期可改善。未见药物对大鼠摄食量及一般行为学的影响。结论:大鼠的体重、脏器系数、生化学、血液学指标均在本室背景数据范围内波动,且无明显剂量-毒性关系,提示上述指标的变化无明显毒理学意义。病理检查所见多为大鼠常见自发病变,故不能确定为药物作用所致。综上,制白附子70%乙醇提取物在3个受试剂量下对大鼠的长期毒性作用不明显,且未观察到蓄积作用。

桑枝乙醇提取物通过NF-κB和MAPKs信号通路对LPS诱导RAW264.7细胞的抗炎作用

目的研究桑枝乙醇提取物对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型的影响,并探究其分子作用机制。方法通过回流提取法制备桑枝乙醇提取物,并采用可见分光光度法检测样品中总黄酮的含量。采用MTT法检测桑枝乙醇提取物对RAW264.7细胞的毒性作用,采用Griess法检测细胞上清液一氧化氮(NO)水平,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,DCFH-DA荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平,倒置荧光显微镜观察细胞形态变化,RT-qPCR法检测细胞iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、Arg-1、IL-10 mRNA表达及细胞M1/M2表型的作用,Western blot法检测细胞iNOS、COX-2、NF-κB、MAPKs信号通路蛋白表达。结果桑枝乙醇提取物中总黄酮含量为(8.47±0.12)%。桑枝乙醇提取物能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子水平(P<0.05,P<0.01),能调控RAW264.7细胞由M1向M2表型的转化,能下调促炎因子mRNA的转录表达和上调抑炎因子mRNA的转录表达(P<0.05,P<0.01),能下调NF-κB信号通路细胞核P65蛋白表达、IKBα磷酸化及MAPKs信号通路p38、JNK和ERK蛋白磷酸化(P<0.05,P<0.01)。结论桑枝乙醇提取物对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型具有较好的抗炎效果,其内在的分子机制可能与下调NF-κB和MAPKs信号通路有关。

蜘蛛香35%乙醇提取物的肠吸收特性

目的研究蜘蛛香35%乙醇提取物的肠吸收特性。方法进行大鼠单向肠灌流实验,计算提取物肠灌流液中不同质量浓度(0.5、1.0、1.5 g/mL)新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、橙皮苷、异绿原酸C吸收参数,考察P-糖蛋白抑制剂(维拉帕米)对提取物吸收的影响。结果除异绿原酸A、橙皮苷外,其他成分K_a、P_(app)值随着其质量浓度增加无明显变化。加入维拉帕米后,各成分(1.0 g/mL)K_a、P_(app)值显著提高(P<0.01)。结论蜘蛛香35%乙醇提取物中7种成分在小肠中呈中等吸收,可能与P-糖蛋白有关。其中,异绿原酸A、橙皮苷吸收机制可能为主动转运,其他成分为自由扩散转运。

鱼腥草95%醇提物对5种蔬菜病原真菌的生物活性研究

以采自鄂西北山区的鱼腥草(Houttuyniae cordata)95%乙醇浸提液为供试药液,测定了其对马铃薯立枯丝核病菌(Rhizoctonia solani),大白菜灰霉病菌(Botrytis cinerea),辣椒白绢病菌(Sclerotium rolfsii),豌豆根腐病菌(Pythium ultimum)和黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.spcucumber)5种病原真菌的生物活性。结果表明:①在抑制的时间动态方面,不同浓度的鱼腥草95%醇提物对菌丝生长的抑制作用均随时间的延长而降低,且抑制效率的动态变化各不相同。②在抑制菌丝生长方面,鱼腥草95%醇提物对豌豆根腐病菌、黄瓜枯萎病菌、马铃薯立枯丝核病菌和大白菜灰霉病菌均有良好的抑制作用,在最高处理浓度为0.002 g/mL时抑制率分别达到60.32%、58.50%、55.89%和55.17%;对辣椒白绢病菌几乎没有抑制作用,在最高处理浓度为0.002 g/mL时抑制率仅为17.19%;③在抑制孢子萌发方面,鱼腥草95%醇提物对大白菜灰霉病菌、马铃薯立枯丝核病菌、黄瓜枯萎病菌和豌豆根腐病菌抑制效果明显,在最高处理浓度为0.002 g/mL时的抑制率分别达到95.24%、90.48%、89.47%和85.71%,且在处理浓度不低于0.000 5 g/mL时对以上4种真菌孢子的抑制率超过40%;对辣椒白绢病菌抑制作用较弱,在最高处理浓度为0.002 g/mL时仅为43.48%。

不同提取方式对三七改善小鼠睡眠功能的影响

目的:观察不同提取方式对三七改善小鼠睡眠功能的影响。方法:通过直接睡眠试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间试验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验、巴比妥钠睡眠潜伏期试验,评价三七水提物、三七30%乙醇提取物、三七70%乙醇提取物对小鼠睡眠的影响。结果:与对照组比较,三七70%乙醇提取物各剂量组、三七30%乙醇提取物高剂量组、三七水提物高剂量组均可延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P<0.05或P<0.01),增加戊巴比妥钠阈下催眠剂量入睡小鼠只数(P<0.05或P<0.001),缩短小鼠的睡眠潜伏期(P<0.05或P<0.001)。以小鼠睡眠时间、入睡只数、睡眠潜伏期时间作为评估不同提取物对改善小鼠睡眠作用的主要指标。三七30%乙醇提取物低剂量组、三七水提物低剂量组与对照组比较改善小鼠睡眠作用不显著,与三七水提取物高剂量组比较三七70%乙醇提取物高剂量组对小鼠睡眠改善作用差异显著(P<0.05),三七30%乙醇提取物高剂量组以及三七70%乙醇提取物低剂量组改善小鼠睡眠作用无显著性差异(P>0.05)。三七70%乙醇提取物高剂量组、三七30%乙醇提取物高剂量组、三七水提物高剂量组小鼠下丘脑及血清中的5-羟色胺(5-HT)及γ-氨基丁酸(GABA)含量均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),多巴胺(DA)含量均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:三七水提物、三七30%乙醇提取物、三七70%乙醇提取物均可在一定程度上改善小鼠的睡眠,其中三七70%乙醇提取物效果最佳。

微波辅助提取龙葵中总生物碱的研究

本文对龙葵中总生物碱 (Totalsteroidalalkaloids,TSA)的微波辅助提取 (Microwave assistedextraction ,MAE)工艺、作用机理及对成分的结构影响进行了系统的研究。以酸性染料比色法为分析手段 ,设计正交试验得到了最佳提取工艺 :以 95 %乙醇为溶剂 ,料液比 1:2 0 ,在 5 85W下提取 8min ;用扫描电镜 (SEM)对样品处理前后形貌进行了观察 ,揭示了微波作用机理与细胞结构变化有关。同时薄层色谱 (TLC)、反相高效液相色谱 (RP- HPLC)定性分析显示 ,微波对有效成分的结构没有造成影响。

柿叶黄酮类化合物提取方法和抗氧化性的研究

采用不同的方法提取柿叶中的黄酮类化合物 ,比较不同提取方法的提取效率及提取物中黄酮类化合物的含量 ,从而探讨最佳的提取方法并对柿叶提取物抗氧化性进行了研究。结果表明 :体积分数 75 %乙醇提取法较佳 。

黄芩及其提取物中黄芩素成分分析标准物质的研制

目的通过建立准确可靠的定值方法及不确定度分析研究,研制具有可溯源和量值传递功能的黄芩及其水、95%乙醇提取物中黄芩素成分分析标准物质。方法根据《中华人民共和国计量法》和标准物质研制技术规范与相关技术文件要求,利用黄芩素国家一级纯度标准物质的量值传递功能,采用高效液相色谱法对黄芩及其水、95%乙醇提取物中黄芩素成分分析标准物质进行均匀性和稳定性检验;采用高效液相色谱法-多家实验室协作标定的方法,确定黄芩中药材、黄芩95%乙醇提取物、黄芩水提取物中黄芩素成分的含量标准值及不确定度评估。结果所研制的黄芩及其水、95%乙醇提取物中黄芩素成分分析标准物质均具有良好的均匀性和稳定性,黄芩素成分含量分别为(7.95±0.23)%,(4.29±0.12)%,(8.80±0.40)%(k=2)。结论所研制的标准物质属国家级计量有证标准物质,具有量值准确、可溯源的特性,可为我国传统中药材及其提取物中有效物质和成分的标准化与国际化提供必要的标准物质、物质标准和标准方法。

野菊花及其提取物中有害元素与农药残留的测定

分析了野菊花、野菊花乙醚提取物及60%乙醇提取物的浸出物、干燥失重与灰分等三项指标,并对其中铅、砷、汞、镉、铜等主要有害元素,以及有机氯和拟除虫菊酯类农药残留等进行了测定。实验结果表明,野菊花乙醚提取物的干燥失重、总灰分、水不溶灰分和酸不溶灰分等均较60%乙醇提取物要低,而硫酸盐灰分较高;野菊花乙醚提取物及60%乙醇提取物中有害元素或农药残留指标均符合药用植物及制剂外经贸绿色行业标准(WM/T2-2004);实验为两种提取物用作为食品抗氧化剂提供了安全支撑。

鱼腥草不同溶剂提取物对豌豆根腐病菌的抑制作用

用蒸馏水、95%乙醇和石油醚为溶剂对采自鄂西北山区的鱼腥草进行全草浸提,探讨不同溶剂提取物对豌豆根腐病菌的抑制作用。试验结果,以浸膏的质量得率为指标,水浸法提取率最高,石油醚超声波法提取率次之,95%乙醇浸泡法提取物最少,分别为14.34%,9.85%,7.99%;当处理浓度不低于0.000 5 g/ml时,对豌豆根腐病菌菌丝生长的抑制率以95%乙醇提取物和石油醚提取物较高,均超过40%,且在最高处理浓度0.002 g/ml时分别达到60.32%和63.26%。而对豌豆根腐病菌孢子萌发的抑制率,在最高处理浓度为0.002 g/ml时,石油醚提取物最高,为90.00%,95%乙醇提取物和水提取物分别为85.71%和59.26%。

宁夏道地药材苦豆子醇提取物体外抑菌作用研究

目的:观察宁夏苦豆子65%乙醇提取物对细菌和真菌的体外抑菌作用。方法:将苦豆子药用65%乙醇浸泡24 h后,回流两次所得提取物,用试管二倍稀释法联合琼脂平板法,进行体外抑菌试验的研究。结果:苦豆子65%乙醇提取物对三种常见致病菌及一种深部真菌抑菌作用显著,其最小抑菌浓度(MIC)均为35.1 mg/mL。结论:苦豆子中草药用65%乙醇提取物对四种受试菌的抑菌作用显著。

多板纲动物的不同保存方法对基因组DNA提取的影响

为了探讨最佳的适合提取DNA的石鳖样本保方法,以日本花棘石鳖Liolophura japonica、日本宽板石鳖Placiphorella japonica、红条毛肤石鳖Acanthochiton ruhrolineatus、平濑锦石鳖Onithochiton hirasei、网纹鬃毛石鳖Mopalia retifera为实验材料,对其分别以甲醛浸泡、95%乙醇浸泡、-75℃超低温保存的样本进行基因组DNA提取.通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳对DNA产物进行检测.结果表明:新鲜材料和用乙醇保存的样品比用-75℃超低温保存的样品提取出的DNA纯度和浓度都高,用甲醛浸泡的方法保存没有提取出DNA.结果表明,超低温保存适合用于DNA提取.但是由于条件限制,长距离外采集样本时适合于用乙醇保存,并且成本较低.

菜籽粕抗氧化物质的提取条件

从菜籽粕中提取抗氧化剂进行了研究。讨论了溶剂、时间、浓度、温度等因素对提取效果的影响,通过对不同条件的比较及正交实验,得到提取的最佳条件,并将菜籽粕提取物点在GF2 5 4硅胶板上,分别用不同溶剂展开不同的次数,得到最佳的展开条件。阴干,剥下谱带,用95 %乙醇浸泡,离心,取全部上清液,做紫外扫描,得出谱带。经初步分析,得出极性大的溶剂的效果最好。

印尼蛇接骨草醇提取物抑制骨肉瘤细胞U2-OS侵袭迁徙的研究

目的发现印尼蛇接骨草95%醇提取物[Gynura procumbens(Lour.)MERR.extract,GPE]能诱导骨肉瘤细胞凋亡、抑制其增殖。文中探讨GPE对骨肉瘤细胞U2-OS体外迁徙、侵袭力的影响。方法用0、40μg/mL GPE分别作用骨肉瘤细胞U2-OS,Wound healing和Transwell侵袭实验检测U2-OS细胞的迁徙、侵袭力。结果 40μg/mL GPE处理组,24 h细胞迁徙率(33±3)%明显低于对照组(0μg/mL GPE)细胞迁移率(66±2)%;2组细胞24h穿膜细胞数分别为(18±2)和(46±2)个/视野,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GPE能在体外抑制骨肉瘤U2-OS细胞侵袭迁徙,有望成为新的抗骨肉瘤转移的药物。

赶黄草3种提取物对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用

目的探讨赶黄草水提取物、70%乙醇提取物、95%乙醇提取物对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型,尾静脉注射脂多糖建立小鼠体内肝损伤模型,3种提取物干预,肝苏颗粒为阳性对照。Giemsa法观察细胞形态学变化,MTS法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,HE染色观察肝组织病理学变化,赖氏法测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,超氧化物歧化酶法测定肝组织超氧物歧化酶(SOD)水平,TBA法检测肝组织丙二醛(MDA)水平,免疫荧光法检测肝组织凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达。结果与脂多糖组比较,脂多糖+70%乙醇提取物组(25、50 mg/L)明显抑制细胞形态学变化,TNF-α、IL-1β水平显著降低(P<0. 05,P<0. 01)。与模型组比较,70%乙醇提取物组明显改善肝组织病理损伤,降低ASC、NLRP3表达,显著降低ALT、AST、MDA水平(P<0. 05)。结论赶黄草70%乙醇提取物对小鼠内毒素性肝损伤具有明显保护作用,其机制可能与减少TNF-α产生、调控ROS/NLRP3/IL-1β通路有关。