止咳枇杷颗粒中桑皮苷A和绿原酸含量测定方法

目的:应用高效液相色谱法测定止咳枇杷颗粒中桑皮苷A和绿原酸含量。方法:色谱柱为C18色谱柱,以乙腈-0.3%磷酸(9∶91)为流动相,流速1 mL/min,柱温30℃,进样量10μL,检测波长326 nm。结果:桑皮苷A在16.12~806.0μg/mL(r=1.0000)范围内线性关系良好,平均加样回收率为101.65%,RSD为2.10%(n=6);绿原酸在4.122~206.1μg/mL(r=1.0000)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.81%,RSD为0.56%(n=6)。结论:该方法测定结果准确、灵敏、重复性好,可用于止咳枇杷颗粒中桑皮苷A和绿原酸的含量测定。

桑皮苷的镇咳平喘作用

目的探讨桑皮苷镇咳、祛痰、平喘作用。方法采用小鼠浓氨水引咳法、小鼠SO2引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法制造3种引咳模型,灌胃给予桑皮苷,以咳嗽潜伏期、咳嗽次数为评价指标,观察桑皮苷的镇咳作用;采用豚鼠磷酸组胺喷雾法制作引喘模型,以引喘潜伏期为评价指标,观察桑皮苷的平喘作用;采用小鼠酚红排痰法制作祛痰模型,以酚红排泌量为观测指标,观察桑皮苷的祛痰作用。结果桑皮苷80 mg.kg-1能明显抑制浓氨水引咳的潜伏期,桑皮苷80 mg.kg-1能明显抑制浓氨水引咳次数,桑皮苷20 mg.kg-1g能明显抑制SO2引咳次数,桑皮苷50 mg.kg-1能明显抑制枸橼酸引咳次数;桑皮苷100 mg.kg-1对组胺引起豚鼠支气管哮喘具有明显的平喘作用;桑皮苷质量浓度提高到160 mg.kg-1,对小鼠酚红排出量仍无影响。结论桑皮苷具有镇咳、平喘作用,但无祛痰作用。

桑皮苷的药理作用研究进展

桑皮苷是传统中药桑白皮中一种主要的二苯乙烯苷类活性成分,存在于治疗痛风、关节炎和风湿病的传统中医处方中,其主要作用是利尿和减轻水肿。近年来,国内外学者对桑白皮主要活性成分的药理活性研究较多,尤其是在借助现代药理学的技术和方法后,桑皮苷的各种生物活性和药理作用逐渐被发现。该文从药理作用角度对桑皮苷的相关研究进行综述,以期为桑皮苷的进一步研究开发和应用提供参考。

高效液相色谱法测定桑树各部位及其配方颗粒中桑皮苷A的含量

目的建立HPLC法测定桑枝、桑叶和桑白皮及其各配方颗粒中桑皮苷A的含量。方法色谱柱为Ulti-mate XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温20℃,流速1.0 mL.min-1,检测波长330 nm,流动相为甲醇（A）-水（B）,梯度程序为0~10 min,5%~30%A;10~20 min,30%~40%A;25~35 min,40%~50%A;35~50 min,50%A。结果桑皮苷在1.49~234μg.mL-1质量浓度与峰面积线性关系良好（r=0.999 4）,平均加样回收率为100.8%（RSD为1.6%）。桑皮苷A在各样品中含量差异较大。结论本方法准确、可靠、重现性好,可为桑枝、桑叶和桑白皮及其配方颗粒的质量控制研究提供参考。

桑皮苷A对照品的制备研究

目的研究从桑白皮中制备桑皮苷A对照品的制备方法。方法结合大孔树脂吸附、硅胶柱色谱和凝胶柱色谱对桑白皮提取物进行分离、纯化,利用TLC和HPLC-ELSD对分离产物进行质量分数检测。并通过各种波谱手段等对其进行结构确证。结果从桑白皮中分离、纯化出桑皮苷A对照品,质量分数>98.5%。结论该方法制备出的桑皮苷A对照品符合中药化学对照品的相关要求.可作为桑白皮药材和含桑白皮成药质量控制.以及中药药效物质基础研究用的化学对照品。

桑皮苷的提取方法及工艺条件研究

桑皮苷是桑白皮中具有药用保健功能的成分之一。为了从桑白皮中高效提取桑皮苷,比较了超声波提取法和冷浸提取法的提取效果,针对不同提取方法的工艺条件如溶剂、原料质量浓度、提取温度和提取液pH值等因子进行了优选试验。通过高效液相色谱紫外检测法(HPLC)检测提取样品中的桑皮苷含量,确定采用超声波法的提取效果较好,在以75%乙醇作为提取溶剂和原料质量浓度67 g/L、提取液pH 7、提取温度25℃的工艺条件下,桑皮苷的提取得率可达1.346%。

HPLC测定桑白皮汤中桑皮苷A的含量

通过高效液相色谱法测定桑白皮汤中桑皮苷A的含量。采用Alltima TM C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,体积比为15∶85;柱温为30℃;进样量为20μL;体积流量为1 mL/min;检测波长为238 nm。桑皮苷A在0.4448~22.24μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为97.74%,RSD为1.85%。此方法可以准确、快速、高效、简便地测定桑白皮汤中桑皮苷A的含量,为桑白皮汤的质量评价奠定研究基础。

桑皮苷的拉曼光谱快速分析

桑皮苷具有镇咳、平喘、降血糖、抗肿瘤、治疗痛风等功效,在临床治疗中逐渐得到广泛应用。在桑皮苷的制备生产过程中,一般采用HPLC或紫外吸收方法来分析和检测其中的主要成分,较为繁琐费时。该文介绍了利用银溶胶纳米颗粒作为表面拉曼增强基底,对桑皮苷成分进行共聚焦显微拉曼光谱分析,为拉曼光谱在桑皮苷主要成分的快速有效检测提供方法。

桑枝中桑皮苷A的提取工艺优化及其含量测定

本文采用响应面法优化桑枝中桑皮苷A的超声提取工艺。在单因素试验的基础上,以桑枝中桑皮苷A为响应值,考察了甲醇比例、溶剂体积、超声时间及超声温度对桑皮苷A含量测定的影响。研究表明,桑枝中桑皮苷A的最佳提取工艺条件为:60%甲醇水溶液,溶剂体积55 mL,超声时间40 min,超声温度35℃。在该条件下,桑枝中桑皮苷A质量分数为7. 63 mg/g,与预测值7. 64 mg/g接近。桑皮苷A在0. 012 8~0. 064 mg/mL范围呈良好的线性关系(r=0. 999 3),9批桑枝药材中桑皮苷A含量范围为4. 97~13. 14 mg/g。结果表明根据Box-Behnken模型、采用响应面分析法得到的桑枝中桑皮苷A提取优化工艺准确可靠,可用于检测桑枝中桑皮苷A的含量。

桑皮苷C对照品的制备及鉴定

目的:研究中药桑白皮中桑皮苷C对照品的制备方法,并对其进行鉴定。方法:采用柱层析等方法提取分离纯化桑白皮中的成分桑皮苷C,用MS、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,通过TLC和HPLC对分离产物进行纯度检测。结果:从桑白皮中分离出桑皮苷C对照品,质量分数>98.5%。结论:该方法制备了符合测定要求的对照品桑皮苷C,可作为控制桑白皮药材及其制剂的指标成分。

桑枝中桑皮苷A的含量测定

目的:建立桑枝中桑皮苷A的含量测定方法。方法:Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(15∶85),检测波长324 nm,柱温30℃,流速1 mL.min-1。结果:桑皮苷A在10.34～206.8μg呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率99.8%;11批桑枝药材中桑皮苷A含量在0.10%～1.69%。结论:此法准确、简便、快速,可用于检测桑枝中桑皮苷A的含量。

HPLC法同时测定桑枝中桑皮苷A和桑皮黄素的含量

目的：建立同时测定桑枝中桑皮苷A和桑皮黄素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Cosmosil C18-AR-Ⅱ,流动相为乙腈-1%乙酸水溶液（梯度洗脱）,检测波长为303 nm,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,进样量为10~20μl。结果：桑皮苷A和桑皮黄素的质量浓度分别在0.101 5~2.029、0.020 42~0.408 4 mg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r=0.999 8、0.999 7）;精密度试验的RSD〈2%,重复性、稳定性试验的RSD〈3%;平均加样回收率分别为98.2%、97.5%,RSD分别为1.39%、1.29%（n=6）。在早春采集的样品中桑皮苷A和桑皮黄素的含量较高。结论：该方法操作简便、结果准确,可为桑枝的合理采收和开发利用提供参考。

桑皮苷A对人肺癌细胞A549紫杉醇化疗的增敏作用及其机制研究

目的 研究桑皮苷A(Mul A)对人肺癌细胞A549紫杉醇(Taxol)化疗作用的影响及机制。方法 将A549细胞分为溶媒对照组(二甲基亚砜)、紫杉醇单用组(50 nmol·L^(-1)紫杉醇处理48 h)、桑皮苷A组(10、20、40μmol·L^(-1)桑皮苷A处理48 h)、紫杉醇联用桑皮苷A组(50 nmol·L^(-1)紫杉醇+10、20、40μmol·L^(-1)桑皮苷A处理48 h)。用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测药物对细胞凋亡和细胞周期分布变化的影响;分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对A549细胞中P-糖蛋白(P-gp)mRNA表达、蛋白表达及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白的影响。结果 桑皮苷A可显著增强紫杉醇对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用,其中20, 40μmol·L^(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用可分别使细胞存活率显著下降约17.28%和27.38%。同时,与紫杉醇单用相比,10、20、40μmol·L^(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用可使G2/M期细胞量占比分别显著增加0.73、1.54和2.82倍;此外,20、40μmol·L^(-1)桑皮苷A与紫杉醇联用使G0/G1期细胞量占比分别显著减少26.74%和50.27%。细胞凋亡实验结果显示,桑皮苷A可明显增强紫杉醇诱导的A549细胞凋亡。与对照组相比,桑皮苷A可降低A549细胞内P-gp的mRNA和蛋白表达水平,10、20与40μmol·L^(-1)可分别使P-gp mRNA表达水平显著下降26.76%、41.43%和62.30%。此外,研究还发现桑皮苷A显著性增强A549细胞内转录因子p65(RelA/p65)的核转位、升高细胞质中磷酸化核因子-kappa B抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白水平。结论 桑皮苷A对人肺癌细胞A549进行紫杉醇化疗具有增敏作用,其机制可能与激活细胞内NF-κB信号通路,进而下调P-gp的表达水平有关。

桑皮苷A逆转K562/阿霉素耐药细胞化疗多药耐药的研究

目的研究桑皮苷A对人白血病耐药细胞K562/阿霉素耐药细胞(K562/ADM)化疗耐药的影响。方法实验分为溶媒(DMSO)对照组、阳性对照组(10μmol·L^(-1)维拉帕米处理48 h,再用5μg·mL^(-1)阿霉素孵育1 h或2μg·mL^(-1)罗丹明123孵育1.5 h)、阿霉素单用组(5μg·mL^(-1)阿霉素孵育1 h)、阿霉素合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^(-1)桑皮苷A处理48 h,再用5μg·mL^(-1)阿霉素孵育1 h)、罗丹明123合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^(-1)桑皮苷A处理48 h,再用2μg·mL^(-1)罗丹明123孵育1.5 h)。用噻唑蓝(MTT)实验初步确定桑皮苷A的逆转耐药作用;再以细胞内阿霉素蓄积实验,罗丹明123(Rho123)蓄积及外排实验进一步研究桑皮苷A的逆转耐药作用;分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对K562/ADM细胞中P-糖蛋白(P-gp)mRNA、蛋白表达及磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白(PI3K-Akt-mTOR)通路相关蛋白的影响。结果桑皮苷A能增加K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,桑皮苷A(5~20μmol·L^(-1))与阿霉素(5~160μg·mL^(-1))联合处理可明显降低耐药细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50),逆转倍数分别为1.59,2.20和5.48倍。阿霉素胞内蓄积实验结果显示桑皮苷A能显著升高K562/ADM细胞中阿霉素浓度,其中10,20μmol·L^(-1)桑皮苷A可使胞内阿霉素平均荧光值升高2.3倍和4.3倍;同时,Rho123胞内蓄积和外排实验发现桑皮苷A不仅能增加细胞内Rho123的蓄积,还能减少Rho123的外排,其中10和20μmol·L^(-1)桑皮苷A可分别使胞内Rho123的平均荧光值增加至2.1倍和2.6倍。与对照组相比,桑皮苷A处理可浓度依赖性地降低细胞内P-gp的mRNA和蛋白表达水平,其中10与20μmol·L^(-1)桑皮苷A可分别使P-gp mRNA水平显著下降36.90%和65.40%。桑皮苷A能显著抑制K562/ADM细胞中p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平。结论桑皮苷A可通过抑制K562/ADM细胞中PI3K-Akt-mTOR通路,进而下调细胞内P-gp的表达水平,以达到提高肿瘤细胞对阿霉素的化疗敏感性和逆转细胞多药耐药的作用。

桑叶中桑皮苷F对黑素生物合成的抑制作用

据报道桑(Morus alba)的根皮具有皮肤增白作用,其活性成分为氧化白藜芦醇。本次研究了桑叶成分对黑素生物合成的作用,同时探讨了它的超氧化物清除活性。

HPLC法同时测定不同基原崖桑皮和桑白皮中7种活性成分含量

目的:建立同时测定重庆地区不同基原崖桑皮和桑白皮中7种活性成分含量的方法,为完善崖桑皮和桑白皮的质量控制标准以及比较两者质量等同性提供参考。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定58批崖桑皮和桑白皮药材中新绿原酸、桑皮苷A、绿原酸、紫云英苷、山柰酚、桑辛素和异槲皮素的含量,色谱柱为Diamonsil C_(18),流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。利用SPSS 22.0软件,采用独立样本t检验、主成分分析和聚类分析方法分析58批崖桑皮和桑白皮药材中上述7种活性成分的含量差异。结果:上述7种活性成分在各自质量浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r≥0.9990),精密度、稳定性(24 h)、重复性、耐用性和加样回收率试验的RSD均小于3%。崖桑皮中新绿原酸、桑皮苷A、绿原酸、紫云英苷、山柰酚、桑辛素和异槲皮素的平均含量分别为0.304、22.462、1.730、1.308、1.593、2.842、0.657 mg/g,而桑白皮中上述7种活性成分的平均含量分别为0.305、22.995、2.486、2.438、2.916、4.158、1.264 mg/g。独立样本t检验结果显示,崖桑皮和桑白皮的上述7种活性成分中只有山柰酚的含量差异具有统计学意义(P<0.05);主成分分析和聚类分析结果均显示崖桑皮中上述7种活性成分的含量与桑白皮无明显差别。结论:所建HPLC法简便、灵敏、准确度高,可为完善崖桑皮和桑白皮的质量控制标准提供参考。崖桑皮和桑白皮在主要活性成分上具有一定的质量等同性,以华桑和鸡桑为来源的崖桑皮可作为桑白皮的代替品使用。

HPLC法同时测定新疆桑枝中五种活性成分的含量

建立HPLC法同时测定新疆桑枝中桑皮苷A、绿原酸、东莨菪素、白藜芦醇、桑辛素的方法。采用YMCPack ODS色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-甲醇-0.1%冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长330nm,270nm,流速1.0mL·min^(-1),检测波长为270nm,330nm。柱温为30℃,进样量为20μL。五种成分在25min内均达到完全分离,桑皮苷A、绿原酸、东莨菪素、白藜芦醇及桑辛素的平均回收率分别为99.3%、99.5%、100.1%、99.9%、102.1%,其RSD分别为2.7%、0.64%、1.92%、0.78%、1.13%。本方法操作简便、结果快速、准确可靠,具有较好的重复性和稳定性,为桑枝的质量标准提供实验依据。

桑白皮中一种原型入血成分的含量测定

目的:建立桑白皮中1种原型入血成分的含量测定方法。方法:以血清药物化学方法追踪确定桑白皮原型入血成分;采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,甲醇-0.1%甲酸水为流动相,流速1.0 m L·min-1,检测波长326 nm,测定桑白皮药材中原型入血成分的含量。结果:在大鼠含药血浆中检测到7个移行成分,鉴定入血原型成分桑皮苷A;此成分线性范围为0.1-1.0μg(r=0.999 9);平均回收率为98.2%(RSD=1.38%,n=6)。结论:建立的含量测定方法简便可行重复性良好,测定14批不同来源的桑白皮中桑皮苷A含量差异较大,可将此成分作为桑白皮质量控制指标成分。

3种二苯乙烯类化合物的稳定性研究

采用超高效液相色谱仪(UPLC)测定白藜芦醇、氧化白藜芦醇和桑皮苷A含量的变化,分别研究了温度、光照和酸碱度对3种化合物稳定性的影响。结果表明3种化合物在不同温度下,其有效期不同,白藜芦醇在4℃下可保存74.67年,氧化白藜芦醇在-40℃下有效期可达11.44年,而桑皮苷A在-40℃下的有效期可达3.65年。光照对3种化合物稳定性的影响效应依次为:桑皮苷A>氧化白藜芦醇>白藜芦醇;白藜芦醇、氧化白藜芦醇和桑皮苷A的最适p H分别为3.24、5.38和4.3。这些结果为3种化合物的提取、分离、储存、运输与开发利用提供了有效参考。

桑白皮药材的品质检测及质量标准

采用薄层色谱法(TLC)对桑白皮的桑皮苷A、桑辛素、桑酮G进行了定性鉴别,并根据2015年版中国药典方法测定了不同产地不同生源桑白皮中水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物,同时采用高效液相法(HPLC)测定了桑白皮中的桑皮苷A.结果表明,桑白皮中桑皮苷A、桑辛素、桑酮G斑点清晰、特征明显.最终建议桑白皮药材质量标准(以质量分数计)为:水分不超过13%,总灰分不超过9%,酸不溶性灰分不超过2.5%,水溶性热浸浸出物不得低于25%,以干燥品计,桑皮苷A质量分数不低于0.91%.